一种马尾藻再生植株的诱导方法
【专利摘要】本发明公开了一种马尾藻再生植株的诱导方法，包括制备无菌外植体和将外植体接种于诱导培养基上诱导愈伤组织形成，诱导温度为15-20℃、光强为4000-5000Lx，光周期为8h；马尾藻假根于0.2%的聚维酮处理3min，然后于3%的次氯酸钠溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min可以获得无菌成活的外植体；1LPES培养基中添加ZT0.1-1mg、IAA1-2mg、抗坏血酸1-3g、蔗糖30g、琼脂7g，高温高压灭菌10-20min后有利于马尾藻形成芽。
【专利说明】一种马尾藻再生植株的诱导方法【技术领域】
[0001]本发明涉及植物组织培养【技术领域】，具体涉及一种马尾藻组织培养的方法。
【背景技术】
[0002]马尾藻是一种大型经济褐藻，藻体长度最大可达7 m以上，马尾藻形成的自然藻场蕴藏着丰富的生物资源，是鱼类、虾蟹类良好的繁育场所，是海洋生产力最高的生态系统之一。马尾藻富含糖类、脂类、蛋白质、维生素、矿物质和多种人体必需的微量元素，其开发利用前景非常广阔。马尾藻是一种多年生海藻，由于生长速度快、生物量大以及在浅海生态环境中重要的生态服务功能，可作为“蓝色碳汇”、藻场重建、生态系统环境修复、人工鱼礁和海洋牧场重要的构建物种之一，具有巨大的经济效益、生态效益和社会效益。马尾藻的种质资源比较匮乏，目前主要通过有性繁殖途径进行人工育种，繁殖时间比较长，且需要大量的种藻作为采孢子的来源，目前马尾藻的商业养殖尚不普及，主要以自然资源作为种质来源，不能为人工育种提供稳定、充足的种藻来源。
[0003]植物组织培养技术不但可以在短时间内繁殖出大量的愈伤组织或者丛生芽，且再生的植株与原始植株没有遗传差异性；而愈伤组织可以继代增殖形成新的愈伤组织，愈伤组织也可以诱导形成芽或根从而形成新的植株，此种繁殖方法的繁殖系数很高，可以达到事半功倍的效果，是最有效的植物培养方法。而马尾藻的组织培养技术目前还不成熟，还没有成功的方法可以稳定的形成大量的愈伤组织或者丛生芽。
【发明内容】
[0004]针对现有技术存在的缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种马尾藻再生植株的诱导方法，通过在假根上诱导马尾藻形成芽的途径达到无性育种的目的。
[0005]为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下:
一种马尾藻再生植株的诱导方法，包括如下步骤:以马尾藻的假根作为外植体，清洗干净后，于0.2%的聚维酮处理3min，然后于3%的次氯酸钠溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;将消毒后的外植体用无菌过滤海水清洗干净后切成长度为0.3-0.5mm的切段，将切段接种于添加激素的固体PES培养基中，于光照强度为4000-5000LX、光照时间为8h、温度为15-20°C的条件下培养20-30d至芽形成。
[0006]进一步的，所述的培养基的配置方法为，IL PES培养基中添加ZT 0.1-lmg、IAAl-2mg、抗坏血酸l_3g、鹿糖30g、琼脂7g,高温高压灭菌20min。
[0007]进一步的，所述的培养基的配置方法为，IL PES培养基中添加ZT 0.lmg, IAAlmg,抗坏血酸lg、鹿糖30g、琼脂7g,高温高压灭菌20min。
[0008]进一步的，所述的培养基的配置方法为，IL PES培养基中添加ZT lmg, IAA2mg、抗坏血酸3g、鹿糖30g、琼脂7g,高温高压灭菌20min。
[0009]进一步的，所述的培养基的配置方法为，IL PES培养基中添加ZT 0.5mg、IAAlmg,抗坏血酸2g、鹿糖30g、琼脂7g,高温高压灭菌20min。[0010]进一步的，所述的培养基的配置方法为，IL PES培养基中添加ZT lmg, IAAlmg、抗坏血酸3g、鹿糖30g、琼脂7g,高温高压灭菌20min。
[0011]进一步的，所述的培养基的配置方法为，IL PES培养基中添加ZT 0.5mg、IAA1.5mg、抗坏血酸3g、鹿糖30g、琼脂7g,高温高压灭菌20min。
[0012]本发明的有益效果是:
首次成功的以马尾藻假根作为外植体诱导芽形成，且芽的诱导率可以达到42%，芽可以进一步发育形成马尾藻植株，为马尾藻藻场提供丰富的种质资源。
【具体实施方式】
[0013]以下通过实施例进一步阐述本发明的有益效果:
实施例1:
以马尾藻的假根作为外植体，清洗干净后，于0.2%的聚维酮处理3min，然后于3%的次氯酸钠溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;将消毒后的外植体用无菌过滤海水清洗干净后切成长度为0.3-0.5mm的切段；将切段接种于固体PES培养基中，IL PES培养基中添加ZT 0.1mg> IAAlmg、抗坏血酸lg、鹿糖30g、琼脂7g ;于光照强度为4000_5000Lx、光照时间为8h、温度为18°C的条件下继续培养28d至芽形成；共接种100块假根切块，100块组织块中有20块外植体上有芽形成,芽的诱导率为20%。
[0014]实施例2:
以马尾藻的假根作为外植体，清洗干净后，于0.2%的聚维酮处理3min，然后于3%的次氯酸钠溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;将消毒后的外植体用无菌过滤海水清洗干净后切成长度为0.3-0.5mm的切段；将切段接种于固体PES培养基中，IL PES培养基中添加ZT lmg, IAA2mg、抗坏血酸3g、蔗糖30g、琼脂7g ;于光照强度为4000-5000Lx、光照时间为8h、温度为18°C的条件下继续培养28d至芽形成；共接种100块假根切块，100块组织块中有40块外植体上有芽形成,芽的诱导率为42%。
[0015]实施例3:
以马尾藻的假根作为外植体，清洗干净后，于0.2%的聚维酮处理3min，然后于3%的次氯酸钠溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;将消毒后的外植体用无菌过滤海水清洗干净后切成长度为0.3-0.5mm的切段；将切段接种于固体PES培养基中，IL PES培养基中添加ZT 0.5mg、IAAlmg、抗坏血酸2g、鹿糖30g、琼脂7g ;于光照强度为4000_5000Lx、光照时间为8h、温度为18°C的条件下继续培养28d至芽形成；共接种100块假根切块，100块组织块中有30块外植体上有芽形成，芽的诱导率为30%。
[0016]实施例4:
以马尾藻的假根作为外植体，清洗干净后，于0.2%的聚维酮处理3min，然后于3%的次氯酸钠溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;将消毒后的外植体用无菌过滤海水清洗干净后切成长度为0.3-0.5mm的切段；将切段接种于固体PES培养基中，IL PES培养基中添加ZT lmg, IAAlmg、抗坏血酸3g、蔗糖30g、琼脂7g ;于光照强度为4000-5000Lx、光照时间为8h、温度为18°C的条件下继续培养28d至芽形成；共接种100块假根切块，100块组织块中有38块外植体上有芽形成，芽的诱导率为38%。
[0017]实施例5:以马尾藻的假根作为外植体，清洗干净后，于0.2%的聚维酮处理3min，然后于3%的次氯酸钠溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;将消毒后的外植体用无菌过滤海水清洗干净后切成长度为0.3-0.5mm的切段；将切段接种于固体PES培养基中，IL PES培养基中添加ZT 0.5mg、IAA1.5mg、抗坏血酸3g、鹿糖30g、琼脂7g ;于光照强度为4000_5000Lx、光照时间为8h、温度为18°C的条件下继续培养28d至芽形成；共接种100块假根切块，100块组织块中有42块外植体上有芽形成,芽的诱导率为42%。 [0018]上述实例只是为说明本发明的技术构思以及技术特点，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明的实质所做的等效变换或修饰，都应该涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种马尾藻再生植株的诱导方法，其特征在于，包括如下步骤:以马尾藻的假根作为外植体，清洗干净后，于0.2%的聚维酮处理3min，然后于3%的次氯酸钠溶液中消毒5min，在于0.1%的升汞中消毒3min ;将消毒后的外植体用无菌过滤海水清洗干净后切成长度为0.3-0.5mm的切段，将切段接种于添加激素的固体PES培养基中，于光照强度为4000-5000LX、光照时间为8h、温度为15_20°C的条件下培养20_30d至芽形成。
2.根据权利要求1所述的马尾藻再生植株的诱导方法，其特征在于，所述的培养基的配置方法为，IL PES培养基中添加ZT 0.1-lmg, IAAl_2mg、抗坏血酸l_3g、蔗糖30g、琼脂7g，高温高压灭菌20min。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的马尾藻再生植株的诱导方法，其特征在于，所述的培养基的配置方法为，IL PES培养基中添加ZT 0.11^、^^11!^、抗坏血酸18、蔗糖3(^、琼脂7g,高温高压灭菌20min。
4.根据权利要求1或权利要求2所述的马尾藻再生植株的诱导方法，其特征在于，所述的培养基的配置方法为，IL PES培养基中添加ZT 11^、^^21!^、抗坏血酸38、蔗糖3(^、琼脂7g，高温高压灭菌20min。
5.根据权利要求1或权利要求2所述的马尾藻再生植株的诱导方法，其特征在于，所述的培养基的配置方法为，IL PES培养基中添加ZT 0.5mg、IAAlmg、抗坏血酸2g、蔗糖30g、琼脂7g,高温高压灭菌20min。
6.根据权利要求1或权利要求2所述的马尾藻再生植株的诱导方法，其特征在于，所述的培养基的配置方法为，IL PES培养基中添加ZT 11^、^^11!^、抗坏血酸38、蔗糖3(^、琼脂7g，高温高压灭菌20min。
7.根据权利要求1或权利要求2所述的马尾藻再生植株的诱导方法，其特征在于，所述的培养基的配置方法为，IL PES培养基中添加ZT 0.5mg、IAA1.5mg、抗坏血酸3g、蔗糖30g、琼脂7g,高温高压灭菌20min。
【文档编号】A01H4/00GK103621402SQ201310525496
【公开日】2014年3月12日 申请日期:2013年10月31日 优先权日:2013年10月31日
【发明者】张亚峰 申请人:张亚峰