板栗鞣花酸鞣质在制备抑菌剂中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供板栗鞣花酸鞣质在制备抑菌剂中的应用，所述板栗鞣花酸鞣质的制备方法为，将板栗栗蓬、栗花或栗叶经干燥后加工成粉末，加入至乙醇水溶液中，得到板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末的乙醇水分散液，对所述乙醇水分散液进行超声提取后再进行水浴回流提取，浓缩滤液经冷冻干燥即得板栗鞣花酸鞣质。本发明首次发现板栗鞣花酸鞣质具有较强的抗氧化性，极强的还原力，特别适用于羟基自由基、超氧自由基、DPPH自由基等的清除以及亚硝酸盐的还原，另外，板栗鞣花酸鞣质对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、米曲霉、黑曲霉等致病微生物具有较强的抑菌活性。
【专利说明】板栗鞣花酸鞣质在制备抑菌剂中的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及化学领域和微生物学领域，具体地说，涉及板栗鞣花酸鞣质在制备抑菌剂中的应用。
【背景技术】
[0002]板栗(Castanea mollissima Blume)属山毛棒科(Fagacene)植物，为落叶乔木。栗蓬是栗子的外刺苞，栗花为板栗雄花序，栗叶为板栗树叶。众多研究表明，栗蓬、栗花或栗叶中富含鞣花酸鞣质等植物多酚类物质。植物多酚是一类多羟基化合物，是一种天然的无毒的抗氧化剂，试验表明其具有较强的清除自由基和抗氧化能力，并对大肠杆菌有抑制作用，具有一定的药理作用。已经广泛应用于食品、药品和日用品。因此，对栗蓬、栗花或栗叶中鞣花酸鞣质进行制备，将其用于饲料工业原料、食品工业原料、化工业原料和医药产品，将具有广阔的开发和应用前景；在使板栗废弃物得到充分利用，减少环境污染的同时，也提高板栗的附加值，带动农村经济发展，对我国循环经济的发展，建设资源节约型、环境友好型社会具有十分重要的意义。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是提供板栗鞣花酸鞣质在制备抑菌剂中的应用。
[0004]为了实现本发明目的，本发明首先提供板栗鞣花酸鞣质在制备抗氧化剂中的应用，其中，所述板栗鞣花酸鞣质的制备方法为:将板栗栗蓬、栗花或栗叶经干燥后加工成粉末，加入至乙醇水溶液中，得到板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末的乙醇水分散液，对所述乙醇水分散液进行超声提取后再进行水浴回流提取，浓缩滤液经冷冻干燥即得板栗鞣花酸鞣质。
[0005]本发明还提供 板栗鞣花酸鞣质在制备还原剂中的应用，其中，所述板栗鞣花酸鞣质的制备方法为:将板栗栗蓬、栗花或栗叶经干燥后加工成粉末，加入至乙醇水溶液中，得到板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末的乙醇水分散液，对所述乙醇水分散液进行超声提取后再进行水浴回流提取，浓缩滤液经冷冻干燥即得板栗鞣花酸鞣质。
[0006]所述还原剂用于羟基自由基、超氧自由基、DPPH自由基等的清除以及亚硝酸盐的还原。
[0007]本发明进一步提供板栗鞣花酸鞣质在制备抑菌剂中的应用，其中，所述板栗鞣花酸鞣质的制备方法为:将板栗栗蓬、栗花或栗叶经干燥后加工成粉末，加入至乙醇水溶液中，得到板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末的乙醇水分散液，对所述乙醇水分散液进行超声提取后再进行水浴回流提取，浓缩滤液经冷冻干燥即得板栗鞣花酸鞣质。
[0008]所述抑菌剂用于抑制大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、米曲霉、黑曲霉等致病微生物。
[0009]具体地，上述板栗鞣花酸鞣质的制备方法为:将板栗栗蓬、栗花或栗叶经干燥后加工成粉末，向Ig板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末(粉末粒度为20-40目，优选20目)中加入10~40mL乙醇水溶液，得到板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末的乙醇水分散液，于40°C~50°C (优选40°C),40KHz超声提取30~40min(优选30min)后，于50°C~80°C(优选50°C或80°C)进行2次水浴回流提取，每次提取0.5~1.5h(优选0.5h、lh或1.5h)，浓缩滤液于-50°C~_60°C(优选-50°C、_56°C或 _60°C)冷冻干燥 15-25h (优选 15h、20h 或 25h)。
[0010]其中，使用乙醇水溶液进行水浴回流，所述乙醇水溶液中乙醇的质量百分含量为5%~45%(优选15%、30%或45%)。优选使用与初始加入的乙醇水溶液等体积的乙醇水溶液进行水浴回流。
[0011]本发明具有以下优点:
[0012]本发明首次提供板栗鞣花酸鞣质在制备抗氧化剂、还原剂和抑菌剂中的用途，并首次发现板栗鞣花酸鞣质具有较强的抗氧化性，极强的还原力，特别适用于羟基自由基、超氧自由基、DPPH自由基等的清除以及亚硝酸盐的还原，另外，板栗鞣花酸鞣质对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、米曲霉、黑曲霉等致病微生物具有较强的抑菌活性。
[0013]我国是世界板栗生产大国，随着板栗产量的持续增长和板栗加工产业的不断发展，使得生产过程中栗蓬、栗花和栗叶等废弃物急剧增加。对这些废弃物的传统处理方法通常为燃烧和自然堆弃腐烂，这不但给板栗栽培区域环境造成了不良的影响，同时也形成了资源浪费。板栗废弃物栗花、栗蓬、栗叶鞣花酸鞣质在氧化剂和抗菌剂的开发中具有潜在的利用价值，将这些废弃资源加以开发利用，使其变废为宝，利用从板栗废弃物中提取的天然抗氧化性物质，不仅可以延长食品的贮存期、货架期，而且有助于保护环境，更有助于提高食品安全性，避免了化学防腐杀菌剂的滥用及危害。
[0014]本发明通过对板栗废弃物加以充分利用，一方面减少环境污染，另一方面使其变废为宝，提高板栗的附加值，带动农村经济发展。为推动我国循环经济的发展，建设资源节约型、环境友好型社会具有十分重要的经济价值和社会意义。
【专利附图】
【附图说明】
[0015]图1为本发明实施例4中板栗栗蓬、栗花或栗叶鞣花酸鞣质提取物和VC的还原力比较结果。
[0016]图2为本发明实施例4中板栗栗蓬、栗花或栗叶鞣花酸鞣质提取物与VC对.0H清除作用的比较结果。
[0017]图3为本发明实施例4中板栗栗蓬、栗花或栗叶鞣花酸鞣质提取物与VC对O2- ?清除作用的比较结果。
[0018]图4为本发明实施例4中板栗栗蓬、栗花或栗叶鞣花酸鞣质提取物与VC对DPPH ?清除作用的比较结果。
[0019]图5为本发明实施例4中板栗栗蓬、栗花或栗叶鞣花酸鞣质提取物与VC对亚硝酸盐清除作用的比较结果。
[0020]图6A-图6D为本发明实施例5中板栗栗蓬、栗花或栗叶鞣花酸鞣质提取物溶液的抑菌效果比较；其中，图6A为大肠杆菌，图6B为枯草芽孢杆菌，图6C为米曲霉，图6D为黑曲霉。
[0021]图7为本发明实施例5中用板栗栗蓬、栗花或栗叶鞣花酸鞣质提取物水溶液处理土豆的防腐试验结果。
[0022]图8为本发明 实施例5中用板栗栗蓬、栗花或栗叶鞣花酸鞣质提取物水溶液处理茄子的防腐试验结果。[0023]图9为本发明实施例5中用板栗栗蓬、栗花或栗叶鞣花酸鞣质提取物水溶液处理ii腐的防腐试验结果。
[0024]图10为本发明实施例5中用板栗栗蓬、栗花或栗叶鞣花酸鞣质提取物水溶液处理猪肉的防腐试验结果。
[0025]图11为板栗鞋花酸HPLC高效液相色谱色谱图；其中，a为鞋花酸标准品16 U g/niL ；b为栗叶样品；c为栗花样品；d为栗包样品；EA:鞋花酸。
【具体实施方式】
[0026]以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。
[0027]实施例1板栗鞣花酸鞣质的制备
[0028]将板栗栗蓬、栗花或栗叶阴干后加工成粉末，向Ig板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末(粉末粒度为20目)中加入乙醇质量百分含量为30%的乙醇水溶液30mL，得到板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末的乙醇水分散液，于40°C，40KHz超声提取30min后，于80°C进行2次水浴回流提取，每次提取lh，浓缩滤液于_56°C冷冻干燥20h。其中，每次回流使用乙醇质量百分含量为30%的乙醇水溶液30mL进行。
[0029]实施例2板栗鞣花酸鞣质的制备
[0030]将板栗栗蓬、栗花或栗叶阴干后加工成粉末，向Ig板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末(粉末粒度为30目)中加入乙醇质量百分含量为15%的乙醇水溶液10mL，得到板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末的乙醇水分散液，于45°C，40KHz超声提取35min后，于60°C进行2次水浴回流提取，每次提取1.5h，浓缩滤液于-60°C冷冻干燥25h。其中，每次回流使用乙醇质量百分含量为15%的乙醇水溶液IOmL进行。
[0031]实施例3板栗鞣花酸鞣质的制备
[0032]将板栗栗蓬、栗花或栗叶阴干后加工成粉末，向Ig板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末(粉末粒度为20目)中加入乙醇质量百分含量为45%的乙醇水溶液40mL，得到板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末的乙醇水分散液，于50°C，40KHz超声提取40min后，于50°C进行2次水浴回流提取，每次提取0.5h，浓缩滤液于_50°C冷冻干燥15h。其中，每次回流使用乙醇质量百分含量为45%的乙醇水溶液40mL进行。
[0033]实施例4板栗鞣花酸鞣质抗氧化性的研究
[0034]1、还原力的测定
[0035]由于Fe2+比Fe3+更易被生物体吸收，而还原剂能够将铁氰化钾还原成亚铁氰化钾，亚铁氰化钾再与Fe3+作用生成普鲁士蓝，在700nm波长测定其吸光度值，以检测剩余的铁氰
化钾，与标准液的差值越大表示其还原力越高。
[0036]
【权利要求】
1.板栗鞣花酸鞣质在制备抑菌剂中的应用，其特征在于，所述板栗鞣花酸鞣质的制备方法为:将板栗栗蓬、栗花或栗叶经干燥后加工成粉末，加入至乙醇水溶液中，得到板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末的乙醇水分散液，对所述乙醇水分散液进行超声提取后再进行水浴回流提取，浓缩滤液经冷冻干燥即得板栗鞣花酸鞣质。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抑菌剂用于抑制大肠杆菌、枯草芽孢杆囷、米曲霉、黑曲霉。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述板栗鞣花酸鞣质的制备方法为:将板栗栗蓬、栗花或栗叶经干燥后加工成粉末，向Ig板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末中加入10~40mL乙醇水溶液，得到板栗栗蓬、栗花或栗叶粉末的乙醇水分散液，于40°C~50°C，40KHz超声提取30~40min后，于50°C~80°C进行2次水浴回流提取，每次提取0.5~1.5h，浓缩滤液于_50°C~_60°C冷冻干燥15-25h ； 其中，使用乙醇水溶液进行水浴回流，所述乙醇水溶液中乙醇的质量百分含量为5%~45%
【文档编号】A01N43/90GK103601733SQ201310654019
【公开日】2014年2月26日 申请日期:2013年12月5日 优先权日:2013年12月5日
【发明者】秦岭, 姜奕晨, 曹庆芹, 杨柳, 张小琴, 成军, 张卿, 房克凤 申请人:北京农学院