专利名称：：前列环素衍生物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及新型的前列环素衍生物、其可接受的酸加成盐(acidadditionsalts)、溶剂化物、水合物及多晶型物。本发明也提供了包含本发明化合物的组合物，及该组合物在治疗能用前列环素进行有益治疗的疾病或病症的方法中的用途，特别是在治疗能用全身性或肺动脉血管床扩张剂或血小板聚集抑制剂进行有益治疗的疾病或病症的方法中的用途。发明背景伊洛前列素(Iloprost)是前列环素PGI2的合成类似物，并记载于美国专利4,692,464中。已知伊洛前列素的化学名为(E)-(3aS,4R,5R,6aS)-六氬-5-4-[(EK3S,4RS)-3-羟基4-甲基-l-辛烯-6-炔基]-A"叫'a-并环戊二烯戊酸(pentalenevalericacid)，及5-[(E)-(lS,5S,6R，7R)画7-羟基-6-[(EH3S，4RS)-3-羟基-4-曱基-l-辛烯-6-炔基]-二环[3.3.0]辛烷-3-亚基)戊酸。已知伊洛前列素在体外具有抑制血小板聚集和血小板粘附的药理学作用。还已知其可引起微动脉和微静脉的扩张，减少由介质如5-羟色胺或组胺等引起的血管渗透性。在肺动脉压过高的动物;漠型中，伊洛前列素表现为降低肺动脉压。由于伊洛前列素能抑制肺血管收缩、降低肺血管阻力以及具有抗血小板聚集和抗凝血活性，这些因素有助于其用于治疗肺动脉压过高中的用途。可吸入式伊洛前列素制剂的这种用途在美国已经得到批准。尽管伊洛前列素的功效显著，但是由于其半衰期短，所以每天需给药6至9次，每次给药间隔不超过2小时。如此高频率的给药会导致时间顺应性的问题，例如遗漏用药、补偿遗漏用药时所造成的过量用药。另外，病人在睡眠期间不能适时地给药治疗。伊洛前列素更常见的副作用包括异常实验室检验(abnormallabtest)、背痛、视力模糊、意识错乱、头晕、衰弱、从坐卧位置突然起立时导致的头暈、寒战、咳t軟加剧、咳嗽或咳血、腹泻、-张口困难(difficultyopeningthemouth)、发热、发烧、不适或生病的一般感觉、头痛、关节痛、牙关紧闭、食欲不振、肌肉酸痛、肌肉痛性痉挛、肌肉痉挛(尤其是颈部和背部)、恶心，面部、颈部、手臂和有时胸上部的发红，流弟、战栗、咽喉痛、盗汗、睡眠障碍(troublesleeping),不寐(sleeplessness)、失眠(unabietosleep)、异常的疲劳和虚弱及呕吐。这些副作用可归因于伊洛前列素的一种或多种代谢产物和/或由于低顺应性及每日需频繁用药导致的过量用药。因此，尽管伊洛前列素具有良好的活性，但仍然一直都需要新型和改进的化合物来治疗上述疾病和病症。定义术语"改善"和"治疗，，可互换使用，皆是指降低、抑制、减弱、减小、停止或稳定疾病的发展或进展(例如本文il明的疾病或障碍)。"疾病，，是指破坏或干扰细胞、组织或器官正常功能的任何病症或病况。应该认识到的是，取决于合成中所用的化学原料的来源，合成的化合物中存在一定的天然同位素丰度差异。因此，伊洛前列素的制剂中会固有地含有少量的氘化同位素同系物(isotopologues)。尽管存在这样的差异，但是天然丰度稳定的氢和碳的同位素的浓度相对于本发明化合物的稳定同位素取代的程度而言较小，且微不足道。参见如WadaE等，Seikagaku1994,66:15;GanesLZ等，CompBiochemPhysiolMolIntegrPhysiol1998,119:725。在本发明化合物中，当指定一个具体的位置具有氘时，应该理解为此位置的氘的丰度远大于氘的天然丰度，即0.015%。在所述化合物中，指定为具有氘的位置通常表示每个指定为氘的原子的最小同位素富集因数至少为3000(45%氖含量)。本文所使用的术语"同位素富集因数"是指特定同位素的同位素丰度与天然丰度的比值。在其他的实施方案中，本发明化合物中每个指定为氘的原子的同位素富集因数为至少3500(每个指定为氘的原子含有52.5%的氘)、至少4000(含有60°/。的氘)、至少4500(含有67.5%的氘)、至少5000(含有75%的氘)、至少5500(含有82.5%的氖)、至少6000(含有90%的氖)、至少6333.3(含有95%的氖)、至少6466.7(含有97°/。的氖)、至少6600(含有99%的氖)"或至少6633.3(含有99.5%的氖)。在本发明化合物中，未被指定为具体的同位素的任何原子代表任何该原子的稳定同位素。除非另外声明，当具体指定一个位置为"H"或"氬"时，应该理解的是该位置的氢具有天然丰度的同位素组成。在其他实施方案中，本发明化合物含有少于10%,优选少于6%，更优选地少于3%的所有其他同位素同系物的混合，其中包括缺少任何氖的形式。在某些方面，本发明化合物含有少于"X，，。/。的所有其他同位素同系物的混合，其中包括缺少任何氘的形式；其中X是介于0和IO之间的任意数值(例如1、0.5、0.001)，包括端值。含有多于10°/。的所有其他同位素同系物的混合的物质组合物在本文中称为"混合物"，并且必须满足下文所列参数。在本文中，对同位素组成的这些限制和同位素组成的所有引用之处仅指存在于式I或II化合物中的活性的、游离碱形式的氖/氬的相对量，并不包括前药或平衡离子可水解部分的同位素组成。术语"同位素同系物"是指与本发明具体的化合物相比，仅在其分子或离子的同位素组成上有所不同的种类。本文所使用的术语"化合物"意图包括其盐、溶剂化物及水合物。在本文中记载的本发明某些方面中具体地提及了"盐"、"溶剂化物"或"水合物"，而在本发明其他方面当使用术语"化合物"而未列举这些其他的形式时，这不应理解为有意排除这些形式。'本发明化合物的盐由酸与化合物的碱性基团(例如氨基官能团)形成，或由碱与化合物的酸性基团(例如羧基官能团)形成。根据本发明另一优选的实施方案，化合物是可药用酸加成盐。本文所使用的术语"可药用的"是指在合理的医学判断范畴内，适用于与人类及其它哺乳动物的组织接触的成分，而无不适当的毒性、刺激性、过敏反应等，并且相称于合理的利益/风险比。"可药用盐"是指任何非毒性的盐，其给药至受者后能直接或间接地提供本发明化合物或化合物的前药。"可药用平衡离子"是盐的离子部分，其为非毒性的且在给药至受者后从盐中被释放出来。通常用于形成可药用盐的酸包括无机酸如氢硫酸、盐酸、氢溴酸、氬碘酸、硫酸及磷酸，以及有机酸如对曱苯磺酸、水杨酸、酒石酸、酸式酒石酸(bitartaricacid)、抗坏血酸、马来酸、苯磺酸(besylicacid)、富马酸、葡萄糖酸、嚿萄糖醛酸、曱酸、谷氨酸、曱磺酸、乙磺酸、苯^黄酸、乳酸、草酸、对溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、柠檬酸、苯曱酸及醋酸，以及有关的无机与有机酸。因此所述可药用盐包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢^^典酸盐、醋酸盐、丙酸盐、癸酸盐(decanoate)、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、癸酸盐(caprate)、庚酸盐、丙炔酸盐(propiolate)、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-l,4-二酸盐、己炔-l，6-二酸盐、苯曱酸盐、氯代苯甲酸盐、曱基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯曱酸盐、曱氧基苯曱酸盐、邻苯二曱酸盐、对苯二曱酸盐、磺酸盐、二曱苯磺酸盐、苯乙酸盐、苯丙酸盐、苯丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、(3-羟基丁酸盐、乙醇酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-l-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、扁桃酸盐等。优选的可药用酸加成盐包括与无机酸(如盐酸和氢溴酸)形成的酸加成盐，尤其是与有机酸(如马来酸)形成的酸加成盐。本文所使用的术语"水合物"是指还包含化学计量或非化学计量的水的化合物，所述水通过非共价的分子间作用力结合。本文所使用的术语"溶剂化物"是指还包含化学计量或非化学计量的溶剂的化合物，所述溶剂如水、丙酮、乙醇、曱醇、二氯曱烷、2-丙醇等，其通过非共价的分子间作用力结合。本发明化合物在辛烯-6-炔基侧链上的3位和4位具有不对称碳原子。3位的立体构型(stereochemistry)是S，该构型是活性所需的立体构型。同样地，本发明化合物可以是单独的非对映异构体3S,4S或3S,4R,以及这两种非对映异构体的混合物。相应地，本发明化合物不仅可包括立体异构体混合物，也包括单一的立体异构体，其基本上不含其它立体异构体。本文所使用的术语"基本上不含其它立体异构体"是指存在的其他立体异构体少于25%，优选地少于10%,更优选地少于5%,最优选地少于2%,或少于"X"。/。(其中X是介于0至100之间的值，包括端值)。本领域已熟知获得或合成立体异构体的方法，并且这些方法可实际用于合成最终化合物或起始原料或中间体。在本发明其他实施方案中，化合物是分离的(isolated)化合物。本文所使用的术语"至少X。/。对映体富集"是指至少X。/。的化合物是单一的对映体形式，其中x是介于o至ioo之间的值，包括端值。本文所使用的术语"稳定的化合物"是指化合物具有进行生产的充足稳定性且在用于本文的具体目的时在足够的时间内仍保持完整性的化合物(例如配制入治疗性产物、中间体，用于制备治疗性化合物、可分离或可贮藏的中间体化合物，治疗对治疗剂有响应的疾病或病症)。本文所使用的术语"轻同位素同系物"和"轻原子同位素同系物"是指这样的化合物种类该化合物种类与本发明具体化合物的区别在于在该具体化合物中被氘占据的位置上，这些化合物种类具有的是氢。"D"是指氘。"立体异构体，，是指对映体或非对映异构体。"Tert"、"t，，及"t-"是均指"叔"。在本说明书全文中，当提及"每个Y"时，其独立地包括所有的"Y"基团(例如Y"、Ylb、Y^及Y215)，当提及"每个Z"时，其独立地包括所有的"Z，，基团(例如Z"及Z"),当适合时均如此。治疗性化合物本发明提供了式I化合物或其可药用盐其中每个Y独立地选自氢或氘；每个Z独立地选自氢、氘或氟；并且至少一个Y或Z是氘。在一个实施方案中，Y"与Y"相同。在更具体的实施方案中，Y"与Y"同时为氘。在另一实施方案中，Y"与Y化相同。在更具体的实施方案中，Y"与Y"同时为氘。在又一实施方案中，Z"和Z化独立地选自氘或氟。更具体地，Z"与Z"相同。还更具体地，Z"与Z'b同时为氘或同时为氟。在一非常具体的实施方案中，Z^与—Z化同时为氘。在一具体的实施方案中，Yla、Ylb、Y"与Y^同时为氘。在另一实施方案中，该化合物选自下表所列出的任一个化合物表l.式I化合物的实例<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>本发明也提供了式II化合物或其可药用盐:其中每个Y独立地选自氢或氘；每个Z独立地选自氢、氘或氟；并且至少一个Y或Z是氘。在式II化合物一个实施方案中，Y"与Y'b相同。在更具体的实施方案中，Y!a与Y化同时为氘。在式n化合物另一实施方案中，Y^与Y"相同。在更具体的疾施方案中，y2a与y2b同时为氘。在式II化合物又一实施方案中，Z'a和Z'b相同。更具体地，Z"与Z'b同时为氘。在一具体的实施方案中，yla、Ylb、Y"与Y加同时为氘。在另一实施方案中，该化合物选自下表所列出的任一个化合物表2.式n化合物的实例<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>在再一实施方案中，该化合物选自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>具有普通技能的合成化学家可轻易地实施式I和式n化合物的合成。相关的方法和中间体已经披露于，例如GaisHJ等，Chemistry2006,12(21):5610-5617;KrampGJ等，JAmChemSoc2005,127(50):17910-17920;Kim,M等，JOrgChem2006，71(12):4642-4650;vanBergen，M等，JAmChemSoc2002,124(16):4321-4328;UenoK等，ChemPharmBull1984，32(9):3768-3769;Gais,HJ等，TetLett1988，29(15):1773-1774;及美国专利4,400,393和5,200,530中。在此类方法中，可使用氖化试剂，并且可任选其他含同位素的试剂和/或中间体来合成本文所描述的化合物，或使用本领域已知的标准合成方法将同位素原子引入化学结构中。以下方案说明了怎样制备本发明化合物。方案1示例了制备式I化合物的简便方法:方案1:在美国专利5,200,530中记载了伊洛前列素的合成方法，该文献引入本文中作为参考。"PG"表示保护基团，例如甲硅烷基醚保护基，实例包括二甲基苯基曱硅烷基或二曱基氯硅烷(dimethylthexylsilyl)的实例(见例如T.W.Greene和P.G.M.Wuts,ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,第三版,JohnWileyandSons(1999))。方案1展示了怎样调节伊洛前列素的一般合成路线来获得本发明化合物。首先通过使伯醇10与草酰氯和DMSO在二氯曱烷中在-60。C下反应，然后滴加三乙胺并升温至0°C,从而将伯醇10氧化成醛。然后将得到的醛11与二曱基磷酸酯12在四氢呋喃中反应来提供13,其中使用氢化钠作为碱。在-40。C下，使用硼氢化钠和七水合氯化铈将酮还原成醇14。用酮淬灭过量的硼氬化钠得到醇14。分别以酸和四丁基氟化铵处理除去缩酮和曱硅烷基醚保护基而得到15。通过与二氢吡喃反应，以苯^黄酸做催化剂，从而以THP醚的形式保护仲醇,.得到16。将酮与合适取代的三苯基戊酸的内鐵盐在DMSO中的溶液反应，氢化钠作为石威。随后以温和的酸除去THP保护基而得到式I化合物。也可4吏用与在日本专利申请2001309366中记载的相似方式制备合适的氘化伊洛前列素。制备了用于12的起始原料，如下述方案2a所示，该方案记载于Schulte,KE等，ChemBer195487p.964-970中。在下述方案2b中记载了中间体12的制备。方案2a:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>根据方茉3可合成式II化合物'<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>其他合成本文通式(例如式I或II)化合物的方法可方便地通过调节本文所引用的参考文献而获得。对这些方法的变换及优化都在本领域普通技术人员的技术范围之内。以上所示的具体的^^线和化合物并不意图限制本发明。本文方案中的化学结构描述了这样的变量，它们与本文通式化合物中相应位置上的化学基团(部分、原子等)的定义相当，不论其变量名称(即Yla、Ylb、Y2a、Y2b、力或Z'b)的表述是否相同。某化合物结构的化学基团在合成另一化学结构中的稳定性在本领域普通技术人员认知范围之内。合成式I和II化合物及其合成前体(包括那些在本文方案中未指明的化合物或前体)的其他方法也在本领域普通技术人员的认知范围之内。本领域包括，例如在R.Larock，ComprehensiveOrganicTransformations,VCHPublishers(1989);T.W.GreeneandP.G,M.Wuts,ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,第三版，John"WileyandSons(1999》L.FieserandM.Fieser,FieserandFieser'sReagentsforOrganicSynthesis,JohnWileyandSons(1994);及L.Paquette,ed.，EncyclopediaofReagentsforOrganicSynthesis,JohnWileyandSons(1995)及其后续版本中说明的方法及策略。本发明所想到的取代基和变量的组合仅指形成稳定化合物的那些取代基和变量的组合。本发明还提供了本发明化合物与其轻同位素同系物的混合物。例如当在指定的位置未能有效地结合同位素、有意或无意地将氘交换成质子(例如将主体溶剂(bulksolvent)交换成连接杂原子的氘)、或有意与纯化合物混合，都会导致这些混合物的形成。在一实施方案中，这些混合物包含至少约50%的重原子同位素化合物(即少于约50%的轻同位素同系物)。更优选是包含至少80%的重原子同位素化合物的混合物。最优选的是包含至少90%的重原子同位素化合物的混合物。在一方面，混合物包含至少约X。/。的重原子同位素化合物(即少于约(100-X)。/。的轻同位素同系物)，其中X是介于0至100之间的值，包含端值。組合物本发明也提供包含有效量的式I或II化合物或其可药用盐以及可药用载体的组合物。在一实施方案中，该组合物不含热原。在另一实施方案中，将本发明组合物制成药用制剂("药用组合物")，其中载体是可药用载体。载体在与制剂中其他成分的相容性方面必须是"可接受的"，就可药用载体而言，是指其典型药用剂量对受者无毒性作用。可用于本发明药用组合物中的可药用载体、佐剂和赋形剂(vehicles)包括但不局限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(例如人血清清蛋白)、緩冲物质(例如磷酸盐)、甘氨酸、'山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯的混合物、水、盐或电解质(例如硫酸鱼精蛋白)、磷酸一氢钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶态二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧曱基纤维素钠、聚丙烯酸酯类、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。若需要时，可通过本领域公知的方法增加药用组合物中的本发明化合物的溶解性和生物利用度。其中一种方法包括在制剂中使用脂质赋形剂。参见"OralLipid-BasedFormulations:EnhancingtheBioavailabilityofPoorlyWater-SolubleDrugs(DrugsandthePharmaceuticalSciences),"DavidJ.Hauss，ed.InformaHealthcare,2007;及"RoleofLipidExcipientsinModifyingOralandParenteralDrugDelivery:BasicPrinciplesandBiologicalExamples,"KishorM.Wasan,ed.Wiley-Interscience,2006。另一种已知的增加生物利用度的方法是使用无定形形式的本发明化合物，其任选与泊洛沙姆(poloxamer)(如LUTROLtm和PLURONICtm(BASFCorporation))或氧化乙烯和氧化丙烯的嵌段共聚物一起配制。参见美国专利7,014,866及美国专利公开20060094744和20060079502。本发明药用组合物包括适于口服给药、直肠给药、经鼻给药、局部给药(包括含服和舌下给药)、阴道给药或肠胃外给药(包括皮下给药、肌肉内给药、静脉给药及皮内给药)的组合物。在某些实施方案中，本文ii式化合物经皮给药(例如使用经皮贴片或离子电渗疗法技术(iontophoretictechnology))。其他能够便宜地以单位剂量的形式存在的制剂，如片剂和緩释胶嚢及脂质体，可通过药学领域内已知的任何方法制备。参见例如Remington'sPharmaceuticalSciences,MackPublishing(Company,Philadelphia,PA(17thed.1985)。这些制备方法包括将待给药的分子与各种成分(如由一或多种配合剂构成的载体)结合的步骤。一般而言，该組合物可通过将活性成分分别与液体载体、脂质体或精细分开(divided)的固体载体，或者它们一起，均匀紧密地结合而制备，然后根据需要成型产物。在某些优选的实施方案中，该化合物经口服给药。适于口服给药的本发明组合物可以是离散单位(discreteunit),例如含有预定量的活性成分的胶嚢、嚢剂或片剂，粉剂或颗粒剂，在水性液体或非水性液体中的溶液或混悬剂，水包油液体吼剂或油包水液体乳剂，或包封于脂质体中，以及大丸,射(bolus)專。软凝胶胶嚢(softgelatincapsules)可用于包含所述混悬剂，这样可有利于增加化合物的吸收速率。就口服用的片剂而言，其常用载体包括乳糖和玉米淀粉。通常也会加入如硬脂酸镁的润滑剂。对于胶嚢形式的口服给药，有利的稀释剂包括乳糖和干燥的玉米淀粉。当经口服给药水性混悬剂时，活性成分与乳化剂和悬浮剂结合。若需要时，可加入某些润湿剂和/或调味剂和/或着色剂。适于口服给药的组合物包括在调味基体中含有成分的锭剂和在惰性基体中含有活性成分的软锭剂(pastilles),所述调味基体通常为蔗糖和阿拉伯胶或西黄蓍胶(tragacanth);所述惰性基体例如明胶和甘油、或蔗糖和阿拉伯胶。适于肠胃外给药的组合物包括水性和非水性无菌注射液及水性和非水性无菌混悬液，所述注射液可包含抗氧化剂、緩冲液、抑菌剂和使制剂与目标受者的血液等渗的溶质，所述混悬液可包含助悬剂和增稠剂。制剂可以装于单位剂量或多剂量的容器(例如密封的安瓿瓶和小瓶)中，并可冻干(lyophilized)保存，仅需在使用之前及时加入无菌液体载体(例如注射用水)。即时(extemporaneous)注射液和混悬剂可由无菌粉末、颗粒和片剂制备。这些注射溶液可以是如无菌可注射水性或油状混悬剂。此混悬剂可根据本领域已知的技术使用合适的分散剂或润湿剂(例如吐温80)及助悬剂制备。无菌可注射制剂也可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂(如1，3-丁二醇)中的无菌可注射溶液或混悬剂。可以使用的可接受赋形剂和溶剂包括甘露醇、水、林格溶液和等渗氯化钠溶液。另外无菌的不挥发性油也常用作溶剂或悬浮介质。为此，可使用任何温和的不挥发性油，包括合成的甘油单酯和甘油二酯。脂肪酸(如油酸)及其甘油酯衍生物可用于制备可注射物，天然可药用油(如橄榄油或蓖麻油，尤其是它们的聚氧乙烯化形式)也可用于制备可注射物。这些油状溶液或混悬剂也可含有长链醇稀释剂或分散剂。本发明药用组合物可通过栓剂形式直肠给药。这些组合物可通过混合本发明化合物与合适的非刺激性的赋形剂而制备，所述赋形剂在室温下是固体，但在直肠温度下是液体，因此其在直肠中融化以释放活性组分。这些物质包括但不局限于可可脂、蜂蜡和聚乙二醇。本发明药用组合物可通过鼻用气雾剂或吸入剂给药。所述组合物可才艮据，剂学领域已知的技、术制备，并且可使用千醇或其他合适的防腐剂、增加生物利用度的吸收促进剂、碳氟化合物和/或其他本领域已知的增溶剂或分散剂制成盐溶液。参见例如RabinowitzJD和ZaffaroniAC发明的美国专利6,803,031,已專争ih》会AlexzaMolecularDeliveryCorporation。当所需治疗涉及的区域或器官可通过局部给药轻易到达时，局部施用本发明药用组合物尤为有用。为了局部给药至皮肤，将药用组合物配制成含有悬浮于或溶解于载体中的活性成分的合适软膏剂。本发明化合物局部给药的载体包括j旦不限于矿物油、液体石蜡(liquidpetroleum)、白凡士林(whitepetroleum)、丙二醇、聚氧化乙烯聚氧化丙烯化合物、乳化蜡和水。供选地，可将药用组合物配制成含有悬浮于或溶解于载体中的活性物质的合适乳剂或乳膏。合适的载体包括但不局限于矿物油、失水山梨醇酑单硬脂酸酯、聚山梨酯60(polysorbate60)、十六烷基酯蜡、十六/十八烷基醇、2-辛基十二烷醇、千醇和水。本发明药用组合物也可通过直肠栓剂或合适的灌肠剂局部给药至下肠道。本发明也包括局部经皮贴片给药和离子电渗法给药(iontophoreticadministration)。优选的剂型包括吸入式微粒剂和口服剂，所述微粒剂例如使用了I-nebAADSystem或ProdoseAADSystem的伊洛前列素制剂及在PCT专利公开WO2006014930中记载的伊洛前列素制剂，所述口服剂例如在美国专利/>开US20050101673中记载的制剂。本发明治疗方法(subjecttherapeutics)的施用可以是局部的，从而纟合药至关注的位置。可使用各种技术在关注的位置提供本发明组合物(subjectcompositions),例如注射、使用导管、套针、发射物(projectiles)、普卢兰尼克凝胶(pluronicgel)、支架(stents)、药物緩释聚合物或其他可进入内部的装置。因此，根据又一实施方案，可将本发明化合物掺入用于涂布植入式医疗装置的组合物中，所述医疗装置例如假体、人工瓣膜、血管移植物、支架或导管。本领域中已知合适的涂层及经涂布的植入式装置的一般制备方法，实例见美国专利6,099,562、5,886,026及5,304,121。所述涂层通常是生物相容性聚合物材料，如水凝胶聚合物、聚曱基二硅氧烷、聚己内酯、聚乙二醇、聚乳酸、乙烯醋酸乙烯酯及其混合物。视情况，还可在涂层上覆盖合适的外涂层(topcoat)以赋予组合物控释特性，所述外涂层有氟硅氧烷(fluof加ilicone)、多糖、聚乙二醇、磷脂或其组合。如本文所使用蝽那些术语一样，侵入式装置的涂层也包括在可药用载体、佐剂或赋形剂的定义之内。根据另一实施方案，本发明提供了涂布植入式医疗装置的方法，其包括使所述装置与上述涂层组合物接触的步骤。对本领域技术人员而言显而易见的是，在将装置植入哺乳动物之前，先将其涂布。根据另一实施方案，本发明提供了浸渍植入式药物释放装置的方法，其包括使所述药物释放装置与本发明化合物或组合物接触的步骤。植入式药物释放装置包括但不局限于生物可降解的聚合物胶嚢或颗粒、不可降解的可扩散聚合物胶嚢及生物可降解的聚合物薄膜。合物的组合物的植入式医疗装置，这样所述化合物具有治疗活性。根据另一实施方案，本发明提供了浸渍或含有本发明化合物或包含本发明化合物的组合物的植入式药物释放装置，这样所述化合物从所述装置中释放并具有治疗活性。当器官或组织由于从患者中移除而可达到时，可将所述器官或組织浸泡于含有本发明组合物的介质中，可将本发明组合物涂布于器官上，或以其他简便的方法施用本发明组合物。在另一实施方案中，本发明组合物还可包含第二治疗剂。该第二治疗剂包括任何已知的化合物或治疗剂，其在与全身性或肺动脉血管床血管扩张剂或血小板聚集抑制剂一起给药时具有或被证明具有优越的性质。所述试剂包括那些可与伊洛前列素组合使用的试剂，其详细记载于PCT专利/>开W0198,1867、WO2005030187、WO2006014930、WO2005009446、WO2004019952、WO2000002450、WO1992013537、WO1997006806和WO1998037894及美国专利乂>开US20020128314、US20030139372、US20030162824、US20030216474、US20040033223、US20040052760、US20040058940、US20040266880、US20050009847、US20050070596、US20050080140、US20050101673、US20050106151、US20050119330、US20050239719、US20050239842、US20050239867、US20060183684、US20060160213中。在一实施方案中，第二治疗剂可用于治疗或预防以下疾病或病症肺动脉压过高、系统性硬化症继发的雷诺现象(Raynaud，sPhenomenon)、对比剂肾病(contrastmediatedneplirop础y)或肺癌。一更具体地，与本发明化合物一起配制的所述第二治疗剂是一种用于治.疗肺动脉压过高的试剂。在一实施方案中，第二治疗剂选自5型磷酸二酯酶抑制剂或内皮素-1拮抗剂。在另一实施方案中，5型磷酸二酯酶抑制剂是昔多芬(sildenafil)。在又一实施方案中，内皮素-1拮抗剂是波生坦(bosentan)。在另一实施方案中，本发明提供了独立剂型的本发明化合物和第二治疗剂，其中所述剂型相互结合。本文所使用的术语"相互结合"是指将独立的剂型包装在一起或相互连接，很明显如此做意在使独立的剂型一起出售或给药(在其中一种给药的24小时之内，连续或同时地给药另一种)。在本发明药用组合物中，本发明化合物以有效量存在。本文所使用的术语"有效量，，是指当以合适的给药方案给药时，给药量足以降低或缓解所治疗疾病的严重性、持续时间或进展，防止所治疗疾病的恶化，促使所治疗疾病复原，或增强或提高另一治疗的预防或治疗效果。动物和人用的剂量的内在关系(基于毫克每平方米体表面积)记载于Freireich等，(1966)CancerChemotherRep50:219中。体表面积可通过患者的身高和体重估算。参见例如ScientificTables,GeigyPharmaceuticals,Ardsley,N.Y.,1970,537。本发明化合物有效的单位剂量为约1毫克/千克体重至约500毫克/千克体重，更优选地为约1毫克/千克体重至约250毫克/千克，更优选地为约1毫克/千克体重至约75毫克/千克。单位剂量可每天给药1至9次。如本领域4支术人员所认识的一样，有效剂量可不同，其取决于所治疗的疾病、疾病的严重程度、给药途径、性别、年龄、患者一般的健康状况、赋形剂使用、与其他治疗方案(例如使用其他试剂)共同使用的可能性及主治医师的判断。对于含有第二治疗剂的药用组合物而言，第二治疗剂的有效量为在仅用该试剂的单一治疗方案中通常所用剂量的约20%至100%。优选地，有效量为正常的单一疗法剂量的约70%至100%。本领域已公知这些第二治疗剂的正常单一疗法剂量。参见例如Wells等，eds.,PharmacotherapyHandbook,第二版，AppletonandLange,Stamford,Conn.(2000);PDRPharmacopoeia,TarasconPocketPharmacopoeia2000,DeluxeEdition,TarasconPublishing,LomaLinda,Calif.(2000),将其所有内容引入本文作为参考。上述引用的』些第二治疗剂有望与本发明化合物协同作用。当发生协同-作用时，这能够降低在单一疗法中所需的第二治疗剂和/或本发明化合物的有效剂量。如此可减少第二治疗剂或本发明化合物的毒性副反应、协同地提高功效、简化给药或使用和/或降低化合物的制备或制剂的总费用。治疗方法根据另一实施方案，本发明提供了治疗患有或易患有能得到伊洛前列素有利治疗的疾病的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者给药有效量的本发明化合物或组合物的步骤。这些病症和疾病在本领域内是众所周知的，包括栓塞相关的疾病及其他皮肤疾病、肺动脉压过高、纤维化相关的疾病如硬皮病、脑型症、静脉血流弱(poorvenousflow)、骨病(例如骨髄水肿、骨坏死及骨关节炎)、合胞体病毒感染、瘙痒症或遗传性过^:症状、炎性疾病、中枢神经系统疾病，以及在US20050080140、US20030139372、US20030216474、US20040266880、US20050009847、US20050101673、WO1988001867、WO1992013537、WO2000002450、WO2004019952和WO2006014930中公开的其他疾病。在优选的实施方案中，本发明方法用于治疗患有或易患选自以下疾病或病症的受试者肺动脉压过高、系统性硬化症继发的雷诺现象、对比剂肾病及肺癌。本文说明的方法包括受试者被确认需要特定治疗的那些方法。对受试者是否需要所述治疗的认定可以是受试者或专业医护人员的判断，可以是主观的(例如个人意愿)或客观的(例如通过测试或诊断方法测量)。在另一实施方案中，本发明提供了调节细胞中前列环素受体活性的方法，其包括使所述细胞与本文任一通式的一个或多个化合物接触。在另一实施方案中，上述方法还包括向患者共同给药一种或多种第二治疗剂的步骤。所述第二治疗剂可选自已知与伊洛前列素共同给药的任何第二合的第二治疗剂。具体地，本发明的联合治疗包括与15-羟前列腺素脱氢酶抑制剂联合使用治疗勃起机能障碍；与甜菜碱联合使用作为抗血栓形成药；与5型磷酸二酯酶抑制剂联合使用治疗咽峡炎(angina)、高血压、肺高压、充血性(congesti.ve)心力衰竭、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、肺心病、右心室衰竭、—动脉粥样硬化、'心血管开-放减少的渗透症状、外周血管疾病'、脑^^:净.(cerebralapoplexy)、支气管炎、变应性哮喘、慢性哞喘(chronicasthma)、变应性鼻炎、青光眼、肠易激综合征、肿瘤、肾衰竭、肝硬化和治疗男性和女性性疾病；与COX-l或COX-2抑制剂联合使用治疗炎症相关的心血管疾病；与15-羟前列腺素脱氢酶抑制剂联合使用增加或保持头发厚度；与大麻二酚衍生物联合使用治疗多发性硬化；与al-抗胰蛋白酶或丝氨酸蛋白酶抑制剂联合使用治疗细菌感染；与HMG-CoA还原酶抑制剂联合使用治疗肺增生性血管障碍；与沙利度胺(thalidomide)或4型磷酸二酯酶抑制剂联合使用治疗肺动脉压过高；与降血压药联合使用治疗高血压、糖尿病并发症与代谢综合征；或，与内皮素受体拮抗剂、磷酸二酯酶抑制剂或钙离子通道阻断剂联合使用治疗肺动脉压过高。用于本发明的其他组合疗法可参见记载于US20020128314、US20040033223、US20040058940、US20030162824、US20040052760、US20050070596、US20050106151、US20050119330、US20050239719、US20050239842、US20050239867、US20060160213、US20060183684、WO1997006806、WO1998037894、WO2005009446和WO2005030187中的使用了伊洛前列素的那些組合疗法。在具体的实施方案中，本发明提供了治疗患有肺动脉压过高的患者的方法，其包括向患者联合给药式i或n化合物与第二治疗剂的步骤，其中所述第二治疗剂选自5型磷酸二酯酶抑制剂或内皮素-l拮抗剂。在更具体的实施方案中，所述5型磷酸二酯酶抑制剂是昔多芬。在另一更具体的实施方案中，所述内皮素-1拮抗剂是波生坦。本文所使用的术语"联合给药，，是指所述第二治疗剂能以单一剂量的形式(如上述的含本发明化合物和第二治疗剂的本发明组合物)或以分离的多剂量形式与本发明化合物一起给药。此外，其他试剂可在本发明化合物给药之前或之后或者连续地给药。以此联合疗法进行治疗时，本发明化合物与第二治疗剂都通过常规的方法给药。向受试者给药包含本发明化合物与第二治疗剂的本发明组合物并不排除在治疗过程中的其他时间向所述受试者分开给药相同的治疗剂、任何其他的第二治疗剂或任何本发明化合物。本领域已公知这些第二治疗剂的有效量，剂量的指导也可在本文引用的专利和公开专利申请案及Wells等，eds.,PharmacotherapyHandbook,2ndEdition,pletonandLange，Stamford,Conn.(2000);PDRPharmacp6eia,TarascoinPocketPharmacopoeia2000，DeluxeEdition,TarasconPublishing,LomaLinda，Calif.(2000)和其他医学文章中找到。然而，确定第二治疗剂的最佳有效量范围也在本领域技术人员的认知范围之内。在本发明一实施方案中，当向患者给药第二治疗剂，本发明化合物的有效量小于在不给予第二治疗剂时的本发明化合物有效量。在另一实施方案中，第二治疗剂的有效量小于在不给予本发明化合物时的第二治疗剂有效量。依此方法，可将与任一试剂的高剂量相关的不利副作用减至最低。对本领域技术人员而言，其他潜在的优点(包括改进配药方案和/或降低药物成本等)也是显而易见的。一种或多种上述第二治疗剂在制备用于治疗或预防受试者中上述疾病、病况或病症的药剂(作为单一组合物或作为分离的剂型)中的用途。本发明另一方面是本文通式化合物在受试者中治疗或预防本文所列疾病、病况或病症中的用途。诊断方法及试剂盒本发明的化合物和组合物也可作为试剂用于确定溶液或生物样品(如血浆)中伊洛前列素的浓度、检查伊洛前列素的代谢及其他分析研究。根据一实施方案，本发明提供了确定溶液或生物样品中伊洛前列素浓度的方法，其包括如下步骤a)将已知浓度的式I或II化合物加入溶液或生物样品；b)将溶液或生物样品装入测量装置，该装置可区別伊洛前列素与式I或II化合物；c)校正测量装置，关联式I或II化合物的检测量与加入生物样品或溶液中的式I或II化合物的已知浓度；及d)以所述校正的测量装置测定生物样品中伊洛前列素的量；及e)使用检测量与式I或II化合物的浓度之间的关系式确定样品溶液中伊洛前列素的浓度。能区別伊洛前列素与相应的式I或II化合物的测量装置包括能区别仅在同位素丰度上有差异的两种化合物的任何装置。示例性的测量装置包括质谨仪、核》兹共振仪或红外光谱4义-。在另一实施方案中，本发明提供了评估式I或II化合物代谢稳定性的方法，其包括下列步骤使式I或II化合物与引起代谢的酶源接触一段时间，并在这一段时间后比较式I或II化合物的量与式I或II化合物代谢物的量。在相关的实施方案中，本发明提供了在向患者给药式I或II后评估患者中式i或n化合物代谢稳定性的方法。此方法包括下列步骤在向患者给药式I或II化合物一段时间后，获取患者的血清、尿液或粪便样品；比较血浆、尿液或粪便样品中式I或II化合物的量与式I或II化合物代谢物的量。本发明也提供了用于治疗肺动脉压过高、系统性硬化症继发的雷诺现象、对比剂肾病及肺癌的试剂盒。这些试剂盒包括a)药物组合物，其包含式I或II化合物或其盐、或者其前药或前药的盐、或者其水合物、或溶剂化物、或多晶型物，其中所述药物组合物装于容器中；及b)使用药物组合物治疗所述疾病的方法说明。所述容器是可装载所述药用组合物的任何管或其他密封或可密封的装置。其实例包括瓶、安瓿、分隔的或多腔的瓶套(holdersbottles)(其中每个分区(division)或腔包含单剂量的所述组合物)、分隔的铝箔包装(每一分区包含单剂量的所述组合物)、或分配器(其分分配单剂量的所述组合物)。容器可以是本领域已知的任何常规的形状和形式，其由可药用材料制备，例如纸或纸板盒、玻璃或塑料瓶或广口瓶、反复密封包(例如装着片剂的补充料置于不同容器中)、或具有独立(individual)剂量的泡罩包装(blisterpack)(根据疗程从包装中挤出)。使用的容器可取决于所用的剂型，例如常规的纸板盒一般不会用于装载液体混悬剂。在单个包装中可同时使用多于一种种容器来销售单剂型，这样做也是可行的。例如，可将片剂装于瓶中，然后再装于盒中。优选地，所述容器是泡罩包装。试剂盒还可另外包含一种记忆辅助工具，其包含医生、药师或患者的信息和/或指导。这些记忆辅助工具包括印在每个含有药剂的腔或分区上的数字，这些数字相应于治疗方案的日期，由此标明片剂或胶嚢应于此日给药；或印在每个腔或分区上的星期的日期；或者是卡片，上面印有相同的信息。对于单剂量分配器，记忆辅助工具还包括可表明每日已给药剂量的机械计数器，以及与液晶可视和/或可听提醒信号偶联的电动微芯片存储器，该存储器例如可读取上次给药的日期和/或提醒下次给药的日期。能用于此类试剂盒的其他记忆辅助工具是，印于卡片上的日历及:其他浅显易懂的方法。本发明试剂盒也可包括给药或测量单位剂量的药物组合物的装置。若所述组合物是吸入式组合物，所述装置包括吸入器；若所述组合物是注射用组合物，则所述装置包括注射器和针头；若所述组合物是口服液体组合物，则所述装置包括注射器、药勺、泵或者具有或不具有体积标记的装置；或者适于本发明组合物剂型的任何其他测量或给药装置。在某个实施方案中，本发明试剂盒在分开的容器装置中可包含含有第二治疗剂的药物组合物，例如上述与本发明化合物联合给药的那些第二治疗剂。合成实施例以下所示的合成实施例提供了制备本发明化合的重要中间体。实施例1.(3a'S，4'R,5'R，6a'R)-5'-(叔丁基二曱基曱硅氧基)-5,5-二曱基六氢-l'H-螺-[[1.3]二氧杂环己烷-2,2'-并环戊二烯]-4'-醛(carbaldehyde),化合物11的合成。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>化合物11步骤1.(2,2-二曱基三亚曱基二氧)-顺式-二环[3.3.0]辛-3，7-二酮，化合物4的合成。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>化合物4向顺式-二环[3.3.0]辛-3,7-二酮3(25克，181.06mmol)的.曱苯(300mL)溶液中加入2,2-二曱基-l，-丙二醇U8.9克，181.06mmol)和对曱苯磺酸单水合物(催化量)，将溶液在室温下搅拌过夜。蒸干反应混合物并将得到的粗产物以柱色谱法分离得到单保护的酮4(17.8克，44%)。HNMR(300MHz,CDC13)5:0.94(s,6H),1.80(dd,2H)，2.13-2.70(m,6H),2.80隱2.90(m，2H),3.52(s,2H)，3.65(s,2H)。MS(ESI)m/z:225。步骤2.(2,2-二甲基三亚乙基二氧)-顺式-二环[3.3.0]辛-3-酮-2-羧酸曱酉旨，化合物5的合成。向氬化钠(2.33克，53.5mmo1)的石友酸二曱酯(80mL)混悬液中加入溶于20mL碳酸二甲酯中的单保护的酮4(10克，44.6mmol),并将所得溶液在50。C下搅拌过夜。将反应混合物冷却后，加入甲醇淬灭过量氢化钠，并以乙酸中和混合物。以二氯曱烷(3x50mL)萃取，并在真空下浓缩得到粗产物。将粗产物以柱色i普法提纯得到产物5(7.0克',56%)。&NMR(300MHz,CDC13)S:0.93(s,6H)，1.50-1,90(m,3H),2.04-2.10(m，1H)，2.20-2.60(m，4H)，3.30(d,1'H)，3.44-3.59(m,4H),3.77(s，3H),10.35(bs,1H)。MS(ESI)m/z:283[M+H]+。步骤3.7,7-(2,2-二曱基三亚曱基二氧)-3-a-羟基-顺式-二环[3.3.0]辛烷-2-卩-羧酸曱酯，化合物6的合成。C07CH化合物6在-40。C下向甲酯5(7克，24.8mmol)的曱醇(80mL)溶液中加入NaBH4(1.87克，49.6mmol)，并将溶液在相同的温度下搅拌2小时。向反应混合物中加入丙酮(2mL)，溶液再以饱和草酸(5mL)中和。蒸干溶液，残余物以二氯曱烷萃取(2x25mL)。有机相以硫酸钠干燥后蒸干得到产物6(5克,71%)。'HNMR(300MHz,CDC13)S:0.96(s，6H),1.52-1.72(m，1H)，1.90-2.04(m,1H),2.09-2.30(m，4H),2.43-2.90(m，3H),3.40-3.56(m,4H),3.72(s,3H),4.20-4.30(m，1H)。MS(ESI)m/z:285[M+H]+。步骤4.7,7-(2,2-二曱基三亚甲基二氧)-3-a-叔丁基二曱基曱硅氧基-顺式-二环[3.3.0]辛烷-2-f3-羧酸曱酯，化合物7的合成。H3C、,CH3向羟基化合物6(3克，10.6mmol)的DMF(40mL)溶液中加入咪唑".72克,25.32mmol)和叔丁基二甲基氯硅烷(1.91克,12.66mmol)，将混合物搅拌过夜。向反应混合物中加入水(10mL)，并以乙醚萃取(2x25mL)。有机相以硫酸钠千燥，蒸干，并以柱色谱法精制得到产物7(3克，71%)。'H雨R(300顧2,CDC13)5:0.02(s,3H),0.05(s，3H)，0.85(s，9H),OTBS化合物70.93(s,6H),1.60-1.74(m,1H),1.90-2.04(m,2H)，2.09-2.18(m,3H),2.44-2.50(m,1H),2.56-2.62(m，2H),3,40-3.60(m,4H),3.76(s,3H),4.20-4.30(m，1H)。MS(ESI)m/z:399[M+H]+。步骤5.7,7-(2,2-二曱基三亚甲基二氧)-3-a-叔丁基二曱基曱硅氧基-顺式-二环[3.3.0]辛烷-2-(3-羧酸，化合物8的合成。向酯7(3克，7.52mmo1)的溶液中加入甲醇(40mL)和5%的NaOH(8.2mL)，并将溶液回流1.5小时。将该溶液在真空下浓缩，以水(20mL)稀释，并以乙醚(25mL)萃取。将混合物置于冰浴中，以2N的石克酸酸化(pH-3)，然后以乙醚萃取(2x25mL)。乙醚相以硫酸钠干燥，蒸干后得到酸8(2.0克，69%)。'HNMR(300MHz,CDC13)5:0.02(s,3H),(X05(s，3H),0.81(s,9H),0.95(s,6H),1.60-1.76(m,1H)，1.90-2.03(m,2H),2.09-2.18(m,3H),2.44-2.50。(m,IH),2.56-2,62(m,2H),3.40-3.60(m,4H),4.20-4,30(m,1H)。MS(ESI)m/z:385[M+H]+。步骤6.7,7-(2，2-二甲基三亚曱基二氧)-3-a-叔丁基二曱基曱硅氧基-顺式-二环[3.3.0]辛烷-2-j3-羧酸D-(-)-a-苯基甘氨醇酰胺(glycinolamide),化合物9b的合成。OTBS化合物8<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>向酸8(4克，10.4mmo1)的丙酮(30mL)溶液中加入三乙胺(1.3mL，9.32mmo1)，并在0。C下搅拌5分钟。将溶于丙酮(15mL)中的氯曱酸异丁基酉旨(1.2mL，8.73mmo1)加入反应混合物，并将所得溶液在相同温度下搅拌20分钟。将溶于丙酮(15mL)和乙腈(15mL)中的D-(-)-a-笨基甘氨醇(glycinol)(1.17克，8.56mmol)滴加入反应混合物，并将所得溶液在室温下搅拌24小时。浓缩反应混合物，将残余物溶于二氯曱烷(25mL)并以盐水洗涤(2xl0mL)。有^L相以碌u酸钠干燥并蒸干。以柱色谱法分离非对映异构体(环己烷乙酸乙酯=3:1)得到所需的非对映异构体9b(1.82克，34%)。!HNMR(300MHz,CDC13)S:0.06(s,6H)，0.83(s，9H)，0.95(s,6H),1.42-1.90(m,1H),1.90-2.03(m，2H),2.09-2.18(m，3H)，2.44-2.50(m,1H),2.56匿2.62(m,2H),3.40-3.60(m,4H)，3.88-3.96(m，2H)，4.14-4.23(m，1H)，5.05-5.17(m，1H)，6.50(d，1H),7.26-7.34(m,5H)。MS(ESI)m/z:504[M+H]+。[a]D=-27.39(0.54,氯仿)。实施例2.43-曱基-2-氧庚-5-炔基磷酸二甲酯，化合物12(Zla=Zlb=H)的合成<formula>formulaseeoriginaldocumentpage33</formula>步骤1.2-曱基己-4-炔酸，化合物12c的合成。化合物12c在-50。C下，向二异丙基胺(32.75mL,233.09mmol)的四氢呋喃(100mL)溶液中加入正丁基锂的己烷溶液(1.6M,94mL)，并搅拌5分钟。将反应混合物升温至-20。C并滴加HMPA(15.7mL)和丙酸(6.75mL，90.23mmol)的混合物处理该混合物。将该反应混合物在室温下搅拌30分钟。然后将混合物冷却至0。C后，加入l-溴-2丁炔12b(10克，75.19mmol)的四氬呋喃(20mL)溶液，并在室温下搅拌2小时。将反应混合物倾入10%的盐酸(20mL)中，并以乙醚萃取(3x25mL)。有才几相以石危酸钠干燥，蒸干得到产物12c(12克)，将粗产物直接用于下一步。'HNMR(300MHz,CDC13)5:1.15(d，3H),1.77(t,3H),2.35(m,2H),2.66(m,1H)。步骤2.2-曱基己-4-炔酸曱酯，化合物12d的合成。向粗产物酸12e(12克，95.1mmol)的丙酮(lOOmL)溶液中加入石典曱烷(8.9mL,142.68mmol)和碳酸钾(26.3克，190.24mmol),并将混合物在室温下搅拌过夜。蒸干反应混合物，将所得物溶于水(25mL)。所得溶液以乙醚(3x25mL)萃取，有机相以石克酸钠干燥并蒸干。所得^L产物以真空蒸馏得到纯产物12d(4.4克，33%)。'HNMR(300MHz，CDCl3)5:1.25(d,3H),1.77(t,3H),2.34(m,2H),2.66(m,1H),3.69(s,3H)。步骤3.3-甲基-2-氧代庚-5-炔基磷酸二曱酯，化合物12的合成。化合物12d化合物12向曱基磷酸二甲酯(4.5mL,42.80mmol)的四氢呋喃(20mL)溶4中滴加正丁基锂的己婉溶液(1.6M,24mL)并在-78。C下搅-拌30分钟。将溶于四氢吹喃(10mL)中的酯12d(3.0克，21.40mmol)滴加入反应混合物中，并在-78。C下搅拌3小时，在室温下搅拌l小时。以醋酸(lmL)淬灭反应混合物，加入饱和盐水(30mL)，以乙醚萃取(3x10mL)。乙醚层以硫酸钠干燥，蒸干得到粗产物。将粗产物以真空蒸馏得到纯产物12(2克，40%)。&NMR(300MHz,CDC13)5:1.18(d,3H),1.76(t,3H)，2.36(m,2H),2.64.(m，1H)，3,26(d，2H),3.77(s,3H),3.81(s，3H)。实施例3.4,4-d2-3-曱基-2-氧代庚-5-炔基磷酸二甲酉旨，化合物12(Zla=Zlb=D)的合成在0。C下，向氘化铝锂(1.28克，30.57mmol)的乙醚(60mL)混悬液中滴加2-丁酸曱酯(5克，51mmo1)的乙醚(60mL)溶液。将反应混合物在室溫下搅拌l小时后，以饱和氯化铵溶液(lmL)淬灭。将乙醚层过滤，并以硫酸钠干燥，蒸干。将残余物真空蒸馏得到醇12a(2克，55%)。'HNMR(300丽z,CDC13)5:1.85(s，3H)。步骤2.1,l-d2-l-溴-丁-2-炔的合成。化合物12步骤1.U匿d2-丁-2-炔-l画醇,化合物12a的合成。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage35</formula>化合物12a<formula>formulaseeoriginaldocumentpage35</formula>化合物12b在0。C下，向1，l-d2-丁-2-炔-l-醇12a(1.2克，16.64mmol)的乙醚(10mL)溶液中加入吡啶(4mL,49.92mmol)和三溴化磷(0.89mL，11.15-mmol)后，将溶液加热回流2小时。将反应混合物冷却至0°C，然后以饱和溴化钠溶液(10mL)处理，以乙醚萃取(2xl0mL)。乙醚层以碌^酸钠干燥并蒸干得到产物12b(0.6克，30%)。HNMR(400MHz):1.88(s,3H)。步骤3.3,3-d2-2-甲基己-4-炔酸，化合物12c的合成。DD义H3CCH3化合物12c在-5(TC下，向二异丙基胺(1.93mL，13.77mmol)的四氩呋喃(10mL)溶液中加入正丁基锂的己烷溶液(1.2M,7.4mL),并搅拌所得溶液5分钟。将反应混合物升温至-20。C,并滴加HMPA(0.77mL)和丙酸(0.39mL，5.32mmol)处理该混合物。将该反应所得物在室温下搅拌30分钟。然后将混合物冷却至0。C后，加入1,l-d2-l-溴-丁-2-炔12b(0.60克，4.44譲o1),并在室温下搅拌2小时。将反应混合物倾入10%的盐酸(5mL)中，并以乙醚萃取(2xl0mL)。有机相以硫酸钠干燥，蒸干得到产物12c(l.O克)，将粗产物直接用于下一步。!HNMR(300MHz,CDC13)S:1.15(d，3H),1.83(s，3H),2.64(q,1H)。步骤4.3,3-d-2-甲基己-4-炔甲酯，化合物12d的合成。化合物12d向粗产物酸12c(l.O克，11.53mmol)的丙酮(15mL)溶液中加入石典曱烷(1.07mL,17.30mmol)和碳酸钾(3.18克，23.06mmol),并将混合物在室温下搅拌过夜。蒸干反应混合物，将所得物溶于水U0mL)。所得溶液以乙醚萃取(2xl0mL)，有机相以石克酸钠干燥并蒸干。残余物以真空蒸馏得到粗产物12d(0.6克)。该粗产物直接用于下一步。！HNMR(300MHz:CDC13)S:1.15(d，3H)，1.84(s，3H),2.65(q,IH)，3.69(sV3H)。步骤5.4,4-d2-3-甲基-2-氧庚-5-炔基磷酸二曱酯，化合物12的合成。向曱基石岸酸二甲酯(0.66mL,8.56mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中滴加正丁基锂的己烷溶液(1.2M，6.42mL)并在-78。C下搅拌30分钟。将溶于四氬吹喃(5mL)中的酯12d(0.60克，4.28mmol)滴加入反应混合物中，并在-78。C下搅拌3小时，在室温下搅拌过夜。以醋酸(0.5mL)淬灭反应混合物后加入饱和盐水(10mL),以乙醚萃取(2x5mL)。乙醚层以錄L酸钠干燥，蒸干得到粗产物。将粗产物以真空蒸馏得到粗产物12(0.40g)。某些体外肝代谢研究先前已经记载于下列参考文献中，本文完整收录每篇这些参考文献Obach,RS，DrugMetabDisp,1999，27:1350;Houston,JB等，DrugMetabRev,1997,29:891;Houston,JB,BiochemPharmacol,1994,47:1469;Iwatsubo,T等，PharmacolTher,1997，73:147;及Lave,T等，PharmRes,1997，14:152。微粒体测定法使用合并的肝^f鼓粒体温育来测试通式I或II的化合物的代谢稳定性。然后进行全扫描LC-MS分析来检测主要的代谢物。使用HPLC-MS(或MS/MS)检测来分析暴露于合并的人肝微粒体的测试化合物样品。为了测定代谢稳定性，使用多反应监测(MRM)来测量测试化合物的消失。对于代谢物检测，Ql全扫描作为全i普扫描使用以检测主要的代谢物。实验流程人肝微粒体从商业来源获得(例如XenoTech，LLC(Lenexa,KS))。如下制备温育混合物化合物12代谢稳定性的评估反应混合物组成肝孩么粒体'0.5-2.0nrg/inLNADPHImM磷酸钾，pH7.4氯化镁测试化合物0.1-1)iM。10mM100mM测试化合物与肝微粒体的温育制备反应混合物(减去辅因子)。将反应混合物(不含辅因子)的等分试样在振荡水浴中在37。C温育3分钟。制备反应混合物的另一等分试样，作为阴性对照。以终浓度lpM将测试化合物加入反应混合物和阴性对照两者中。通过添加单纯的有机溶剂(不是测试化合物)来制备反应混合物的等分试样，作为空白对照。通过添加辅因子(不加入阴性对照中)来启动反应，然后在37。C的振荡水浴中温育。在多个时间点(例如0、15、30、60和120分钟)一式三份取出等分试样(200pL)，并与800)iL冰冷的50/50乙腈/dH20混合以终止反应。阳性对照(睾酮和普萘洛尔(Propranolol)以及伊洛前列素)各与测试化合物在分开的反应中同时运行。使用LC-MS(或MS/MS)来分析所有的样品。使用LC-MRM-MS/MS方法来测试代谢稳定性。还有，对空白基质和测试化合物温育样品进行Ql全扫描LC-MS方法。Ql扫描起全谱扫描的作用以鉴别可能代表可能的代谢物的任何样品特征峰。可通过Q1扫描测定这些潜在代谢物的质量。SUPERSOMES测定法。多种人细胞色素P450-特异性SUPERSOMESTM购自Gentest(Woburn,MA,USA)。在37。C一式三份温育1.0mL含有下列物质的反应混合物于100mM磷酸钾緩冲液(pH7.4)中的25pmoleSUPERSOMESTM、2.0mMNADPH、3.0mMMgCl、及1jiM通式I或n的化合物。阳性对照含有lpM伊洛前列素，其代替通式i化合物。阴性对照使用了购自GenTest(Woburn,MA,USA)的对照昆虫细胞胞质溶胶(ControlInsectCellCytosol)(缺乏任何人代谢酶的昆虫细胞^[鼓粒体)。在多个时间点(例如0、2、5、7、12、20、30分钟)从每份样品中取出等分试样(50pL),并放置于多孔板的孔中，并向每份等分试样添加50pL冰冷的含有3氟哌啶醇作为内标的乙腈来终止反应。取出的等分试样的平板置于-20'C的水箱中冷却15分钟。冷却后，向平板中所有的孔中加入100^L去离子水。然后将平板置于离心机中以3000rpm的速度旋转离心10^4fb然后取出一部分上清液(100^L)，"置于新的平板中，并使用质谱方法进行分析。不需另外的说明，相信本领域普通技术人员可使用上文所述的说明和示例性的实施例，制备和利用本发明化合物，并且实现所要求保护的方法。应该理解的是上述说明和实施例仅详细说明了一些优选的实施方案的。对本领域技术人员显而易见的是，可作出各种修改和等价方案而不偏离本发明实质和范围。权利要求1.式I化合物或其可药用盐，其中每个Y独立地选自氢或氘；每个Z独立地选自氢、氘或氟；且至少一个Y或Z是氘。2.权利要求1的化合物，其中Y'a与Y"相同。3.权利要求2的化合物，其中Y"和Y"同时为氘。4.权利要求1-3中任一项的化合物，其中Y"与Y"相同。5.权利要求4的化合物，其中Y^和Y2b同时为氘。6.权利要求1-5中任一项的化合物，其中Z'a与Z化相同。7.权利要求6的化合物，其中Z"和Zlb同时为氘。8.权利要求l的化合物，其选自下表所列出的任一个化合物:<table>tableseeoriginaldocumentpage2</column></row><table>9.式n化合物或其可药用盐其中<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>每个Y独立地选自氢或氘；每个Z独立地选自氢和氘；且至少一个f是氘。10.权利要求9的化合物，其中Y^和Y"同时为氖。11.权利要求9或IO的化合物，其中Y"与Y"相同。12.权利要求ll的化合物，其中Y"和Y'b同时为氖。13.权利要求9-12中任一项的化合物，其中Y^与Y"相同。14.权利要求13的化合物，其中Y"和Y化同时为氖。15.权利要求9-14中任一项的化合物，其中Z)a与Z化相同。16.权利要求15的化合物，其卞Z"和Z化同时为氖。17.权利要求9的化合物，其中所述化合物选自下表所列出的任一个化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage3</column></row><table>18.权利要求1-17中任一项的化合物，其中未指定为氖的任一原子皆以其天然同位素丰度存在。19.一种化合物，其选自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>化合物111和h0oh化合物102。20.—种无热原的组合物，其包含有效量的权利要求1或9的化合物和可药用载体。21.权利要求20的組合物，其中所述组合物是吸入式微粒制剂。22.权利要求20的组合物，其中所述组合物是口服制剂。23.权利要求20-22中任一项的组合物，其还另外包含第二治疗剂。24.权利要求23的组合物，其中所述第二治疗剂是用于治疗或预防选自下列的疾病或病症的试剂肺动脉压过高、系统性硬化症继发的雷诺现象、对比剂肾病，和肺癌。25.权利要求24的组合物，其中所述与本发明化合物共同配制的第二治疗剂用于治疗肺动脉压过高。26.权利要求25的组合物，其中所述第二治疗剂选自5型磷酸二酯酶抑制剂或内皮素-1拮抗剂。27.权利要求26的组合物，其中所述第二治疗剂是昔多芬。28.权利要求26的组合物，其中所述第二治疗剂是波生坦。29.—种调节细胞中前列环素受体活性的方法，其包括使所述细胞与权利要求1或9的化合物接触。30.—种治疗患有或易患以下疾病或病症的患者的方法肺动脉压过高、系统性硬化症继发的雷诺现象、对比介导的肾病，和肺癌，所述方法包括向有此需要的患者给药权利要求20的组合物。31.权利要求30的方法，其中所述疾病是肺动脉压过高。32.权利要求31的方法，其还包括向有此需要的患者给药第二治疗剂的步骤，所述第二治'疗剂选自5型磷酸二酯酶抑制剂及内皮素-l拮抗剂。33.权利要求32的方法，其中所述第二治疗剂是昔多芬。34.权利要求32的方法，其中所述第二治疗剂是波生坦。35.—种治疗患有或易患疾病或病症的患者的方法，其包括向有此需要的患者联合给药权利要求20的组合物和第二治疗剂，其中所述疾病或病症疋a.勃起机能障碍，并且所述第二治疗剂是15-羟前列腺素脱氢酶抑制剂；b.血栓形成症，并且所述第二治疗剂是甜菜4i;c.选自心绞痛、高血压、肺动脉高压、充血性心力衰竭、'隄性阻塞性肺病(COPD)、肺心病、右心室衰竭、动脉粥样硬化、心血管开放减少的渗透症状、外周血管疾病、大脑卒中、支气管炎、变应性哮喘、慢性哮喘、过敏性鼻炎、青光眼、肠易激综合征、肿瘤、肾衰竭、肝硬化、男性性问题和女性性问题，并且所述第二治疗剂是5型磷酸二酯酶抑制剂；d.炎症相关的心血管疾病，并且所述第二治疗剂是COX-l或COX-2抑射剂；e.头发厚度不足，并且所述第二治疗剂是15-鞋前列腺素脱氲酶抑制剂；f.多发性硬化，并且所述第二治疗剂是大麻二酚衍生物；g.细菌感染，并且所述第二治疗剂是al-抗胰蛋白酶或丝氨酸蛋白酶抑制剂；h.肺增生性血管病症，并且所述第二治疗剂是HMG-CoA还原酶抑制剂；i.肺动脉高压，并且所述第二治疗剂是沙利度胺或4型磷酸二酯酶抑制剂；j.选自高血压、糖尿病并发症和代谢综合征，并且所述第二治疗剂是降血压药；或k.肺动脉压过高，并且所述第二治疗剂选自内皮素受体拮抗剂、磷酸二酯酶抑制剂和4丐离子通道阻断剂。全文摘要本发明涉及新型的前列环素衍生物及其可接受的酸加成盐、溶剂化物、水合物及多晶型物。本发明也涉及包含本发明化合物的组合物及所述组合物在治疗能用前列环素进行有益治疗的疾病和病症的方法中的用途，特别是在治疗能用全身性或肺动脉血管床扩张剂或血小板聚集抑制剂进行有益治疗的疾病和病症的方法中的用途。文档编号A01N33/08GK101616584SQ200780051636公开日2009年12月30日申请日期2007年12月21日优先权日2006年12月21日发明者罗杰·滕格申请人:康瑟特制药公司