专利名称：：全雌美国切片型黄瓜美雌09的培育及应用的制作方法
技术领域：
：本发明全雌美国切片型黄瓜美雌09的培育及应用，属于生物技术育种领域，专用于培育全雌型黄瓜新品种。二
背景技术：
：黄瓜是全球普遍栽培的主要蔬菜作物之一，其栽培面积在我国保护地蔬菜中居首位，对保证我国蔬菜周年均衡供应方面具有十分重要的作用。黄瓜是雌雄同株异花的一年生植物。在幼苗期就发生花芽，并进行花芽的性型分化。花一般为单性花，但有的除雌花、雄花外还有完全花。其植株性型有纯雌株、雌雄同株、纯雄株、、纯全株、雄全同株、雌雄全同株。其中以纯雌株和雌雄同株为主(JackE.Staub，MatthewD.Robbins，ToddC.Wehner.VegetablesI.HandbookofPlantBreeding.[M].SpringerNewYork,2008:250)。就品种或株系而言，大致有纯雌株系、纯强雌株系、雌性系、雌全株系、雄全株系、完全株系、纯雌雄株系、纯雄株系等.其中雌性系和雌雄株系被广泛使用。(张春平，何平，曲志才，等.硝酸银对黄瓜雌性系的诱雄效应.西南大学学报(自然科学版)，2007，29(2):4952)。黄瓜的性型是影响其产量的重要因素，全雌型黄瓜是指植株只开雌花而不开雄花的品系，往往表现出早熟、瓜密、丰产等优点。另外，利用全雌型黄瓜制一代杂种无需去雄，节约了劳动力，降低了制种成本，所制成的一代杂种的纯度很高。用全雌型黄瓜作母本配制的一代杂种也多表现早熟、雌花多、采瓜期集中、丰产等优点。因此全雌型黄瓜的选育与应用便成为黄瓜育种中一个重要的研究内容。但是目前国内黄瓜的全雌型品种主要是从国外引进的欧洲温室型黄瓜，生态型较为单一，不能满足生产和育种的需要。本课题组前期研究发现，黄瓜的全雌性状主要由一对核基因控制，全雌对弱雌为显性。当全雌性位点处于纯合状态时，全雌性状表现稳定，不易受到光温等环境因素的影响。而当全雌性位点处于杂合状态时，其全雌性状的表现与遗传背景有着一定的关系，部分生态类型杂合时表现稳定的全雌性，而另外部分生态类型易受光温等环境因素的影响，出现不完全显性特征，在植株基部出现少量的雄花，但总体的雌性表现均很强。(娄群峰，黄瓜全雌性基因分子标记及ACC合酶基因的克隆与表达研究[M].二零零四届博士学位论文)所以，通过与雌性系黄瓜杂交、回交、自交的方式，把全雌性基因转育到非全雌性系黄瓜当中，是培育雌性稳定的黄瓜新品种，拓宽全雌型黄瓜的生态型，提高全雌型黄瓜的利用率的有利途径。三、
发明内容技术问题本发明是针对当前全雌美国切片型的黄瓜品种资源少，生态型不够丰富的现状，在黄瓜雌性基因为显性核基因的基础上，充分利用此基因增加雌性系黄瓜的品种，以提高黄瓜产量、增加育种的亲本材料。技术方案全雌美国切片型黄瓜美雌09的培育方法，包括1)全雌型黄瓜由荷兰RijkZwaan公司购得的黄瓜一代杂种Deltastar，经6代自交选育出稳定的雌性系EC1，EC1为欧洲温室型黄瓜，是雌性基因纯合的全雌型高代自交系，其长势中等，主蔓长2-2.5米，节间长7-9厘米；平均叶面积为20X21厘米，叶绿色，近三角形；商品瓜为绿色，呈圆筒形，瓜长14-16厘米，瓜粗2.5-3厘米，果实表面光滑无剌或极少剌，主侧蔓均可结瓜，种瓜呈黄绿色；2)雌雄同株型黄瓜627是由黄瓜商品种Poinsett97自交7代得到的稳定高代自交系，627为美国切片型黄瓜，雌雄同株，植株长势强，节间长9.5-12.5厘米，茎粗0.75-0.9厘米，平均叶面积为22X23厘米，叶片深绿色，呈心形五角，以主蔓结瓜为主，商品瓜深绿色，瓜条极短，呈圆筒形，瓜剌稀疏白色，瓜长14.5-17.5厘米，宽4.0-4.7厘米;3)全雌基因转育将全雌型黄瓜EC1和雌雄同株型黄瓜627同时进行浸种、催芽、播种、定植及正常的植株管理；在开花期，以EC1为母本，以627为父本，进行杂交得F1，具体操作为在授粉前一天下午，将第二天要开放的EC1的雌花蕾和627的雄花蕾进行套花隔离，开花当天上午8点，将627的雄花花粉授到EC1的雌花柱头上，3朵雄花授一朵雌花，并继续对授粉后的雌花隔离三天；将杂种Fl与627黄瓜回交，然后选择回交后代中的全雌单株继续与627黄瓜回交，至回交3代BC3F1;选BC3F1的全雌单株进行硝酸银诱雄处理，具体操作为当全雌植株长至5-6片真叶时，未出现花蕾或未出现雄花蕾的植株即为全雌型植株，在下午4点左右用浓度为300mg/L的硝酸银水溶液对茎尖及叶面喷雾，至叶片布满小水滴为止，每隔三天处理一次，处理二次，然后将该全雌单株进行自交得BC3F2;在BC3F2中继续选择全雌单株进行诱雄，自交得BC3F3;在BC3F3中选择全雌型的株系，将植株按1:1诱雄后进行系内自交，所收的种子即为全雌型黄瓜新品种美雌09，美雌09植株为全雌型，植株长势强，节间长7.5-9.0厘米，茎粗0.55-0.6厘米，叶片深绿色，平均最大叶片面积为21X20.5厘米，第一雌花节位在6_9节，以后每节均有一朵雌花出现，商品瓜极短为圆筒形，瓜色为深绿色，瓜剌稀疏白色，平均瓜长12.5-14.5厘米，粗3.0-3.5厘米，主侧蔓均可结瓜。全雌单株的选择标准为全株上下均为雌花，无一朵雄花。全雌型黄瓜新品种美雌09用于黄瓜杂交种培育的方法，包括美雌09与普通栽培黄瓜按3:l种植，并进行正常的植株管理，在开花期进行隔离，然后以美雌09为母本，普通栽培黄瓜为父本进行人工授粉或蜜蜂授粉，采收美雌09的成熟果实，待果实后熟后进行剖瓜洗种子，将种子晾晒烘干，即得到高纯度的杂种一代种子。有益效果本发明全雌美国切片型黄瓜美雌09的培育及其应用方法，与现有技术相比，具有如下优点和积极效果本发明是利用杂交、多代回交及自交的方式将全雌性基因转育到雌雄同株型美国切片型黄瓜627当中。由此获得的黄瓜新品种美雌09全雌性状能稳定遗传，且与回交亲本627的性状基本一致。通过此方法，将一雌雄同株型的美国切片型黄瓜转育为稳定的全雌切片型黄瓜新品种。由此拓宽了全雌型黄瓜的生态类型，提高了黄瓜的产量，增加了培育杂种Fl的亲本材料。通过田间观察，黄瓜新品种美雌09为全雌型，植株长势强，节间长7.5-9.0厘米，茎粗0.55-0.6厘米，叶片深绿色，平均最大叶片面积为21X20.5厘米，第一雌花节位在6_9节，以后每节均有一朵雌花出现，商品瓜极短为圆筒形，瓜色为深绿色，瓜剌稀疏白色，平均瓜长12.5-14.5厘米，粗3.0-3.5厘米，主侧蔓均可结瓜。美雌09可作为优良的栽培品种，也可作为亲本配制杂种一代种子。四图1全雌美国切片型黄瓜美雌09的培育技术路线图。生物材料保藏全雌美国切片型黄瓜美雌09，2009年12月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNO.3541，分类命名为黄瓜(Cucumissativus)。五具体实施例方式全雌美国切片型黄瓜美雌09的培育方法，包括1、亲本的来源及性状(以下性状描述参考李锡香，朱德蔚，等.黄瓜种质资源描述规范和数据标准[M].北京中国农业出版社，2005.8-34)1)全雌型黄瓜由荷兰RijkZwaan公司购得的黄瓜一代杂种Deltastar，经6代自交选育出稳定的雌性系EC1，EC1为欧洲温室型黄瓜，是雌性基因纯合的全雌型高代自交系，其长势中等，主蔓长2-2.5米；节间长7-9厘米；平均叶面积为20X21厘米，叶绿色，近三角形，商品瓜为绿色，呈圆筒形，瓜长14-16厘米，瓜粗2.5-3厘米，果实表面光滑无剌或极少剌，主侧蔓均可结瓜，种瓜呈黄绿色。2)雌雄同株型黄瓜627是由黄瓜商品种Poinsett97(市售品种，杨寅桂等.黄瓜苗期热害症状及其发生发展规律研究[J].中国瓜菜，2007，(05).)自交7代得到的稳定高代自交系，627为美国切片型黄瓜，雌雄同株，植株长势强，节间长9.5-12.5厘米，茎粗0.75-0.9厘米，平均叶面积为22X23厘米，叶片深绿色，呈心形五角，以主蔓结瓜为主，商品瓜深绿色，瓜条极短，呈圆筒形，瓜剌稀疏白色，瓜长14.5-17.5厘米，宽4.0-4.7厘米。2、全雌基因的具体转育过程将全雌型黄瓜EC1和雌雄同株型黄瓜627同时进行浸种、催芽、播种、定植及正常的植株管理。在开花期，以EC1为母本，以627为父本，进行杂交得Fl，具体操作为在授粉前5一天下午，将第二天要开放的EC1的雌花蕾和627的雄花蕾进行套花隔离，开花当天上午8点，将627的雄花花粉授到EC1的雌花柱头上，3朵雄花授一朵雌花，并继续对授粉后的雌花隔离三天。将杂种Fl与627黄瓜回交，然后选择回交后代中的全雌单株继续与627黄瓜回交，至回交3代BC3F1。选BC3F1的全雌单株进行硝酸银诱雄处理，具体操作为当全雌植株长至5-6片真叶时，未出现花蕾或未出现雄花蕾的植株即为全雌型植株，在下午4点左右用浓度为300mg/L的硝酸银水溶液对茎尖及叶面喷雾，至叶片布满小水滴为止，每隔三天处理一次，处理二次，然后将该全雌单株进行自交得BC3F2。在BC3F2中继续选择全雌单株进行诱雄，自交得BC3F3。在BC3F3中选择全雌型的株系，将植株按1:1诱雄后进行系内自交，所收的种子即为全雌型黄瓜新品种美雌09。3、全雌型黄瓜新品种美雌09的特性美雌09基本具有美国切片型黄瓜627的性状，但也具有个别EC1的性状，及一些中间或超亲性状。美雌09植株为全雌型，植株长势强，节间长7.5-9.0厘米，茎粗0.55-0.6厘米，叶片深绿色，平均最大叶片面积为21X20.5厘米，第一雌花节位在6-9节，以后每节均有一朵雌花出现，商品瓜极短为圆筒形，瓜色为深绿色，瓜剌稀疏白色，平均瓜长12.5-14.5厘米，粗3.0-3.5厘米，主侧蔓均可结瓜。4、全雌型黄瓜新品种美雌09的应用美雌09与配合力高的普通栽培黄瓜按3:l种植，并进行正常的植株管理。在开花期进行隔离，然后以美雌09为母本，普通栽培黄瓜为父本进行人工授粉或蜜蜂授粉。采收美雌09的成熟果实，待果实后熟后进行剖瓜洗种子，将种子晾晒烘干，即得到高纯度的杂种一代种子。权利要求全雌美国切片型黄瓜美雌09的培育及应用，包括1)全雌型黄瓜由黄瓜Deltastar经6代自交选育出的稳定的雌性系EC1，EC1为欧洲温室型黄瓜，是雌性基因纯合的全雌型高代自交系，其长势中等，主蔓长2-2.5米；节间长7-9厘米；平均叶面积为20×21厘米，叶绿色，近三角形，商品瓜为绿色，呈圆筒形，瓜长14-16厘米，瓜粗2.5-3厘米，果实表面光滑无刺或极少刺，主侧蔓均可结瓜，种瓜呈黄绿色；2)雌雄同株型黄瓜627是黄瓜商品种Poinsett97自交7代得到的稳定高代自交系，627为美国切片型黄瓜，雌雄同株，植株长势强，节间长9.5-12.5厘米，茎粗0.75-0.9厘米，平均叶面积为22×23厘米，叶片深绿色，呈心形五角，以主蔓结瓜为主，商品瓜深绿色，瓜条极短，呈圆筒形，瓜刺稀疏白色，瓜长14.5-17.5厘米，宽4.0-4.7厘米；3)全雌基因转育将全雌型黄瓜EC1和雌雄同株型黄瓜627同时进行浸种、催芽、播种、定植及正常的植株管理；在开花期，以EC1为母本，以627为父本，进行杂交得F1，具体操作为在授粉前一天下午，将第二天要开放的EC1的雌花蕾和627的雄花蕾进行套花隔离，开花当天上午8点，将627的雄花花粉授到EC1的雌花柱头上，3朵雄花授一朵雌花，并继续对授粉后的雌花隔离三天；将杂种F1与627黄瓜回交，然后选择回交后代中的全雌单株继续与627黄瓜回交，至回交3代BC3F1；选BC3F1的全雌单株进行硝酸银诱雄处理，具体操作为当全雌植株长至5-6片真叶时，未出现花蕾或未出现雄花蕾的植株即为全雌型植株，在下午4点左右用浓度为300mg/L的硝酸银水溶液对茎尖及叶面喷雾，至叶片布满小水滴为止，每隔三天处理一次，处理二次，然后将该全雌单株进行自交得BC3F2；在BC3F2中继续选择全雌单株进行诱雄，自交得BC3F3；在BC3F3中选择全雌型的株系，将植株按1∶1诱雄后进行系内自交，所收的种子即为全雌型黄瓜新品种美雌09，美雌09植株为全雌型，植株长势强，节间长7.5-9.0厘米，茎粗0.55-0.6厘米，叶片深绿色，平均最大叶片面积为21×20.5厘米，第一雌花节位在6-9节，以后每节均有一朵雌花出现，商品瓜极短为圆筒形，瓜色为深绿色，瓜刺稀疏白色，平均瓜长12.5-14.5厘米，粗3.0-3.5厘米，主侧蔓均可结瓜。2.根据权利要求l所述的方法，其特征在于全雌单株的选择标准为全株上下均为雌花，无一朵雄花。3.权利要求1或2所述全雌型黄瓜新品种美雌09用于黄瓜杂交种的选育方法，包括美雌09与普通栽培黄瓜按3:l种植，并进行正常的植株管理，在开花期进行隔离，然后以美雌09为母本，普通栽培黄瓜为父本进行人工授粉或蜜蜂授粉，采收美雌09的成熟果实，待果实后熟后进行剖瓜洗种子，将种子晾晒烘干，即得到高纯度的杂种一代种子。全文摘要本发明涉及全雌美国切片型黄瓜美雌09的培育及其应用，属于生物技术育种领域。将全雌型欧洲温室型黄瓜EC1与雌雄同株型美国切片型黄瓜627杂交，所得F1与627回交，在回交后代中选择全雌单株与雌雄同株型黄瓜亲本627连续回交3代，选择BC3F1的全雌单株自交，在BC3F2中选择全雌单株继续自交，最后选择BC3F3均为全雌型植株的株系，把该株系黄瓜混合授粉，获得生长势强、优质高产的全雌美国切片型黄瓜新品种美雌09。将美雌09与普通栽培黄瓜杂交可获得种子纯度高且具有较强杂种优势的全雌型黄瓜品种。文档编号A01H1/02GK101755671SQ20101001767公开日2010年6月30日申请日期2010年1月12日优先权日2010年1月12日发明者娄群峰,张淑霞,钱春桃,陈劲枫申请人:南京农业大学