用于培育和孵化蛋的方法

专利名称：用于培育和孵化蛋的方法
技术领域：
本发明涉及培育和孵化早熟蛋(premature egg)的方法，特别是在 早熟蛋被转移到鸟的泄殖腔之前从鸟中取出的在它们壳中的早熟蛋。
发明的背景
欧洲专利申请no.01650109涉及饲养无菌状态的鸟的方法，该方法 包含将母体鸟关养，在早熟蛋被转移至泄殖腔之前从母体鸟中取出在它
的壳中的早熟蛋并且在它的壳中培育该早熟蛋并且孵化该早熟蛋以生 产出产蛋鸟(laying bird)。
在培育和孵化过程期间，通风、温度控制和湿度是非常重要的。蛋 壳，特别是它的气孔和角质层(cuticle),调整发育胚胎的呼吸性气体 交换和水合作用。基本上，蛋壳是可呼吸的膜，同时胚胎发育蛋壳允许 二氧化碳和水从蛋中逸出和氧进入蛋中。当胚胎生长时，它需要增加的 氧供给。而且，在孵化期期间必须注意保持适当的湿度水平。
正常的自然产下的蛋的成功培育和孵化所需条件是熟知的。这些条 件在物种之间是变化的。例如，对于家禽(如，鸡)整个过程需要20-22 天， 一般地为21天，从第0天-第18天采用培育条件，第18天-第21 天采用孵化条件。在培育蛋期间，蛋应该被定位，这样的话包含空气室 的圆顶端在最上面。 一般的培育箱条件是37.5。C的气温，50%的相对湿 度(RH)和定期的转动(摇动)蛋，使得每45-180分钟蛋的纵向轴被 十曼t曼地旋转大约80°—次(垂直的40°每侧)。
在孵化之前的3天，在第18天或在第18天之后，胚胎一般地向蛋 内的孵化位置移动。在这个阶段蛋不再应该被转动。从第19天-第21 天，相对湿度应该被升高到大约60%-70%。这种高湿度水平降低了蛋的 水分损失。在整个培育和孵化阶段保持适当通风也是很重要的，以保证 在标准大气压(760mmHg)下正常空气的二氧化碳和氧浓度得到保持。
通常，在蛋的培育期间和在孵化阶段之前，到第18天或第19天， 这些蛋释放了 (loose)它们的初始重量的大约13%。这个重量损失对蛋 的正常发育是必不可少的。欧洲专利no.0295964描述了鸟类胚胎体外培养技术。特别地，该说 明书涉及胚胎在它已经从它的壳中取出之后在密闭容器中的培育。使用 的容器优选地是蛋壳的 一部分，该蛋壳选自与所培养的物种相同的物 种，对此发明而言，选自相似的母鸡。类似地，欧洲专利no.0511431公 开了母鸡的受精卵的体外培养方法，其中刚被受精的胚胎在产卵之后大 约一个小时之内从母鸡的输卵管的膨大部的上部取出并随后进行培养。 这两个说明书仅仅公开了已被取出的无壳的蛋的人工培养。
本发明涉及培育和孵化通过手术获得的在它们的壳中的早熟蛋的 特殊技术，特别是从欧洲专利申请no.01650109的方法得到的那些。这
些技术与传统的蛋培育和孵化技术相比时，在通过手术取得的蛋的产率 方面得到了改善的结果。

发明内容
根据本发明的 一般方面，提供了在消过毒的环境中培育和孵化在它 的壳中的早熟蛋的方法，包括任选的冷却和预培育储存蛋的步骤；将早 熟蛋放置在适于提供蛋的可变摇动的培育隔离器中；监测通风和蛋的重 量损失；在培育阶段期间将隔离器中相对湿度(RH)降低到大约 15%-40%水平；在孵化阶段期间将相对湿度提高到大约60%-75%,并且 停止摇动这些蛋；并将蛋保持在隔离器中直到孵化为止。
出人意料地，在培育阶段的首先的18天中所需要的相对湿度比正 常蛋所要求的相对湿度低得多。如果这种15-40%的低相对湿度用来孵
下的蛋)'，它将产生非常低的孵化率(<40%)'、,、'然而对于早熟蛋:'、:这
种低相对湿度是最佳的RH范围。因此，在培育阶段使用上述低的相对 湿度水平与本领域中的传统教导相反。
根据本发明的第 一方面，提供用于在消过毒的环境中培育和孵化通 过手术取得的在它的壳中的早熟蛋的方法，包括以下步骤
a. 预培育储存通过手术取得的早熟蛋；
b. 将蛋放置在适于提供蛋的可变化摇动的培育隔离器；
c. 控制在隔离器中的通风；
d. 称重这些蛋以监测重量损失；
e. 在培育阶l殳期间将相对湿度降^^'j大约15%-40%,并且改变培育隔离器中的温度以获得在培育阶段期间的目标重量损失；
f. 在孵化阶段期间控制在培育隔离器中的相对湿度和温度并且将
相对湿度提高到大约60%-75%并且停止摇动这些蛋；和
g. 保持这些蛋在该隔离器中处于无菌条件中直到孵化为止。 根据本发明，在整个方法期间保持通过手术取得的蛋的无菌状态。
发明的详细i兌明
本发明涉及用于通过手术取得的早熟蛋从任选的预培育储存直到 培育和孵化可成活的鸟的培育和孵化方法。
通过手术取得的蛋(如，通过使用欧洲专利申请no.01650109的方 法获得的那些)由它们的性质来看是早熟的。在一些情况下，它们的发 育(例如原肠胚形成)可以被延迟。而且，有可能的是，这些早熟蛋可 能缺乏足月的自然产下的蛋的某些特征，例如在壳上可能有减少的角质 膜和在壳内的气孔形成可能被损害。已经发现，由于早熟蛋壳的形成和 夕卜牙+麻醉、安乐死方法(euthanasia methods )和定时(timing)的影响， 一些通过手术取得的蛋可能没有足够地释放水分和相应体重，而它们对 正确的胚胎发育和雏禽的生存能力必不可少的。因此，对正常产下的蛋 的标准孵化实践不适合于获得这些早熟的通过手术取得的蛋的最佳的 成活能力。
根据本发明的一个实施方案，提供用于培育和孵化通过手术取得的 在它的壳中的早熟蛋的方法，包括以下步骤
a. 预培育储存通过手术取得的早熟蛋；
b. 将蛋放置在适于提供蛋的可变化摇动的培育隔离器；
c. 控制在隔离器中的通风；
d. 称重这些蛋以监测重量损失；
e. 在培育阶段期间将相对湿度降低到大约15%-40%,并且改变在 培育隔离器中的温度以获得在培育阶段期间的目标重量损失；
f. 在孵化阶段期间控制在培育隔离器中的相对湿度和温度并且将 相对湿度提高到大约60-75%并且停止摇动这些蛋；和
g. 保持这些蛋在该隔离器中处于无菌条件中直到孵化为止。
我们已经出人意料地发现传统的孵蛋技术不适合于通过手术取得 的早熟蛋。需要一种特别地用于早熟蛋的新方法以获得从这类通过手术取得的蛋孵化出健康鸟的始终很高的孵化率。
特别地，我们已经令人惊讶地发现，在低湿度水平在限定时间培育 通过手术取得的蛋在可成活胚胎方面获得了较好的结果。出人意料地，
在培育的首先的约18天中，使用适合于自然产下的蛋的RH (大约 50%RH)得到非常低的早熟蛋的孵化率(<35%可成活的孵化)，而它 对于自然地产下的蛋提供>85%可成活的孵化。而且再出人意料地，在 培育的首先的大约18天中，使用低RH ( 15-40%)对于早熟蛋得到出人 意料好的孵化率(>70%可成活的孵化)，该低RH对于自然产下的蛋得 到非常低的孵化率(<40%)。保持这种低湿度水平是有利的，因为它 提供了所需要的重量损失以保证鸟的可成活的孵化。
理想地，通过手术取得的在它的壳中的早熟蛋是无菌的，并且本发 明的方法在无菌的气氛中进行以保证孵化和培育期间的无菌条件。
根据本发明的一个优选实施方案，控制在培育箱内的通风。可以使 用采用HEPA过滤空气和用消毒氧补充的消毒空气结合的通风。
根据本发明的另一个实施方案，该隔离器装备有称重这些蛋的设 备。这可以直接监测蛋重量损失。从培育的开始至孵化期之前对于单个 蛋的目标重量损失为初始蛋重量的大约10-15%。
根据本发明的更优选的实施方案，该隔离器可以配有 一 个或多个培 育箱，这样的话，每个培育箱可以同时提供不同的对单个蛋优化重量损 失和成活能力所必需的条件，特别是相对湿度水平。将独立的培育箱用 于在蛋重量损失方面预期有宽变化的情况。
该培育期被定义为在培育箱中从第0天到第18天的时期。在这个 时间内，摇动这些蛋是必需的。第O天相当于蛋被放置于培育箱中的第 一天。孵化期被定义为从第19天至第21天的时期。在这个时间内不需 要摇动这些蛋。
在培育和孵化期间的正常水平的相对湿度^f皮理解为大约50%-70%。 本方法认识到需要将传统的培育和孵蛋实践改变到在本领域中没有考 虑到的水平。通过手术取得的蛋的独特特征提供了特定情况，在该特定 情况中本领域中的传统教导没有获得所希望的孵化率/成活率。
根据本发明的一个优选实施方案，在培育阶段期间相对湿度水平被 降低到15-35%，优选地25-35%。
另外，培育阶段在36-38。C的温度下进行。根据本发明的还 一 个优选实施方案，在孵化阶段期间相对湿度水平
被提高到60-75%,优选地大约65%。另外，孵化阶段可以在36-37.5°C 温度下进行。孵化阶段(步骤(e))可以在或大约在第18天开始。
已经发现，和自然产下的蛋相比时，早熟蛋在首先的18天的培育 期间要求低很多的RH,对于在孵化阶段中接下来的3天，所要求的RH 与自然产下的蛋的要求的RH相似。
本发明的方法在培育隔离器中实施。该培育箱可以是在标准孵蛋技 术中使用的传统的培育箱或它可以是适于符合培育和孵化无菌蛋的消 毒要求的培育箱，即培育隔离器。理想地，该培育方法和培育隔离器保 持早熟蛋的消毒和无菌状态。
培育隔离器可以配有设备以监视与控制通风速率、以除湿空气和获 得富氧空气(在760mmHg时21-23% )。因此，理想地，使用已经:故改 进并且能够控制通风的传统的培育隔离器。该方法可以进一步包括向培 育隔离器中加入氧的步骤。最优选地，当在培育箱中的湿度时被降低时 力口入氧。
优选地，将通过手术取得的蛋从进行手术取出的手术隔离器中移出 并且在短时间内(例如在从手术的30分钟之内)被转移到培育隔离器 中。有利地，保证在培育开始之前使蛋由空气进行通风。
该培育方法还可以包括从母体鸟中手术取出之后冷却这些蛋的附 加起始步骤。它还可以包括预培育储存步骤，在该步骤中这些蛋可以被 储存、静止至少24小时，优选地不超过72小时。 一般而言，预培育储 存可以是0-72小时。早熟蛋的优选的储存条件是HEPA过滤空气，15 °C -23 °C之间的温度，50%-75%的相对湿度和无振动或突然震动的储存。
根据本发明的另 一 个实施方案，这些蛋可以通过使用消毒设备和规 定的无污染或无菌空气进行培育。
根据本发明的进一步特定的实施方案，该方法包括以下步骤对于 首先的24小时，可以使用用于蛋的物种的标准培育条件。此后，应该 仔细地监测每个蛋的重量损失、培育温度、相对湿度，和，如果合适的 话，呼吸性气体交换，特别是在空气中的二氧化碳和氧浓度。该培育和 孵化条件可以根据本发明进行调节。理想地，对于55g的通过手术取得 的早熟蛋，希望的目标重量损失为大约0.4g/天。在最初培育的第O天直 到第18天，大约37.2-37.6。C的培育温度是优选的，然后大约36.5-37.5。C的温度是所希望的直到孵化。相对湿度最初可以被设置在大约40%， 但是每天应该根据通风率和每天的蛋重损失进行调节直到第18天，在 此时相对湿度应该被j是高到大约65%。
根据本发明的还进一步的实施方案，从鸟的子宫取出早熟蛋的手术 过程包括切割开鸟的皮肤和对子宫的操作。重要的是，蛋没有被来自鸟 的内脏的废物污染并且蛋本身在方法期间没有被损伤。蛋可以在完整 的、被封闭的(例如，夹住)子宫中取出或者直接地切割开子宫从鸟体 取出。应该避免流体形式的消毒溶液的所有直接接触以消除损害胚胎生 存能力的任何危险。无菌技术是是必要的。
或者，手术取出包括
进行剖腹切割并且用缝合线在两端结扎乌的输卵管； 横切输卵管远端至每个缝线；
取出被包在输卵管中的蛋； 消毒该输卵管； 取出蛋；和 消毒该蛋。
优选地，该鸟^皮麻醉，或者可以在取出在壳中的蛋之前进行安乐死 或被杀死。雌性母体鸟可以是活的或者刚被杀死的。按照伦理的、合法 的和动物福利考虑，活鸟可以是完全有意识的、被镇静的或被麻醉的。 蛋和卵可以被受精或者未被受精。
优选地，蛋的取出是在该蛋将自然地转移到母体鸟中的泄殖腔中时 的转移时间之前并尽可能靠近该转移时间。
然后可以将通过手术取出的蛋放置于消过毒的容器中并封闭。容器 应该可以使蛋冷却并且具有适合蛋储存的设计和尺寸。消过毒的容器是 一个体积大约是蛋的IO倍的、通过塑料框支持和保护该蛋以保证稳定 性和通风的容器。
一旦这些蛋已经孵化，用于孵化出的小鸟、饲养鸟、产卵和繁殖活 性鸟合适的环境是具有HEPA过滤空气的刚性器壁的隔离器。空气被维 持在正压并且以频繁的间隔(例如，考虑隔离器的立体容积和饲养密度， 对于成年鸟10次/小时)进行交换。每只鸟的占地面积理想地为 0.2-0.4m2。保护进口端上的手套不被乌损坏。控制空气温度和光线以提 供与用于相同物种和相同生命周期阶段的常规鸟的条件相似的条件。根据本发明进一步的实施方案， 一旦通过手术取得的蛋已经孵化，
将铜养和繁殖得到的健康和生产(productive)状态的鸟保持在规定的无 污染或消过毒的环境中。可能需要对饮食的营养含量的进行调整。
特别地，可以加入有机微量营养素(如脂肪或水溶性维生素)以补 偿在饮食的消毒期间发生的损失和由于缺少来自共生微生物的供应的 损失。通过y辐射消毒的饮食具有降低的脂溶性和水溶性维生素的浓度。 此外，y辐射的饮食具有受限制的储存期限并且应该进行监测脂肪酸败。
然后饮食含量的分析可以根据生命周期的阶段计算乌所需要的适 当补充量。取决于特定的营养素，它们可以肠胃外给予或在饲料中或在 水中口腔给予。饮用水也应该进行y辐射(uv辐射的水可能包含细菌 芽胞)。
根据本发明的更进一步实施方案，提供用于饲养和培养通过手术取 得的蛋的方法，包括向在卵中的通过手术取得的早熟蛋给予抗生素。优 选地，口服给予的会诺酮类(fluroqmnolones)被给予，并且视需要地， 为了消灭具体的微生物，其他抗微生物剂被给予。抗生素消除了经卵巢 的细菌性和支原体性感染，和对胚胎和随后的小鸟的成活能力和无菌度 具有正面影响。抗病毒素、药品、小分子、肽和单克隆抗体还可以被用 来消除或防止病毒感染。
应当理解的是，当蛋从母体鸟中取出时，培育和孵化蛋所要求的特 定条件随例如物种和发育阶段进行变化。
虽然在上述中，本说明书已经完全涉及家禽，特别是母鸡，应当理 解的是本发明可以在其他鸟上进行。
如果受精蛋被用来生产后代或衍生出(derived)鸟，那么这些蛋可 以在传统的家禽詞养系统、无菌系统或者隔离器中控制微生物进入来进 行孵化、饲养、维持和繁殖。
根据本发明，为了最大限度地没有微生物，蛋应该优选地无菌地从 母雌性体中取出(除非它们也是无菌的)并且生命周期应该在隔离器中 完成。当生产无菌蛋和乌时，生命周期可以在隔离器的外面完成。
在本说明书中术语"包含、包括、；波包含的和含有的"或其任何变化 和术语"包括、包含、被包括的和包括的"或其任何变化被认为是完全可 互换的并且它们应该全被提供最大可能的解释，反之亦然。实施例1 才才泮+和方法
根据欧洲专利申请no.01650109的技术，在它们的壳中的早熟蛋从 母体鸟获得。
早熟蛋在从母体鸟被手术取出之后被冷却。然后将它们储存、静止 至少24小时但不多于72小时。储存条件是HEPA过滤空气，15°C-23 。C之间的温度，50-75%的相对湿度并且这些蛋进行无振动或无突然震动
的储存。
这些蛋通过使用消过毒的设备和规定的无污染的空气进行培育。 最初在首先的24小时，使用标准的培育条件，而此后，应该仔细 地监测每个蛋的重量损失、培育温度、相对湿度，和如果合适的话，呼 吸性气体交换，特别是在空气中的二氧化碳和氧浓度。因此调节培育和 孵化条件。例如，为了降低二氧化碳浓度，提高培育箱隔离器的通风率， 在高环境温度和高相对湿度的条件下，进入隔离器的空气被除湿以保证 相对湿度被维持在大约25%。
在第1天，隔离器的湿度从40%被降低到20-25%以提高通过蛋壳 的水分损失。这促使早熟蛋的重量损失。湿度被保持在这个水平直到第 13天，然后从第14天至第18天增加到40%以便从笫0天至第18天达 到13%的总的重量损失。在第18天之后，湿度被提高到65%正常的孵 化水平。
一旦蛋被孵化，应用以下条件。对于孵出的鸡、饲养的鸟、产卵的 和繁殖活性的鸟的适合环境是刚性器壁的隔离器，其具有HEPA过滤空 气。空气维持在正压并且以频繁间隔进行交换(例如考虑隔离器的立体 容积和飼养密度，对于成年鸟为10次/小时)，占地面积为0.2-0.4m2/1 只鸟，保护进入口上的手套不受鸟的损坏，和控制气温和光线以提供与 用于相同物种和相同生命周期阶段的常规鸟的条件相似的条件。
结果
预培育储存时间(0-5天)和条件(温度、湿度、蛋朝向、通风、 振动)、培育条件(温度、湿度、通风、朝向、重量损失)、处理和孵 化条件对胚胎成活能力的影响储存时间
0天-孵化率为90% 1-3天-孵化率为90% 4-5天-孵化率为60%
用于3天储存的温度、通风/振动
大约25°C同时振动/通风-孵化率为60%, 大约2(TC没有振动/通风-孵化率为80%。
蛋朝向和重量损失
蛋一侧平放-重量损失7.8%，孵化率30% 蛋圆顶端在最上面-重量损失10.2-13.1%,孵化率80-90%
这些结果证实，储存最多三天对通过手术取得的蛋的孵化率不存在 不利影响，只要没有振动作用和提供通风。这些结果还证实在培育期间 蛋朝向的重要性。
实施例2
抗生素(例如，口腔给予的喹诺酮类)对消除经卵巢细菌感染和支 原体性感染的影响和对胚胎和随后鸡的成活能力和无菌度(sterility)的影响。
结果
没有抗生素-成活能力22-60%,和无菌度66-100%; 具有抗生素-成活能力13-57%，和无菌度89-100%。 这些结果证实使用抗生素对去除经卵巢感染(例如，沙门氏菌)的 益处和对通过手术取得的蛋的成活能力不存在不利影响。
实施例3
使用微量营养素-补充的饮食(包含维生素A、 C、 E和K， B维生 素复合物)维持健康和繁殖效率结果
对于用25rads辐射的销售的饮食，维生素损失，其中对于维生素A 和B6为最高(大约50%)。健康通过具有另外补充的饮食进行维持。 证实从通过手术取得的蛋孵化出的鸟可以被维持整个生命周期并且生 产具有正常成活能力的蛋。
实施例4
在培育期(大约18天)，与非常低的RH水平(25%)相比，常规 的RH水平(50%)对通过手术取得的有壳的蛋的孵化率的影响。 蛋的初始重量为大约60g。
结果
50Q/oRH在培育期间的蛋重量损失5-9%,孵化率33% 25。/。RH在培育期间蛋重量损失8-13%,孵化率73% 这些结果证实当通过较低的RH控制重量损失/水分损失时具有改 善的孵化率。
实施例5
麻醉或安乐死对通过手术取得的蛋的孵化率的影响。 和麻醉30分钟相比，安乐死和在30分钟之后取出蛋的影响，和32 小时预培育储存相比，8小时储存的影响。
结果
安乐死孵化率为25% (蛋被储存32小时) 麻醉孵化率为75% (蛋被储存32小时)；
孵化率为0% (蛋被储存8小时) 通过使用氧和异氟烷的混合物来提供麻醉。
实施例6 材冲+和方法
具有已知的SPF状态的五十只成熟的雌性和五只成熟的雄性鸡维持在选定的饮食并使它们自然繁殖。使用定时和触诊的结合来测定从鸟 腹部取出蛋的最佳时间。
对于该过程，鸟通过颈部脱位被进行安乐死并立即进行准备。从腹
侧胸部和腹部去除羽毛并且通过使用50%的碘在醇中的溶液消毒暴露 的皮肤。然后将每只鸟放置在专门适用的用5%过乙酸的溶液消毒的包 括消过毒的仪器的手术隔离器下。该鸟用消过毒的粘合性布覆盖，然后 将隔离器的无菌进入口放置在该布的上方。进行剖腹切割和随后小心解 剖，从子宫/生殖道的远端面和最接近泄殖腔的地方取出蛋。然后将蛋在 无菌条件下转移到适于作为孵蛋培育箱的隔离器。
在安乐死之后15-22分钟，四十一个蛋一皮成功地收回，并且纟皮认为 适合培育。
在18-20°C,在无振动、通风的塑料蛋托盘中储存大约24小时之后， 这些蛋被称重然后这些蛋中的40个被随机分配到四个小的摇动培育箱 中的一个。两个培育箱被维持在大约16-29%的RH (指定为25%RH) 和两个培育箱被维持在大约43-54%的RH (指定为50%RH)。这些蛋 被保持为空气室在最上面，并且在培育的第0天、7天和18天被分别地 称重。在第18天，对所有的培育箱进行调节以提供大约55-71%的RH。 记录那些破壳并有活的可成活的小鸡的蛋的数目。
在孵化的 一天之内，活的鸡从孵蛋隔离器中取出并且被转移到两个 适合于詞养多组鸡的大型饲养隔离器。鸡用通过辐射消毒的补充的商业 饮食进行饲养。在成长18天后，五只鸡从每个祠养隔离器中被取出， 进行安乐死并通过需氧和厌氧培养制成细菌学样品。样品包含肝脏、脾、 心脏、血、阴道/泄殖腔、盲肠和小肠消化物和粪^更。
另外，将100个由50只经挑选用于手术的雌鸟自然产下的蛋在标 准孵蛋条件下(第0-18天，大约50%RH;第18-21天，65%RH )进行 培育以提供对照。所有的蛋在37.4。C进行培育。
结果
可成活的鸡被成功地从人工取得的早熟蛋中孵化出。没有厌氧菌或 需氧菌从鸡样品中分离出。
自然产下的蛋具有91%的可成活鸡孵化率。这证实了由雌鸟生产的 蛋的正常或高水平的自然生殖力。和在50%RH下培育的类似的蛋相比，在首先的18天为25%RH下 培育的早熟蛋(通过手术取得)有明显更大的孵化率(分别地可成活鸡 孵化率73%vs.33% ) ( PO.05 )。
结论
建立了用于在鸡中人工生产无菌受精蛋的安全和高效方法。蛋是可 成活的，并生产出可成活的无菌鸡，其在隔离器中成功地进行维持。然 而，为了获得接近于自然产下的蛋的孵化率的可成活鸡孵化率，需要使 用异常低的相对湿度。具体而言，如果使用常规的RH(50%)，那么 与自然产下的蛋的>90%和与早熟的通过手术取得的蛋的〉70%相比，蛋 的孵化率为<35%。这与关于常规蛋的充分记载的结果(其中低于40% 的RH与降低的孵化率有关)相反，并且与在25%培育的早熟蛋发现有 提高的孵化率(相对于50y。RH)形成对比。
可以由本发明控制的传染性生物包含那些可以是使有关物种致病 的或非致病的生物。相关物种包含鸟类物种(一般地为鸡、家禽和火鸡)、 人及其他哺乳动物(一般地为狗、猫、马、牛、猪、绵羊、山羊、大鼠 和小鼠)。从本发明起见，微生物包含寄生虫、细菌(包含厌氧的和需 氧的物种、共生物种和与消化道有关的物种)、类菌质体、病毒(包含 反转录病毒)、朊病毒(prions)、真菌、酵母、霉菌和DNA和RNA 片段。
根据本发明，蛋的无菌衍生(derivation)和，如果合适的话，鸟的 孵化、饲养、维持和繁殖可以与另一种控制微生物污染方法组合使用。 上述方法包含消毒剂、抗微生物、抗生素、抗病毒剂、驱寄生虫剂、免 疫调节剂和疫苗。
应当理解的是，根据本发明，基本上，那些蛋是人工或通过手术取 得的蛋，严格来说，其根据本发明表示在蛋被转移到潜在污染的区域之 前从母体鸟中取出蛋。理想地，在消过毒的环境中通过用消过毒的食品
喂养来饲养作为母体鸟的鸟。然后，在蛋被转移到母体鸟中有潜在污染 的区域之前从母体鸟中人工地取出蛋，然后对蛋进行培育和孵化以生产 产蛋鸟，其被保持在该消过毒的环境中。
应当理解的是，本发明不局限于如上所述的实施方案和方法，而可 以在权利要求的范围内进行变化。
权利要求
1. 用于在消过毒的环境中培育和孵化通过手术取得的在其壳中的早熟蛋的方法，包括以下步骤a. 预培育储存该通过手术取得的早熟蛋；b. 将蛋放置在适于提供蛋的可变化摇动的培育隔离器中；c. 控制在隔离器中的通风；d. 称重这些蛋以监测重量损失；e. 在培育阶段期间将相对湿度降低到大约15％-40％，并且改变在培育隔离器中的温度以获得在培育阶段期间的目标重量损失；f. 在孵化阶段期间控制在培育隔离器中的相对湿度和温度并且将相对湿度提高到大约60％-75％并停止摇动这些蛋；和g. 保持这些蛋在该隔离器中处于无菌条件中直到孵化为止。
2. 根据权利要求l的方法，其中早熟蛋从鸟，优选地鸡，通过手术 取得。
3. 根据权利要求1或权利要求2的方法，其中该隔离器装备有一个 或多个培育箱，这样每个培育箱同时地提供不同的相对湿度水平。
4. 权利要求l-3任一项的方法，其中步骤(a)进行0-72小时，优 选地至少约24至不超过约72小时。
5. 根据前述权利要求任一项的方法，其中在培育开始之后，培育期 为第0天-第18天。
6. 根据前述权利要求任一项的方法，其中蛋在培育期期间和在孵化 期之前目标重量损失为初始蛋重量的大约8%-15%。
7. 根据前述权利要求任一项的方法，进一步包括向隔离器中加入氧。
8. 根据前述权利要求任一项的方法，其中在步骤(f)中，湿度被才是高到60%-70%。
根据前述权利要求任一项的方法，其中步骤(e)在36-38。C的温度进行。
9. 根据前述权利要求任一项的方法，其中步骤(f)在36-37.5。C的温度进行。
10. 根据前述权利要求任一项的方法，其中早熟蛋的培育和孵化在 消过毒的设备和规定的无污染的空气中进行。
11. 根据前述权利要求任一项的方法，其中在卵中向通过手术取得 的早熟蛋给予抗微生物剂。
12. 饲养根据前述任一项权利要求获得的孵化乌的方法，包含在它 们的饮食中向鸟提供额外营养补充剂的步骤。
13. 权利要求12的方法，其中补充剂选自脂肪或水溶性维生素。
全文摘要
本发明涉及培育和孵化早熟蛋的方法，特别地为在将早熟蛋转移到鸟的泄殖腔之前从鸟取出的通过手术取得的早熟蛋。
文档编号A01K41/00GK101437392SQ200780013528
公开日2009年5月20日 申请日期2007年2月22日 优先权日2006年2月23日
发明者L·莫兰 申请人:奥瓦根国际有限公司