专利名称：宠物喂养中所用的方法和组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及宠物喂养和生长中所用的方法和组合物。
一方面，本发明尤其涉及用乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽改善新生及年幼宠物健康状况的方法。另一方面，本发明涉及改善新生及年幼宠物健康状况的含有乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽的饲料组合物。
可以理解，术语“宠物”为包括所有作为宠物的哺乳动物，如狗科和猫科的食肉动物、如栗鼠科、豚鼠科、八齿鼠科、小鼠科、沙鼠科、仓科、大鼠科、雪貂科的啮齿动物以及如兔科的lagomorphes。对于本发明的用途，狗和猫、尤其狗是最重要的。术语“改善健康状况”意指动物的整体状况并包括如免疫系统的增强、肠道菌群的稳定或死亡率的减少，以及特别是指预防和抑制如细菌和病毒感染的疾病及炎症，以及肠道正常菌群的发育和维持。在上下文中，涉及宠物、尤其狗时使用的术语“年幼”尤其指年龄最大约为16周龄的。
乳铁蛋白是发现于人母乳并已在许多哺乳动物乳汁中明确鉴定的糖蛋白。尽管根据种属的来源不同，似乎有不同的乳铁蛋白，但是在本文中所用的术语乳铁蛋白指所有具有公认的乳铁蛋白基本特征的乳铁蛋白，如有1-4个多糖单位并且具有铁螯合性能的约80000D的单链多肽。乳铁蛋白制剂可以自商业获得，例如来源于Tatua NutritionalsTatua Co-operativeDairy Company Limited，State Highway，26 Tatuanui，Private Bag 800，Morrinsville，New Zealand。乳铁蛋白肽是乳铁蛋白经胃蛋白酶水解的产物。对于本发明目的，优选乳铁蛋白。
在宠物、尤其狗和猫的喂养中，出生最初的几周和几个月对年幼动物的成活至关重要。例如，在对包括2629只幼犬的研究中，在出生的最初7天内死亡42％；在第8天至第21天内死亡15％，在第22-49天内死亡11％。根据本发明，申请人已经发现对新生或幼犬给予乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽可改善幼犬的健康状况并且减少死亡率。因此，根据本发明，适于在出生后最初的四个月内对新生或年幼宠物直接或者经哺乳母亲给予乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽。而且，申请人还发现对怀孕宠物给予乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽可减少死产的数目。
一方面，本发明涉及用来改善新生或年幼宠物的健康状况、尤其减少新生或年幼宠物死亡率的乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽的用途。根据该发明方面，对怀孕或哺乳的宠物和/或新生或年幼宠物每天优选给予每公斤体重约0.1mg-约200mg的乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽。在更优选的实施方案中，每天给予每公斤体重约0.1mg-约100mg、优选约0.1mg-约40mg的乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽，尤其是乳铁蛋白。
一般而言，小型动物每天每公斤体重的食物消耗量高于大型动物。而且，母狗所需的能量或食物量逐渐增加，怀孕5-9周增加约1.5倍，生产最初一周增加约2倍，生产后2-5周增加约3倍，生产后5-8周增加约2.5-1.25倍。因此，本发明所提供的饲料中乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽的含量及饲料组合物的量不得不调整从而提供给动物适量的乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽。
所需剂量的乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽可通过任何常规方式给予，作为兽用制剂或优选作为食物添加剂经肠或肠胃外给予。
如上述所阐明的，一方面本发明涉及改善新生或年幼宠物健康状况、尤其减少其死亡率的乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽作为怀孕、哺乳或者新生或年幼宠物饲料的添加剂的用途。根据本发明的该方面，乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽的适用剂量为基于总饲料组合物计约30-约1000ppm(每百万份数)、优选30-约960ppm、更优选30-约120ppm。
另一方面，本发明涉及改善新生或年幼宠物健康状况并减少其死亡率的含有乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽的宠物饲料组合物，尤其用于怀孕、哺乳或者新生或年幼的狗科和猫科宠物。
根据本发明，优选的宠物饲料组合物包括基于总饲料组合物计约30-1000ppm的乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽，较优选30-960ppm的乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽，更优选30-120ppm的乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽。
根据本发明，乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽可给予尚未断奶的宠物，如新生或尚未断奶的狗或猫。另一方面，也可将乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽给予怀孕或哺乳的动物，如狗，籍此在哺乳动物的奶汁中含有足够量的乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽供幼小动物摄取。而且，根据本发明，乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽可给予断奶后的小动物以改善其健康状况并减少死亡率。
根据本发明，所述饲料组合物可以为常规的宠物饲料，可为干的、罐装的、半湿的或烘干的形式。优选的本发明饲料组合物为干的饲料组合物。这种组合物的常规成分为天然蛋白质、天然脂肪、碳水化合物(NfE)、淀粉、天然纤维以及灰分，另外还包括矿物质、微量元素、维生素、脂肪酸、蛋白质和氨基酸、胆碱、肉碱、膳食纤维以及不同种属的动物膳食平衡所需的物质。这种饲料组合物的基本成分为-天然蛋白质，包括蛋白质和非蛋白质性质的含N化合物，如酰胺、胺、游离氨基酸、铵盐、生物碱；-天然脂肪，包括中性脂肪、类脂(磷脂类、鞘脂类、类固醇类及类胡萝卜素)及其他醚溶性化合物；-游离N-提取物(NFE)，包括多糖(淀粉、肝糖)、可溶糖(葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、麦芽糖及低聚糖)以及可溶性的纤维素、半纤维素、木质素及果胶；-天然纤维，包括不溶性的纤维素、半纤维素、木质素及其他如软木脂、角质等的细胞壁成分；-灰分，包括矿物质(如钙、磷、钠、氯化物、钾、镁的大矿物质(macromineral)以及如铁、铜、锰、锌、碘、硒的小矿物质，即微量元素)，此外还包括如硅酸盐的无机物；-维生素类，包括维生素A、B1、B2、B6、B12、C、D、E、K以及如β胡萝卜素、叶黄素、玉米黄质或番茄红素的类胡萝卜素、泛酸、烟酸、生物素、叶酸、亚油酸和胆碱。
另外的组分可以为ω-6-脂肪酸、ω3-脂肪酸、L-肉碱、硫酸软骨素、葡糖胺、谷氨酸盐/谷氨酸、精氨酸、牛磺酸和羟脯氨酸。
所提供的狗饲料组合物的典型成分包括鸡/牛/火鸡、肝脏、珍珠麦粉、玉米粉、天然脂肪、全干蛋、动物蛋白水解产物、植物油、碳酸钙、氯化胆碱、氯化钾、碘化盐、氧化铁、氧化锌、硫酸铜、氧化锰、亚硒酸钠、碘酸钙、维生素原D、维生素E、维生素B1、烟酸、泛酸钙、吡哆素盐酸盐、核黄素、叶酸、维生素H、维生素B12。
干的宠物饲料含有6-10％的水份，即含有等于或大于90％的干物质。
用于成年狗的典型饲料可包括例如至少25％的蛋白质、12％的脂肪、41.5％的淀粉、2.5％的纤维、1％的亚油酸、1％的钙、0.8％磷(并且Ca∶P为1∶1)、0.6％的钾、0.35％的钠、0.09％的氯化物、0.1％的镁、170mg/kg的铁、35mg/kg的铜、70mg/kg的锰、220mg/kg的锌、4mg/kg的碘、0.43mg/kg的硒、15000IU/kg的维生素A、1200IU/kg的维生素D、400mg/kg的维生素E、11mg/kg的维生素B1、6mg/kg的核黄素、30mg/kg的泛酸、20mg/kg的烟酸、4.3mg/kg的维生素B6、0.9mg/kg的叶酸、0.2μg/kg的维生素B12、2500mg/kg的胆碱、0.8mg/kg维生素H、2500mg/kg的胆碱，所有百分比均基于总饲料组合物的干重。
所提供的用于怀孕和哺乳的狗以及断奶幼犬的典型成分包括例如鸡肉、米、玉米粉、天然脂肪、全干蛋、动物蛋白水解产物、黄豆粗粉、黄豆粉、植物油、鱼油、磷酸二钙、氯化胆碱、氯化钾、碘化盐、氧化铁、氧化锌、硫酸铜、氧化锰、亚硒酸钠、碘酸钙、维生素A、维生素原D、维生素E、烟酸、维生素B1、泛酸钙、吡哆素盐酸盐、核黄素、叶酸、维生素H、维生素B12。
根据所涉及的动物的具体需要，可以对用于怀孕、哺乳或断奶狗的饲料组合物进行适当调整，如每100g干物质可达到1.8MJ的可代谢能；可代谢原料蛋白(g)/可代谢能MJ的比率约为10∶1。
为了在食料中获得足够的能量及满足必需脂肪酸的需要，需提供至少10％的脂肪。所得能量中至少10-20％来源于碳水化合物，因为在乳糖合成中需大量的葡萄糖。食料中约50％的原料蛋白可以来自动物，籍此可确保所必需的必需氨基酸的供给。
用于怀孕和哺乳的狗及断奶幼犬的典型的饲料可包括例如至少30％的蛋白质、22％的脂肪、24％的淀粉、2.5％的纤维、1.15％的钙、0.95％的磷(并且Ca∶P为1∶1)、0.6％的钾、0.35％的钠、0.09％的氯化物、0.1％的镁、260mg/kg的铁、30mg/kg的铜、55mg/kg的锰、170mg/kg的锌、4mg/kg的碘、0.43mg/kg的硒、15000IU/kg的维生素A、1200IU/kg的维生素D、120mg/kg的维生素E、11mg/kg的维生素B1、6mg/kg的核黄素、40mg/kg的泛酸、27mg/kg的烟酸、6.5mg/kg的维生素B6、1.2mg/kg的叶酸、0.29mg/kg维生素B12、0.8mg/kg的维生素H、3000mg/kg的胆碱，所有百分比均基于总饲料组合物的干重。
猫饲料组合物提供的典型成分包括牛肉、鸡肉、干缩鸡肝、羊肉、羊肝、猪肉、火鸡肉、火鸡肝、禽肉、鱼粗粉、禽蛋白水解产物、动物脂肪、植物油、黄豆粗粉、豌豆糠、玉米麸、全干蛋、玉米粉、玉米面、米、米面、干糖蜜糖、果糖聚糖(fructooligosaccharides)、可溶纤维、植物胶、纤维素粉、粘土、酵母、碘化氯化盐、硫酸钙、三磷酸钠、磷酸二钙、碳酸钙、氯化钾、氯化胆碱、氧化镁、氧化锌、氧化铁、硫酸铜、硫酸铁、氧化锰、碘酸钙、亚硒酸钠、维生素原D、维生素E、维生素B1、烟酸、泛酸钙、吡哆素盐酸盐、核黄素、叶酸、维生素H、维生素B12、牛磺酸、L-肉碱、酪蛋白、D-蛋氨酸。
用于成年猫的典型饲料可包括例如至少32％的蛋白质、15％的脂肪、27.5％的淀粉、11％的膳食纤维、4.5％的纤维、3.4％的亚油酸、0.08％的花生酸(arachionic acid)、0.15％的牛磺酸、50mg/kg的L-肉碱、ω6/3＝5、1％的钙、0.8％的磷(且Ca∶P的比率至少为1∶1)、0.6％的钾、0.4％的钠、0.6％的氯化物、0.08％的镁、190mg/kg的铁、30mg/kg的铜、60mg/kg的锰、205mg/kg的锌、2.5mg/kg的碘、0.2mg/kg的硒、25000IU/kg的维生素A、1500IU/kg的维生素D、400mg/kg的维生素E、30mg/kg的维生素C、20mg/kg的维生素B1、40mg/kg的核黄素、56mg/kg的泛酸、153mg/kg的烟酸、14mg/kg的维生素B6、3.2mg/kg的叶酸、0.2mg/kg的维生素B12、1mg/kg的维生素H、3000mg/kg的胆碱，所有百分比均基于总的饲料组合物的干重。
乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽可加入常规的宠物饲料中，如加入干的宠物饲料中，这可通过将乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽水溶液喷雾在饲料组合物上并将组合物充分混合进行。
本发明组合物的效果可通过多种方法来测定。可测定定居于肠的细菌(如大肠杆菌、肠球菌、梭状芽孢杆菌和乳杆菌)的量。例如，取排泄物或食糜的标本并根据熟练技术人员已知的方法分析微生物存在的状况。肠壁活组织检查所获得的标本可用于分析如肠壁结构或派尔结外观的改变。
可通过分析血液标本中的各种参数像红细胞计数(血色素、血球容积、红血球数目、红血球的MCHC、MCH、MCV指标)和白细胞计数(白细胞总数、白细胞分类(嗜碱性粒细胞、中性粒细胞、嗜酸粒细胞、单核细胞、血小板、B淋巴细胞和T淋巴细胞)的相对量和绝对量来测定免疫系统的状况。体液免疫系统中的改变可通过对IgA和IgG浓度的测定来获得。
整个机体内的抗氧化能力反映了机体抵抗氧化应力和保护细胞膜和胞质组分不受游离基破坏的能力。抗氧化的能力越高，表示中和游离基以及阻止游离基破坏引起的连锁反应的能力越强，因此抗氧化能力在维持健康状况和单个细胞的完整性中扮演重要角色。
熟练技术人员已知测定抗氧化能力的各种参数，包括TEAC(Troloxequivalent antioxidant capacity)，可通过例如根据Armstrong and Browne的方法(Adv Exp Med Biol 36643-58(1994))，在进行1∶1的稀释后采用分光光度计，记录3分钟内的吸光度的值进行测定，；总的抗氧化能力(TAC)、红细胞超氧化物岐化酶(SOD)，可通过例如基于将氧发生反应(黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶(XOD))与氧检测反应[2-(4-碘代苯基)-3-(4-硝基苯酚)-5-苯基四唑氯化物]相结合并用分光光度计检测吸光率的方法来测定；铁蛋白，可通过酶联免疫测定法来测定；血浆铜蓝蛋白，可通过测定血浆铜蓝蛋白氧化酶活性的比色法来测定；维生素E和维生素C的含量；CK(肌酸激酶)；以及AST(天冬氨酸转氨酶)，在波长334nm处进行荧光检测来测定。
如下实施例进一步说明本发明，但不用于限制本发明的范围。
实施例1将5份获自商业的狗饲料(由Royal Canin Schweiz AG，CH-8105 Regensdorf，Switzerland提供的ROYAL CANIN Starter的狗饲料)用乳铁蛋白(由Tatua Nutritionals提供)水溶液喷雾，使终饲料组合物中的乳铁蛋白的量分别达到30、60、120、240或480ppm(mg/kg)。将饲料组合物充分混合以确保饲料添加剂的均匀分布。饲料组合物的干物质的含量约为90％(重量)。
实施例2向5份含有奶粉(脱脂，低乳糖)、动物脂肪、植物油、奶蛋白和卵磷脂的每公斤提供热量5500kcal ME的商品幼犬奶(ROYALCANIN 1stAge Milk)中加入乳铁蛋白粉末并充分混合，使终奶粉组合物中的乳铁蛋白的量分别达到30、60、120、240或480ppm(mg/kg)。
实施例3将重约13kg的母狗(Beagle)分成3组，在生产前第4周，每组的每只母狗每天喂养约0.2-约0.34kg的实施例1中的狗饲料，分别可提供的乳铁蛋白的量为30、60和120ppm，然后在生产后每只母狗每天喂养约0.4-约0.6kg的实施例1中的狗饲料，喂养7周，分别可提供的乳铁蛋白的量为30、60和120ppm。
实施例4将幼犬(Beagle)分成3组，从出生第3天至第4周每组喂养实施例2的饲料组合物，所提供的乳铁蛋白的量分别为30、60和120ppm(每天每公斤体重5-30g的干性物，随着动物年龄的增加逐渐喂养量)。然后给动物断奶，此后每天喂养150-250g(随年龄而变)实施例1中的狗饲料喂养8周，所提供的乳铁蛋白的量分别为30、60和120ppm。
实施例5出生体重约为240g的Beagle幼犬在第4周后断奶，每天喂养约180-约250g实施例1中的狗饲料，喂养8周，所提供的乳铁蛋白的量分别为30、60和120ppm。
实施例6在4周和12周后收集实施例4中的服用60ppm乳铁蛋白和未服用乳铁蛋白的幼犬的粪便，并分析大肠杆菌E、肠球菌、梭状芽孢杆菌和乳杆菌的情况。在服用60ppm乳铁蛋白的幼犬的粪便中，大肠杆菌E、肠球菌、梭状芽孢杆菌的量减少而乳杆菌的量增加。
实施例7从实施例4中服用60ppm乳铁蛋白的幼犬和未服用乳铁蛋白的4周龄的幼犬中获取食糜。在12周龄时提取食糜和肠壁切片并保存于-200℃的液氮中。用光学显微镜观察标本并检测肠壁结构和派尔结的免疫组织化学的改变。乳铁蛋白有益于派尔结和肠壁结构。
实施例8从实施例4中服用60ppm乳铁蛋白的幼犬和未服用乳铁蛋白的4周龄和12周龄的幼犬中提取血液标本，通过测定红细胞、白细胞、B淋巴细胞和T淋巴细胞的数量，IgG，IgA及其抗体的含量、维生素E和维生素C的含量以及TEAC来分析对免疫系统的影响。在服用60ppm乳铁蛋白的幼犬中，对红细胞和白细胞的量没有影响。B淋巴细胞和T淋巴细胞的数量，IgG，IgA及其抗体、TEAC、维生素E和维生素C的含量增加。
实施例9在8周和12周后收集实施例5中服用60ppm乳铁蛋白和未服用乳铁蛋白的幼犬的粪便，并分析大肠杆菌E、肠球菌、梭状芽孢杆菌和乳杆菌的情况。在服用60ppm乳铁蛋白的幼犬的粪便中，大肠杆菌E、肠球菌、梭状芽孢杆菌的量减少而乳杆菌的量增加。
实施例10从实施例5中服用60ppm乳铁蛋白的幼犬和未服用乳铁蛋白的8周龄的幼犬中提取食糜。在12周龄时提取食糜和肠壁切片并保存于-200℃的液氮中。用光学显微镜观察标本并检测肠壁结构和派尔结的免疫组织化学的改变。乳铁蛋白有益于派尔结和肠壁结构。
实施例11从实施例5中服用60ppm乳铁蛋白的幼犬和未服用乳铁蛋白的8周龄和12周龄的幼犬中提取血液标本，通过测定红细胞、白细胞、B淋巴细胞和T淋巴细胞的数量，IgG，IgA及其抗体的含量、维生素E和维生素C的含量以及TEAC来分析对免疫系统的影响。在服用60ppm乳铁蛋白的幼犬中对红细胞和白细胞的量没有影响。B淋巴细胞和T淋巴细胞的数量，IgG，IgA及其抗体、TEAC、维生素E和维生素C的含量增加。
权利要求
1.乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽在改善新生和年幼宠物健康状况中的用途。
2.如权利要求1的用途，其中对选自未断奶宠物、断奶宠物以及怀孕宠物或哺乳宠物的宠物每公斤体重每天给予约0.1mg-200mg乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽。
3.乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽作为用来改善新生和年幼宠物健康状况而加入怀孕、哺乳、新生或年幼宠物饲料中的添加剂的用途。
4.如权利要求3的用途，其中在饲料组合物中乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽的量约30ppm-约1000ppm。
5.如权利要求1-4中任一项的用途，其中所述宠物为怀孕、哺乳、新生或年幼的狗或猫。
6.用于改善新生和年幼犬或猫的健康状况的宠物饲料组合物，该饲料组合物包括乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽。
7.如权利要求6的宠物饲料组合物，其中乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽的量基于总组合物计约为30ppm-约1000ppm。
8.宠物饲料组合物，该饲料组合物含有30ppm-约1000ppm乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽。
9.宠物饲料组合物，该饲料组合物含有30ppm-约480ppm乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽。
10.根据权利要求7、8或9的宠物饲料组合物，其中所述宠物选自未断奶、断奶以及怀孕或哺乳的宠物。
全文摘要
本发明涉及饲养宠物和使其生长的方法和组合物，包括通过使用乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽来改善新生宠物和年幼宠物身体状况的方法和含有乳铁蛋白和/或乳铁蛋白肽的宠物饲养组合物。
文档编号A23K1/18GK1592581SQ02823307
公开日2005年3月9日 申请日期2002年11月25日 优先权日2001年12月5日
发明者S·克拉默, J·法伊弗 申请人:Dsm Ip 资产有限公司