专利名称：紫杂回交商品苗种的培育方法
技术领域：
本发明属于贝类水产养殖的育种技术，尤其是涉及一种紫杂回交商品苗种的培育方法。
背景技术：
海湾扇贝(Argopecten irradians irradians)原产于美国大西洋沿岸，于1982 年引入我国。海湾扇贝生长速度快，温度适应范围广，抗逆性强，非常适合我国北方海域的养殖，目前产量和养殖面积占我国扇贝养殖的50%以上。由于引进后长期近交，海湾扇贝在养殖过程中种质退化严重，表现为商品贝规格越来越小，育苗养殖过程中死亡率较高，例如2007年海湾扇贝亲贝死亡率高达约70%，因此扇贝养殖业迫切需要对海湾扇贝进行遗传改良，其中杂交育种是最有效的方法之一。发明人自2007年首次从秘鲁引进了紫扇贝(Argopecten purpuratus)。紫扇贝是原产于南太平洋的一种速生型中型扇贝，与海湾扇贝都属于Argopecten属，染色体数相同，且都是雌雄同体，但二者在个体大小、生长和温度适应性等方面性状互补。因此发明人又通过将紫扇贝与海湾扇贝进行种间杂交，培养出正交(紫扇贝卵子和海湾扇贝精子受精)和反交(海湾扇贝卵子和紫扇贝精子受精)两种杂交子一代。杂交子一代生长较快， 个体较大，部分个体仅雌区发育，性成熟时仅排放卵子且可育(王春德等，2009.紫扇贝与海湾扇贝种间杂交的研究。海洋科学，33 (10) 84-87 ；Chunde Wang等，2011. Introduction of the Peruvian scallop and its hybridization with the bay scallop in China, Aquaculture,2011, 310 :380-387)。进一步研究表明，杂交子一代虽然可以产生较大的杂种优势，但要大面积推广仍存在着两个较大的困难。首先，由于引进的紫扇贝的温度适应范围很窄，在青岛及以南海域不能度夏，在青岛及以北海域也不能越冬，因而要获得大量用于培育杂交子一代的紫扇贝亲贝十分困难。其次，由于海湾扇贝和紫扇贝都是雌雄同体的扇贝，同时排放精子和卵子， 卵子容易受到同种精子的污染，难以大量获得未受精卵用于种间杂交，从而导致所获得的商品苗种中真正的杂交后代的比例大大降低，使产量的提高幅度大大受限。
发明内容
本发明的目的是提供一种实用的紫杂回交商品苗种的培育方法，以弥补现有利用紫扇贝和海湾扇贝生产杂交扇贝商品苗种技术的不足。本发明基于以下构思1)首先在亲贝促熟方面摒弃了传统的海湾扇贝从4°C开始培育，而且产卵前需要提高到19°C的常规方法，通过研究杂交子一代扇贝的温度适应特性， 专门选择了从10°C开始培育杂交子一代亲贝，到产卵前逐渐提高到17°C ；2)紫扇贝与海湾扇贝的杂交子一代中有部分个体仅雌区发育且排出的卵子可育，这样就可以方便地实现获得大量有受精能力的未受精卵；幻用少量的紫扇贝即可获得大量的精子，而且由于精子和卵子大小不同，可以用500目的筛绢过滤获得不含卵子的精液，这样不需要培育很多的紫扇贝；4)用杂交子一代的未受精卵与紫扇贝精子回交可获得100%的回交商品苗种，能实现方便、高效地生产杂交苗种；最后幻所获得的本发明的紫杂回交商品苗种在生长、个体大小和温度耐受性方面具有显著的优势。本发明的技术方案是选择来自紫扇贝与海湾扇贝的杂交子一代家系或群体中的仅雌区发育的优良个体，与雌雄同体的紫扇贝优良个体同步促熟；再用常规的阴干和温度刺激的方法诱导上述杂交子一代个体排卵，获得未受精卵；同时刺激紫扇贝产卵排精，然后用500目筛绢过滤获得紫扇贝精液；将上述获得的杂交子一代的卵子与紫扇贝精子受精， 受精卵孵化后按照常规方法进行幼虫培育和苗种中间培育，即获得具有显著杂种优势的紫杂回交商品苗种；上述同步促熟是从10°C开始培育杂交子一代亲贝，到产卵前逐渐提高到 17°C。本发明培育的紫杂回交商品苗种同时具有海湾扇贝和紫扇贝的特性，在生长、个体大小和温度耐受性方面比紫扇贝具有显著优势，因此能在北方海区如青岛、大连等海域养殖，且当年产量可比海湾扇贝提高50%以上。
具体实施例方式本发明的操作方法或具体步骤如下1)亲贝的选择和促熟从正交(紫扇贝卵子和海湾扇贝精子受精)或反交(海湾扇贝卵子和紫扇贝精子受精)家系或群体中选择大个体杂交子一代扇贝，同时选择大个体的紫扇贝亲贝，在1月初纳入育苗室水体内，蓄养密度为100个/m3，选择从10°C开始培育亲贝。每天分6次投喂浓度为200-300万细胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等单胞藻类，每次投喂15升/m3，每天换水三分之一，每6天倒一次池，用空气压缩机连续充气。在10°C培育 10天性腺开始膨大后开始升温，每天提高0. 5°C，待升到17°C时性腺接近成熟，逐渐增加饵料的投喂量直到扇贝达到性成熟。2)紫杂回交商品苗种的培育挑选50个以上性腺发育成熟、个体较大且性腺仅有雌区发育的子一代扇贝，阴干刺激30分钟，将这些扇贝置于预先加入23°C海水的水泥池中，使其产卵。再选择20个以上性腺发育成熟的紫扇贝，置于预先加入23°C海水的塑料桶中，产卵排精后用500目的筛绢过滤，收集不含紫扇贝卵子的精液，然后向杂交子一代卵子中加入少量的紫扇贝精液，搅拌使精卵混合均勻，显微镜下观察使每个卵子周围有5-6个精子，将受精卵置于黑暗环境下孵化，按照常规方法进行幼虫培育和苗种中间培育，即可以获得壳高达到1. 5厘米以上的紫杂回交商品苗种，用于商业化养殖。实施例12008年3月底取成熟紫扇贝，经温度刺激后获得紫扇贝卵子，用海湾扇贝的精子授精后获得紫扇贝(卵)和海湾扇贝(精)杂交子一代苗，获得成贝。2009年春天将从上述杂交子一代扇贝促熟后从中选择个体大且仅雌区发育的扇贝，经阴干和温度刺激后获得卵子，以紫扇贝的精子授精，培养出了杂交子一代与紫扇贝的回交苗种。至2009年11月底，回交苗种的壳高、壳长、壳宽及体重分别比同期培育的海湾扇贝自交群体大45.8%，46.5%， 31. 0%和 162. 9% (表 1)。表1紫杂回交苗种与同期海湾扇贝群体表型的比较(n = 30)
权利要求
1.一种紫杂回交商品苗种的培育方法，其特征在于选择来自紫扇贝与海湾扇贝的杂交子一代家系或群体中的仅雌区发育的优良个体，与雌雄同体的紫扇贝优良个体同步促熟； 再用常规的阴干和温度刺激的方法诱导上述杂交子一代个体排卵，获得未受精卵；同时刺激紫扇贝产卵排精，然后用500目筛绢过滤获得紫扇贝精液；将上述获得的杂交子一代的卵子与紫扇贝精子受精，受精卵孵化后按照常规方法进行幼虫培育和苗种中间培育，即获得具有显著杂种优势的紫杂回交商品苗种；上述同步促熟是从10°C开始培育杂交子一代亲贝，到产卵前逐渐提高到17°C。
2.紫杂回交商品苗种的培育方法，其特征在于具体步骤如下1)亲贝的选择和促熟从用紫扇贝卵子和海湾扇贝精子受精或用海湾扇贝卵子和紫扇贝精子受精所获得的家系或群体中选择大个体杂交子一代扇贝，同时选择大个体的紫扇贝亲贝，在1月初纳入育苗室水体内，蓄养密度为100个/ m3，选择从10°C开始培育亲贝；每天分6次投喂浓度为200-300万细胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等单胞藻类，每次投喂15 升/ m3，每天换水三分之一，每6天倒一次池，用空气压缩机连续充气；在10°C培育10天性腺开始膨大后开始升温，每天提高0. 5°C，待升到17°C时性腺接近成熟，逐渐增加饵料的投喂量直到扇贝达到性成熟；2)紫杂回交商品苗种的培育挑选50个以上性腺发育成熟、个体较大且性腺仅有雌区发育的子一代扇贝，阴干刺激30分钟，将这些扇贝置于预先加入23°C海水的水泥池中，使其产卵；再选择20个以上性腺发育成熟的紫扇贝，置于预先加入23°C海水的塑料桶中，产卵排精后用500目的筛绢过滤，收集不含紫扇贝卵子的精液，然后向杂交子一代卵子中加入少量的紫扇贝精液，搅拌使精卵混合均勻，显微镜下观察使每个卵子周围有5-6个精子， 将受精卵置于黑暗环境下孵化，按常规方法进行幼虫培育和苗种中间培育，即可以获得用于商业化养殖的紫杂回交商品苗种。
全文摘要
本发明涉及一种紫杂回交商品苗种的培育方法，其特征在于选择来自海湾扇贝与紫扇贝的杂交子一代家系或群体中的仅雌区发育的优良个体，与紫扇贝优良个体同步促熟，再用常规阴干和温度刺激的方法诱导杂交子一代排卵，同时刺激紫扇贝产卵排精，然后取用500目筛绢过滤获得紫扇贝精液，与杂交子一代的卵子受精，孵化后按照常规方法进行幼虫培育和苗种中间培育，即获得具有显著杂种优势的紫杂回交商品苗种。本发明培育的紫杂回交商品苗种同时具有海湾扇贝和紫扇贝的特性，在生长、个体大小和温度耐受性方面比紫扇贝具有显著优势，因此能在北方海区如青岛、大连等海域养殖，且当年产量可比海湾扇贝提高50％以上。
文档编号A01K61/00GK102301970SQ20111022335
公开日2012年1月4日 申请日期2011年8月5日 优先权日2011年8月5日
发明者刘保忠, 李建立, 李继强, 杜厚宽, 王文琪, 王春德 申请人:青岛农业大学