专利名称：：一种球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混配杀虫剂及其制备方法
技术领域：
：本发明属于生物农药
技术领域：
，涉及一种球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混配杀虫剂及其制备方法。
背景技术：
：鳞翅目、半翅目、同翅目、鞘翅目等重要农林业害虫的防治工作非常重要。例如烟粉虱Semz'w'ato&c/(Gennadius)属同翅目(Hopoptera)粉虱科(Aleyrodidae)，是一种世界性的重要害虫。20世纪70年代以后随着B型烟粉虱的出现，烟粉虱对大田作物、蔬菜和花卉等的危害日益严重，尤其近几年来，烟粉虱相继大暴发于世界各地。烟粉虱从90年代初期井始在我国不同地区相继暴发，尤其严重为害黄瓜、番茄、莉子、甜瓜和西葫芦等作物，严重时损失率可达70%以上。烟粉虱具有体形微小，种群数量大，寄主范围广，世代重叠严重，易扩散等特点，虫体内农药的靶标位点基因很容易产生突变并得到积累，能够迅速遗传延续下去。因此，烟粉虱的抗药性问题极为严重，目前已对有机氯、有机磷、拟除虫菊酯、'氨基甲酸酯、烟碱类、昆虫生长调节剂等主要类型杀虫剂产生了抗药性。生物防治已经成为控制烟粉虱必需发展的技术。球孢白僵菌(S^mveWs6aw/a"a)是一种重要的昆虫病原真菌，对同翅目、鳞翅目、双翅目、鞘翅目、膜翅目等昆虫有侵染能力，主要用于i防治鳞翅目、半翅目、同翅目、鞘翅目害虫等重要农林业害虫。球孢白僵菌与其它真菌杀虫剂一样，具有不污染环境、不产生抗药性，以及持续有效性等优点，然而，单独使用球孢白僵菌防治烟粉虱等害虫，其效果不稳定，受环境条件影响很大，并且见效慢。因此，发展真菌的混合制剂是一个克服其固有缺点的好办法。绿僵菌素(cfe^nm'")是昆虫病原真菌——绿僵菌(am'sop"aevar.am'sop/fae)在侵染过程中向寄主昆虫血腔分泌的一种环縮肽类抗生素，绿僵菌素具有显著的杀虫效果，并且具有不同于现有杀虫剂的全新的作用机理，主要作用于昆虫的血淋巴免疫系统，使之丧失免疫防御能力。绿僵菌素易降解、无残留，毒性低，开发利用绿僵菌素具有重要经济意义。然而，绿僵菌素单独使用时，毒力不够高，防治效果并不理想。同时，长期使用同一种杀虫剂容易引起害虫抗药性发展，这对混配农药也不断提出了新的发展要求，不断开发研究农药复配技术或混合施用技术是克服或延缓抗药性的一个重要方法。综上所述，本申请人拟利用绿僵菌素对虫生真菌的增效作用，开发球孢白僵菌与绿僵菌素混配杀虫剂，尤其是针对烟粉虱的杀虫剂，相关技术目前暂无技术报道。
发明内容本发明的一个目的是克服现有技术的不足，提供一种球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混配杀虫剂。本发明的另一个目的是提供所述杀虫剂的制备方法。本发明的目的通过下述技术方案来实现提供一种球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混配杀虫剂，采用球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混配而成，所述杀虫剂含有球孢白僵菌真菌活分生孢子10^ii个/L、含有绿僵菌素io100mg/L。混配用到的辅剂为常规使用的溶剂，例如吐温80、丙酮或乙酸乙酯等溶剂。所述绿僵菌素可以是绿僵菌素中的任何一种同系物，或者是它们以任何比例的混合物。本发明同时提供了所述球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混配杀虫剂的制备方法，包括以下步骤(1)配制孢白僵菌真菌分生孢子悬浮液；(2)配制绿僵菌素贮备液；(3)将分生孢子悬浮液与绿僵菌素贮备液混合。步骤(1)所述分生孢子悬浮液中活分生孢子的浓度为101()12个/L。可将球孢白僵菌真菌分生孢子用0.010.05%吐温80溶液稀释配制。步骤(2)所述绿僵菌素贮备液中绿僵菌素的浓度大于100000mg/L，取绿僵菌素用溶剂丙^或乙酸乙酯溶解配制而成。步骤(3)所述孢白僵菌真菌分生孢子悬浮液与绿僵菌素贮备液的混合是将上述步骤(1)所述孢白僵菌真菌分生孢子悬浮液与步骤(2)所述绿僵菌素贮备液按一定比例混合，只要使最终浓度保持为孢白僵菌真菌活分生孢子1(^u个/L、绿僵菌素浓度为10100mg/L即可。本发明所述杀虫剂使用是将上述步骤(3)制备的混合液喷施于目标作物上，进行害虫田间防治。本发明的有益效果是本发明提供了一种新的真菌生物杀虫剂，针对烟粉虱的抗药性问题进行生物防治。本发明通过长期大量的实验研究，选择球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混用增效解决烟粉虱的抗药性问题，通过大量的实验研究，确定混配后的杀虫剂保证较佳的杀虫效果，其中的孢白僵菌真菌分生孢子与绿僵菌素浓度。所述杀虫剂具有不同于现有杀虫剂的全新的作用机理，杀虫效果显著，尤其是针对危害严重的烟粉虱毒杀作用显著，同时具有环境友好的特点。本发明所述杀虫剂制备方法非常简单，易于推广。具体实施例方式下面结合具体实施历来进一步详细说明本发明。实施例1:本发明增效杀虫剂的制备(1)取球孢白僵菌菌分生孢子，用0.010.05%吐温80溶液配制成浓度为1(T^个活分生孢子/L的孢子悬浮液；(2)取绿僵菌素，用丙酮或乙酸乙酯等溶剂配制成有效成份浓度大于100000mg/L的贮备液；(3)将上述步骤(1)所述分生孢子悬浮液与步骤(2)所述绿僵菌素贮备液按一定比例混合，使最终浓度保持为活分生孢子109M1个/L、绿僵菌素10100mg/L。实施例2本发明增效杀虫剂对农林业害虫的室内毒力测定实验本实施例以烟粉虱(BemWato&c/)为主要实验对象，进行室内毒力测定时，用扶桑(7//Z^c^m^-w>2m^L.)作供试植物，其盆栽苗育于养虫笼中，将烟粉虱成虫接入养虫笼，待其产卵一天后将其全部赶出，笼内保持26。C的温度和14:IO的光照，待扶桑叶片上的烟粉虱发育至2龄若虫时，采用浸渍法进行毒力测验，重复4次，调查药后4天的效果，计算校正死亡率，求药剂浓度对数一死亡率几率值的回归方程，并进行卡方适合性检验，然后求出LCs()，根据下式计算增效比(SR)，根据SR值判断标准混合剂是否具有增效作用SRS0.5，拮抗作用；SR=0.51.5，相加作用；SR^1.5增效作用。LC50(理论)=(a+b)/(a/LC50A+b/LC，)增效比(SR)二LCso理论值/LC5o实际值A、B分别代表两种药剂组分，a、b是A、B两组分在混剂中含量的比值。因为实验方法属于本领域常规方法，实验结果不一一赘述，部分实验结果见表1，球孢白僵菌分生孢子与绿僵菌素混配杀虫剂具有显著杀虫增效作用。表1球孢白僵菌分生孢子与绿僵菌素对烟粉虱的室内毒力实验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>10:1109.5(95.4-125.3)SR1.6968.1(57.2-69.5)SR-1.5220:1126,4(108.9-147.2)SR1.5273.5(61.8-86.1)SR-1.42CS:分生孢子，其LCso值单位是l(^个/L;DA:绿僵菌素A，其LC值单位是mg/L。实施例3本发明所述杀虫剂对烟粉虱的田间药效试验试验于2008年5月在大棚栽培西红柿上进行，温度2230°C，相对湿度8197%，小区面积30m2，随机区组设计，重复4次，在烟粉虱2龄若虫高峰期喷药，施药后每隔2天调查一次，每小区固定检査10个点(每点约10cm2的叶面积)，每个点不少于100头若虫，记录总虫数和(病)死虫数，计算校正死亡率，作方差分析和新复极差测验。试验结果见如表2，本发朋所述增效杀虫剂的防治效果明显优于球孢白僵菌和绿僵菌素单剂。表2几种药剂对烟粉虱(5emWato&cO防治效果对照处理有效成份处理后不同时间的校正死亡率(％)分生孢子绿僵菌素2天4天6天本发明增效球孢白僵菌1()8个/L50mg/L47.5a71.5a90.1a5X1。8个/L25mg/L51.7a74.9a92.4a球孢白僵菌孢子1C)8个/L23.8b'51.9b62.4b5X1()8个/L32邻69.7a88.5a绿僵菌素100mg/L52.5a53.9b53.9b50mg/L13.6c13.6c13,6cCK(空白对照)0.2d0.3d0.3d权利要求1、一种球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混配杀虫剂，其特征在于是采用球孢白僵菌真菌、绿僵菌素与溶剂混配而成，所述球孢白僵菌真菌活分生孢子的浓度为107～11个/L，所述绿僵菌素的浓度为10～100mg/L。2、一种权利要求1所述球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混配杀虫剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)配制孢白僵菌菌分生孢子悬浮液；(2)配制绿僵菌素贮备液；(3)将分生孢子悬浮液与绿僵菌素贮备液混合。3、根据权利要求2所述球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混配杀虫剂的制备方法，其特征在于步骤(1)所述分生孢子悬浮液^活分生孢子的浓度为10^u个/L。4、根据权利要求2或3所述球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混配杀虫剂的制备方法，其特征在于步骤(1)所述悬浮液的配制是将球孢白僵菌真菌分生孢子用0.010.05%吐温80溶液稀释配制。5、根据权利要求2所述球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混配杀虫剂的制备方法，其特征在于步骤(2)所述绿僵菌素贮备液中绿僵菌素的浓度大于100000mg/L。6、根据权利要求2或5所述球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混配杀虫剂的制备方法，其特征在于步骤(2)所述绿僵菌素贮备液的配制是取绿僵菌素用丙酮或乙酸乙酯溶剂溶解配制而成。7、根据权利要求2所述球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混配杀虫剂的制备方法，其特征在于步骤(3)所述分生孢子悬浮液与绿僵菌素贮备液的混合比例根据活分生孢子最终浓度为109"个丄、绿僵菌素最终浓度为10100mg/L确定。全文摘要本发明公开了一种球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混配杀虫剂，采用球孢白僵菌真菌、绿僵菌素与溶剂混配而成，混配后球孢白僵菌真菌活分生孢子的浓度为10<sup>7～11</sup>个/L、绿僵菌素的浓度为10～100mg/L时杀虫效果较好。所述杀虫剂的制备方法包括配制孢白僵菌菌分生孢子悬浮液、配制绿僵菌素贮备液、将分生孢子悬浮液与绿僵菌素贮备液混合等步骤。本发明选择球孢白僵菌真菌与绿僵菌素混用增效，杀虫剂具有不同于现有杀虫剂的全新的作用机理，杀虫效果显著，尤其是针对危害严重的烟粉虱毒杀作用显著，同时具有环境友好的特点。文档编号A01P7/00GK101438714SQ20081022000公开日2009年5月27日申请日期2008年12月15日优先权日2008年12月15日发明者任顺祥,胡琼波申请人:华南农业大学