专利名称：一种四季草莓杂交选育方法
技术领域：
本发明涉及一种植物繁殖，即一种四季草莓杂交选育新型方法。
背景技术：
在现有技术中，我国草莓产业发展很快，不断育成和引进新的品种，这些草莓品种虽然各有差别，但共同的缺点为一季品种，只在每年I月中旬(温室栽培)至初夏季节集中上市，7月中旬至12月末是草莓市场的空缺期。草莓生产的经济效益首先取决于品种，四季草莓可多季结果，能够满足淡季市场需求，可见，选育和引种四季草莓品种尤为重要。目前关于草莓品种选育的报道较多，但关于四季草莓的育种研究报道极少。东方草莓iFragaria orientalis Losina-Losinsk.)是蔷薇科草莓属多年生草本植物，呈小群落分布于长白山海拔80(T1200 m的草地和林下等生境，其果实膨大较小、成熟后呈紫红色、味酸甜、有香气、果形为球形或卵形、产量极低，但东方草莓具有极强的抗寒性、抗旱性和抗病能力，是草莓育种的优良野生种质资源。卢比草莓(Ruby strawberry)是国外四季草莓品种，果实短楔形，呈深橘红色，有光泽，果肉较硬，耐运输，产量较高，但抗寒、旱和抗病等能力较差，并且卢比草莓在我国北方等高寒地区栽培易受冻害。草莓育种过程中存在母本去雄复杂、人工授粉可操作性差、产生纯杂交种子数量少等缺点和难点。
发明内容
本发明的目的是针对上述不足而提供一种通过草莓快速发生不育株作为母本，并将父本花粉制成花粉液的简捷、方便、杂交成功率高、杂交种纯正的一种四季草莓杂交选育方法。本发明的技术解决方案是一种四季草莓杂交选育方法，其步骤如下
(I)以东方草莓和卢比草莓试管苗为试材。(2)卢比草莓雄性不育株发生的调控方法
选择卢比草莓试管苗的匍匐茎苗若干株，温度控制在10 13 °C、光照时数为4 5h · Cf1和处理16 25 d后，促使卢比草莓产生雄性不育植株，待雄性不育株形成后，保留形态正常、饱满和较大的一级花蕾进行疏花，每株保存4 5个花蕾供授粉。(3)东方草莓花粉液母液的制备
将东方草莓提前栽培，保留形态正常、饱满和较大的一级花蕾进行疏花，花蕾开放当日，将花粉囊、花粉管一同取下，放入蒸馏水中悬浮，收集花粉；将收集的花粉与硼酸5. 2 g、蔗糖150 g、二水氯化钙12.5 mg，聚乙二醇4000 (PEG4000) 36 g (促使花粉充分分散)的蒸馏水混合液定容至I L作为母液备用，其中保证花粉含量为8 - 12g，pH6. O 7. O。(4)东方草 莓花粉喷施液制备和使用将IL母液用蒸馏水稀释成3 L，于温度18 22 °C条件下放置6小时，摇均后喷施卢比雄性不育株，待卢比草莓果实成熟后得种、栽培。步骤(4)中，喷施是指每隔3 6 h喷施I次，共喷施3次，最后I次喷施花粉液6 h后于植株上喷施I次大量清水以洗去残留即可。基于两个品种的优缺点，以东方草莓为父本，卢比草莓为母本采取杂交技术选育优质丰产综合抗性能力强的四季草莓新品种。本发明的优点是本发明利用草莓生长发育过程中所必需的温度、光照等因素，以母本卢比草莓为研究对象，通过改变温度和光照等因素促使卢比草莓出现雄性不育株(包括空花粉囊、花粉败育和雄蕊退化等)，并在适宜的环境下栽培父本东方草莓获得优质花粉制备高活性花粉喷施液，从而解决了母本花粉参与、父本花粉授粉不完全、杂交种子纯度低、获得种子数量少、获得优质杂交后代几率小和操作复杂等问题，以达到快速、简捷完成杂交选育新品种草莓的最终目标。下面将结合实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。
具体实施例方式—种四季草莓杂交选育方法
I材料与方法
1.1材料
以东方草莓和卢比草莓试管苗(由通化师范学院生物系植物组织培养实验室提供)为试材。1. 2 方法1.2.1卢比草莓雄性不育株发生的调控方法
八月末，选择生长 健壮、大小均匀的卢比草莓试管苗的匍匐茎苗3600株。通过调节温度(15 20 °C)、光照时数(5 10 h .(T1 )、光照强度(500 1000 Ix)和处理天数(12 45 d)促使卢比草莓产生雄性不育植株，为了快速和提高不育株的发生率，采用均匀设计法设计试验，选用U12 (124)均匀表，每个处理100株草莓苗，重复3次，筛选确定影响卢比草莓雄性不育株发生的最佳温度、光照时数、光照强度和处理天数。雄性不育株发生率=(雄性不育株数/100) X 100%。待雄性不育株形成后，保留形态正常、饱满和较大的一级花蕾进行疏花，每株保存4 5个花蕾供授粉。1.2.2东方草莓花粉液母液、喷施液的制备和使用
将东方草莓提前栽培于土壤肥沃、温湿度适宜的园圃中，待花芽分化、花序抽生后，保留形态正常、饱满和较大的一级花蕾进行疏花，每株保存6个花蕾。花蕾开放当日(未完全开放)，用镊子使花粉囊露出后将花粉囊连同O. 3 cm长的花粉管一同取下，放入100 mL的三角瓶中的蒸馏水中悬浮，达到取量后，将三角瓶用锡纸封口并置于恒温摇床上振荡培养(温度20 °C，转数120 rpm)l 2 h后，此时花粉囊几乎全部打开，花粉悬浮于水表面，滤除花粉囊等杂质后将花粉与硼酸5. 2 g、蔗糖150 g、二水氯化钙12. 5 mg，聚乙二醇4000(PEG4000) 36 g，用蒸馏水将以上成份定容至I L作为母液备用(保证花粉为10 g左右)，PH6. O 7. 0，于2 5 1条件下避光保存，保存期为I 2 d，最好现配先用。喷施液制备和使用将IL母液用蒸馏水稀释成3 L，于温度18 22 1条件下放置6小时(提高花粉活力)，再摇均后装入自制的喷施器内立即喷施卢比雄性不育株，每隔3 6 h喷施I次，喷施3次，最后I次喷施花粉液6 h后于植株上喷施I次大量清水以洗去残留即可。7 10 d可根据果实成果率、果实表面种子膨胀情况可确定花粉液的效能。
1. 2. 3在新品种草莓选育中的应用
待卢比草莓果实成熟并变为深红色后，将草莓摘下，将种子用清水洗出，置于通风处达到60%干度，与2倍量的细河砂混合均匀后放置到I 4 °C的冰柜中冷藏30 d后取出可直接散播于苗床上，覆盖腐熟松针后待种子萌发。杂交种子萌发后苗高达到3 5 cm时，定植于园圃的畦上，8月中下旬，取匍匐茎苗进行生产型定植于温室中，进行7 d左右5 °C的休眠后开始生长，注意水肥管理和病虫害防治。观察植株特性、果实形状等特性，从中选择优良性状品种快繁并进行区试栽培，进一步确定品种的遗传稳定性、植物学特性、果实性状、抗性、栽培模式和适应区域等。2结果与分析
2.1温度、光照时数、光照强度和处理时间对卢比草莓雄性败育株发生的影响
表I 影响卢比草莓雄性不育株发生的主要因素的U12(124)试验设计与结果
权利要求
1.一种四季草莓杂交选育方法，其步骤如下(1)以东方草莓和卢比草莓试管苗为试材；(2)卢比草莓雄性不育株发生的调控方法选择卢比草莓试管苗的匍匐茎苗若干株，温度控制在10 13 °C、光照时数为4 5 h · Cf1和处理16 25 d后，促使卢比草莓产生雄性不育植株，待雄性不育株形成后，保留形态正常、饱满和较大的一级花蕾进行疏花，每株保存4 5个花蕾供授粉；(3)东方草莓花粉液母液的制备将东方草莓提前栽培，保留形态正常、饱满和较大的一级花蕾进行疏花，花蕾开放当日，将花粉囊、花粉管一同取下，放入蒸馏水中悬浮，收集花粉；将收集的花粉与硼酸5. 2 g、 鹿糖150 g、二水氯化I丐12. 5 mg,聚乙二醇400036 g的蒸馏水混合液定容至I L作为母液备用，其中保证花粉含量为8 — 12g，pH6.0 7. O ；(4)东方草莓花粉喷施液制备和使用将IL母液用蒸馏水稀释成3L，于温度18 22 °C条件下放置6小时，摇均后喷施卢比雄性不育株，待卢比草莓果实成熟后得种、栽培。
2.按照权利要求1所述的四季草莓杂交选育方法，其特征在于步骤(4)中，喷施是指每隔3 6 h喷施I次，共喷施3次，最后I次喷施花粉液6 h后于植株上喷施I次大量清水以洗去残留即可。
全文摘要
本发明涉及一种植物繁殖，即一种四季草莓杂交选育方法。其步骤如下以东方草莓和卢比草莓试管苗为试材；卢比草莓雄性不育株发生的调控方法选择卢比草莓试管苗的匍匐茎苗若干株，温度控制在10～13℃、光照时数为4～5h·d-1和处理16～25d后，促使卢比草莓产生雄性不育植株；东方草莓花粉液母液的制备将东方草莓花粉与硼酸5.2g、蔗糖150g、二水氯化钙12.5mg，聚乙二醇4000 36g的蒸馏水混合液定容至1L作为母液备用，花粉含量为8－12g。将母液用蒸馏水稀释，于温度18～22℃条件下放置6小时，摇均后喷施卢比雄性不育株，待卢比草莓果实成熟后得种、栽培。
文档编号A01H1/02GK103039356SQ201310018958
公开日2013年4月17日 申请日期2013年1月18日 优先权日2013年1月18日
发明者顾地周, 姜云天, 朱俊义, 郭志欣, 杨丽娟, 陆爽, 潘雨, 禚玲玲, 张学士, 王秋爽, 付航, 倪伟佳 申请人:通化师范学院