专利名称：乌苏里拟鲿人工繁殖方法
技术领域：
本发明涉及一种食用鱼的人工繁殖方法，具体涉及一种乌苏里拟鳕人工繁殖方法。
背景技术：
乌苏里拟鳕(Pseudobagrus ussuriensis)隶属于鲇形目(Silurformes)、鳕科 (Bagridae)、拟鳕属O^seudcAagrus)，分布于我国黑龙江至珠江的各水系以及我国长江和淮河水系的太湖、洪泽湖等水域，但近年来其资源量锐减。该鱼肉质细嫩、味道鲜美、无肌间刺、市场需求旺盛；并且食性广、适温强(耐温0_36°C左右)、病害少、生长速度较快，倍受广大消费者和养殖户所喜爱，养殖前途十分广阔。因此，开展其人工繁殖和商品鱼养殖十分必要。鱼类人工繁殖技术是将雌、雄亲鱼培育至性腺成熟，再通过人工催产措施促进亲鱼发情、产卵或排精获得受精卵，然后营造适宜的环境条件，使受精卵孵化出鱼苗的技术。 其中，获取大批量受精卵是鱼类人工繁殖生产的关键因素。国内外鱼类人工繁殖中受精卵获取的方法有两种，一是通过雌雄亲鱼在产卵池中自然产卵、受精的方法获得受精卵；二是采用人工授精方法获得受精卵。我国现有乌苏里拟鳕人工繁殖的方法均采用按常规方法同池培育雌、雄亲鱼。催产时，雌亲鱼两次注射催产剂，第1次注射总注射剂量的30%，第2次注射余量；雄鱼一次注射，于雌鱼第2针注射时进行，剂量为雌鱼注射剂量的一半。在该技术方案条件下，由于雄鱼精巢无法完全成熟， 不能自然排精和发情，因此无法通过雌、雄亲鱼在产卵池中自然产卵、受精的方法获得受精卵；也无法采用不伤害雄亲鱼的人工授精方法，在催产后的效应时间到达后，尽管雌亲鱼可顺利挤出成熟卵子，但由于雄鱼精巢成熟度差，无法挤出精液。因此，目前生产上只能采用杀鱼取精的人工授精方法获得受精卵，即先杀死雄鱼，取出精巢，将精巢碾磨稀释，镜检大部分精子具有活力后，再人工将成熟卵挤到盛卵盆内进行精卵混合获得受精卵。由于乌苏里拟鳕是多年繁殖鱼类，雄性鱼本可以作为亲本保留多年用于人工繁殖或作为种质资源群体保留。因此，现有技术采用的杀死雄性鱼取精的人工繁殖方法是对种质资源的极大破坏， 是不符合可持鳕发展方向的。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明解决的技术问题是提供一种乌苏里拟鳕人工繁殖方法，利用该方法可以在不损伤雄性亲鱼的情况下通过自然产卵、受精法或者人工授精法获得大批量优质受精卵，并孵化出鱼苗，不但可提高受精率，更重要的是能保留雄性亲本群体用于下一年繁殖。为解决上述技术问题，本发明的技术方案是这样实现的一种乌苏里拟鳕人工繁殖方法，尤其是，包括如下步骤(1)亲鱼的选择
选择鳍条完整、无损伤的3龄及以上亲鱼；(2)亲鱼的培育将雌、雄亲鱼分别放入不同的培育池中进行培育，自人工催产前一个月开始，在雄性亲鱼培育池中投喂含睾酮激素的人工配合饲料；(3)人工催产选择成熟的雌、雄亲鱼注射催产药物，雌、雄亲鱼均采取二次注射，雌亲鱼剂量为 第一次注射促黄体素释放激素类似物2号，第二次注射促黄体素释放激素类似物2号、绒毛膜促性腺激素和地欧酮，雄鱼的剂量为雌鱼的70%，两次注射的时间间隔为14 20小时；(4)促进亲鱼发情采用微流水冲气或间断冲水方法刺激催产后的亲鱼，并控制环境条件；(5)受精通过自然产卵、受精或人工授精的方法获得受精卵；(6)人工孵化将受精卵放入孵化池中进行孵化，控制水流、水质、水温和溶氧，保持良好的孵化条件。优选的，在上述乌苏里拟鳕人工繁殖方法中，所述步骤(2)中，睾酮激素为 17 α-甲基睾酮。优选的，在上述乌苏里拟鳕人工繁殖方法中，所述含睾酮激素的人工配合饲料的制备方法为用少量面粉在温开水中拌合成稀浆糊，再将睾酮激素加入稀浆糊并搅拌均勻， 然后将该稀浆糊与人工配合颗粒饲料充分拌合，放在阴凉通风处吹干。优选的，在上述乌苏里拟鳕人工繁殖方法中，所述睾酮激素与人工配合颗粒饲料的质量配比为20mg Ikgo优选的，在上述乌苏里拟鳕人工繁殖方法中，所述人工配合颗粒饲料中的蛋白质含量不低于20%。优选的，在上述乌苏里拟鳕人工繁殖方法中，所述步骤(3)中，雌亲鱼在第一次注射时促黄体素释放激素类似物2号的剂量为5 μ g 8 μ g/kg体重，雌亲鱼在第二次注射时促黄体素释放激素类似物2号的剂量为10 μ g 15 μ g/kg体重、绒毛膜促性腺激素的剂量为500IU 700IU/kg体重、地欧酮的剂量为ang ％ig/kg体重。优选的，在上述乌苏里拟鳕人工繁殖方法中，所述步骤中，将催产后的雌、雄亲鱼按1 1 5 6的比例放入产卵池中，实现自然产卵、受精。优选的，在上述乌苏里拟鳕人工繁殖方法中，所述步骤(5)中，人工授精的方法为挤出3尾雌亲鱼的卵液，同时将1尾雄亲鱼的精液挤出或用吸管吸出，然后将卵液和精液混合，实现人工受精。与现有技术相比，本发明根据乌苏里拟鳕雄性成鱼性腺发育中后期其体内性激素水平持鳕下降的特有变化规律，通过人工投喂外源激素等技术，能使乌苏里拟鳕雄鱼很好地自然成熟、自然排精和发情。并且，自然排精方式得到的精子，其精子成熟度高，受精率有保障。采用自然受精或人工授精的方法均可顺利地获得大批量受精卵。更重要的是，雌、雄亲鱼均不会受到损伤，雌、雄亲鱼均可继鳕用于下一年的人工繁殖生产，为开展该雄性鱼类的保种和育种工作奠定了种质保障。避免了现有技术只能采用杀鱼取精的方法完成人工繁殖的生产方式。
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1所示为本发明乌苏里拟鳕人工繁殖方法的框图。
具体实施例方式为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点，而不是对本发明权利要求的限制。参图1所示，本发明具体实施例公开了一种乌苏里拟鳕人工繁殖方法，包括如下步骤(1)亲鱼的选择选择鳍条完整、无损伤的3龄及以上亲鱼；(2)亲鱼的培育将雌、雄亲鱼分别放入不同的培育池中进行培育，自人工催产前一个月开始，在雄性亲鱼培育池中投喂含睾酮激素的人工配合饲料；(3)人工催产选择成熟的雌、雄亲鱼注射催产药物，雌、雄亲鱼均采取二次注射，雌亲鱼剂量为 第一次注射促黄体素释放激素类似物2号(LRH-A2)，第二次注射促黄体素释放激素类似物 2号(LRH-A2)、绒毛膜促性腺激素(HCG)和地欧酮(DOM)，雄鱼的剂量为雌鱼的70 %，两次注射的时间间隔为14 20小时；(4)促进亲鱼发情采用微流水冲气或间断冲水方法刺激催产后的亲鱼，并控制环境条件；(5)受精通过自然产卵、受精或人工授精的方法获得受精卵；(6)人工孵化将受精卵放入孵化池中进行孵化，控制水流、水质、水温和溶氧，保持良好的孵化条件。研究表明，雄性鱼在精巢发育和排精发情等过程中，需要大量的雌二醇(E》和睾酮(T)激素，而T又是合成E2的前体，添加外源17 α-甲基睾酮(17 α-MT)可能直接或通过其代谢产物作用于精巢，促进雄鱼精巢发育成熟。发明人的研究也发现，T水平在雄性乌苏里拟鳕鱼的精巢发育和排精发情等生理过程中起到了至关重要的调节作用。本发明实施例在催产前的一个月投喂添加17 α-MT的饲料后，雄亲鱼体内T含量能维持较高水平，精巢成熟加快、生精作用显著；同时，在催产时，雌、雄亲鱼均采取2次注射，雄亲鱼单位体重的催产剂量为雌鱼的70%，且营造适宜环境条件的方法，能进一步促进雄鱼的自然排精和发情，从而，可在不损伤雌、雄亲鱼的基础上，通过自然产卵、受精或人工授精的方法获得大批量优质受精卵，并孵化出鱼苗。步骤(1)中，选择个体大、体质健壮、无病、鳍条完整、无损伤的3龄及以上亲鱼，亲鱼的选择日期优选为每年的2月份(自然环境温度下)。在环境温度人为可控的条件下，也可不受日期的约束。步骤O)中，雌、雄亲鱼分别放入不同的培育池中进行培育，亲鱼的放养量优选为 667m2放养IOOkg左右，并混养规格为15cm 20cm的花白鲢100尾 200尾。亲鱼培育池优选位于水源较近、注排方便、环境较安静处。池底平坦，淤泥较少，面积660m2 1300m2，水深1. 3m 1. 8m，进排水口有拦鱼设备。池塘清整符合池塘常规培育鱼苗鱼种技术规范(SC/T1008-94)。睾酮激素优选为17 α -甲基睾酮(17 α -MT)。含睾酮激素的人工配合饲料的制备方法为用少量面粉在温开水中拌合成稀浆糊，再将17 α -甲基睾酮(白色粉末，无臭，无味)均勻拌入稀浆糊中，然后将此稀浆糊与人工配合颗粒饲料充分拌合，获得含睾酮激素的人工配合饲料，最后放在阴凉通风处吹干后， 即可投喂。亲鱼培育池必须投喂蛋白质含量大于20%的人工配合颗粒饲料。在亲鱼池搭设饵料台，定位投喂在饵料台上。上午9时和下午17时分别投喂30%与70%。每次投饵量以60min摄食完为宜，投喂饵料要注意观察鱼的活动情况，投喂饵料不要过剩。日投饵量参见表1。水温达到17°C以上(在催产前1个月)起，在雄性亲鱼池中投喂含17 α -甲基睾酮(17 α-MT)(睾酮激素与人工配合颗粒饲料的质量配比为20mg Ikg)的激素人工配合颗粒饲料，一直至催产前停止投喂。雌性亲鱼池中投喂不加激素的人工配合饲料。表1乌苏里拟鳕亲鱼培育日投饵量
权利要求
1.一种乌苏里拟鳕人工繁殖方法，其特征在于，包括如下步骤(1)亲鱼的选择选择鳍条完整、无损伤的3龄及以上亲鱼；(2)亲鱼的培育将雌、雄亲鱼分别放入不同的培育池中进行培育，自人工催产前一个月开始，在雄性亲鱼培育池中投喂含睾酮激素的人工配合饲料；(3)人工催产选择成熟的雌、雄亲鱼注射催产药物，雌、雄亲鱼均采取二次注射，雌亲鱼剂量为第一次注射促黄体素释放激素类似物2号，第二次注射促黄体素释放激素类似物2号、绒毛膜促性腺激素和地欧酮，雄鱼的剂量为雌鱼的70%，两次注射的时间间隔为14 20小时；(4)促进亲鱼发情采用微流水冲气或间断冲水方法刺激催产后的亲鱼，并控制环境条件；(5)受精通过自然产卵、受精或人工授精的方法获得受精卵；(6)人工孵化将受精卵放入孵化池中进行孵化，控制水流、水质、水温和溶氧，保持良好的孵化条件。
2.根据权利要求1所述乌苏里拟鳕人工繁殖方法，其特征在于所述步骤O)中，睾酮激素为17 α-甲基睾酮。
3.根据权利要求1所述乌苏里拟鳕人工繁殖方法，其特征在于所述含睾酮激素的人工配合饲料的制备方法为用少量面粉在温开水中拌合成稀浆糊，再将睾酮激素加入稀浆糊并搅拌均勻，然后将该稀浆糊与人工配合颗粒饲料充分拌合，放在阴凉通风处吹干。
4.根据权利要求3所述乌苏里拟鳕人工繁殖方法，其特征在于所述睾酮激素与人工配合颗粒饲料的质量配比为20mg Ikgo
5.根据权利要求3所述乌苏里拟鳕人工繁殖方法，其特征在于所述人工配合颗粒饲料中的蛋白质含量不低于20%。
6.根据权利要求1所述乌苏里拟鳕人工繁殖方法，其特征在于所述步骤(3)中，雌亲鱼在第一次注射时促黄体素释放激素类似物2号的剂量为5 μ g 8 μ g/kg体重，雌亲鱼在第二次注射时促黄体素释放激素类似物2号的剂量为10 μ g 15 μ g/kg体重、绒毛膜促性腺激素的剂量为500IU 700IU/kg体重、地欧酮的剂量为2mg ％ig/kg体重。
7.根据权利要求1所述乌苏里拟鳕人工繁殖方法，其特征在于所述步骤(4)中，将催产后的雌、雄亲鱼按1 1 5 6的比例放入产卵池中，实现自然产卵、受精。
8.根据权利要求1所述乌苏里拟鳕人工繁殖方法，其特征在于所述步骤(5)中，人工授精的方法为挤出3尾雌亲鱼的卵液，同时将1尾雄亲鱼的精液挤出或用吸管吸出，然后将卵液和精液混合，实现人工受精。
全文摘要
本发明公开了一种乌苏里拟鲿人工繁殖方法，针对乌苏里拟鲿雄性成鱼在常规亲鱼培育和催产方法条件下，性腺成熟度差，只能通过杀鱼取精的方法进行人工繁殖的特点，本发明通过添加外源激素和环境条件等技术，能使乌苏里拟鲿雄鱼很好地自然成熟、自然排精和发情。并且，自然排精方式得到的精子，其精子成熟度高，受精率有保障。采用自然受精或人工授精的方法均可顺利地获得大批量受精卵。更重要的是，雌、雄亲鱼均不会受到损伤，雌、雄亲鱼均可继续用于下一年的人工繁殖生产，为开展该雄性鱼类的保种和育种工作奠定了种质保障。避免了现有技术只能采用杀鱼取精的方法完成人工繁殖的生产方式。
文档编号A01K61/00GK102524128SQ201210012630
公开日2012年7月4日 申请日期2012年1月16日 优先权日2012年1月16日
发明者周凤建, 强小刚, 贾一何, 黄鹤忠 申请人:苏州大学