驱蚊香草的组织培养方法
【专利摘要】本发明公开了一种驱蚊香草的组织培养方法，该方法是以驱蚊香草的幼嫩叶片为外植体，经过外植体处理、外植体接种分化、继代培养、生根培养和移栽的步骤培育而成，具有培养方法简单，繁殖周期短、成活率高、成本低廉的特点，适于批量生产。
【专利说明】驱蚊香草的组织培养方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及植物组织培养方法，具有涉及驱蚊香草的组织培养方法。
【背景技术】
[0002]驱蚊香草(Pelargonium citrosum Vanleenii ),又名净蚊香草、驱蚊草，属牦儿苗科天竺葵属多年生转基因植物，其叶片散发的香茅醛具有柠檬香驱蚊作用，常用于驱蚊。与传统的驱蚊、灭蚊产品相比，驱蚊香草更加廉价、环保。驱蚊香草不仅驱蚊效果好，其柠檬香味还有较强的空气净化的作用，以及对人体有安神、醒脑，促进睡眠的作用，对人体无毒副作用。因其一年四季常绿，可作盆景用来观赏，是近年来较受人们喜爱的绿花观赏植物。且驱蚊香草的全株可入药,有极高的药用价值,主要用于治疗风湿、氙气等症。
[0003]驱蚊香草的价值越来越受到人们的关注，但由于驱蚊香草是融合体，不能进行有性繁殖，而扦插繁殖用材多、速度有限，多次扦插又会使植株退化、易感染病毒，繁殖的时间和植株的成活率受到限制。
【发明内容】
[0004]针对上述的不足，本发明所要解决的技术问题是提供一种以驱蚊香草的幼嫩叶片为外植体，培养方法简单，繁殖周期短、成活率高，适于批量生产的驱蚊香草的组织培养方法。
[0005]为解决上述问题，本发明通过以下技术方案实现:
[0006]驱蚊香草的组织培养方法，包括如下步骤:`[0007]I)外植体处理:选用驱蚊香草幼嫩叶片作为外植体，并留叶柄长度为I~3cm，然后用自来水冲洗12~25min,再于无菌条件下75%酒精处理2~5s,再用0.1%升萊处理2~8min,最后用无菌水冲洗4~7次即可；
[0008]2)外植体接种分化:先用无菌滤纸将步骤I)处理得的外植体吸干水分，然后将叶柄扦插接种于MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L的分化培养基上，于温度为25~28°C、相对湿度为60~70%和光照强度为1800~25001x的条件下培养30~45天至分化出芽，得分化芽；
[0009]3)继代培养:将长至0.5~1.5cm的分化芽接种于MS+6-BA0.4mg/L的增殖培养基上，增殖培养20~30天，得增殖芽；
[0010]4)生根培养:当增值芽长至2.5~3.0cm时转接于MS+NAA0.4mg/L的生根培养基上，培养12~18天，得生根苗；
[0011]5)移栽:将步骤4)培养好的生根苗置于18~25°C的温室中，炼苗3~4天，然后移栽于细沙土:草炭=2:1的混合基质的苗床上，每隔3~6小时向叶面喷水，即可。
[0012]所述分化培养基、增殖培养基和生根培养基均于1.03 X IO5PaUlO~125°C的条件下，湿热灭菌12~20min制备而成。
[0013]进一步地，所述分化培养基、增殖培养基和生根培养基均加有蔗糖3%和琼脂7g/L0
[0014]本发明的优点为:
[0015]本发明以驱蚊香草的幼嫩叶片为外植体，经过外植体处理、外植体接种分化、继代培养、生根培养和移栽的步骤培育而成，具有培养方法简单，繁殖周期短、成活率高的特点，适于批量生产。
【具体实施方式】
[0016]下面结合具体实施例对本发明作进一步的解释说明，但不局限于这些实施例。
[0017]实施例1
[0018]驱蚊香草的组织培养方法，包括如下步骤:
[0019]I)外植体处理:选用驱蚊香草幼嫩叶片作为外植体，并留叶柄长度为1cm，然后用自来水冲洗25min,再于无菌条件下75%酒精处理2s,再用0.1%升萊处理8min,最后用无菌水冲洗4次即可；
[0020]2)外植体接种分化:先用无菌滤纸将步骤I)处理得的外植体吸干水分，然后将叶柄扦插接种于MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L的分化培养基上，于温度为25°C、相对湿度为70%和光照强度为ISOOIx的条件下培养30天至分化出芽，得分化芽；
[0021]3)继代培养:将长至0.5cm的分化芽接种于MS+6-BA0.4mg/L的增殖培养基上，增殖培养30天，得增 殖芽；
[0022]4)生根培养:当增值芽长至2.5cm时转接于MS+NAA0.4mg/L的生根培养基上，培养18天，得生根苗；
[0023]5)移栽:将步骤4)培养好的生根苗置于18°C的温室中，炼苗4天，然后移栽于细沙土:草炭=2:1的混合基质的苗床上，每隔3小时向叶面喷水，即可。
[0024]所述分化培养基、增殖培养基和生根培养基均于1.03X 105Pa、125°C的条件下，湿热灭菌12min制备而成，且均加有蔗糖3%和琼脂7g/L。
[0025]实施例2
[0026]驱蚊香草的组织培养方法，包括如下步骤:
[0027]I)外植体处理:选用驱蚊香草幼嫩叶片作为外植体，并留叶柄长度为3cm，然后用自来水冲洗12min,再于无菌条件下75%酒精处理5s,再用0.1%升萊处理2min,最后用无菌水冲洗7次即可；
[0028]2)外植体接种分化:先用无菌滤纸将步骤I)处理得的外植体吸干水分，然后将叶柄扦插接种于MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L的分化培养基上，于温度为28°C、相对湿度为60%和光照强度为25001x的条件下培养45天至分化出芽，得分化芽；
[0029]3)继代培养:将长至1.5cm的分化芽接种于MS+6-BA0.4mg/L的增殖培养基上，增殖培养20天，得增殖芽；
[0030]4)生根培养:当增值芽长至3.0cm时转接于MS+NAA0.4mg/L的生根培养基上，培养12天，得生根苗；
[0031]5)移栽:将步骤4)培养好的生根苗置于25°C的温室中，炼苗3天，然后移栽于细沙土:草炭=2:1的混合基质的苗床上，每隔6小时向叶面喷水，即可。
[0032]所述分化培养基、增殖培养基和生根培养基均于1.03X 105Pa、110°C的条件下，湿热灭菌20min制备而成，且均加有蔗糖3%和琼脂7g/L。
[0033]实施例3
[0034]驱蚊香草的组织培养方法，包括如下步骤:
[0035]I)外植体处理:选用驱蚊香草幼嫩叶片作为外植体，并留叶柄长度为2cm，然后用自来水冲洗20min,再于无菌条件下75%酒精处理3s,再用0.1%升萊处理5min,最后用无菌水冲洗6次即可；
[0036]2)外植体接种分化:先用无菌滤纸将步骤I)处理得的外植体吸干水分，然后将叶柄扦插接种于MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L的分化培养基上，于温度为27°C、相对湿度为65%和光照强度为21001x的条件下培养40天至分化出芽，得分化芽；
[0037]3)继代培养:将长至1.0cm的分化芽接种于MS+6-BA0.4mg/L的增殖培养基上，增殖培养25天，得增殖芽；
[0038]4)生根培养:当增值芽长至2.8cm时转接于MS+NAA0.4mg/L的生根培养基上，培养15天，得生根苗；
[0039]5)移栽:将步骤4)培养好的生根苗置于20°C的温室中，炼苗4天，然后移栽于细沙土:草炭=2:1的混合基质的苗床上，每隔4小时向叶面喷水，即可。
[0040]所述分化培养基、增殖培养基和生根培养基均于1.03X 105Pa、120°C的条件下，湿热灭菌15min制备而成，且均加有蔗糖3%和`琼脂7g/L。
【权利要求】
1.驱蚊香草的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤: 1)外植体处理:选用驱蚊香草幼嫩叶片作为外植体，并留叶柄长度为I~3cm，然后用自来水冲洗12~25min,再于无菌条件下75%酒精处理2~5s,再用0.1%升萊处理2~8min,最后用无菌水冲洗4~7次即可； 2)外植体接种分化:先用无菌滤纸将步骤I)处理得的外植体吸干水分，然后将叶柄扦插接种于MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L的分化培养基上，于温度为25~28°C、相对湿度为60~70%和光照强度为1800~25001x的条件下培养30~45天至分化出芽，得分化芽； 3)继代培养:将长至0.5~1.5cm的分化芽接种于MS+6-BA0.4mg/L的增殖培养基上，增殖培养20~30天，得增殖芽； 4)生根培养:当增值芽长至2.5~3.0cm时转接于MS+NAA0.4mg/L的生根培养基上，培养12~18天，得生根苗； 5)移栽:将步骤4)培养好的生根苗置于18~25°C的温室中，炼苗3~4天，然后移栽于细沙土:草炭=2:1的混合基质的苗床上，每隔3~6小时向叶面喷水，即可。
2.根据权利要求1所述的驱蚊香草的组织培养方法，其特征在于:所述分化培养基、增殖培养基和生根培养基均于1.03 X IO5PaUlO~125°C的条件下，湿热灭菌12~20min制备而成。
3.根据权利要求1所述的驱蚊香草的组织培养方法，其特征在于:所述分化培养基、增殖培养基和生根培养基均加有蔗糖·3%和琼脂7g/L。
【文档编号】A01H4/00GK103814822SQ201410071786
【公开日】2014年5月28日 申请日期:2014年2月28日 优先权日:2014年2月28日
【发明者】黎雁欣 申请人:黎雁欣