专利名称：百合组织培养诱导成球的方法
技术领域：
本发明涉及植物组织培养，具体地说是百合组织培养诱导成球的方法。
背景技术：
植物组织培养是指在离体的条件下，将植物体的一部分，如一小段茎、一小块叶、甚至一个细胞，接种在培养基上，使它们重新形成一个完整植株的方法。组织培养的步骤有培养基的制作与接种材料的消毒、接种、植株诱导、生根和移栽。
其中常用的培养基为MS培养基，其配方为
百合花卉靠无性繁殖法繁殖，病毒逐代传递积累，危害日趋严重。分离花卉植物0.1-0.5毫米大小的生长点，培养得到的基本上是无病毒苗；去病毒后，植株生长势强，花朵变大，色泽鲜艳，抗逆能力提高，产花数量上升。这一技术将被广泛应用。现在所有的百合组织培养最终都是以百合生根苗进行移载，该方法组培苗炼苗难、移载成活率较低。
发明内容
本发明的目的在于提供一种百合组织培养诱导成球的方法；成球后百合苗健壮、移载成活率高、缩短形成商品球的时间。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为百合组织培养诱导成球的方法，将诱导扩繁的百合组培苗接种于组培培养基(如MS培养基)中培养，培养基中糖和/或蔗糖的浓度为60～120g/l，激素BA浓度为0.1～0.5mg/l，NAA浓度为0.01～0.2mg/l。
所述培养是在2000～3000LX每天12～14小时的光照，20～26℃的条件下培养；培养基中糖和/或蔗糖的较佳浓度为75～105g/l，最好为90g/l；BA较佳的浓度为0.2～0.3mg/l，最好为0.2mg/l；NAA较佳的浓度为0.05～0.15mg/l，最好为0.1mg/l。
本发明具有如下优点1.本发明将百合的生根苗继续培养成球，以成球后的组培苗进行移载，移载时组培苗健壮，成活率可达到95％以上。
2.本发明采用改进的MS培养基，百合组培苗成球速度快，直径大，长势好。
具体实施例方式
实施例1百合组织培养诱导成球1)诱导扩繁百合组培苗当百合芽长5～10cm时，取其茎尖分生组织，接种于MS培养基中，附加入BA(6-苄基氨基嘌呤)0.5mg/l、NAA(萘乙酸)0.5mg/l和蔗糖30g/l进行诱导；在2000～3000LX(本实施例为2000LX)每天12～14小时(本实施例为14小时)的光照条件下，20～26℃的温度条件下，30～40天后(本实施例为30天)，直接诱导出许多致密的不定芽，如果延长培养时间，则直接形成芽丛；将不定芽重复转入上述培养基中，每25～35天(本实施例为30天)转接一次，形成许多高约2～3cm的小苗；2)组培苗成球将扩繁中的百合组培苗(小苗)劈成单株，接种于下述培养基中MS+BA 0.1～0.5+NAA 0.01～0.2+蔗糖60～120g/l，在2000～3000LX(本实施例为2000LX)每天12～14小时(本实施例为14小时)的光照条件下，20～26℃的温度条件下，经过55～65天(本实施例为60天)的培养，组培苗便长成直径约1.3cm左右的百合小鳞茎，然后进行移载，成活率可达96％以上；3)观察其不同激素浓度配比及不同蔗糖浓度对百合小鳞茎的诱导作用效果将扩繁中的百合组培苗劈成单株，接种于以下实验改进的MS培养基中，培养基为MS+BA+NAA+蔗糖或糖；经过60天的培养后，其长势情况如下表1-4。
a.当BA和NAA浓度一定时(BA 0.2mg/l+NAA 0.1mg/l)，不同浓度的糖含量对百合鳞茎的诱导。(以下的糖或蔗糖含量是指培养基中糖或蔗糖的总含量)表1
从上表中可以看出，当BA和NAA浓度及其他条件不变时，随着糖的浓度增加，球直径也不断增大，在糖浓度90g/l时，球直径最大平均为13.9mm，高于90g/l后，球直径开始逐渐下降，所以最佳的诱导成球的糖浓度为90g/l，诱导直径最大，长势正常，移载成活率最高。
b.当BA和NAA浓度一定时(BA 0.2mg/l+NAA 0.1mg/l)，不同浓度的蔗糖含量对百合鳞茎的诱导。
表2
从上表中可以看出当BA和NAA浓度及其他条件不变时，随着糖的浓度增加，球直径也不断增大，在蔗糖浓度90g/l时，球直径最大平均为13.9mm，高于90g/l后，球直径开始逐渐下降。
c.在蔗糖浓度90g/l、BA为0.2mg/l时，不同浓度的NAA含量对百合鳞茎的诱导。
表3
从上表中可以看出当BA和糖浓度及其他条件不变时，NAA浓度在0.05～0.15之间时鳞球直径较大，而最好的则属NAA 0.1mg/l。
d.在蔗糖浓度90g/l、NAA为0.1mg/l时，不同浓度的BA含量对百合鳞茎的诱导。
表4
从上表中可以看出当NAA和糖浓度及其他条件不变时，BA浓度在0.15～0.3之间时鳞球直径较大，而最好的则属BA0.2mg/l。
从上表1-4可以看出，在百合组织培养诱导成球的过程中，主要是蔗糖或糖浓度及激素浓度配比的影响较大。其最佳的百合诱导成球培养基为MS+BA 0.2mg/l+NAA 0.1mg/l+蔗糖90g/l，平均直径达到13.9mm，长势正常。
由于常规的MS培养基和WPM培养基均可在百合组织培养过程中应用，并且它们的组成成份中各组份的用量相差较大，而在本发明中起突出诱导作用的为糖、BA和NAA的浓度，而对于改进的MS培养基中各组份用量无需严格限定，本发明组培中可采用改进的MS组成如下表5所示，其中还应添加有硝酸钾(KNO3)1000～1900mg/L、磷酸二氢钾(KH2PO4)170-340mg/L、碘化钾(KI)0.75～0.83mg/L和氯化钴(CoCl2)0.025～0.5mg/L，或添加有Ca(NO3)2·4H2O 350-556mg/L和K2SO4990～1450mg/L。
表5
权利要求
1.百合组织培养诱导成球的方法，其特征在于将诱导扩繁的百合组培苗接种于组培培养基中培养，培养基中糖和/或蔗糖的浓度为60～120g/l，激素BA浓度为0.1～0.5mg/l，NAA浓度为0.01～0.2mg/l，组培苗长成百合小鳞茎即可进行移载。
2.按照权利要求1所述百合组织培养诱导成球的方法，其特征在于所述培养是在2000～3000LX每天12～14小时的光照，20～26℃的条件下培养，经过55～65天的培养，组培苗长成百合小鳞茎即可进行移载。
3.按照权利要求1所述百合组织培养诱导成球的方法，其特征在于所述培养基中糖和/或蔗糖的浓度为75～105g/l，BA浓度为0.2～0.3mg/l，NAA浓度为0.05～0.15mg/l。
4.按照权利要求1所述百合组织培养诱导成球的方法，其特征在于所述培养基中糖和/或蔗糖的浓度为90g/l，BA浓度为0.2mg/l，NAA浓度为0.1mg/l。
全文摘要
本发明涉及植物组织培养，具体地说是百合组织培养诱导成球的方法，其将诱导扩繁的百合组培苗接种于组培培养基中培养，培养基中糖和/或蔗糖的浓度为60～120g/l，激素BA浓度为0.1～0.5mg/l，NAA浓度为0.01～0.2mg/l。本发明的优点为将百合的生根苗继续培养成球，以成球后的组培苗进行移载，移载时组培苗健壮，成活率可达到95％以上；采用改进的MS培养基，百合组培苗成球速度快，直径大，长势好。
文档编号A01H4/00GK1903018SQ20051004695
公开日2007年1月31日 申请日期2005年7月29日 优先权日2005年7月29日
发明者潘利军 申请人:潘利军