专利名称：一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种畜禽饲料，具体是生产不添加化学品绿色发酵饲料的 一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法。
背景技术：
随着人们生活水平的提高，人们对食品安全问题越来越重视。尤其是三 聚氰胺事件引发的一系列食品安全问题使人们更加认识到食品安全的重要性。作为动物性 食品的源头，饲料安全就是食品安全。目前在猪饲料和鸡饲料中普遍添加有抗生素和激素， 致使生产出来的猪肉和鸡肉及鸡蛋口感差，抗生素含量超标，影响人们身体健康。为了保证 肉的品质，许多厂家也尝试生产不添加抗生素的发酵饲料，但是由于发酵用的菌种和发酵 工艺的限制，使这种无抗生素饲料难以健康发展。
发明内容
本发明提供了一种可以提高生猪、奶牛、鸡的免疫力和生长性能，简易 低成本制作的一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法。其乳酸菌发酵剂菌种组方 为东方伊萨酵母菌(拉丁文学名=Issatchenkia orientalis ；保藏单位中国微生物菌 种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏日期2008年12月18日；保藏单位简称及编号 CGMCC No :2813)30%、异常毕赤酵母菌(拉丁文学名Pichia anomala ；保藏单位中国微 生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏日期2008年12月18日；保藏单位简称及 编号=CGMCC No :2814)30%和戊糖片球菌(拉丁文学名=Pediococcus pento saceus ；保藏 单位中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏日期2008年12月18日；保 藏单位简称及编号=CGMCC No 2815)40% ；其制备方法是把上述试管菌种分别用三角瓶和 发酵罐扩增培养，再按一定比例混合制备成液体乳酸菌发酵剂及固体乳酸菌发酵剂，然后 把乳酸菌发酵剂添加到饲料中发酵成不含抗生素的微生物发酵饲料。由于本发明利用有益 微生物发酵饲料，通过添加能够大量分泌各种消化酶的东方伊萨酵母菌，蛋白含量高的异 常毕赤酵母菌产生酸性物质降低PH值，为戊糖片球菌提供厌氧环境，有利于乳酸菌在肠道 中定植，可以有效的改善动物肠道微生态平衡，细化营养因子，从而提高动物的免疫力，并 具有提高肉料比，无药物残留，改善肉质的作用。本发明用来发酵饲料的三种益生菌分别用发酵罐扩增培养的方法进行生产，生产 微生物发酵饲料的乳酸菌发酵剂菌种配比根据不同动物或同一种动物的不同生长期做适 当的调整。本发明所用的固体乳酸菌发酵剂采用玉米、麸皮等为载体，以利微生物菌种附 着，其有益活菌含量可达10亿/克。本发明所用的液体乳酸菌发酵剂中有益菌含量可达20 亿/毫升。通过近几年的试验结果表明，微生物发酵饲料对提高生猪肉料比，提高非特异性 免疫力，增加收入有明显效果。生猪采食发酵好的饲料后，皮毛光滑、肤色红润、背健臀肥、 精神状态良好，乳酸菌发酵剂完全可以替代饲料中的抗生素。与使用抗生素的传统饲养方 式相比，使用无抗生素的微生物发酵饲料组的生猪平均日增重提高了 5到6个百分点。从 经济效益分析，无抗生素的微生物发酵饲料比传统的抗生素混合饲料组平均每头猪增加收 Λ 15元左右。本发明乳酸菌发酵剂组方中的菌种保藏简要说明1、东方伊萨酵母菌拉丁文学名Issatchenkia orientalis ；保藏单位中国微生物菌种保 藏管理委员会普通微生物中心；
保藏单位地址北京市朝阳区大屯路；保藏日期2008年12月18日；保藏单位简称及编号CGMCC No :2813。2、异常毕赤酵母菌拉丁文学名Pichia anomala ；保藏单位中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址北京市朝阳区大屯路；保藏日期2008年12月18日；保藏单位简称及编号CGMCC No :2814。3、戊糖片球菌拉丁文学名:Pediococcus pento saceus ；保藏单位中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址北京市朝阳区大屯路；保藏日期2008年12月18日；保藏单位简称及编号CGMCC No :2815。
具体实施例方式实施例1 乳酸菌发酵剂的菌种组方为东方伊萨酵母菌 (CGMCC No :2813)30%、异常毕赤酵母菌(CGMCC No :2814) 30 % 和戊糖片球菌(CGMCCNo 2815)40% ；其制备方法是把试管种子用三角瓶和发酵罐培养扩增，再按一定比例混合制备 成不含抗生素的液体乳酸菌发酵剂、固体乳酸菌发酵剂，然后把乳酸菌发酵剂添加到饲料 中发酵成不含抗生素的微生物发酵饲料。实施例2 乳酸菌发酵剂的三角瓶培养基配方及培养方法为东方伊萨酵母菌CGMCC No :2813 麦芽汁培养基(12° Β )，pH5. 5 6. 5，121°C灭 菌20mi η ；其接种量为1%，于28°C下培养30h ；异常毕赤酵母菌CGMCC No 2814 麦芽汁培养基(12° Β )，ρΗ5· 5 6. 5，121°C灭 菌20min ；其接种量为1%，于28°C下培养30h ；戊糖片球菌CGMCC No 2815 水解酪蛋白10. 0g、酵母膏5. 0g、葡萄糖20. 0g、吐温 80 1. 0g、柠檬酸铵 2. 0g、磷酸氢二钾 2. 0g、醋酸钠 2. 0g、MnS04. 7H20 0. 2g、MgS04 0 . 05g、蒸 馏水1000ml，pH6. 2 6. 5，121°C灭菌20min ；其接种量为1%，于35°C下培养24h。实施例3 乳酸菌发酵剂的发酵罐培养基配方及培养方法为东方伊萨酵母菌CGMCC No :2813 麦芽汁培养基(12° Β )、pH 5. 5 6. 5、121°C 灭菌25min ；或红糖20g、黄豆芽汁50ml、磷酸氢二钾2g、水1000ml，pH5. 5 6. 5，121 °C灭 菌25min ；其接种量为3 %，于28°C，pH5. 5 6. 5下培养30h ；异常毕赤酵母菌CGMCC No 2814 麦芽汁培养基(12° Be)，pH 5. 5 6. 5，121°C 灭菌25min ；或红糖20g、黄豆芽汁50ml、磷酸氢二钾2g、水1000ml，pH5. 5 6. 5，121 °C灭 菌25min ；其接种量为3 %，于28°C，pH5. 5 6. 5下培养30h ；戊糖片球菌CGMCC No 2815 红糖20g、西红柿汁50ml、酵母膏5g、磷酸氢二钾2g、 吐温 80 0. 5ml，pH 6. 2 6. 5，121°C灭菌 20min ；其接种量为 3%，于 35°C，pH5. 5 6. 5 下 培养24h。实施例4 乳酸菌发酵剂的固体培养基配方及培养方法为东方伊萨酵母菌CGMCC No 2813 玉米面45%、豆粕25%、 麸皮25%、红糖5%，pH 5. 5 6. 5，121°C灭菌60min ；其接种量为6%，于28°C，pH 5. 5 6. 5下培养32h ；
异常毕赤酵母菌CGMCC No :2814 玉米面45%、豆粕25%、麸皮25%、红糖5%，pH 5. 5 6. 5，121°C灭菌60min ；其接种量为6%，于28°C，pH 5. 5 6. 5下培养32h ；戊糖片球菌CGMCC No :2815 玉米面45%、豆粕25%、麸皮25%、红糖5%， pH6.5 7. 3，121°C灭菌 60min ；其接种量为 6%，于 35°C，pH 5. 5 6. 5 下培养 32h。实施例5 液体乳酸菌发酵剂的制备工艺为试管菌种一三角瓶一级种一发 酵罐二级种一混合配伍一无菌灌装一成品；其混合配伍菌种比例为东方伊萨酵母菌 (CGMCC No :2813)30%、异常毕赤酵母菌(CGMCC No :2814) 30 %、戊糖片球菌(CGMCC No: 2815)40%。液体乳酸菌发酵剂添加到饲料中生产微生物发酵饲料的方法为(1)乳酸菌发酵剂的稀释按照1 10的比例进行稀释，即将IL液体乳酸菌发酵 剂倒进IOkg水中搅拌均勻；(2)发酵将IOkg稀释好的液体乳酸菌发酵剂添加到IOOkg猪饲料中，加水用搅 拌机或人工搅拌均勻。将搅拌均勻的饲料装在透气的编织袋中，保持饲料蓬松透气，置于 28-35°C的房间内发酵24-48h。实施例6 固体乳酸菌发酵剂的制备工艺为试管菌种一三角瓶一级种一发酵罐 二级种一固体培养三级种一无菌晾晒一混合配伍一成品；其混合配伍菌种比例为东方 伊萨酵母菌(CGMCC No :2813)30%、异常毕赤酵母菌(CGMCCNo :2814) 30 %、戊糖片球菌 (CGMCC No :2815)40%;东方伊萨酵母菌CGMCC No :2813和异常毕赤酵母菌CGMCC No 2814 固体发酵容器为铝桶，戊糖片球菌CGMCCN0 2815固体发酵容器为密封塑料桶；发酵后的固 体菌种在6-12h内快速晾干以免污染。固体乳酸菌发酵剂添加到饲料中生产微生物发酵饲料的方法为(1)固体乳酸菌发酵剂的活化按It饲料取用Ikg固体乳酸菌发酵剂的量，在 40°C左右条件下，将固体乳酸菌发酵剂放在IOkg温水中浸泡活化2-3h ；(2)发酵将活化好的乳酸菌发酵剂添加到IOOkg饲料中，加水用搅拌机或人工搅 拌均勻，再将搅拌均勻的饲料装在透气的编织袋中，保持饲料蓬松透气，置于28-35°C的房 间内发酵24-48h。实施例7 本发明利用乳酸菌发酵剂生产的微生物发酵饲料具有特殊的酒香味， 有益活菌数在10亿/克以上。发酵好的微生物发酵饲料应在6个月之内用完。在制备和 使用中应注意(1)水份要求搅拌后水份为55% -65%，即用手握起成团而不渗水，松手团块可 裂开，手揉则散。水质要求饲料发酵所需的水不需要额外消毒，但应该是洁净的自来水或 地下水。(2)温度要求发酵所需的温度范围为20-40°C，低于20°C较难发酵。(3)通气要求盛装饲料的编织袋应选择无内膜的透气性好的袋子，装料不可过 实，同时饲料的含水量要控制在55% -65%之间，以保证有适量的氧气供应。(4)发酵时间根据环境温度、含水量和通气量的不同，饲料发酵所需的时间也不 一样，按照标准操作，发酵24-48小时即可达到要求。(5)发酵原料的要求一定要选择不含抗生素、激素、防腐剂、色素、瘦肉精等添加 剂的饲料作为发酵原料。
权利要求
一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法，其特征在于生产微生物发酵饲料的乳酸菌发酵剂菌种组方为东方伊萨酵母菌(Issatchenkia orientalis；CGMCC No2813)30％、异常毕赤酵母菌(Pichia anomala；CGMCCNo2814)30％和戊糖片球菌(Pediococcus pento saceus；CGMCC No2815)40％；其制备方法是先把上述试管菌种分别用三角瓶和发酵罐培养扩增，再按一定比例混合制备成液体乳酸菌发酵剂和固体乳酸菌发酵剂，然后将乳酸菌发酵剂添加到饲料中发酵成不含抗生素的微生物发酵饲料。
2.根据权利要求1所述的一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法，其特征是其 乳酸菌发酵剂的三角瓶培养基配方及培养方法为东方伊萨酵母菌CGMCC No :2813 麦芽汁培养基(12° Β )，pH5. 5 6. 5，121°C灭菌 20min ；其接种量为1%，于28°C下培养30h ；异常毕赤酵母菌CGMCC No :2814 麦芽汁培养基(12° Β )，ρΗ5· 5 6. 5，121°C灭菌 20min;其接种量为1%，于28°C下培养30h ；戊糖片球菌CGMCC No 2815 水解酪蛋白lO.Og、酵母膏5.0g、葡萄糖20. Og、吐温 801. Og、柠檬酸铵 2. Og、磷酸氢二钾 2. Og、醋酸钠 2. Og、MnSO4. 7H20 0. 2g、MgSO4 0. 05g、蒸 馏水1000ml，pH6. 2 6. 5，121°C灭菌20min ；其接种量为1%，于35°C下培养24h。
3.根据权利要求1所述的一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法，其特征是其 乳酸菌发酵剂的发酵罐培养基配方及培养方法为东方伊萨酵母菌CGMCC No 2813 麦芽汁培养基(12° Be)，pH 5. 5 6. 5，121°C灭菌 25min ；或红糖20g、黄豆芽汁50ml、磷酸氢二钾2g、水1000ml, ρΗ5· 5 6. 5，121°C灭菌 25min ；其接种量为3%，于28°C，pH5. 5 6. 5下培养30h ；异常毕赤酵母菌CGMCC No 2814 麦芽汁培养基(12° Be)，pH 5. 5 6. 5，121°C灭菌 25min ；或红糖20g、黄豆芽汁50ml、磷酸氢二钾2g、水1000ml, ρΗ5· 5 6. 5，121°C灭菌 25min ；其接种量为3%，于28°C，pH5. 5 6. 5下培养30h ；戊糖片球菌CGMCC No 2815 红糖20g、西红柿汁50ml、酵母膏5g、磷酸氢二钾2g、吐温 800. 5ml, pH 6. 2 6. 5，121°C灭菌 20min ；其接种量为 3%，于 35°C，pH5. 5 6. 5 下培养 24h。
4.根据权利要求1所述的一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法，其特征是其 乳酸菌发酵剂的固体培养基配方及培养方法为东方伊萨酵母菌CGMCC No 2813 玉米面45%、豆粕25 %、麸皮25 %、红糖5 %，pH 5. 5 6. 5，121°C灭菌60min ；其接种量为6%，于28°C，pH 5. 5 6. 5下培养32h ；异常毕赤酵母菌CGMCC No 2814 玉米面45%、豆粕25 %、麸皮25 %、红糖5 %，pH 5. 5 6. 5，121°C灭菌60min ；其接种量为6%，于28°C，pH 5. 5 6. 5下培养32h ；戊糖片球菌CGMCC No 2815 玉米面45%、豆粕25%、麸皮25%、红糖5%，pH6. 5 7. 3，121°C灭菌60min ；其接种量为6%，于35°C，pH 5. 5 6. 5下培养32h。
5.根据权利要求1所述的一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法，其特征是其 液体乳酸菌发酵剂的制备工艺为试管菌种一三角瓶一级种一发酵罐二级种一混合配伍一 无菌灌装一成品；其混合配伍菌种比例为东方伊萨酵母菌(CGMCC No :2813)30%、异常毕 赤酵母菌(CGMCC No :2814)30%、戊糖片球菌(CGMCC No 2815)40%0
6.根据权利要求1所述的一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法，其特征是其固体乳酸菌发酵剂的制备工艺为试管菌种一三角瓶一级种一发酵罐二级种一固体培养三级种一无菌晾晒一混合配伍一成品；其混合配伍菌种比例为东方伊萨酵母菌(CGMCC No 2813)30%、异常毕赤酵母菌(CGMCC No :2814) 30%、戊糖片球菌(CGMCC No :2815)40%;东 方伊萨酵母菌CGMCC No 2813和异常毕赤酵母菌CGMCC No 2814固体发酵容器为铝桶，戊 糖片球菌CGMCC No 2815固体发酵容器为密封塑料桶；发酵后的固体菌种在6_12h内快速 晾干以免污染。
7.根据权利要求1所述的一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法，其特征是其 液体乳酸菌发酵剂添加到饲料中生产微生物发酵饲料的方法为(1)乳酸菌发酵剂的稀释按照1 10的比例进行稀释，即将IL液体乳酸菌发酵剂倒 进IOkg水中搅拌均勻；(2)发酵将IOkg稀释好的液体乳酸菌发酵剂添加到IOOkg猪饲料中，加水用搅拌 机或人工搅拌均勻；将搅拌均勻的饲料装在透气的编织袋中，保持饲料蓬松透气，置于 28-35°C的房间内发酵24-48h。
8.根据权利要求1所述的一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法，其特征是其 固体乳酸菌发酵剂添加到饲料中生产微生物发酵饲料的方法为(1)固体乳酸菌发酵剂的活化按It饲料取用Ikg固体乳酸菌发酵剂的量，在40°C左 右条件下，将固体乳酸菌发酵剂放在IOkg温水中浸泡活化2-3h ；(2)发酵将活化好的乳酸菌发酵剂添加到IOOkg饲料中，加水用搅拌机或人工搅拌均 勻，再将搅拌均勻的饲料装在透气的编织袋中，保持饲料蓬松透气，置于28-35°C的房间内 发酵 24-48h。
全文摘要
本发明公开了生产不添加化学品绿色发酵饲料的一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法。其乳酸菌发酵剂的菌种组方为东方伊萨酵母菌30％、异常毕赤酵母菌30％和戊糖片球菌40％；其制备方法是把上述试管菌种分别用三角瓶和发酵罐扩增培养，再按一定比例混合制备成液体乳酸菌发酵剂及固体乳酸菌发酵剂，然后把乳酸菌发酵剂添加到饲料中发酵成不含抗生素的微生物发酵饲料。由于本发明通过添加能够大量分泌各种消化酶的有益菌种，产生酸性物质降低pH值，为乳酸菌提供厌氧环境，有利于乳酸菌在肠道中定植，可以有效的改善动物肠道微生态平衡，细化营养因子，从而提高动物的免疫力，并具有提高肉料比，无药物残留，改善肉质的作用。
文档编号A23K1/16GK101836688SQ20091006484
公开日2010年9月22日 申请日期2009年4月30日 优先权日2009年4月30日
发明者李海泉, 王岩, 郭夏丽 申请人:李海泉