专利名称：一种含有复合微生物菌群的矿物肥料及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种含有复合微生物菌群的矿物肥料，这种肥料可以为作物生长提供 营养；预防和治疗作物因缺钙和镁而引起的生理性病害；同时复合微生物菌群适应性强、 性能稳定，具有固氮、解磷、解钾等多种功能，能改变固氮宿主专一性，对人畜无任何副作 用，对土质不构成污染；农作物施用后各项指标达到绿色食品要求并能增产、提高品质。
背景技术：
化学肥料对现代农业的生产发展和保障人类粮食安全奠定了物质基础，然而化肥 的低利用率和由此带来的高环境风险一直是困扰全球的重大问题。因此，世界各国都在积 极探索提高肥料利用率、遏止环境污染的方法和途径，最近20年则主要是通过改变养分释 放特性、改善肥料功能等来达到上述目的。 一是通过肥料养分释放模式改性，提高肥效，减 少污染；二是通过有机无机肥料复合化，提高肥效，减少污染；三是通过发展配方肥与改善 肥料功能，提高肥效，减少污染。尤其是对有机无机肥料复合化的研究与开发，已经成为当 前的热点。 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn)，芽孢杆菌属的一种。其菌 体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质 对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用；能迅速消耗环境中的游离氧，造 成低氧环境，促进有益厌氧菌生长，并产生有机酸类，间接抑制其它致病菌生长；剌激免疫 器官的生长发育，增强细胞免疫功能，提高群体免疫力；其菌体自身合成a-淀粉酶、蛋白 酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类，与消化酶类一同发挥作用；能合成维生素B1、 B2、 B6、烟酸等 多种B族维生素，提高干扰素和巨噬细胞的活性。 胶冻样芽胞杆菌(Bacillus mucilaginosus)，俗称钾细菌是农田中常见的一种土 壤细菌。五十年代初，苏联学者亚历山大罗夫首先报导从土壤中分离到此种特殊细菌，不仅 有活化硅酸盐矿物中钾素的能力，而且还能利用磷灰石中磷素和固定大气氮素，因而称为 硅酸盐细菌。胶质芽胞杆菌对磷钾矿物有利用和分解能力，但在短时间内释放出的速效磷 钾含量并不高，特别是以对钾长石的分解能力更低，这与此类岩石矿物的特殊结构有关。胶 质芽胞杆菌还具有固氮能力和PGPR作用(在植物根际生活的一类具有剌激植物生长和抑 制植物病原菌等综合作用的细菌群，简称PGPR)。 白云石是碳酸盐矿物，化学成分为CaMg[C03]2。白云石矿主要成分为碳酸钙和碳 酸镁。是生产钙镁磷肥的主要矿物原料之一，同时含有丰富的铁、锰、锌等微量元素，补充作 物对微量元素的需求。 钙元素是作物正常生长发育不可缺少的营养元素，合理使用钙肥，尤其在喜钙作 物如苹果、番茄、大白菜等作物需钙关键时期使用可以有效预防和治疗作物因缺钙而引起 的生理性病害，为高产优质打下基础。 钙在生物膜中可作为磷脂的磷酸根和蛋白质的羧基间联系的桥梁，因而可以维持 膜结构的稳定性。钙是构成细胞壁的一种元素，细胞壁的胞间层是由果胶酸钙组成的。缺钙时，细胞壁形成受阻，影响细胞分裂，或者不能形成新细胞壁，出现多核细胞。因此缺钙时生 长受抑制，严重时幼嫩器官(根尖、茎端)溃烂坏死。钙对植物抗病有一定作用。据报道， 至少有40多种水果和蔬菜的生理病害是因缺钙引起的，如大白菜缺钙时心叶呈褐色。苹果 在幼果期缺钙可以引起痘斑病和裂果病。钙也是一些酶的活化剂，如由ATP水解酶、磷脂水 解酶等酶催化的反应都需要钙离子的参与。钙在植物体内呈离子状态存在，主要存在于叶 子或老的器官和组织中，它是一个非常难移动的元素。因此，传统钙肥料产品吸收性能差， 无法完全满足补充钙元素的需要。 镁是植物叶绿素的组成成分，它是叶绿素分子中唯一的金属元素；镁是多种酶的 活化剂；镁是聚核糖体的必要成分，还能促进作物体内维生素A、C的形成。因此，施用镁肥 能促进农作物的光合作用，促进蛋白质的合成，提高农作物的产量和改善农产品的品质。另 据报道，镁还能促进植物对硅的吸收，有利于防止病菌侵入；还能减少植物对锰的吸收，减 轻锰过多时的病害作用；当施低浓度的镁时还能促进钙的吸收。在作物镁的分布一般以种 子含量最高，茎叶次之，根最少。 一般来说，豆科作物比禾本科作物含镁高，块根作物镁的吸 收量通常是禾谷类作物的2倍。大田作物的水稻、花生、芝麻、经济作物类的柑桔、香蕉、菠 萝、烟草以及蔬菜中的马铃薯、番茄都是需镁较多的作物。 近年来，我国南方出现了由于缺镁引起水稻黄叶造成减产的现象。随着农牧业的 发展，施肥水平和高浓度化肥的逐年增长，对镁的要求日趋明显，尤其是在降水量多的酸性 砂质土地区。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种含有复合微生物菌群的矿物肥料。
本发明的技术方案如下一种含有复合微生物菌群的矿物肥料，其特征在于通
过用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)和胶冻样芽胞杆菌(Bacillus
mucilaginosus)扩接培养发酵吸附制得的复合微生物菌剂，将白云石粉、锰矿石粉、硫酸
锌、硼润土和复合微生物菌剂混合粉碎制成矿物肥料，其中组份及其重量份数为白云石粉
70——95、锰矿石粉l-5、硫酸锌l-5、硼润土 2-10、复合微生物菌剂1_10。 所述的复合微生物菌剂由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn)
和胶冻样芽胞杆菌(Bacillus mucilaginosus)单独扩接培养发酵，发酵后的菌液用草炭吸
附，将两种吸附后的单一菌剂按照l : 1的比例混合、粉碎，水分保持在30%以内，得复合微
生物菌剂。 所述的白云石粉，是白云石由粉碎机粉碎、研磨成颗粒小于或等于60目的白云石 粉。 所述的锰矿石粉，是锰矿石由粉碎机粉碎、研磨成颗粒小于或等于60目的锰矿石 粉。 所述的膨润土 (Bentonite)按译音，是以蒙脱石为主的含水粘土矿，公学分子式 为Nax(H20)4(AI2-xMg0. 83) Si4010) (0H)2，由于它具有特殊的性质。如膨润性、粘结性、 吸附性、催化性、触变性、悬浮性以及阳离子交换性等等，所以广泛用于各个工业领域。因而 人们称之为"万能土"。 本发明另一个目的是提供一种含有复合微生物菌群的矿物肥料的制备方法，其特征在于包括以下步骤 A.枯草芽孢杆菌菌剂的制备 1)将试管斜面保藏法保藏的枯草芽孢杆菌菌种取出，扩接至新鲜的试管牛肉膏蛋 白胨斜面培养基上，于3(TC培养箱中2-4天培养成熟后，备用； 2)采用该菌的液体专有培养基配方(牛肉膏5g，蛋白胨5g， NaCl 5g， pH7. 2，水 1L)配制培养液，盛装容器中灭菌，待置常温后，将步骤l)得到培养成熟后的的菌种接种 于摇瓶中，摇床培养；菌液菌数达到20亿/ml以上，生长期处于对数生长阶段，即为成熟种 子，将其合并装入接种瓶，备进入发酵阶段；种子液的量以一级发酵罐容积为基准，接种量
0. 1% _10%之间； 3)按照所给发酵液配方(淀粉10kg豆饼粉10kg蛋白胨lkg (NH4) 2S04 lkg KH2P04 0.5kg酵母粉0. lkg CaC03 5.0kg pH 7. 5水IT)配制发酵培养基，通过高压蒸汽灭菌， 利用循环冷却水将发酵液冷却至28°C _301:，期间始终保持罐内为正压状态，表压控制在 0. 05Mpa ;采用压差法将种子液压入发酵罐，控制压力0. 05Mpa，温度28。C，无菌空气通气量 为罐容积的0. 5-1倍； 4)待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养条件同上，当发 酵液达到质量指标5-6. 0，发酵液菌数达到20亿/ml以上，芽孢率为80%时，即为发酵 结束，放入已灭菌的储液罐中，备用； 5)将无菌草炭(含水量《15%，细度80目筛通过率80%)与发酵液以3至5 : 1 适当比例吸附，混合均匀，控制含水量《20%，有效活菌数> 2亿/g，得枯草芽孢杆菌菌剂 产品，备用； B.胶冻样芽胞杆菌菌剂的制备 1)将试管斜面保藏法保藏的胶冻样芽胞杆菌菌种取出，扩接至新鲜的试管牛肉膏 蛋白胨斜面培养基上，于3(TC培养箱中2-4天培养成熟后，备用； 2)采用该菌的液体专有培养基配方(牛肉膏5g，蛋白胨5g， NaCl 5g， pH7. 2，水 1L)配制培养液，盛装容器中灭菌，待置常温后，将步骤1)得到培养成熟后的的菌种接种于 摇瓶中，摇床培养。菌液菌数达到20亿/ml以上，生长期处于对数生长阶段，即为成熟种 子，将其合并装入接种瓶，备进入发酵阶段；种子液的量以一级发酵罐容积为基准，接种量
0. 1% _10%之间； 3)按照所给发酵液配方(淀粉10kg豆饼粉10kg蛋白胨lkg (NH4) 2S04 lkg KH2P04 0.5kg酵母粉0. lkg CaC03 5.0kg pH 7. 5水IT)配制发酵培养基，通过高压蒸汽灭菌， 利用循环冷却水将发酵液冷却至28°C _301:，期间始终保持罐内为正压状态，表压控制在 0. 05Mpa左右。采用压差法将种子液压入发酵罐，控制压力0. 05Mpa，温度28。C，无菌空气通 气量为罐容积的O. 5-1倍； 4)待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养条件同上，当发 酵液达到质量指标5-6. 0，发酵液菌数达到20亿/ml以上，芽孢率为80%时，即为发酵 结束，放入已灭菌的储液罐中，备用； 5)将无菌草炭(含水量《15%，细度80目筛通过率80%)与发酵液以3至5 : 1 适当比例吸附，混合均匀，控制含水量《20%，有效活菌数> 2亿/g，得胶冻样芽胞杆菌菌 剂产品，备用；
C.复合微生物菌剂制备将步骤A制备的枯草芽孢杆菌菌剂和步骤B制备的胶冻 样芽胞杆菌菌剂按照l : 1的比例混合、粉碎，水分保持在30%以内，得复合微生物菌剂，备 用； D.本发明产品的制备，按组份及其重量份数为白云石粉70——95、锰矿石粉 l-5、硫酸锌l-5、硼润土 2-10和复合微生物菌剂1-10分别称重置于搅拌机搅拌混合1—— 2小时，在温度10-55t:、pH值5-10. 5条件下，经造粒机造粒、烘干机烘干、分筛机分筛制成 本发明所述的一种含有复合微生物菌群的矿物肥料。 在具体实施方案中，本发明的一种含有复合微生物菌群的矿物肥料采用如下具体 步骤制备 A.枯草芽孢杆菌菌剂的制备1)将试管斜面保藏法保藏于4t:冰箱的枯草芽孢杆菌菌种取出，扩接至新鲜的试
管牛肉膏蛋白胨斜面培养基上，于3(TC培养箱中2-4天培养成熟后，备用；
2)采用该菌的液体专有培养基配方(牛肉膏5g，蛋白胨5g， NaCl 5g， pH7. 2， 水1L)配制培养液，盛装容量以容器的1/5为宜，(如500ml三角瓶装液量100ml)表压 0. lMpa-O. 15Mpa(12rC _125°C )下0. 5h灭菌，待置常温后，将步骤1)得到培养成熟后的的 菌种接种于摇瓶中，于28°C 160rpm 180rpm摇床培养；菌液菌数达到20亿/ml以上，生 长期处于对数生长阶段，即为成熟种子，将其合并装入接种瓶，备进入发酵阶段；种子液的 量以一级发酵罐容积为基准，接种量O. 1% _10%之间； 3)按照所给发酵液配方(淀粉10kg豆饼粉10kg蛋白胨lkg (NH4) 2S04 lkg KH2P04 0.5kg酵母粉O. lkg CaC03 5.0kg pH 7. 5水IT)配制发酵培养基，装液量以发酵罐容量的 80%为宜，通过高压蒸汽灭菌，表压0. IMpa-O. 15Mpa(12rC _125°C )下维持lh ;利用循环 冷却水将发酵液冷却至28°C _301:，期间始终保持罐内为正压状态，表压控制在0. 05Mpa ; 采用压差法将种子液压入发酵罐，控制压力0. 05Mpa，温度2『C，无菌空气通气量为罐容积 的0. 5-1倍； 4)待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养条件同上；当 发酵液达到质量指标5-6. O，发酵液菌数达到20亿/ml以上时，即为发酵结束，放入已 灭菌的储液罐中备用，此为枯草芽孢杆菌发酵液； 5)将无菌草炭(含水量《15%，细度80目筛通过率80% )与枯草芽孢杆菌发酵 液以3至5 : l适当比例吸附，混合均匀，控制含水量《20X，有效活菌数^2亿/g，得枯 草芽孢杆菌菌剂产品，备用；
B.胶冻样芽胞杆菌菌剂的制备1)将试管斜面保藏法保藏于4t:冰箱的胶冻样芽胞杆菌菌种取出，扩接至新鲜的
试管牛肉膏蛋白胨斜面培养基上，于30°C培养箱中2-4d培养成熟后，备用；
2)采用该菌的液体专有培养基配方(牛肉膏5g，蛋白胨5g， NaCl 5g， pH7. 2， 水1L)配制培养液，盛装容量以容器的1/5为宜，(如500ml三角瓶装液量100ml)表压 0. IMpa-O. 15Mpa(12rC _125°C )下0. 5h灭菌，待置常温后，将步骤1)得到培养成熟后的的 菌种接种于摇瓶中，于28°C 160rpm 180rpm摇床培养。菌液菌数达到20亿/ml以上，生 长期处于对数生长阶段，即为成熟种子，将其合并装入接种瓶，备进入发酵阶段。种子液的 量以一级发酵罐容积为基准，接种量O. 1% -10%之间；
3)按照所给发酵液配方(淀粉10kg豆饼粉10kg蛋白胨1kg (NH4) 2S04 1kg KH2P04 0.5kg酵母粉0. lkg CaC03 5.0kg pH 7. 5水IT)配制发酵培养基，装液量以发酵罐容量的 80%为宜，通过高压蒸汽灭菌，表压0. IMpa-O. 15Mpa(12rC _125°C )下维持lh。利用循环 冷却水将发酵液冷却至28°C _301:，期间始终保持罐内为正压状态，表压控制在0. 05Mpa ; 采用压差法将种子液压入发酵罐，控制压力0. 05Mpa，温度2『C，无菌空气通气量为罐容积 的0. 5-1倍； 4)待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养条件同上。当发 酵液达到质量指标ra5. 5-6. O，发酵液菌数达到20亿/ml以上时，即为发酵结束，放入已灭 菌的储液罐中备用，此为胶冻样芽胞杆菌发酵液； 5)将无菌草炭(含水量《15%，细度80目筛通过率80% )与胶冻样芽胞杆菌发 酵液以3至5 : l适当比例吸附，混合均匀，控制含水量《20%，有效活菌数> 2亿/g，得 胶冻样芽胞杆菌菌剂产品，备用； C.复合微生物菌剂制备将步骤A制备的枯草芽孢杆菌菌剂和步骤B制备的胶冻 样芽胞杆菌菌剂按照l : 1的比例混合、粉碎，水分保持在30%以内，得复合微生物菌剂，备 用； D.本发明产品的制备，按白云石粉87公斤、锰矿石粉2公斤、硫酸锌2公斤、硼润 土 4公斤、复合微生物菌剂5公斤分别称重置于搅拌机搅拌混合1. 5小时，在温度3(TC、pH 值8条件下，经造粒机造粒、烘干机烘干、分筛机分筛制成本发明所述的一种含有复合微生 物菌群的矿物肥料。 本发明的一种含有复合微生物菌群的矿物肥料包括菌种溶液和载体。菌种溶液 含有的微生物有①枯草芽孢杆菌，拉丁文名称是Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn， 中文菌名Chinese Name枯草芽孢杆菌，中国农业微生物菌种保藏管理中心保藏号是ACCC. No.11060。 ②胶冻样芽胞杆菌，拉丁文名称是Bacillus mucilaginosus，甘肃省微生物菌种
保藏中心菌株保藏编号GSICC 30210，保藏时间19900819。 所述的白云石粉由江西奥特精细矿粉有限公司提供。 所述的锰矿石粉由云南瑞美金源矿业有限公司提供。 所述的硫酸锌由富阳市宏利化工厂提供。 所述的膨润土由河南省信阳扬帆膨润土厂公司提供。 本发明所述的粉碎机是由山东省章丘市宇龙机械有限公司提供的CD高效粉碎 机。 本发明所述的搅拌机是由山东省章丘市宇龙机械有限公司提供的CD立式搅拌 机。 本发明所述的造粒机是由河南省郑州市隆祥复合肥设备有限公司提供的转鼓造 粒机。 本发明所述的分筛机是由山东省章丘市宇龙机械有限公司提供的GTS滚筒筛。
上述的原材料和设备均可商购到。 本发明以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn)和胶冻样芽胞杆 菌(Bacillus mucilaginosus)与硼润土、白云石粉、锰矿石粉和硫酸锌混合造粒生产的一
9种含有复合微生物菌群的矿物肥料。能够有效的改善土壤的团粒结构；通过复合生物菌群 的活动，能够分解土壤中部分不能被作物吸收的磷、钾元素，使磷、钾从土壤中分解出来；同 时，微生物在土壤中的生活、活动，可产生很多代谢产物或分泌物，这些分泌物对作物的生 长有剌激作用；提高营养元素和复合微生物菌群的相互促吸，生产一种全水溶、含多种营养 成分的一种含有复合微生物菌群的矿物肥料，全面提高钙镁肥施肥效果。该肥料易溶于水， 有利于植物的吸收和利用，同时改善土壤，提高作物的抗逆性。 本发明的产品可以利用我国的钙镁资源，替代进口。同时，生产工艺简单，原材料 和生产成本低廉，可以保证作物增产和农民增收。
具体实施例方式
下面用实施例进一步说明本发明，实施中只列出组份及其重量份数，其制备方法
如上说明书所述。
实施例1:实施例2:实施例3:
复合微生物菌剂(重量份数)5110
白云石粉(重量份数)879570
锰矿石粉(重量份数)215
硫酸锌(重量份数)215
硼润土(重量份数)4210 五、增产、试验效果分析 试验于2008年10月安排在安徽省池州市。由爱沃(北京)农业技术有限公司提 供一种含有复合微生物菌群的矿物肥料，供试品种为皖油14。供试验地块土壤为潮土，质 地轻壤，中肥力水平，地力均匀。 1、含有复合微生物菌群的矿物肥料试验方法 试验共设三个处理，三次重复，随机区组排列，小区面积40m2。 处理一 ck按照当地习惯施肥。
处理二 ck+底施普通颗粒型f丐镁肥。
处理三ck+底施含有复合微生物菌群的矿物肥料。 2、含有复合微生物菌群的矿物肥料田间管理及记录 表1试验点田间管理情况表
10试验地点
安徽省池州市
小区面积 作物品种 定植期 收获期
5米X6米二30平方米 皖油14 2008年10月15曰 09年6月1曰至6月5曰
基肥 处理一碳铵40公斤、过磷酸钙40公斤、氯化钾20公斤
情况 处理二 同上+普通颗粒型钙镁肥
处理三_同上+含有复合微生物菌群的矿物肥料
3、含有复合微生物菌群的矿物肥料试验结果与分析 表2试验结果统计
处理
亩产(千克)
II
m
平均
处理一 123 处理二 135 处理三、147
118 143 154
120 139 153
120. 33
139 151.33 试验结果如表2所示，常规施肥处理(处理一 )油菜籽平均产量为120. 33千克/ 亩，常规施肥加普通颗粒型钙镁肥处理(处理二)油菜籽的平均产量为139千克/亩，处理 二比对照增产15. 52%，常规施肥加含有复合微生物菌群的矿物肥料处理(处理三)油菜籽 的平均产量为151. 33千克/亩，处理三比对照增产25. 8%，处理三比常规施肥加普通颗粒 型钙镁肥处理(处理二 )增产8. 9% 。 对试验各处理油菜籽的亩产量进行方差分析，各处理之间油菜籽的亩产量差异显
著。对各处理油菜籽亩产量进行多重比较，结果如表3所示，可以看出，处理一与处理二之
间油菜籽亩产量差异明显，达到显著水平。处理一与处理三之间油菜籽亩产量差异明显，达
到显著水平。处理二与处理三之间油菜籽亩产量差异明显，达到显著水平。 F = 62. 193** F0 05 = 10. 128 F0 01 = 34. 116 表3试验PLSD检测处理平均产量(千克/亩) Xi差异显著性 a =0. 05
处理三151.33
处理二139b
处理一120. 33c 4、小结 爱沃(北京)农业技术有限公司生产的含有复合微生物菌群的矿物肥料，在大田油菜上增产效果明显，可以大面积推广使用。 以上对本发明的实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。
1权利要求
一种含有复合微生物菌群的矿物肥料，其特征在于通过用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)和胶冻样芽胞杆菌(Bacillusmucilaginosus)扩接培养发酵吸附制得的复合微生物菌剂，将白云石粉、锰矿石粉、硫酸锌、硼润土和复合微生物菌剂经搅拌机搅拌混合、造粒机造粒、烘干机烘干、分筛机分筛制成含有复合微生物菌群的矿物肥料，其中组份及其重量份数为白云石粉70-95、锰矿石粉1-5、硫酸锌1-5、硼润土2-10、复合微生物菌剂1-10。
2. 根据权利要求1所述的一种含有复合微生物菌群的矿物肥料，其特征在于组份及 其重量份数为白云石粉87公斤、锰矿石粉2公斤、硫酸锌2公斤、硼润土 4公斤和复合微生 物菌剂5公斤分别称重置于搅拌机搅拌混合1. 5小时，在温度30°C 、pH值8条件下，经造粒 机造粒、烘干机烘干、分筛机分筛制成本发明所述的一种含有复合微生物菌群的矿物肥料。
3. 根据权利要求1或2所述的一种含有复合微生物菌群的矿物肥料，其特征在于所 述的复合微生物菌剂由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)和胶冻样芽 胞杆菌(Bacillus mucilaginosus)单独扩接培养发酵，发酵后的菌液用草炭吸附，将两种 吸附后的单一菌剂按照l : 1的比例混合、粉碎，水分保持在30%以内，得复合微生物菌剂。
4. 一种含有复合微生物菌群的矿物肥料的制备方法，其特征在于包括以下步骤A. 枯草芽孢杆菌菌剂的制备1) 将试管斜面保藏法保藏的枯草芽孢杆菌菌种取出，于3(TC培养箱中2-4天培养成熟 后，备用；2) 配制培养液盛装于容器中灭菌，待置常温后，将步骤l)得到培养成熟后的菌种接种 于摇瓶中，摇床培养到成熟，将成熟种子合并装入接种瓶，置于无菌室，等候接入发酵罐，种 子液的量是以一级发酵罐容积为基准，接种量在0. 1% -10%之间；3) 将发酵培养基通过高压蒸汽灭菌，利用循环冷却水将发酵液冷却至28t: -301:，期 间始终保持罐内为正压状态，表压控制在0. 05Mpa，采用压差法将种子液压入发酵罐，控制 压力0. 02Mpa-0. 05Mpa，温度28°C ，无菌空气通气量为罐容积的0. 5_1倍；4) 待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养至发酵结束，发酵液 放入已灭菌的储液罐中，备用；5) 将发酵液用无菌草炭吸附，混合均匀，控制含水量《20%，有效活菌数> 2亿/g，得 枯草芽孢杆菌菌剂产品，备用；B. 胶冻样芽胞杆菌菌剂的制备1) 将试管斜面保藏法保藏的胶冻样芽胞杆菌菌种取出，于3(TC培养箱中2-4天培养成 熟后，备用；2) 配制培养液盛装于容器中灭菌，待置常温后，将步骤l)得到培养成熟后的菌种接种 于摇瓶中，摇床培养到成熟，将成熟种子合并装入接种瓶，置于无菌室，等候接入发酵罐，种 子液的量是以一级发酵罐容积为基准，接种量在0. 1% _10%之间；3) 将发酵培养基通过高压蒸汽灭菌，利用循环冷却水将发酵液冷却至28t: -301:，期 间始终保持罐内为正压状态，表压控制在0. 05Mpa，采用压差法将种子液压入发酵罐，控制 压力0. 02Mpa-0. 05Mpa，温度28°C ，无菌空气通气量为罐容积的0. 5_1倍；4) 待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养至发酵结束，发酵液 放入已灭菌的储液罐中，备用；5)将发酵液用无菌草炭吸附，混合均匀，控制含水量《20%，有效活菌数> 2亿/g，得 胶冻样芽胞杆菌菌剂产品，备用；C. 复合微生物菌剂制备将步骤A制备的枯草芽孢杆菌菌剂和步骤B制备的胶冻样芽 胞杆菌菌剂按照l : 1的比例混合、粉碎，水分保持在30%以内，得复合微生物菌剂，备用；D. 本发明产品的制备，按组份及其重量份数为白云石粉70-95、锰矿石粉l-5、硫酸锌1- 5、硼润土 2-10和复合微生物菌剂1-10分别称重置于搅拌机搅拌混合1-2小时，在温度 10-55°C、 pH值5-10. 5条件下，经造粒机造粒、烘干机烘干、分筛机分筛制成本发明所述的 含有复合微生物菌群的矿物肥料。
5.根据权利要求4所述的一种含有复合微生物菌群的矿物肥料的制备方法，其特征在 于包括以下步骤A.枯草芽孢杆菌菌剂的制备1) 将试管斜面保藏法保藏于4t:冰箱的枯草芽孢杆菌菌种取出扩接，于3(TC培养箱中2- 4天培养成熟后，备用；2) 将配制的培养液盛装容量以容器的约1/5为宜，在表压0. lMpa-O. 15Mpa、 121°C -125°CT0. 5h灭菌，待置常温后，将步骤l)得到培养成熟后的菌种接种于摇瓶中， 于28°C 160rpm 180rpm摇床培养，菌液菌数达到20亿/ml以上，生长期处于对数生长阶 段，即为成熟种子，将其合并装入接种瓶，置于无菌室，等候接入发酵罐，种子液的量是以一 级发酵罐容积为基准，接种量在0. 1% -10%之间；3) 将配制的发酵培养基装入发酵罐中，装液量以发酵罐容量的约80%，通过高压蒸 汽灭菌，表压0. IMpa-O. 15Mpa、121°C -125t:下维持lh，利用循环冷却水将发酵液冷却至 28°C _301:，期间始终保持罐内为正压状态，表压控制在0. 05Mpa，采用压差法将种子液压 入发酵罐，控制压力0. 05Mpa，温度28t:，无菌空气通气量为罐容积的0. 5_1倍；4) 待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养至发酵结束，发酵液 放入已灭菌的储液罐中，备用；5) 将发酵液用无菌草炭吸附，混合均匀，控制含水量《20%，有效活菌数> 2亿/g，得 枯草芽孢杆菌菌剂产品，备用；B :胶冻样芽胞杆菌菌剂的制备1) 将试管斜面保藏法保藏于4t:冰箱的胶冻样芽胞杆菌菌种取出扩接，于3(TC培养箱 中2-4天培养成熟后，备用；2) 将配制的培养液盛装容量以容器的约1/5为宜，在表压0. IMpa-O. 15Mpa、 121°C -125°CT0. 5h灭菌，待置常温后，将步骤l)得到培养成熟后的菌种接种于摇瓶中， 于28°C 160rpm 180rpm摇床培养，菌液菌数达到20亿/ml以上，生长期处于对数生长阶 段，即为成熟种子，将其合并装入接种瓶，置于无菌室，等候接入发酵罐，种子液的量是以一 级发酵罐容积为基准，接种量在O. 1% -10%之间；3) 将配制的发酵培养基装入发酵罐中，装液量以发酵罐容量的约80%，通过高压蒸 汽灭菌，表压0. IMpa-O. 15Mpa、121°C -125t:下维持lh，利用循环冷却水将发酵液冷却至 28°C _301:，期间始终保持罐内为正压状态，表压控制在0. 05Mpa，采用压差法将种子液压 入发酵罐，控制压力0. 05Mpa，温度28t:，无菌空气通气量为罐容积的0. 5_1倍；4) 待一级发酵结束后，通过管道直接将菌液压入二级发酵罐，培养至发酵结束，发酵液放入已灭菌的储液罐中，备用；5)将发酵液用无菌草炭吸附，混合均匀，控制含水量《20%，有效活菌数> 2亿/g，得胶冻样芽胞杆菌菌剂产品，备用；C. 复合微生物菌剂制备将步骤A制备的枯草芽孢杆菌菌剂和步骤B制备的胶冻样芽胞杆菌菌剂按照l : 1的比例混合、粉碎，水分保持在30%以内，得复合微生物菌剂，备用；D. 本发明产品的制备，按白云石粉87公斤、锰矿石粉2公斤、硫酸锌2公斤、硼润土 4公斤和复合微生物菌剂5公斤分别称重置于搅拌机搅拌混合1. 5小时，在温度3(TC、 pH值8条件下，经造粒机造粒、烘干机烘干、分筛机分筛制成本发明所述的含有复合微生物菌群的矿物肥料。
全文摘要
本发明涉及一种含有复合微生物菌群的矿物肥料及其制备方法，通过用枯草芽孢杆菌和胶冻样芽胞杆菌扩接培养发酵吸附制得的复合微生物菌剂，将白云石粉、锰矿石粉、硫酸锌、硼润土和复合微生物菌剂经搅拌机搅拌混合、造粒机造粒、烘干机烘干、分筛机分筛制成含有复合微生物菌群的矿物肥料，其制备方法包括按组份及其重量份数分别称重置于搅拌机搅拌混合1-2小时，在温度10-55℃、pH值5-10.5条件下，经造粒机造粒、烘干机烘干、分筛机分筛制成本发明的含有复合微生物菌群的矿物肥料。本发明的肥料可以为作物生长提供营养；预防和治疗作物因缺钙和镁而引起的生理性病害；同时复合微生物菌群适应性强、性能稳定，具有固氮、解磷、解钾等多种功能，能改变固氮宿主专一性，对人畜无任何副作用，对土质不构成污染；农作物施用后各项指标达到绿色食品要求并能增产、提高品质。
文档编号C05G3/00GK101759500SQ201010033810
公开日2010年6月30日 申请日期2010年1月5日 优先权日2010年1月5日
发明者柳建 申请人:爱沃(北京)农业技术有限公司