一种大菱鲆与星斑川鲽的杂交繁育方法
【专利摘要】本发明公开了一种雄性大菱鲆和雌性星斑川鲽杂交繁育方法，主要内容包括：1）选用大菱鲆雄鱼作为父本，星斑川鲽雌鱼作为母本，分别采用不同条件使两者达到同步成熟；2）人工受精，受精率达70%；3）孵化水温（8±0.5）℃，受精卵80小时后脱膜孵化，孵化率为82%；4）投喂自己强化培养的饵料培育仔稚鱼逐渐过渡到投喂配合饲料，幼苗成活率达71%。本发明不仅为鲆鲽类的大规模养殖提供了新的品种，对鱼类遗传育种的研究具有重要意义。
【专利说明】—种大菱鲆与星斑川鲽的杂交繁育方法
【技术领域】
[0001]本发明属于海水鱼类苗种繁育【技术领域】，具体涉及一种大菱鲆与星斑川鲽的杂交繁育方法，即一种以大菱鲆雄鱼X星斑川鲽雌鱼人工杂交培育具备优良性状新品种的繁育方法。
【背景技术】
[0002]大菱鲆{Scophthamus maxi mu s)是欧洲名贵的经济鱼种，它适应低水温环境、生长快、抗逆性强、肉质细嫩、胶质丰富、口感独特，深受养殖者和消费者的喜爱。自1992年引入我国以来，在我国北方沿海迅速发展，成为我国北方海水养殖的一项支柱产业。人工养殖条件下，驯化的大菱鲆通过控温、控光，可实现全年繁殖。星斑川鲽
系冷温性鱼类，具有广温、广盐，尤其耐低氧能力、低温能力和抗病力强，耗氧率低，养殖成活率高，可以自然越冬等诸多优点。加之其耐运输、耐冷冻，冷藏后肉质基本不变，营养价值高，口感独特，作为高级生鱼片的主要原料，在国内外市场上深受欢迎，已成为新兴的养殖对象。目前，关于鲆鲽类杂交有诸多报道，有关大菱鲆雄鱼X星斑川鲽雌鱼杂交尚未见报道。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是提供一种大菱鲆与星斑川鲽的杂交繁育方法，即通过不同的养殖水温、光照和营养来控制大菱鲆雄鱼和星斑川鲽雌鱼性腺同步发育；使用人工杂交育种的方法，使大菱鲆雄鱼和星斑川鲽雌鱼杂交，培育新的品种，从而弥补现有技术的不足。
[0004]本发明的杂交繁育方法，包括有如下的步骤:
1)亲鱼选择`
选择的父本亲鱼为形态正常、无缺损、健康的3龄大菱鲆雄鱼，所选 的母本为形态正常、无缺损、健康的3龄星斑川鲽雌鱼；
2)亲鱼培育和生殖调控
将选择的亲鱼分别采用不同的条件进行培育，主要通过控制温度、光照和营养来调节性腺发育的同步性。
[0005]3)人工受精与孵化
用传统干法受精，受精完成15min后，将受精卵放入洗卵袋中，用清新消毒海水洗卵，然后将卵加满清新海水静置，取上浮卵进行孵化；
受精卵的孵化条件:受精卵在水温8±0.5°C、盐度28~30、pH7.8 ~8.2、微充气条件下孵化；
4)仔、稚鱼和幼鱼培育
孵化的幼苗的布池密度0.7 X IO4尾/m3，光照强度100~5001x ;初期培育水温为8°C，第5日龄水温逐渐升高0.5°C/2d至16°C，之后保持不变，水温日变化不超过1°C ;盐度为28~32, pH值8.0~8.2 ;仔鱼布池水深40cm,第3~7天逐渐加水至90cm,第4天开始每天同温换水，并逐渐增大换水量，第10天换水率30%~40%,第20天为100%。7天前不吸底，之后每日吸底、清除污物1-2次；
仔鱼布池前向池中添加小球藻，保持其密度2.0X IO5个/毫升；仔鱼第3天开口摄食时投喂轮虫并保持密度2~3个/毫升，12天左右投喂卤虫无节幼体，12~15天保持卤虫无节幼体密度0.5~I个/毫升，15天后逐渐增至I~2个/毫升，同时停止轮虫投喂；轮虫、卤虫无节幼体投喂前用小球藻及富含DHA、EPA和卵磷脂的强化剂进行16小时的营养强化。18天诱导仔鱼摄食配合饵料。
[0006]本发明根据大菱鲆雄鱼和星斑川鲽雌鱼性腺发育规律，采用营养强化和环境调控结合的方法，诱导亲鱼同步性成熟。本发明母本星斑川鲽具有广温、广盐的特点，与大菱鲆杂交后代适应能力强，白化率低，生长快，适合较大范围推广养殖。本发明通过干法受精，受精率达到70%，孵化率达82%，成活率达71%。
【具体实施方式】
[0007]下面结合实施例对本发明的方法进行详细的描述:
实施例1
I)确定亲本:父本选用大菱鲆，母本选用星斑川鲽。
[0008]2)父本的培育:选用3龄 大菱鲆亲鱼30尾进行亲鱼强化培育，培养密度为I尾/m2,饲养用水由海水和井水调配形成，日换水量为600%。投喂经消毒冰鲜的玉筋鱼、缇鱼等鲜杂鱼鱼肉，日投喂两次(7:00,16:00)，根据摄食情况，日投喂量占其体重的1-3.5%，灯光控制光照，光照强度150-5001x，光照时间由10L/14D到8L/16D。水温由8°C逐渐调至12°C，强化培育前30天，每10天取I尾鱼的性腺进行目测和组织切片分析确定性腺发育情况，与母本的性腺发育情况进行比较，每次升温0.5°C，随着腹部的膨大，观察腹部发育情况每6天升温一次，每次升温0.5°C至12°C。
[0009]母本的培育:选用3龄星斑川鲽亲鱼20尾进行亲鱼强化培育，培养密度为I尾/m2,饲养用水由海水和井水调配形成，日换水量为600%。投喂经消毒冰鲜的黄花鱼、沙丁鱼、牡蛎肉等，每公斤饲料中添加0.5-2%。维生素C，0.3-0.4%。维生素E, 0.8%。的复合维生素，
0.6%的DHA, 1.2%的卵磷脂，0.2%。的硫酸锌，日投喂两次(7:00，16:00),日投喂量占其体重的1_3%。用灯光控制亲鱼池光照，光照强度150-3601x，光照时间由10L/14D到16L/8D。水温由6°C逐渐调至8°C，强化培育前30天，每10天取I尾鱼的性腺进行目测和组织切片分析确定性腺发育情况，每次升温0.5°C。观察性腺发育情况，性腺发育至第四期时水温升至8°C不变。
[0010]3)人工杂交受精
将亲鱼用湿毛巾包裹、用脱脂棉将生殖孔擦拭干净，双手在亲鱼腹部两侧同时均匀用力，自后而前徐徐挤压腹部，即有精液或卵子流出。将精液盛放入经消毒的干燥烧杯中待用。使用经消毒的2000毫升烧杯接取卵子。
[0011]人工干法授精:将精液滴入盛有卵子的烧杯中，边缓缓加入清新消毒的海水边搅拌，搅拌过程大约持续5-6分钟，静置15分钟后，将受精卵放入80目筛絹的洗卵袋内，用清新消毒海水(8±0.5) °C洗卵3遍，然后将卵倒入2000毫升量筒加满清新海水静置30分钟。[0012]受精卵孵化:取上浮卵子置于1X0.5m网箱孵化，水温8±0.5°C、盐度28~30、PH7.8~8.2、微充气条件下孵化，80小时后脱膜孵化，孵化率为82%。
[0013]4)仔、稚鱼和幼鱼培育
育苗用水为砂滤海水和井水。初孵仔鱼静水、微充气培育，布池密度0.7 X IO4尾/m3，随着生长逐渐降低密度。光照强度100~5001x。初期培育水温为8°C，第5日龄水温逐渐升高0.5°C /2d至16°C，之后保持不变，水温日变化不超过1°C。盐度为28~32，pH值8.0~
8.2。仔鱼布池水深40cm，第3~7天逐渐加水至90cm，第4天开始每天同温换水，并逐渐增大换水量，第10天换水率30%~40%，换水率逐渐升高，至20天换水率为200%。7天前不吸底，之后每日吸底、清除污物1-2次。
[0014]饲料:仔鱼布池前向池中添加小球藻，保持其密度2.0 X IO5个/毫升。仔鱼第3天开口摄食，此时投喂轮虫并保持密度2~3个/毫升。12天左右投喂卤虫无节幼体，12~15天保持卤虫无节幼体密度0.5~I个/毫升，15天后逐渐增至I~2个/毫升，同时停止轮虫投喂。轮虫、卤虫无节幼体投喂前需要用小球藻及富含DHA、EPA和卵磷脂的强化剂进行16小时的营养强化。根据摄食情况逐渐增加饲料料。
[0015]采用此培育方法雌雄亲鱼基本能够达到同步成熟，并且雌鱼的卵子质量较高，正常率为83%，受精率为70%，孵化率达到82%以上，幼苗成活率达71%，生长较快，畸形率为
3.5%，白化率极少，培育60天`获得平均体长4.5cm的优质幼苗80万尾。
【权利要求】
1.一种大菱鲆与星斑川鲽的杂交繁育方法，其特征在于，所述的杂交繁育方法是用大菱鲆雄鱼和星斑川鲽雌鱼作为亲本进行杂交。
2.如权利要求1所述的杂交繁育方法，包括有如下的步骤: 1)亲鱼选择 选择的父本亲鱼为形态正常、无缺损、健康的3龄大菱鲆雄鱼，所选的母本为形态正常、无缺损、健康的3龄星斑川鲽雌鱼； 2)亲鱼培育和生殖调控 将选择的亲鱼进行培育，调节性腺发育的同步性； 3)人工受精与孵化 用传统干法受精，受精完成15min后，将受精卵放入洗卵袋中，用清新消毒海水洗卵，然后将卵加满清新海水静置，取上浮卵进行孵化。
3.如权利要求2所述的杂交繁育方法，其特征在于所述的步骤3)中受精卵的孵化条件如下:受精卵在水温8±0.5°C、盐度28~30、pH7.8~8.2、微充气条件下孵化。
4.如权利要求2所述的杂交繁育方法，其特征在于还包括有仔、稚鱼和幼鱼培育步骤，具体如下: 孵化幼苗的布池密度0.7 X IO4尾/m3，光照强度100~5001x ;初期培育水温为8°C，第5日龄水温逐渐升高0.5°C /2d至16°C，之后保持不变，水温日变化不超过1°C;盐度为28~32, pH值8.0~8.2 ;仔鱼布池水深40cm,第3~7天逐渐加水至90cm,第4天开始每天同温换水，并逐渐增大换水量，第10天换水率30%~40%，第20天为100% ；7天前不吸底，之后每日吸底、清除污物1-2次； 仔鱼布池前向池中添加小球藻，保持其密度2.0X IO5个/毫升；仔鱼第3天开口摄食时投喂轮虫并保持密度2~3个/毫升，12天左右投喂卤虫无节幼体，12~15天保持卤虫无节幼体密度0.5~I个/毫升，15天后逐渐增至I~2个/毫升，同时停止轮虫投喂。
5.如权利要求2所述的杂交繁育方法，其特征在于所述的轮虫、卤虫无节幼体投喂前用小球藻及富含DHA、EPA和卵磷脂的强化剂进行16小时的营养强化；18天开始诱导仔鱼摄食配合饵料。
【文档编号】A01K61/00GK103749369SQ201410055279
【公开日】2014年4月30日 申请日期:2014年2月19日 优先权日:2014年2月19日
【发明者】方华华, 侯竹美 申请人:青岛农业大学