专利名称：：从怀槐中提取抑制木材腐朽菌提取物的方法
技术领域：
：本发明涉及一种用于抑制木材腐朽菌提取物的提取方法。
背景技术：
：木材容易受白腐菌、褐腐菌、球毛壳菌、宛氏拟青霉等细菌的侵害而腐烂，开发和提取具有天然防腐性能的植物化学成分，进行树木提取物的木材防腐研究，为实现木材的低毒保护和防腐工业的清洁生产奠定理论和技术基础，对保护和节约木材资源，推动木材防护科学与技术的进步，降低环境污染负荷，保护自然生态具有十分重大的经济价值和社会意义。
发明内容本发明所要解决的技术问题是为了解决木材容易受细菌侵害而腐烂的问题，提供了一种从怀槐中提取抑制木材腐朽菌提取物的方法。本发明从怀槐中提取抑制木材腐朽菌提取物的方法如下一、将风干后的怀槐心材粉碎至细度为40目60目，然后在32。C8(TC的条件下，按照心材质量与甲醇体积比为l:7的比例将心材在甲醇中浸提5h，过滤；二、在32'C8(TC的条件下，经过步骤一甲醇浸提后的心材的质量与甲醇的体积按照l:4的比例将心材在甲醇中浸提3h，过滤；三、合并步骤一和步骤二得到的滤液，减压蒸馏回收溶剂、在温度为45。C54。C、真空度为O.7MPa0.9MPa的条件下干燥至恒重，即得甲醇提取物；四、用丙酮替代甲醇重复步骤一至步骤三，得到丙酮提取物；五、将步骤三得到的甲醇提取物与步骤四得到的丙酮提取物混合，即得抑制木材腐朽菌的怀槐提取物。本发明方法所得的抑制木材腐朽菌的怀槐提取物对采绒革盖菌、密粘褶菌、球毛壳菌及宛氏拟青霉菌均有较好的抑制效果。本发明方法所得的抑制木材腐朽菌的怀槐提取物中含有14-甲基十五碳酸甲基酯、8，11-十八碳二烯酸甲基酯、n-十六烷酸、9，12-十八碳二烯酸、辛酸、邻苯二酚、苯酚、2-甲氧基苯酚、3-甲氧基苯酚、4-乙基，2-甲氧基苯酚、6-甲氧基邻苯二酚(3-甲氧基，1，2-苯二醇)、间苯二酚、2，6-二甲氧基苯酚、十七烷、癸烷、十九烷、二十烷、十六烷酸甲基酯、二十一烷、二十八烷、1，7-二甲基菲、9，10-二甲基蒽、2，3，5-三甲基菲、2-丙烯酸，3-(3，4-)二甲氧基苯甲基酯、2-丙烯酸，3-(3，4，5-)三甲氧基苯甲基酯、2，6，10，15，19，23-六甲基-2，6，10，14，18，22-二十四碳六烯和6-乙酰基屈二十七种成分。图l是具体实施方式一中所得抑制木材腐朽菌的怀槐提取物对采绒革盖菌的抑制效果图;图2是具体实施方式一中所得抑制木材腐朽菌的怀槐提取物对密粘褶菌的抑制效果图；图3是具体实施方式一中所得抑制木材腐朽菌的怀槐提取物对球毛壳菌的抑制效果图；图4是具体实施方式一中所得抑制木材腐朽菌的怀槐提取物对宛氏拟青霉菌的抑制效果图；图5是具体实施方式六中所得怀槐乙醚提取物对采绒革盖菌的抑制效果图；图6是具体实施方式六中所得怀槐乙醚提取物对密粘褶菌的抑制效果图；图7是具体实施方式六中所得怀槐乙醚提取物对球毛壳菌的抑制效果图；图8是具体实施方式六中所得怀槐乙醚提取物对宛氏拟青霉菌的抑制效果图；图9是具体实施方式七中所得抑制木材腐朽菌的怀槐提取物对采绒革盖菌的抑制效果图；图10是具体实施方式七中所得怀槐氯仿提取物对密粘褶菌的抑制效果图；图ll是具体实施方式七中所得怀槐氯仿提取物对球毛壳菌的抑制效果图；图12是具体实施方式七中所得怀槐氯仿提取物对宛氏拟青霉菌的抑制效果图；图13是具体实施方式八中所得怀槐去离子水提取物对采绒革盖菌的抑制效果图；图14是具体实施方式八中所得怀槐去离子水提取物对密粘褶菌的抑制效果图；图15是具体实施方式八中所得怀槐去离子水提取物对球毛壳菌的抑制效果图。具体实施方式本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。具体实施方式一本实施方式中从怀槐中提取抑制木材腐朽菌提取物的方法如下一、将风干后的怀槐心材粉碎至细度为40目60目，然后在32。C8(TC的条件下，按照心材质量与甲醇体积比为l:7的比例将心材在甲醇中浸提5h，过滤；二、在32。C8(TC的条件下，经过步骤一甲醇浸提后的心材的质量与甲醇的体积按照l:4的比例将心材在甲醇中浸提3h，过滤；三、合并步骤一和步骤二得到的滤液，减压蒸馏回收溶剂、在温度为45。C54。C、真空度为O.7MPa0.9MPa的条件下干燥至恒重，即得甲醇提取物；四、用丙酮替代甲醇重复步骤一至步骤三，得到丙酮提取物；五、将步骤三得到的甲醇提取物与步骤四得到的丙酮提取物混合，即得抑制木材腐朽菌的怀槐提取物。本实施方式步骤五中将步骤三得到的甲醇提取物与步骤四得到的丙酮提取物按照任意比混合。将本实施方式所得的抑制木材腐朽菌的怀槐提取物进行抑菌实验，具体实验过程如下a、将经过高压蒸汽灭菌后直径为10mm的滤纸片在无菌的条件下浸泡到抑制木材腐朽菌的怀槐心材提取物质量浓度为10%的乙醇溶液中，待完全浸透后，取出，风干，备用；b、用20mL0.9%的生理盐水分别将采绒革盖菌、密粘褶菌、宛氏拟青霉菌、球毛壳菌洗下，制成菌悬液备用；c、在超净工作台中取菌悬液lmL，分别放在培养皿中的培养基表面，将菌悬液涂匀，用灼烧过的镊子取步骤a中已经风干的滤纸片，在酒精灯附近放于培养基表面，每个培养基表面放23个即可；d、将培养皿密封，放入培养箱在29"C下进行培养和观察。本实施方式所用的密粘褶菌、球毛壳菌及宛氏拟青霉菌均购自广东省微生物研究所，所用的培养基为综合马铃薯培养基，其成分如下表物质名称用量马铃薯汁(Potatoextract)1000ml葡萄糖(glucose)20gffl2P043gMgsS04H201.5gVitaminB!(硫胺素)8mg琼脂20g由图l、图2、图3和图4可知本实施方式所得的抑制木材腐朽菌的怀槐提取物对采绒革盖菌、密粘褶菌、球毛壳菌及宛氏拟青霉菌均有较好的抑制效果。具体实施方式二本实施方式与具体实施方式一不同的是步骤一中将风干后的怀槐心材粉碎至细度为50目。其它与具体实施方式一相同。具体实施方式三本实施方式与具体实施方式一或二不同的是步骤一中在53'C的条件下浸提。其它与具体实施方式一或二相同。具体实施方式四本实施方式与具体实施方式一或二不同的是步骤一中在58"C的条件下浸提。其它与具体实施方式一或二相同。具体实施方式五本实施方式与具体实施方式一或二不同的是步骤三中在53。C、真空度为0.8MPa的条件下干燥至恒重。其它与具体实施方式一或二相同。具体实施方式六本实施方式与具体实施方式一不同的是从怀槐中采用乙醚提取提取物的方法如下一、将风干后的怀槐心材粉碎至细度为40目60目，然后在32。C8(TC的条件下，按照心材质量与乙醚体积比为l:7的比例将心材在乙醚中浸提5h，过滤；二、在32r8(TC的条件下，经过步骤一乙醚浸提后的心材的质量与乙醚的体积按照l:4的比例将心材在乙醚中浸提3h，过滤；三、合并步骤一和步骤二得到的滤液，减压蒸馏回收溶剂、在温度为45°C54°C、真空度为O.7MPa0.9MPa的条件下干燥至恒重，即得怀槐乙醚提取物。将本实施方式所得的怀槐乙醚提取物进行抑菌实验，具体实验过程如下e、将经过高压蒸汽灭菌后直径为10mm的滤纸片在无菌的条件下浸泡到怀槐乙醚提取物质量浓度为10%的乙醇溶液中，待完全浸透后，取出，风干，备用；f、用20mL0.9%的生理盐水分别将采绒革盖菌、密粘褶菌、宛氏拟青霉菌、球毛壳菌洗下，制成菌悬液备用；g、在超净工作台中取菌悬液lmL，分别放在培养皿中的培养基表面，将菌悬液涂匀，用灼烧过的镊子取步骤e中已经风干的滤纸片，在酒精灯附近放于培养基表面，每个培养基表面放13个即可；h、将培养皿密封，放入培养箱在29"C下进行培养和观察。本实施方式所用的密粘褶菌、球毛壳菌及宛氏拟青霉菌均购自广东省微生物研究所，所用的培养基为综合马铃薯培养基，其成分如下表<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>由图5图8可知，本实施方式得到的怀槐乙醚提取物的抑菌效果没有具体实施方式一所得抑制木材腐朽菌的怀槐提取物的抑菌效果好。具体实施方式七本实施方式与具体实施方式一不同的是从怀槐中采用氯仿提取提取物的方法如下一、将风干后的怀槐心材粉碎至细度为40目60目，然后在32。C8(TC的条件下，按照心材质量与氯仿体积比为l:7的比例将心材在氯仿中浸提5h，过滤；二、在32'C8(TC的条件下，经过步骤一氯仿浸提后的心材的质量与氯仿的体积按照l:4的比例将心材在氯仿中浸提3h，过滤；三、合并步骤一和步骤二得到的滤液，减压蒸馏回收溶剂、在温度为45°C54°C、真空度为O.7MPa0.9MPa的条件下干燥至恒重，即得怀槐氯仿提取物。将本实施方式所得的怀槐氯仿提取物进行抑菌实验，具体实验过程如下i、将经过高压蒸汽灭菌后直径为10mm的滤纸片在无菌的条件下浸泡到怀槐氯仿提取物质量浓度为10%的乙醇溶液中，待完全浸透后，取出，风干，备用；j、用20mL0.9%的生理盐水分别将采绒革盖菌、密粘褶菌、宛氏拟青霉菌、球毛壳菌洗下，制成菌悬液备用；k、在超净工作台中取菌悬液lmL，分别放在培养皿中的培养基表面，将菌悬液涂匀，用灼烧过的镊子取步骤i中已经风干的滤纸片，在酒精灯附近放于培养基表面，每个培养基表面放13个即可；1、将培养皿密封，放入培养箱在29"C下进行培养和观察。本实施方式所用的密粘褶菌、球毛壳菌及宛氏拟青霉菌均购自广东省微生物研究所，所用的培养基为综合马铃薯培养基，其成分如下表物质名称用量马铃薯汁(Potatoextract)1000ml葡萄糖(glucose)20gffl2P043gMgsS04H201.5gVitaminB!(硫胺素)8mg琼脂20g由图9图12可知，本实施方式得到的怀槐氯仿提取物的抑菌效果没有具体实施方式一所得抑制木材腐朽菌的怀槐提取物的抑菌效果好。具体实施方式八本实施方式与具体实施方式一不同的是从怀槐中采用去离子水提取提取物的方法如下一、将风干后的怀槐心材粉碎至细度为40目60目，然后在32。C8(TC的条件下，按照心材质量与去离子水体积比为l:7的比例将心材在去离子水中浸提5h，过滤；n、用20mL0.9%的生理盐水分别将采绒革盖菌、密粘褶菌、宛氏拟青霉菌、球毛壳菌洗下，制成菌悬液备用；o、在超净工作台中取菌悬液lmL，分别放在培养皿中的培养基表面，将菌悬液涂匀，用灼烧过的镊子取步骤m中已经风干的滤纸片，在酒精灯附近放于培养基表面，每个培养基表面放13个即可；P、将培养皿密封，放入培养箱在29"C下进行培养和观察。本实施方式所用的密粘褶菌、球毛壳菌及宛氏拟青霉菌均购自广东省微生物研究所，所用的培养基为综合马铃薯培养基，其成分如下表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>由图13图15可知，本实施方式得到的怀槐去离子水提取物的抑菌效果没有具体实施方式一所得抑制木材腐朽菌的怀槐提取物的抑菌效果好。具体实施方式九本实施方式中将具体实施方式一所得的抑制木材腐朽菌的怀槐提取物具体实施方式六所得的怀槐乙醚提取物具体实施方式七所得的怀槐氯仿提取物和具体实施方式八所得的怀槐去离子水提取物用于抑制采绒革盖菌、密粘褶菌、球毛壳菌和宛氏拟青霉菌的效果对比如下表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注"一"代表无抑菌效果；"+"代表有抑菌效果，增加代表抑菌效果增加。表1中A代表具体实施方式六所得的怀槐乙醚提取物，B代表具体实施方式七所得的怀槐氯仿提取物，C代表具体实施方式一所得的抑制木材腐朽菌的怀槐提取物，D代表具体实施方式八所得的怀槐去离子水提取物，由表l可知具体实施方式六所得的怀槐乙醚提取物、具体实施方式七所得的怀槐氯仿提取物和具体实施方式八所得的怀槐去离子水提取物用于抑制采绒革盖菌、密粘褶菌、球毛壳菌和宛氏拟青霉菌的效果均没有具体实施方式一所得的抑制木材腐朽菌的怀槐提取物用于抑制采绒革盖菌、密粘褶菌、球毛壳菌和宛氏拟青霉菌的效果好具体实施方式十本实施方式与具体实施方式一不同的是采用怀槐树皮替代心材分别采用乙醚、氯仿、丙酮、甲醇和去离子水提取提取物。其他与具体实施方式一相同。将本实施方式所得的5种提取物进行抑菌实验，5种提取物的抑菌效果如表2:表2提取溶剂药液浓度采绒革盖菌密粘褶菌球毛壳菌宛氏拟青霉E10%————F10%———+G10%————H10%———+I10%——++注"一"代表无抑菌效果；"+"代表有抑菌效果，增加代表抑菌效果增加。表2中E代表怀槐树皮的乙醚提取物，F代表怀槐树皮的氯仿提取物，G代表怀槐树皮的丙酮提取物，H代表怀槐树皮的甲醇提取物，I代表怀槐树皮的去离子水提取物，由表l和表2的对比看出怀槐树皮的乙醚提取物、怀槐树皮的氯仿提取物、怀槐树皮的丙酮提取物、怀槐树皮的甲醇提取物及怀槐树皮的去离子水提取物均没有具体实施方式一所得的抑制木材腐朽菌的怀槐提取物的抑菌效果好。权利要求1.从怀槐中提取抑制木材腐朽菌提取物的方法，其特征在于从怀槐中提取抑制木材腐朽菌提取物的方法如下一、将风干后的怀槐心材粉碎至细度为40目～60目，然后在32℃～80℃的条件下，按照心材质量与甲醇体积比为1∶7的比例将心材在甲醇中浸提5h，过滤；二、在32℃～80℃的条件下，经过步骤一甲醇浸提后的心材的质量与甲醇的体积按照1∶4的比例将心材在甲醇中浸提3h，过滤；三、合并步骤一和步骤二得到的滤液，减压蒸馏回收溶剂、在温度为45℃～54℃、真空度为0.7MPa～0.9MPa的条件下干燥至恒重，即得甲醇提取物；四、用丙酮替代甲醇重复步骤一至步骤三，得到丙酮提取物；五、将步骤三得到的甲醇提取物与步骤四得到的丙酮提取物混合，即得抑制木材腐朽菌的怀槐提取物。2.根据权利要求l所述的从怀槐中提取抑制木材腐朽菌提取物的方法，其特征在于步骤一中将风干后的怀槐心材粉碎至细度为50目。3.根据权利要求1或2所述的从怀槐中提取抑制木材腐朽菌提取物的方法，其特征在于步骤一中在53"C的条件下浸提。4.根据权利要求1或2所述的从怀槐中提取抑制木材腐朽菌提取物的方法，其特征在于步骤一中在58"C的条件下浸提。5.根据权利要求1或2所述的从怀槐中提取抑制木材腐朽菌提取物的方法，其特征在于步骤三中在53。C、真空度为0.8MPa的条件下干燥至恒重。全文摘要从怀槐中提取抑制木材腐朽菌提取物的方法，它涉及一种用于抑制木材腐朽菌提取物的提取方法。本发明解决了木材容易受细菌侵害而腐烂的问题。本发明方法如下一、将风干后的怀槐心材甲醇中浸提5h，过滤，再在甲醇中浸提3h，过滤，合并滤液，减压蒸馏回收溶剂、干燥至恒重，即得甲醇提取物；二、用丙酮替代甲醇重复步骤一，得到丙酮提取物；三、将甲醇提取物与丙酮提取物混合，即得抑制木材腐朽菌的怀槐提取物。本发明方法所得的抑制木材腐朽菌的怀槐提取物对采绒革盖菌、密粘褶菌、球毛壳菌及宛氏拟青霉菌均有较好的抑制效果。本发明方法所得的抑制木材腐朽菌的怀槐提取物中含有二十七种成分。文档编号A01N65/20GK101653152SQ20091030761公开日2010年2月24日申请日期2009年9月24日优先权日2009年9月24日发明者坚李,李淑君,杨冬梅,苏文强申请人:东北林业大学