专利名称：哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法
技术领域：
本发明涉及两种不同属鲑科鱼类的杂交方法。
技术背景哲罗鱼与细鳞鱼虽然都属于我国东北地区土著冷水鲑科鱼类，但是亲缘性较远。哲罗鱼是淡水鱼，它属大型肉食性冷水性鱼，适于22'C以下的水中生 活，并且生长速度快，生长期较长，肉质较细鳞鱼差，产卵期在3 4月份(黑 龙江)，卵产在水流湍急清澈砂砾河底。而细鳞鱼属于中小型冷性鱼，杂食性， 生长较哲罗鱼稍慢，生长周期较短，肉质细嫩鲜美，蛋白质含量高、脂肪含量 低。产卵期为5 6月份(黑龙江)，卵产在水质清晰、水流较缓的砂砾底。两 种鱼的分类地位、亲缘关系、生活习性及产卵期都不同，所以本领域技术人员 都认为哲罗鱼与细鳞鱼是不能进行杂交的。 发明内容本发明的目的是为了解决哲罗鱼和细鳞鱼由于亲缘关系远，繁殖习性有差 异而无法杂交的问题；而提供一种哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法。本发明哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法是采用以下步骤进行的 一、将性成 熟的哲罗鱼雌鱼放养于水温为2 2(TC的模拟哲罗鱼自然产卵环境的培育池 中进行培育；同时将性成熟的细鳞鱼雄鱼放养于水温为2 2(TC的模拟细鳞鱼 自然产卵环境的培育池中进行培育；二、模拟哲罗鱼自然产卵环境的培育池水 温为3 5。C，哲罗鱼雌鱼腹部饱满柔软，用塑胶软管经由生殖孔检查卵径超过 3毫米以上，向哲罗鱼雌鱼注射催熟药物；三、向哲罗鱼雌鱼注射催熟药物48 小时后，向哲罗鱼雌鱼注射催产药物，然后放回哲罗鱼模拟自然产卵环境的培 育池；与此同时向细鳞鱼雄鱼注射催产药物，然后放回细鳞鱼模拟自然产卵环 境的培育池；四、再注射催产药物后8~10天，哲罗鱼雌鱼开始排卵，分别挤 出卵子和精液，将精液用胎牛血清稀释得到稀释精液，卵子用生理盐水清洗后 加入稀释精液，用柔软、干净的羽毛快速均匀搅拌1分钟，加入清水再放置5 分钟，洗去多余的精液和破损的卵皮，得到受精卵；五、将受精卵在清水中静止40 60分钟，待卵充分吸水膨胀，使卵膜硬化并富有弹性，然后计数装入鲑 鱼专用孵化桶中进行孵化，在孵化过程中将死亡的卵挟出，每隔两天用 500 1000ppm的甲醛溶液消毒(防止滋生真菌)，消毒时间为45分钟；仔鱼出 膜后，即得到了哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交的仔鱼。
本发明步骤一中哲罗鱼雌鱼的培育水深为80 120cm。步骤一中细鳞鱼雄 鱼的培育水深为50 100cm。步骤二中对哲罗鱼注射的催熟药物由人绒毛膜促 性腺激素(HCG)、促性腺激素释放激素类似物(S-GnRH-A)和马来酸地欧 酮(DOM)组成；每千克体重哲罗鱼注射的雌性激素药中含有200IU人绒毛 膜促性腺激素、2pg促性腺激素释放激素类似物和0.4mg马来酸地欧酮。步骤 三中对哲罗鱼注射的催产药物由人绒毛膜促性腺激素、促性腺激素释放激素类 似物和马来酸地欧酮组成；每千克哲罗鱼注射的雌性激素药中含有800IU人绒 毛膜促性腺激素、8pg促性腺激素释放激素类似物和1.6mg马来酸地欧酮。步 骤三中对细鳞鱼注射的催产药物由人绒毛膜促性腺激素、促性腺激素释放激素 类似物和马来酸地欧酮组成；每千克哲罗鱼注射的雌性激素药中含有500IU人 绒毛膜促性腺激素、5pg促性腺激素释放激素类似物和0.8mg马来酸地欧酮。
本发明的方法使生活和繁殖习性、分类地位、亲缘关系及产卵期都不同的 两种鱼能够同期成熟，排精排卵，获得杂交种，并且受精率在85%以上，孵化 率在80%以上。本发明的方法得到的杂交种继承了细鳞鱼和哲罗鱼的特点，易 驯化、肉味好、生长速度快、抗病能力强。比同批细鳞鱼自群繁育幼鱼生长快 75%，比哲罗鱼自群繁育幼鱼生长快35%。另外，由于获得的杂交种具有不育 的特性，可在最大程度内保护这两种鱼原种在我国的种质资源特有性，可以避 免物种的流失。
具体实施例方式
具体实施方式
一本实施方式哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法是采用以下步 骤进行的 一、将性成熟的哲罗鱼雌鱼放养于水温为2 20'C的模拟哲罗鱼自 然产卵环境的培育池中进行培育；同时将性成熟的细鳞鱼雄鱼放养于水温为 2 2(TC的模拟细鳞鱼自然产卵环境的培育池中进行培育；二、模拟哲罗鱼自 然产卵环境的培育池水温为3~5"，哲罗鱼雌鱼腹部饱满柔软，用塑胶软管经 由生殖孔检査卵径超过3毫米以上，向哲罗鱼雌鱼注射催熟药物；三、向哲罗鱼雌鱼注射催熟药物48小时后，向哲罗鱼雌鱼注射催产药物，然后放回哲罗 鱼模拟自然产卵环境的培育池；与此同时向细鳞鱼雄鱼注射催产药物，然后放 回细鳞鱼模拟自然产卵环境的培育池；四、再注射催产药物后8 10天，哲罗 鱼雌鱼开始排卵，分别挤出卵子和精液，将精液用胎牛血清稀释得到稀释精液， 卵子用生理盐水清洗后加入稀释精液，用柔软、干净的羽毛快速均匀搅拌1 分钟，加入清水再放置5分钟，洗去多余的精液和破损的卵皮，得到受精卵； 五、将受精卵在清水中静止40 60分钟，待卵充分吸水膨胀，使卵膜硬化并富 有弹性，然后计数装入鲑鱼专用孵化桶中进行孵化，在孵化过程中将死亡的卵 挟出，每隔两天用500 1000ppm的甲醛溶液消毒(防止滋生真菌)，消毒时间 为45分钟；仔鱼出膜后，即得到了哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交的仔鱼。
本实施方式步骤五中受精卵的孵化条件与哲罗鱼受精卵相同。本实施方式 中哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交获得的杂交种可能不育，受精率在85%以上，孵化 率在80%以上。杂交种继承了细鳞鱼和哲罗鱼的特点，易驯化、肉味好、生长 速度快、抗病能力强。比同批细鳞鱼自群繁育幼鱼生长快75%，比哲罗鱼自群 繁育幼鱼生长快35%。
具体实施方式
二本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中哲罗鱼 雌鱼的培育水深为80 120cm。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
三本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中哲罗鱼 雌鱼的培育水深为90 110cm。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
四本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中哲罗鱼 雌鱼的培育水深为100cm。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
五本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中细鳞鱼
雄鱼的培育水深为50 100cm。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
六本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中细鳞鱼
雄鱼的培育水深为60 80cm。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
七本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中细鳞鱼
雄鱼的培育水深为70cm。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
八本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中哲罗鱼雌鱼的体重在10kg以上，其鱼龄在10龄以上。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
九本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中细鳞鱼 雄鱼的体重在3kg以上，其鱼龄在5龄以上。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
十本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤二中哲罗鱼
催熟药物由人绒毛膜促性腺激素(HCG)、促性腺激素释放激素类似物 (S-GnRH-A)和马来酸地欧酮(DOM)组成；每千克体重哲罗鱼注射的催熟 药物中含有200IU人绒毛膜促性腺激素、2吗促性腺激素释放激素类似物和 0.4mg马来酸地欧酮。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
十一本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤三中哲罗 鱼催产药物由人绒毛膜促性腺激素、促性腺激素释放激素类似物和马来酸地欧 酮组成；每千克体重哲罗鱼注射的催产药物中含有800IU人绒毛膜促性腺激 素、8吗促性腺激素释放激素类似物和1.6mg马来酸地欧酮。其它与具体实施 方式一相同。
具体实施方式
十二本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤三中细鳞 鱼催产药物由人绒毛膜促性腺激素、促性腺激素释放激素类似物和马来酸地欧 酮组成；每千克体重细鳞鱼注射的雌性激素药中含有500IU人绒毛膜促性腺激 素、5pg促性腺激素释放激素类似物和0.8mg马来酸地欧酮。其它与具体实施 方式一相同。
具体实施方式
十三本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤四中精液 与胎牛血清体积比为l: 2~4。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
十四本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤四中精液 与胎牛血清体积比为l: 3。其它与具体实施方式
一相同。
具体实施方式
十五本实施方式与具体实施方式
十三或十四不同的是步骤
四中将用1毫升稀释精液给0.15><105 0.5><105的卵子受精个卵子中。其它与具
体实施方式十三或十四相同。
具体实施方式
十六本实施方式与具体实施方式
十三或十四不同的是步骤 四中将用1毫升稀释精液给0.2><105~0.4><105~的卵子受精个卵子中。其它与具 体实施方式十三或十四相同。
权利要求
1、哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法，其特征在于哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法是采用以下步骤进行的一、将性成熟的哲罗鱼雌鱼放养于水温为2～20℃的模拟哲罗鱼自然产卵环境的培育池中进行培育；同时将性成熟的细鳞鱼雄鱼放养于水温为2～20℃的模拟细鳞鱼自然产卵环境的培育池中进行培育；二、模拟哲罗鱼自然产卵环境的培育池水温为3～5℃，哲罗鱼雌鱼腹部饱满柔软，用塑胶软管经由生殖孔检查卵径超过3毫米以上，向哲罗鱼雌鱼注射催熟药物；三、向哲罗鱼雌鱼注射催熟药物48小时后，向哲罗鱼雌鱼注射催产药物，然后放回哲罗鱼模拟自然产卵环境的培育池；与此同时向细鳞鱼雄鱼注射催产药物，然后放回细鳞鱼模拟自然产卵环境的培育池；四、再注射催产药物后8～10天，哲罗鱼雌鱼开始排卵，分别挤出卵子和精液，将精液用胎牛血清稀释得到稀释精液，卵子用生理盐水清洗后加入稀释精液，用柔软、干净的羽毛快速均匀搅拌1分钟，加入清水再放置5分钟，洗去多余的精液和破损的卵皮，得到受精卵；五、将受精卵在清水中静止40～60分钟，待卵充分吸水膨胀，使卵膜硬化并富有弹性，然后计数装入鲑鱼专用孵化桶中进行孵化，在孵化过程中将死亡的卵挟出，每隔两天用500～1000ppm的甲醛溶液消毒，消毒时间为45分钟；仔鱼出膜后，即得到了哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交的仔鱼。
2、 根据权利要求1所述的哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法，其特征在于步 骤一中哲罗鱼雌鱼的培育水深为80 120cm。
3、 根据权利要求1所述的哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法，其特征在于步 骤一中细鳞鱼雄鱼的培育水深为50~100cm。
4、 根据权利要求1所述的哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法，其特征在于步 骤二中哲罗鱼催熟药物由人绒毛膜促性腺激素、促性腺激素释放激素类似物和 马来酸地欧酮组成；每千克体重哲罗鱼注射的催熟药物中含有200IU人绒毛膜 促性腺激素、2吗促性腺激素释放激素类似物和0.4mg马来酸地欧酮。
5、 根据权利要求1所述的哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法，其特征在于步 骤三中哲罗鱼催产药物由人绒毛膜促性腺激素、促性腺激素释放激素类似物和 马来酸地欧酮组成；每千克体重哲罗鱼注射的催产药物中含有800IU人绒毛膜 促性腺激素、8吗促性腺激素释放激素类似物和1.6mg马来酸地欧酮。
6、 根据权利要求1所述的哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法，其特征在于步 骤三中细鳞鱼催产药物由人绒毛膜促性腺激素、促性腺激素释放激素类似物和 马来酸地欧酮组成；每千克体重细鳞鱼注射的雌性激素药中含有400IU人絨毛 膜促性腺激素、4吗促性腺激素释放激素类似物和0.8mg马来酸地欧酮。
7、 根据权利要求1所述的哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法，其特征在于步 骤四中精液与胎牛血清体积比为1: 2 4。
8、 根据权利要求1所述的哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法，其特征在于步 骤四中精液与胎牛血清体积比为1: 3。
9、 根据权利要求7或8所述的哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法，其特征在 于步骤四中，用每1毫升稀释精液给0.15><105 0.50><105个卵子受精。
10、 根据权利要求7或8所述的哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法，其特征在 于步骤四中，用每1毫升稀释精液给0.2><105 0.4><105个卵子受精。
全文摘要
哲罗鱼与细鳞鱼远缘杂交方法，它涉及两种不同属鲑科鱼类的杂交方法。本发明解决了哲罗鱼和细鳞鱼由于亲缘关系远，繁殖习性有差异而无法杂交的问题。本发明方法如下一、培育；二、对哲罗鱼雌鱼进行催熟；三、分别对哲罗鱼雌鱼、细鳞鱼雄鱼进行催产；四、得到受精卵；五、孵化。本发明的方法使生活和繁殖习性、分类地位、亲缘关系及产卵期都不同的两种鱼能够同期成熟，排精排卵，获得杂交种，并且受精率在85％以上，孵化率在80％以上。本发明的方法得到的杂交种继承了细鳞鱼和哲罗鱼的特点，易驯化、肉味好、生长速度快、抗病能力强。
文档编号A61D19/00GK101317558SQ20081006474
公开日2008年12月10日 申请日期2008年6月16日 优先权日2008年6月16日
发明者徐革锋, 李永发, 佳 杜, 牟振波 申请人:中国水产科学研究院黑龙江水产研究所