专利名称：一种利用植物源提取物提高玫烟色拟青霉对烟粉虱侵染力的方法
技术领域：
本发明属于害虫生物防治技术领域，具体涉及一种利用仙鹤草乙醇提取物提高玫烟色拟青霉对烟粉虱侵染力的方法。
背景技术：
烟粉風Bemisia tabaci (Gennadius) (Homoptera Aleyrodidae)为多食性刺吸式害虫，分布在世界各地。烟粉虱成若虫不仅吸取植物汁液造成直接为害，还能传播多种植物 病毒病造成更大的间接为害，给农业生产带来巨大的经济损失。一直以来，如何高效安全防治烟粉虱都是世界性难题。玫烟色拟青霉Paecilomyces fumosoroseus作为一种昆虫病原真菌，可寄生多种昆虫，是蚜虫、粉虱等蔬菜害虫以及果树、茶树害虫的重要致病真菌。玫烟色拟青霉已在一些发达国家开发为烟粉虱生物杀虫剂，如在美国被开发为生物杀虫剂，用于防治扶桑、一品红等烟粉虱；在荷兰也已开发出玫烟色拟青霉商品制剂Biocon，用于防治黄瓜上粉虱。但玫烟色拟青霉作为烟粉虱生物杀虫剂尚未能得到较广泛应用，造成这一现状除了因为真菌侵染对环境要求高这一因素外，玫烟色拟青霉本身的侵染力也是重要影响因素，该真菌对不同来源寄主以及同一寄主不同龄期及虫态侵染力存在差异，如对烟粉虱低龄若虫侵染率很高，对成虫侵染力则较低。如何进一步提升玫烟色拟青霉侵染力是提高该菌作为生物杀虫剂实用性的关键之一。仙鹤草Agrimonia pilosa Ledeb.是一种多年生草本植物,属蔷薇科,在我国大部分地区均有分布。仙鹤草作为一种中药已得到广泛应用，其具有抗炎镇痛、降血糖、降血压、抗肿瘤和增强机体免疫功能等作用。仙鹤草还能显著提高害虫寄生性天敌-寄生蜂和捕食性天敌-蜘蛛的控害能力。本发明研究仙鹤草乙醇提取物对杀虫真菌-玫烟色拟青霉侵染力的影响，研究结果对于提升利用杀虫真菌进行重大害虫生物防治水平具有重要指导意义。
发明内容
I、发明目的提供一种利用仙鹤草乙醇提取物提高玫烟色拟青霉侵染力的方法，能安全有效地提高玫烟色拟青霉对烟粉虱的侵染力，提升害虫的生物防治水平。2、技术方案为达到上述目的，本发明选用仙鹤草的乙醇提取物和杀虫真菌同时处理烟粉虱，获得了一种安全高效的生物防治方法，它的应用显著提高了玫烟色拟青霉对害虫的侵染力。本发明为一种玫烟色拟青霉侵染力提高方法，其特征在于利用仙鹤草乙醇提取物和玫烟色拟青霉同时处理烟粉虱，提高玫烟色拟青霉对烟粉虱的侵染力。
3、有益效果本发明的方法与现有技术相比，产生以下有益效果(1)突破传统单用杀虫真菌防治害虫，将植物源提取物同真菌一同防治害虫，提高杀虫真菌的控害效果，切实提高害虫生物防治水平；(2)植物源提取物和杀虫真菌环境相容性均好，用于害虫的防治，可有效减少环境污染。
具体实施例方式本发明的实施例是采用室内生物测定的方法。通过室内生物测定，明确仙鹤草乙醇提取物对玫烟色拟青霉侵染烟粉虱能力的提高作用。供试材料仙鹤草由同仁堂药店购得； 烟粉虱为室内番茄苗上饲养，玫烟色拟青霉为室内固体培养基培养。试验方法仙鹤草的乙醇提取用万能粉碎机将仙鹤草和苦楝皮中药粉碎，称取IOOg干粉放入IOOOml三角瓶中，加入75%乙醇450ml，在室温下(20°C -25°C )浸提14天，过滤。用旋转蒸发仪在水浴中减压浓缩，然后将提取物放置于-80°C冰箱内冷冻6h后，再放置于真空冷冻干燥机中进行干燥，真空抽提12h后得到仙鹤草乙醇提取物干粉，保存于4°C冰箱中备用。仙鹤草乙醇提取物对玫烟色拟青霉侵染力的影响试虫准备将生长旺盛的无虫健康番茄植株放置于养虫笼内，接入羽化24h的烟粉風成虫，产卵24h后移去烟粉風成虫,养虫笼置于养虫室中(温度25±1°C,光照L : D=14 10)，待烟粉虱发育至2龄若虫时备用，剪下番茄叶片，每张叶片上保留50-100头烟粉風若虫，番爺叶柄用浸有植物营养液的脱脂棉包裹。孢子悬浮液浓度的配制及处理选取试验中产孢量大和致病力强的玫烟色拟青霉菌株，在PDA培养基上大量培养分生孢子后，用O. I %吐温-80的无菌水稀释孢子，用血球计数板对孢子量进行计数，通过逐步稀释配置浓度为IO5个/ml孢子悬浮液。各处理分别为IO5个/ml孢子悬浮液、IO5个/ml孢子悬浮液加2mg/ml仙鹤草乙醇提取液、2mg/ml仙鹤草乙醇提取液，对照处理为O. 1%吐温-80的无菌水。采用浸叶法，将带有2龄烟粉虱若虫的番茄叶片浸入悬浮液，IOs后取出自然晾干，每处理为I个叶片，重复4次，将用脱脂棉包裹的番爺叶片置于9cm的培养皿中，放于光照培养箱内(温度25土 TC,光照L : D =
14 10，湿度65%)，每天观察其若虫的真菌感染情况，记录处理后烟粉虱死亡虫数，计算各处理校正死亡率。实施效果仙鹤草乙醇提取物对玫烟色拟青霉侵染烟粉虱能力的影响研究了仙鹤草乙醇提取物对玫烟色拟青霉侵染力的影响(表I)。比较I. OX IO5个/ml玫烟色拟青霉分生孢子悬浮液及相同浓度分生孢子悬浮液加2mg/ml仙鹤草乙醇提取物处理烟粉虱2龄若虫后的感染率，发现仙鹤草乙醇提取物能显著提高玫烟色拟青霉对烟粉虱的侵染能力。虽然在处理后6天内，仙鹤草乙醇提取物没有表现出显著提高玫烟色拟青霉对烟粉虱的侵染能力，玫烟色拟青霉单用及与仙鹤草混用这两个处理间的致死率无显著差异，但均显著高于仙鹤草单用的致死率(0.8% ) (F = 89. 772，df = 2，11，P =O.0000);在感染后8d，仙鹤草则显著提高了玫烟色拟青霉对烟粉虱的侵染力，仙鹤草加玫烟色拟青霉处理组对烟粉虱的致死率为50. 9 %，真菌单用的致死率为41. 9 %，两者差异显著(F = 157. 293，df = 2，11，P = O. 000);至处理后10d，仙鹤草对真菌侵染力的提高作用更明显，仙鹤草加玫烟色拟青霉处理组对烟粉虱的致死率为81. 6%，而真菌单用的致死率仅为 56.8%，极显著低于前者(F = 107.6, df = 2，11，P = O. 000)。表I仙鹤草和苦楝皮乙醇提取物对玫烟色拟青霉侵染烟粉虱能力的影响
权利要求
1.一种杀虫真菌侵染力的提高方法，其特征在于利用仙鹤草乙醇提取物和玫烟色拟青霉联合作用，提高真菌对烟粉虱的侵染力。
2.根据权利要求I所述的仙鹤草乙醇提取物和玫烟色拟青霉联合作用，其特征在于仙鹤草乙醇提取物和玫烟色拟青霉同时作用于烟粉虱。
全文摘要
本发明公开了一种利用植物源提取物提高杀虫真菌侵染能力的方法。针对玫烟色拟青霉对重大害虫烟粉虱侵染力总体不高的问题，利用仙鹤草乙醇提取物和玫烟色拟青霉一同处理烟粉虱，可明显提高玫烟色拟青霉对烟粉虱的侵染率，提升真菌的控害能力。同传统的单用玫烟色拟青霉进行害虫生物防治相比，此技术以重大害虫烟粉虱为靶标对象，利用仙鹤草乙醇提取物提高玫烟色拟青霉的侵染力，从而提高其控害效果。此技术不仅增效作用明显，而且安全性高，能够切实提高重大害虫的生物防治水平，将具有一定的应用前景。
文档编号A01N65/34GK102630710SQ20121010263
公开日2012年8月15日 申请日期2012年4月10日 优先权日2012年4月10日
发明者刘宝生, 方继朝, 瞿钰峰, 郭慧芳, 钟万芳 申请人:江苏省农业科学院