专利名称：一种快速解除蔓荆子种子休眠的方法
技术领域：
本发明涉及一种快速解除蔓荆子种子休眠的方法。
背景技术：
蔓荆子为马鞭草科植物单叶蔓荆mex trifolia L. var. simplicifolia Cham. 或蔓荆V. trifolia L.的干燥成熟果实。蔓荆子临床应用广泛，同时又是优良的园林绿 化、防风固沙、改良土壤的物种，具有较高的开发利用价值。目前蔓荆子资源以野生为主，主 产于山东、江西、广西等省区，其中山东、江西以单叶蔓荆为主，广西以蔓荆为主。近年来，蔓 荆子野生资源破坏严重，已被列为国家重点保护野生药材物种名录(三类)。由于蔓荆子 种子具有休眠特性，生产上主要以营养繁殖为主，解除蔓荆子种子休眠，提高蔓荆子繁殖系 数，对开展蔓荆子资源保护和可持续利用具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种安全性好、操作简单、容易控制的快速解除蔓荆子种子 休眠的方法。本发明的快速解除蔓荆子种子休眠的方法，包括以下步骤
1.收集10 11月份的黑色成熟的蔓荆子果实，常温储藏，用种子风选净度仪清选空 壳，选出净种子，即为蔓荆子种子；
2.将蔓荆子种子用浓硫酸浸泡1 60分钟，流水冲洗2小时后去掉表面碳化物质；
3.将其在常温20 25°C下，浸泡于0.1 5. Omg/ml赤霉素溶液1 36小时，之后用 1%次氯酸钠消毒5 15分钟，然后用蒸馏水清洗至pH = 7 ；
4.将蔓荆子种子置恒温或变温条件的光照培养箱中，用蛭石或湿沙或滤纸或海绵发芽 床，或置沙质土壤中进行发芽。本发明的快速解除蔓荆子种子休眠的方法，能有效解除阻碍蔓荆子种子萌发的各 种因素，包括种皮所形成的机械障碍，打破蔓荆子种子休眠，从而提高发芽率(发芽率可以 达到82. 1%)，与现有的营养繁殖相比，具有操作简单、成本低廉、快速萌发等优点，可广泛用 于蔓荆子药材的栽培和园林绿化中。
图1为不同浓度赤霉素下浓硫酸酸蚀和未酸蚀与发芽率的关系，横坐标为赤霉素 的浓度，纵坐标为发芽率，以百分比表示，WS表示未酸蚀处理，S表示酸蚀处理。图2为浓硫酸处理后不同浓度赤霉素处理与发芽率的关系，横坐标为赤霉素的浓 度，纵坐标为发芽率，以百分比表示。
具体实施例方式一种快速解除蔓荆子种子休眠的方法，其步骤是1.收集10 11月份的黑色成熟的蔓荆子果实，常温储藏，用种子风选净度仪清选空 壳，选出净种子，即为蔓荆子种子；
2.将蔓荆子种子用98%的浓硫酸浸泡10 15分钟，流水冲洗2小时后用纱布搓掉表 面碳化物质；
3.再将其在常温20°C下，浸泡于0.5 1. Omg/ml赤霉素溶液18小时，之后用1%次氯 酸钠消毒15分钟，然后用蒸馏水清洗至pH = 7 ；
4.再将蔓荆子种子置恒温或变温条件的光照培养箱中用滤纸发芽床进行发芽。所述 的恒温是15、20、25、30°C，所述的变温条件是白天25°C培养18小时、晚上15°C培养8小时， 或者是白天30°C培养18小时、晚上20°C培养8小时。
以下通过实施例来进一步描述本发明。说明1.具体实施方式
中所采用的发芽试验(除实施例5外)均为纸床发芽试验 法，具体如下直径为9cm的培养皿内放置滤纸，用水湿透，将多余的水倒掉，以保湿不积水 为度，选取50粒蔓荆子种子均勻放入培养皿内的纸上，再将培养皿盖好后放入微电脑控制 光照培养箱(LRH-250-G11 ；广东省医疗器械厂生产)，按照各个试验例所设计的特定温度 (恒温或变温)条件进行发芽，整个发芽过程中均进行光照；发芽过程中每天检测1 2 次，并适当补足水分，蔓荆子种子开始发芽后，每天计数1次。发现有腐败的种子应随时拣 出，若霉变种子> 5%，应及时更换培养皿内的滤纸，并将种子用蒸馏水清洗后再放入培养 皿内继续令其发芽。2.参照《国际种子检验规程》(1985)、《农作物种子检验规程》(1995)等作为评定 种子是否发芽的标准(以长出Icm为发芽)。3.种子发芽率是指发芽试验终期，在规定的日期内发芽的全部种子数占供试种子 的百分率。发芽率(%)=规定日期内发芽种子/供试种子粒数X100%。本试验中的发芽日 期均为自将发芽纸床放入箱中起的20天。4.本实验试图通过多种方法打破蔓荆子的休眠，但只有赤霉素能打破蔓荆子种子 的休眠，其它方法如湿沙层积、生长素、浓硫酸等均不能解除蔓荆子休眠。实验材料
本实验所用的蔓荆子种子为2009年10月份在江西省新建县采收的黑色成熟的单叶蔓 荆子果实。将蔓荆子果实常温阴干后，用种子风选净度仪清选空壳，选出的蔓荆子核果中有 种子者为蔓荆子种子，蔓荆子种子用牛皮纸袋常温储藏。实施例1
一、实验方法
将蔓荆子种子分为两组，一组用浓硫酸酸蚀一定时间，一组空白对照。然后把蔓荆子种 子分别浸泡于0. 1,0. 5,1. 0,1. 5,2. O mg/ml赤霉素溶液中18小时后，用1%次氯酸钠消毒 15分钟，无菌水漂洗5次至至pH = 7。每个浓度平行四组，每组50粒置于30°C恒温培养箱 全光照培养，每日统计发芽率。二、实验结果
如图1表明，在相同赤霉素浓度条件下酸蚀蔓荆子种子对其发率率和发芽势均有明显 提高。酸蚀处理蔓荆子种子的7天的发芽率为70%，而未酸蚀蔓荆子种子的发芽率为10%，20天时发芽率达到最高，酸蚀处理的发芽率为73. 5%，而未酸蚀的发芽率为69. 0%。酸蚀处 理的发芽势也显著高于未经酸蚀处理的，第10天酸蚀处理的发芽势为73. 5%，未酸蚀的为 58%。因此浓硫酸酸蚀处理可以打破蔓荆子果皮的机械束缚。实施例2
一、实验方法
用98%浓硫酸分别浸泡成熟的蔓荆子种子0. 5、5、10、15、30、60分钟后，慢慢倾倒掉硫 酸，用清水冲洗2小时，然后用纱布搓掉蔓荆子表面碳化物质，再将蔓荆子分别浸泡于1. 0 mg/ml赤霉素溶液中18小时后，用1%次氯酸钠消毒15分钟，无菌水漂洗5次至pH = 7。每 个处理平行四组，每组50粒，置于30°C恒温培养箱全光照培养。每日统计发芽率，实验结果 见表1。表1浓硫酸酸蚀处理蔓荆子的发芽率
二、实验结果
如表1结果表明随酸蚀时间的增加，发芽率有所提高，其中以15分钟最佳，酸蚀30分 钟时则下降。酸蚀处理提高萌发率可能与克服果皮的机械阻力有关。实施例3
一、实验方法
将浓硫酸酸蚀15分钟后的蔓荆子分别浸泡于0. 1,0. 5,1. 0,2. 0,5. 0,10. 0 mg/ml赤霉 素溶液中18小时后，用1%次氯酸钠消毒15分钟，无菌水漂洗5次至至pH = 7。每个浓度 平行四组，每组50粒，置于30°C恒温培养箱全光照培养。每日统计发芽率，实验结果见图 2。二、实验结果
图2结果表明解除蔓荆子种子休眠的最佳浓度为0. 5 1. Omg/ml,本实验浓度范围内 发芽率没有显著性差异。实施例4
一、实验方法
将浓硫酸酸蚀15分钟后的蔓荆子种子分别浸泡于1. Omg/ml赤霉素溶液中，浸泡的时 间为浸泡的时间为1、6、12、18、24、36小时。用次氯酸钠消毒15分钟，然后用蒸馏水清洗至 PH =7。每个浓度平行四组，每组50粒，置于30°C恒温培养箱全光照培养。每日统计发芽 率，实验结果见表2 (A，B表示有显著性差异)。二、实验结果
表2结果表明赤霉素浸泡时间并不是影响蔓荆子种子发芽率的主要因数，但以18小 时的发芽率最高，浸泡18、24、36小时的发芽率没有显著性差异(P > 0.05)，故浸泡时间为 18小时。表2赤霉素浸泡时间与蔓荆子种子发芽率
权利要求
1.一种快速解除蔓荆子种子休眠的方法，其特征在于它包括以下步骤(a)收集10 11月份的黑色成熟的蔓荆子果实，常温储藏，用种子风选净度仪清选空 壳，选出净种子；(b)将蔓荆子种子用浓硫酸浸泡1 60分钟，流水冲洗2小时后去掉表面碳化物质；(c)将其在常温20 25°C下，浸泡于0.1 5. Omg/ml赤霉素溶液1 36小时，之后 用1%次氯酸钠消毒15 18分钟，然后用蒸馏水清洗至pH = 7 ；(d)再将蔓荆子种子转入恒温或变温条件的光照培养箱中用蛭石或湿沙或滤纸或海绵 发芽床，或置沙质土壤中进行发芽。
2.如权利要求1所述的快速解除蔓荆子种子休眠的方法，其特征在于步骤(b)中蔓荆 子种子用浓硫酸浸泡10 15分钟。
3.如权利要求1所述的快速解除蔓荆子种子休眠的方法，其特征在于步骤(c)中蔓荆 子种子浸泡于0. 5 1. Omg/ml赤霉素溶液18小时。
4.如权利要求1所述的快速解除蔓荆子种子休眠的方法，其特征在于步骤(d)中所述 的恒温是15、20、25、30°C中的任意一种。
5.如权利要求1所述的快速解除蔓荆子种子休眠的方法，其特征在于步骤(d)中所 述的变温条件是白天25°C培养18小时、晚上15°C培养8小时，或者是白天30°C培养18小 时、晚上20°C培养8小时。
全文摘要
一种快速解除蔓荆子种子休眠的方法，其步骤是选出蔓荆子净种子，将其用浓硫酸浸泡，然后去掉表面碳化物质；将其在常温下，浸泡于赤霉素溶液，之后用次氯酸钠消毒，然后用蒸馏水清洗；再将蔓荆子种子转入恒温或变温条件的光照培养箱中用蛭石或湿沙或滤纸或海绵发芽床，或置沙质土壤中进行发芽。本发明的快速解除蔓荆子种子休眠的方法，能有效解除阻碍蔓荆子种子萌发的各种因素，包括种皮所形成的机械障碍，打破蔓荆子种子休眠，显著提高种子发芽率，发芽率可达82.1%，与现有的营养繁殖相比，具有操作简单、成本低廉、快速萌发等优点，可广泛用于蔓荆子药材的栽培和园林绿化中。
文档编号A01C1/00GK102090181SQ201010576590
公开日2011年6月15日 申请日期2010年12月7日 优先权日2010年12月7日
发明者吴波, 孙荣进, 张剑, 方磊, 曾金祥, 朱玉野, 朱继孝, 杜婷, 杨雅琴, 漆乐媛, 熊诗华, 王文杰, 王晓云, 罗光明, 蔡财军 申请人:江西中医学院