专利名称：黄蜀葵组培快繁方法
技术领域：
本发明涉及一种锦葵科秋葵属植物黄蜀葵的组织培养和快速繁殖方法，属于林业
生物技术领域。
背景技术：
黄蜀葵全草可入药，花具有清利湿热，消炎解毒之功效，果实种子能治疗消化不 良、不思饮食，跌打损伤等。用黄蜀葵治病疗伤在我国历代医籍中均有记载，民间应用也很 普遍，国内外对黄蜀葵有巨大的需求市场。国内没有关于黄蜀葵的组织培养和快繁方法的 研究。但生产上，由于黄蜀葵种子种皮革质坚硬，因此，实生繁殖出苗率很低，如何提高繁殖 系数成为黄蜀葵资源供应要解决的一个关键技术。植物组织培养是植物规模化生产的一种 快速高效繁殖方法。
发明内容
本发明的目的在于弥补现有技术之不足，提供一种方法操作简单、繁殖速率高的 黄蜀葵组培快繁方法。 本发明的目的通过以下方案实现包括由种子获得无菌苗、芽的增殖、诱导芽生根
三个步骤，在短时间里获得大量黄蜀葵的种苗。
本发明方法具体操作按下列步骤进行 a、取黄蜀葵种子在超净工作台上用75X乙醇消毒l 2min，0. 1%他(;12灭菌9 10min，无菌水冲洗4 5次； b、将步骤a中处理后的种子接入培养基MS中，温度25 ± 1°C ，光照1500 2000LX， 时间10 14h/d进行萌发培养； c、将步骤b中苗龄25 50d的幼苗茎切成1 2cm的带节茎段接入培养基 MS+6-BA1. 0 1. 5mg/L+NAA0. 1 0. 2mg/L中，置于温度25士1。C，光照1500 2000LX，时 间12 14h/d进行培养，增殖系数9. 5 10. 5 ; d、将步骤c中2 3cm的腋芽切下，接入培养基1/2MS+IBA0. 4 0. 6mg/L中并置
于温度25士rC，光照1500 2000LX，时间12 14h/d条件下诱导生根。 本发明方法操作简单，繁殖速率高，稳定性强，培育周期短，产率高的优点，在实际
生产应用中具有较强的可行性，适用于黄蜀葵的产业化生产。
具体实施例方式以下结合实施例对本发明进行详细说明。
实施例1 本实施例的操作步骤如下a、取黄蜀葵种子在超净工作台上用75%乙醇消毒 lmin，O. 1% Hgcl2灭菌10min，无菌水冲洗5次； b、将步骤a中处理后的种子接入培养基MS中，温度25士rC，光照1500LX，时间12h/d进行萌发培养； c、将步骤b中苗龄25d的幼苗茎切成1. 5cm的带节茎段接入培养基 MS+6-BA1. 5mg/L+NAA0. 15mg/L中，置于温度25± 1°C ，光照2000LX，时间14h/d进行培养，分 化系数达到10. 3 ; d、将步骤c中2. 0cm的腋芽切下，接入培养基1/2MS+IBA0. 6mg/L中并于置于温度 25士rC，光照2000LX，时间14h/d条件下诱导生根，生根率100%。
实施例2 本实施例的操作步骤如下a、取黄蜀葵种子在超净工作台上用75%乙醇消毒 1. 5min， 0. 1 % Hgcl2灭菌9min，无菌水冲洗4次; b、将步骤a中处理后的种子接入培养基MS中，温度25士rC，光照1800LX，时间 14h/d进行萌发培养； c、将步骤b中苗龄40d的幼苗茎切成lcm的带节茎段接入培养基MS+6-BA1. Omg/ L+NAA0. lmg/L中，置于温度25士rC，光照1500LX，时间14h/d进行培养，分化系数达到
9. 6 ; d、将步骤c中2. Ocm的腋芽切下，接入培养基1/2MS+IBA0. 4mg/L中并于置于温度 25士rC，光照2000LX，时间12h/d条件下诱导生根，生根率达到100%。
实施例3 本实施例的操作步骤如下a、取黄蜀葵种子在超净工作台上用75%乙醇消毒 lmin，O. 1% Hgcl2灭菌10min，无菌水冲洗5次； b、将步骤a中处理后的种子接入培养基MS中，温度25士rC，光照1500LX，时间 10h/d进行萌发培养； c、将步骤b中苗龄50d的幼苗茎切成2cm的带节茎段接入培养基MS+6-BA1. 5mg/ L+NAA0. 2mg/L中，置于温度25± 1°C，光照2000LX，时间12h/d进行培养，分化系数达到
10. 2 ; d、将步骤c中2. 5cm的腋芽切下，接入培养基1/2MS+IBA0. 5mg/L中并于置于温度 25士rC，光照2000LX，时间14h/d条件下诱导生根，生根率达到100%。
实施例4 本实施例的操作步骤如下a、取黄蜀葵种子在超净工作台上用75%乙醇消毒 2min，0. 1% Hgcl2灭菌10min，无菌水冲洗5次; b、将步骤a中处理后的种子接入培养基MS中，温度25士rC，光照1800LX，时间 10h/d进行萌发培养； c、将步骤b中苗龄45d的幼苗茎切成2cm的带节茎段接入培养基MS+6-BA1. 5mg/ L+NAA0. 2mg/L中，置于温度25± 1°C，光照2000LX，时间12h/d进行培养，分化系数达到 10. 2 ; d、将步骤c中2. 5cm的腋芽切下，接入培养基1/2MS+IBA0. 5mg/L中并于置于温度 25士rC，光照1500LX，时间14h/d条件下诱导生根。
实施例5 本实施例的操作步骤如下a、取黄蜀葵种子在超净工作台上用75%乙醇消毒 2min， 0. 1 % Hgcl2灭菌9min，无菌水冲洗4次;
b、将步骤a中处理后的种子接入培养基MS中，温度25± 1°C ，光照2000LX，时间 13h/d进行萌发培养； c、将步骤b中苗龄30d的幼苗茎切成2cm的带节茎段接入培养基MS+6-BA1. 5mg/ L+NAAO. 2mg/L中，置于温度25±1°C，光照1800LX，时间12h/d进行培养，分化系数达到 10. 2 ; d、将步骤c中3cm的腋芽切下，接入培养基1/2MS+IBA0. 5mg/L中并于置于温度 25士rC，光照1800LX，时间13h/d条件下诱导生根，生根率达到100%。
权利要求
一种黄蜀葵组培快繁方法，其特征在于包括由种子获得无菌苗、芽的增殖、诱导芽生根三个步骤，在短时间里获得大量黄蜀葵的种苗。
2. 根据权利要求1所述的黄蜀葵的组培快繁方法，其特征在于诱导芽生根步骤如下将芽的增殖步骤中2. 0 3. 0cm的腋芽切下，接入培养基1/2MS+IBA0. 4 0. 6mg/L中并于 置于温度25士rC，光照1500 2000LX，时间10 14h/d条件下诱导生根。
3. 根据权利要求1或2所述的黄蜀葵组培快繁方法，其特征在于种子获得无菌苗步 骤如下取黄蜀葵种子在超净工作台上用75%乙醇消毒1 2min，0. 1% Hgcl2灭菌9 10min，无菌水冲洗4 5次；将上述处理后的种子接入培养基MS中，温度25士rC，光照 1500 2000LX，时间10 14h/d进行萌发培养。
4. 根据权利要求1或2所述的黄蜀葵组培快繁方法，其特征在于芽的增殖步骤 如下将所获无菌苗中苗龄25 50d的幼苗茎切成1 2cm的带节茎段接入培养基 MS+6-BA1. 0 1. 5mg/L+NAA0. 1 0. 2mg/L中，置于温度25士1。C，光照1500 2000LX，时 间14h/d进行培养。
全文摘要
本发明公开了一种锦葵科秋葵属植物黄蜀葵组培快繁方法，该方法是由种子获得无菌苗、芽的增殖、诱导芽生根三个步骤，在短时间里获得大量黄蜀葵的种苗。增殖步骤如下将苗龄25～50d的无菌幼苗茎切成1～2cm的带节茎段接入培养基MS+6-BA1.0～1.5mg/L+NAA0.1～0.2mg/L中，在一定温度、光照条件下进行培养；诱导芽生根步骤如下将芽的增殖步骤中1.0～2.0cm的腋芽切下，接入培养基1/2MS+IBA0.4～0.6mg/L中在一定温度、光照条件下诱导生根。本发明具有方法简单，繁殖速率高，稳定性强，培育周期短，产率高的优点，在实际生产应用中具有较强的可行性，适用于黄蜀葵的产业化生产。
文档编号A01H4/00GK101715729SQ20091018683
公开日2010年6月2日 申请日期2009年12月29日 优先权日2009年12月29日
发明者沈勇根, 胡冬南 申请人:江西农业大学