专利名称：：一种从香椿老叶中提取抗氧化活性物质的方法
技术领域：
：本发明属于天然产物提取领域，特别是一种从香椿老叶中提取抗氧化活性物质的方法。
背景技术：
：香椿是一种属于楝科的多年生木本植物，学名7bo朋w'加"^(A.Juss.)Roem,原产于我国的中部地区，主要有红香椿、褐香椿、红叶椿、红芽绿香椿、黑油椿、红油椿、青油椿和苔椿七种，在我国已有2000多年的栽培历史。香椿木材常被用来制作各种高档家具和作为观赏树木种植。香椿全株植物均可被利用，是一经济价值极高的树种。香椿嫩芽营养丰富、全面、均衡，富含蛋白质、氨基酸、各种挥发油、多种维生素和微量元素，可直接食用或制成各种系列风味食品。香椿籽油无色、味芳香、可食用、富含必须脂肪酸，有较高的营养价值。香椿老叶氨基酸组成较全面，是优质的饲料原料。香椿不仅是一种良好的木本佳蔬，而且也是药食同源的天然绿色保健食品，《唐本草》、《本草纲目》中均有相应的药用记载。香椿子主治胃和十二指肠溃疡、慢性胃炎等。香椿叶具有清热解毒、收敛止血、去湿止痛、健胃理气、降血糖、杀虫、增强精子活力、抗肿瘤等功效。通过研究发现，香椿提取物具有非常强的抗氧化活性，而香椿老叶是香椿产业中的主要副产物，数量巨大，充分研究开发和利用香椿老叶具有重要的现实意义。目前，国内外对香椿老叶的研究仅见于发明专利申i青——香椿老叶黄酮与皂甙的提取方法(专利申请号200510069895)对香椿老叶中抗氧化活性物质的提取工艺未见任何相关研究报道。
发明内容本发明的目的是提供一种低成本、适合于产业化开发的、从香椿老叶中提取抗氧化活性物质的方法。本发明是通过以下技术方案来实现的一种从香椿老叶中提取抗氧化活性物质的方法，其提取方法的步骤如下(1).将香椿老叶于阴凉处晾干、粉碎，过3050目筛，形成香椿叶粉；(2).在香椿叶粉中加入浓度为6080%的乙醇溶液进行提取，提取温度为6080°C,提取料液比为1:101:30(w/v)，提取时间28h，重复浸提25次，提取液浓縮后上大孔吸附树脂柱纯化；(3).采用68倍柱床体积的蒸镏水洗脱，除去多糖、蛋白等水溶性杂质；(4).采用36倍柱床体积的6095%浓度的乙醇溶液洗脱，洗脱液经浓縮、冷冻干燥，得到抗氧化活性物质。而且，纯化采用大孔吸附树脂的型号为AB-8，采用动态上样方式。本发明的优点和有益效果是1.本发明采用香椿产业的副产品一_香椿老叶为原料制备强抗氧化的活性物质，变废为宝，是一种绿色产业；且工艺较为简单，无须较大设备投资，适合于大规模产业化生产，为进一步开发出系列香椿功能性食品奠定了基础。2.所制备的抗氧化活性物质产品适用于食品抗氧化剂、功能性食品和医药、化妆品等行业。提取物残渣经加工后可作为饲料、肥料，以实现综合利用。具体实施例方式本发明通过以下实施例进一步详述，但本实施例所叙述的技术内容是说明性的，而不是限定性的，不应依此来局限本发明的保护范围。本发明所涉及的从香椿老叶中提取抗氧化活性物质的方法步骤如下(1).将香椿老叶于阴凉处晾干、粉碎，过40目筛，形成香椿叶粉；(2).称取100g香椿叶粉，在该香椿叶粉中加入1000mL浓度为60%乙醇溶液，7(TC提取时间4h，重复浸提3次，提取液合并并浓縮至1000mL后上大孔吸附树脂柱纯化，大孔吸附树脂型号可采用AB-8，上样方式采用动态上样；以TLC(薄层色谱)监测柱子流出液，至开始有泄漏时停止上样；(3).采用8倍柱床体积的蒸馏水洗脱，以充分除去大量多糖、蛋白等水溶性杂质；(4).采用4倍柱床体积、浓度为95%的乙醇溶液洗脱，合并后的洗脱液经浓縮、冷冻干燥，得到浅棕色粉末状的抗氧化活性物质产品。将此浅棕色粉末产品用甲醇配制成100pg/mL溶液，以同浓度的BHT(2,4二叔丁基甲基苯酚)和Vc(维生素C)为阳性对照做DPPH自由基清除试验和FRAP法抗氧化能力测试。其结果如表1和表2所示。_表1100pg/mL样品DPPH自由基清除率_样品(IOO^g/mL)_BHT香椿老叶抗氧化物质VcDPPH自由基清除率(％)69.88±1.45b91.19士2.03a94.35±0.24a同一行不含相同字母表示各样品之间存在极显著性差异(P〈0.01)表2<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>同一行不含相同字母表示各样品之间存在极显著性差异(P<0.01)权利要求1.一种从香椿老叶中提取抗氧化活性物质的方法，其特征在于其提取方法的步骤如下(1).将香椿老叶于阴凉处晾干、粉碎，过30～50目筛，形成香椿叶粉；(2).在香椿叶粉中加入浓度为60～80％的乙醇溶液进行提取，提取温度为60～80℃，提取料液比为1∶10～1∶30(w/v)，提取时间2～8h，重复浸提2～5次，提取液浓缩后上大孔吸附树脂柱进行纯化；(3).采用6～8倍柱床体积的蒸馏水洗脱，除去多糖、蛋白等水溶性杂质；(4).采用3～6倍柱床体积的60～95％浓度的乙醇溶液洗脱，洗脱液经浓缩、冷冻干燥得到抗氧化的活性物质。全文摘要本发明涉及一种从香椿老叶中提取抗氧化活性物质的方法，是采用乙醇提取、大孔吸附树脂AB-8纯化、洗脱液浓缩、干燥，最终得到具有强抗氧化活性的提取物，属于天然产物提取领域。本发明采用香椿产业的副产品——香椿老叶为原料制备强抗氧化的活性物质，变废为宝，是一种绿色产业；且工艺较为简单，无须较大设备投资，非常适合于大规模产业化生产，为进一步开发系列香椿功能性食品奠定了基础。所制备的香椿抗氧化活性物质产品适用于食品抗氧化剂、功能性食品和医药、化妆品等行业，提取物残渣经加工后可作为饲料、肥料，实现综合利用。文档编号A23K1/00GK101099768SQ20071005838公开日2008年1月9日申请日期2007年7月25日优先权日2007年7月25日发明者刘常金,周庆礼,夏廉法,江慎华,王昌禄,王玉荣,陈勉华,陈志强申请人:天津科技大学