一种快捷简便的叶蝉消化器官解剖方法
【专利摘要】本发明提供了一种快捷简便的叶蝉消化器官解剖方法，属于昆虫解剖学领域。本方法能在短时间内得到完整的叶蝉消化道，最大程度减少细胞成分的损失，保证细胞内超微结构的原始状态保存完好，便于下一步实验得到良好结果。本申请利用消化道连接着头部的唾液腺和尾部的直肠，用抽拉的方法小心将消化道解剖出来，不损伤消化器官，也不破坏叶蝉躯壳，最大程度保存了昆虫的完整性。
【专利说明】一种快捷简便的叶蝉消化器官解剖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种快捷简便的叶蝉消化器官解剖方法，属于昆虫解剖学领域。
【背景技术】
[0002]解剖学是涉及生命体的结构和组织的生物学分支学科；可以分为动物解剖学和植物解剖学。解剖学的主要分支是比较解剖学、组织学和人体解剖学。在解剖学研究中，研究大体器官常利用剖割的方法；组织、细胞、细胞器的观察则会利用显微镜。
[0003]昆虫解剖是研究介体与病原物互作机理的重要技术，是进行电镜和免疫荧光观察病原物侵染消化道实验的前提。叶蝉是该方面研究较为常见的介体昆虫。此类昆虫体型小，3龄若虫体长约为2.0-2.5mm，成虫体长约为5mm，消化道小且娇嫩，因此解剖叶蝉需要较多耐心、熟练的技术和合理的方法。
[0004]一般的解剖方法是从叶蝉外部体壁往里剥，找到一段消化道后，顺着该段继续剥，直至剥出完整的消化道。这种方法不仅对消化道损伤很大，影响实验结果和质量，而且难度大，因为从外往内剥，消化道经常会卷在真皮层中，不容易发觉，有时剥完了整只叶蝉都找不到消化道，浪费了实验材料。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种快捷简便的叶蝉消化器官解剖方法，能在短时间内得到完整的叶蝉消化道，最大程度减少细胞成分的损失，保证细胞内超微结构的原始状态保存完好，便于下一步实验得到良好结果。
[0006]为实现上述目的，本发明采用如下技术方案:
一种快捷简便的叶蝉消化器官解剖方法，包括以下步骤:
1)将收集到的叶蝉置于玻璃试管内，放于冰上麻痹；
2)在载玻片上滴I滴缓冲液，置于显微镜下；
3)将麻痹后的叶蝉移至载玻片上的缓冲液中，腹部朝上；
4)若为若虫，一边轻夹虫体以便固定,一边夹住头部轻轻抽拉,使头部剥离体躯,但食道仍连接着头部和胸腹；继续夹紧，小心移动，渐渐抽拉出大部分消化道；随着持续移动，原本连接尾部的消化道末端会自行脱离尾部，最终得到完整的消化道器官，同时不会大面积损坏叶蝉体躯；
5)若为成虫，先摘除头部，接着一边夹住腹节倒数第二节侧边，一边夹住尾部的产卵器或交配器，并小心慢慢撕开该段腹节的节间膜，露出消化道器官；继续撕，渐渐抽拉出位于腹部的完整消化道，而此时肠道的末端仍连在尾部，因此稍稍拉断连接尾部的肠道末段，便得到完整的消化道器官。
[0007]所述的缓冲液为清水或磷酸缓冲液，其中磷酸缓冲液浓度为0.01 mol/L, pH值为7.4。
[0008]所述消化道器官为中肠和后肠。[0009]本发明的优点在于:利用消化道连接着头部的唾液腺和尾部的直肠，用抽拉的方法小心将消化道解剖出来，不损伤消化器官，也不破坏叶蝉躯壳，最大程度保存了昆虫的完整性。
【专利附图】
【附图说明】
[0010]图1叶蝉成虫完整的消化道器官。
【具体实施方式】
[0011]材料和试剂:载玻片，玻璃试管，冰，磷酸缓冲液(PBS)浓度为0.01 mol/L，pH值为
7.4。
[0012]仪器和工具:体视显微镜、尖头镊子(电镜专用)。
[0013]实施例1
1.将收集到的叶蝉若虫置于玻璃试管内，放于冰上麻痹。
[0014]2.在载玻片上滴I滴PBS，置于体视显微镜下。
[0015]3.将麻痹后的叶蝉移至载玻片上的PBS中，腹部朝上。
[0016]4.左手用镊子轻夹虫体以便固定，右手用镊子夹住头部稍稍向右移动，使头部剥离体躯，但食道仍连接着头部和胸腹。右手继续加紧镊子，小心向右移动，渐渐抽拉出大部分消化道(中肠)。随着右手的持续移动，原本连接尾部的消化道末端会自行脱离尾部，最终得到完整的消化道器官(中肠和后肠)，同时不会大面积损坏叶蝉体躯。
[0017]实施例2
1、将收集到的叶蝉雌成虫置于玻璃试管内，冰上麻痹。
[0018]2、在载玻片上滴I滴PBS，置于体视显微镜下。
[0019]3、将麻痹后的叶蝉移至载玻片上的PBS中，腹部朝上。
[0020]4、左手用镊子轻夹虫体以便固定，右手用镊子摘除头部。而后，右手用镊子夹住腹节倒数第二节侧边，左手用镊子夹住尾部的产卵器，并小心慢慢向左移动，逐渐撕破该段腹节的节间膜，露出消化道器官(中肠)。继续左手向左移动，渐渐抽拉出位于腹部的完整消化道。而此时肠道的末端仍连在尾部，因此用镊子稍稍拉断连接尾部的肠道末段，便可得到完整的消化道器官(中肠和后肠)。
[0021]实施例3
1、将收集到的叶蝉雄成虫置于玻璃试管内，放于冰上麻痹。
[0022]2、在载玻片上滴I滴PBS，置于体视显微镜下。
[0023]3、将麻痹后的叶蝉移至载玻片上的PBS中，腹部朝上。
[0024]4、左手用镊子轻夹虫体以便固定，右手用镊子摘除头部。而后，右手用镊子夹住腹节倒数第二节侧边，左手用镊子夹住尾部的交配器，并小心慢慢向左移动，逐渐撕破该段腹节的节间膜，露出消化道器官(中肠)。继续左手向左移动，渐渐抽拉出位于腹部的完整消化道。而此时肠道的末端仍连在尾部，因此用镊子稍稍拉断连接尾部的肠道末段，便可得到完整的消化道器官(中肠和后肠)。
[0025]以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
【权利要求】
1.一种快捷简便的叶蝉消化器官解剖方法，其特征在于:包括以下步骤: 1)将收集到的叶蝉置于玻璃试管内，放于冰上麻痹； 2)在载玻片上滴I滴缓冲液，置于显微镜下； 3)将麻痹后的叶蝉移至载玻片上的缓冲液中，腹部朝上； 4)若为若虫，一边轻夹虫体以便固定,一边夹住头部轻轻抽拉,使头部剥离体躯,但食道仍连接着头部和胸腹；继续夹紧，小心移动，渐渐抽拉出大部分消化道；随着持续移动，原本连接尾部的消化道末端会自行脱离尾部，最终得到完整的消化道器官，同时不会大面积损坏叶蝉体躯； 5)若为成虫，先摘除头部，接着一边夹住腹节倒数第二节侧边，一边夹住尾部的产卵器或交配器，并小心慢慢撕开该段腹节的节间膜，露出消化道器官；继续撕，渐渐抽拉出位于腹部的完整消化道，而此时肠道的末端仍连在尾部，因此稍稍拉断连接尾部的肠道末段，便得到完整的消化道器官。
2.根据权利要求1所述的一种快捷简便的叶蝉消化器官解剖方法，其特征在于:所述的缓冲液为清水或磷酸缓冲液；其中磷酸缓冲液浓度为0.01 mol/L, pH值为7.4。
3.根据权利要求1所述的一种快捷简便的叶蝉消化器官解剖方法，其特征在于:所述消化道器官为中肠和后肠。
【文档编号】A61D1/00GK103800090SQ201410067296
【公开日】2014年5月21日 申请日期:2014年2月27日 优先权日:2014年2月27日
【发明者】陈红燕, 魏太云, 陈倩, 毛倩卓, 贾东升, 吴维 申请人:福建农林大学