专利名称:大蒜体胚诱导的培养基的制作方法
技术领域:
本发明属于大蒜组织培养技术,特别是从大蒜胚性愈伤组织诱导出体细胞胚的培养基。
背景技术:
植物组织培养中诱导外植体细胞分裂形成的愈伤组织,一类是疏松愈伤组织(非胚性愈伤组织),一类是胚性愈伤组织。只有胚性愈伤组织在适宜的条件下,才可以继续再分化,形成胚状体,进而形成芽、根,再生出完整植株。胚状体亦称体细胞胚或体胚,是由体细胞产生的类似胚胎的结构,其发育过程与合子胚类似,分为原胚、球形胚、心形胚、鱼雷形胚及子叶胚等几个阶段。胚状体再生系统不仅是最理想的基因转化受体系统,也是组织培养快速繁殖的有效方法之一。人们利用胚状体发生这一快速繁殖方式,在其表面包以一层特制的有机物质等,即所谓“人工种子”,为快速生产种苗提供了新的途径,但目前从大蒜胚性愈伤组织诱导出体细胞胚的诱导率较低。
发明内容
本发明的目的是克服大蒜茎尖组织培养中由胚性愈伤组织体胚诱导率低的问题,提供一种大蒜体胚高效诱导的培养基,用于大蒜的科研和生产。
本发明的技术方案如下该大蒜体胚诱导的培养基是将6-苄基嘌呤6-BA、2,4-二氯苯氧乙酸2,4-D、水解酪蛋白CH、蔗糖、琼脂溶解于基本培养基MS中而成的,其各组份的用量为以1L基本培养基MS加入量计MS 1L6-BA0.1-1.0mg2,4-D 0.1-1.0mgCH 200mg蔗糖20g琼脂6g。
优选为
MS 1L6-BA0.1mg2,4-D 1.0mgCH 200mg蔗糖20g琼脂6g上述原料中,MS为基本培养基,提供培养组织生长发育所需的无机营养元素和部分有机营养元素;6-苄基嘌呤6-BA和2,4-二氯苯氧乙酸2,4-D是植物生长调节剂,具有促进培养组织形成体胚的作用;水解酪蛋白CH提供有机多肽类营养元素;蔗糖提供培养组织生长发育所的碳素营养;琼脂的主要作用是固化培养基,起支撑作用。
上述各组份的用量是发明人在理论分析的基础上进行大量试验摸索总结得出的,按上述比例配制培养基,具有较好诱导效果。
上述培养基的制作方法是将6-BA、2,4-D、CH、蔗糖、琼脂溶解于MS,搅拌均匀,PH值调整为5.8-6.0之间即可。
本发明的积极效果是利用本培养基大蒜体胚的诱导率可达到72.0%,一个茎尖分生组织可以诱导出15个体胚。
具体实施例方式
以下通过实施例进一步阐述本发明的有益效果实施例1培养基配方MS 1L6-BA1.0mg2,4-D 0.1mgCH 200mg蔗糖20g琼脂6g实施例2培养基配方MS1L
6-BA1.0mg2,4-D 1.0mgCH 200mg蔗糖20g琼脂6g实施例3培养基配方MS 1L6-BA0.1mg2,4-D 1.0mgCH 200mg蔗糖20g琼脂6g试验方法及结果将上述实施例的培养基用于大蒜体胚的诱导试验材料大蒜徐州白蒜茎尖分生组织诱导出的胚性愈伤组织。
方法将大蒜徐州白蒜茎尖分生组织诱导出的胚性愈伤组织转管接种到培养基上,胚性愈伤组织与培养基要结合紧密,每试管接种1个胚性愈伤组织,置于25℃、光强约2000Lux、每日光照12小时,培养4周后统计结果见下表大蒜体胚诱导率和体胚数量(4周) 由表中结果分析得出如下结论实施例1中体胚的诱导率为36.0%,平均每块愈伤组织出胚数为8.6个;实例2中体胚的诱导率为42.0%,平均每块愈伤组织出胚数为11.5个;实施例3中体胚的诱导率为72.0%,平均每块愈伤组织出胚数为15.0个。
综合以上分析,得出大蒜茎尖培养胚性愈伤组织体胚诱导的最佳培养基为MS 1L6-BA0.1mg2,4-D 1.0mgCH 200mg蔗糖20g琼脂6g。
权利要求
1.一种大蒜体胚诱导的培养基,其特征是,它是将6-苄基嘌呤6-BA、2,4-二氯苯氧乙酸2,4-D、水解酪蛋白CH、蔗糖、琼脂溶解于基本培养基MS中而成的,其各组份的用量为以1L基本培养基MS加入量计MS1L6-BA 0.1-1.0mg2,4-D0.1-1.0mgCH200mg蔗糖 20g琼脂 6g。
2.根据权利要求1所述的大蒜体胚诱导的培养基,其特征是各组份的用量为MS1L6-BA 0.1mg2,4-D1.0mgCH200mg蔗糖 20g琼脂 6g。
全文摘要
本发明公开了一种从大蒜胚性愈伤组织诱导出体胚细胞的培养基。它是将6-苄基嘌呤6-BA、2,4-二氯苯氧乙酸2,4-D、水解酪蛋白CH、蔗糖、琼脂溶解于基本培养基MS中制成,其优点是诱导率高.适用于大蒜的工厂化生产。
文档编号A01H4/00GK1884489SQ20061008591
公开日2006年12月27日 申请日期2006年5月26日 优先权日2006年5月26日
发明者张允刚 申请人:江苏徐淮地区徐州农业科学研究所