一种供试铃木氏果蝇的人工饲养方法
【专利摘要】本发明涉及一种供试昆虫的人工饲养方法，特别涉及一种供试铃木氏果蝇的人工饲养方法。本发明用人工合成饲料培养基取代了现有的全程使用葡萄作为饲料的饲养方法，同时配合本发明所述的饲养方法，较之现有的供试铃木氏果蝇饲养方法其存活率，化蛹率，羽化率，单雌产卵量有了较大的提高，为供试铃木氏果蝇的正常供应提供了有利条件。
【专利说明】一种供试铃木氏果蝇的人工饲养方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种供试昆虫的人工饲养方法，特别涉及一种供试铃木氏果蝇的人工饲养方法。
【背景技术】
[0002]铃木氏果蚬Drosophila suzukii,又称楼桃果蚬、斑翅果蚬,寄主植物广泛，目前已在蓝莓、黑莓、樱桃、草莓、李子、桃子、葡萄、无花果、猕猴桃和梨等水果上发现有铃木氏果蝇危害。铃木氏果蝇产卵器呈锯齿状，能够刺穿果皮，将卵产于完好果实内部，然后幼虫在果实内部蛀食危害，使水果变褐色腐烂，严重影响果实产量和质量。
[0003]随着人们对健康水平的关注及对生活质量要求的提高，绿色无公害水果生产和农业可持续发展的呼声越来越强烈。无公害水果生产的基本概念和技术要求是“为保证一定产量和效益，在不对生产环境产生污染和农产品体内有毒残留物质不超标的前提下，允许限量使用限定的化学物质。”也就是说，无公害水果生产，允许限量使用某些化肥，低毒农药等，但水果内的有毒残留物质不能超过国家规定标准。
[0004]供试昆虫的人工大量繁殖技术是现代害虫防治研究的重要手段之一。铃木氏果蝇作为研究和防治对象，尤其是开展生物防治和抗药性测定、辐射不育等研究工作，研究其人工合成饲料及大量饲养繁殖技术，解决试虫供应问题，对水果无公害生产是十分重要的。
[0005]现有的铃木氏果蝇饲养技术所采用的饲料，一般为葡萄。即市场买回的葡萄，去梗，清洗，将葡萄从中间剖开，放在养虫瓶中供果蝇食用繁殖。全部的饲养过程中均采用葡萄作为饲料，由于现有的葡萄中均带有一定的农药残留无法被彻底的除去，这样就使得铃木氏果蝇的饲养安全得不到保证，对于铃木氏果蝇的毒害较大，而且市场上的葡萄品种随季节变化很大，对季节有着过高的限制，这样就无法保证供试昆虫的一致性，降低了试验结果的可信度和代表性，且所得的铃木氏果蝇敏感性差，试验结果不准确。葡萄含有大量水分，易腐烂，发酵后产生刺鼻气味及大量的水，影响幼虫的发育及存活率。
【发明内容】
[0006]针对现有供试铃木氏果蝇饲养方法存在的诸多不足，本发明提供了一种供试铃木氏果蝇的人工饲养方法，用人工合成饲料培养基取代了现有的全程使用葡萄作为饲料的饲养方法，同时配合本发明所述的饲养方法后，较之现有的供试铃木氏果蝇饲养方法其存活率，化蛹率，羽化率，单雌产卵量有了较大的提高，为供试铃木氏果蝇的正常供应提供了有利条件。
[0007]本发明所述的一种供试铃木氏果蝇的人工饲养方法，其具体步骤为:
[0008](I)选用密胺仿瓷托盘，在其内放一滤纸，在滤纸上滴水，使滤纸湿润，并将人工合成饲料培养基放在滤纸上；
[0009] (2)将铃木氏果蝇成虫释放在养虫笼内，使成虫进行交配，并将步骤(1)中的托盘移入养虫笼内，使成虫在人工合成饲料培养基上产卵；[0010](3)将成虫在同一时间段内所产的卵及其人工合成饲料培养基移至人工气候箱中，饲养5-6天后，幼虫近老熟时，开始化蛹羽化得到成虫。
[0011]在饲养开始前，需对饲养环境进行消毒，可将新洁尔灭用无菌蒸馏水稀释15倍制成消毒液，然后将饲养幼虫所用的器具放入消毒液中，浸泡24小时，再用自来水冲净空干后方可使用。
[0012]在对步骤(1)中所述的滤纸进行润湿时，需控制用水量，防止滤纸表面出现镜面反射，当出现镜面反射时说明加水过多，幼虫在托盘中易淹死，降低最终的存活率和收率，一般控制其加水量为9-13滴。本发明所述托盘为2cmX20cmX30cm密胺仿瓷托盘，该种托盘耐高温，耐污染，不易摔碎，轻便耐用，大小适宜。
[0013]所述的人工合成饲料培养基主要是提供成虫产卵和幼虫以及成虫取食之用，培养基大小可根据饲养场所大小改变，但培养基至少应占养虫笼底面积的65 % ;最重要的是培养基的厚度应在0.3-0.6cm之间，太薄饲料会迅速变干，太厚幼虫会钻蛀到饲料内部化蛹不利于羽化成成虫。为了保证最终达到较好的效果，本发明采用的养虫笼大小为IOOcmX 50cmX 50cm，在其中释放450-600只成虫进行饲养，培养基大小为
0.5cmX20cmX29cm。其中成虫中雌雄比例设定为雌:雄=1-1.5: 1，在这个比例范围内，果蝇间的种内竞争不明显，产卵率、孵化率和幼虫存活率较高；比例过高易弓丨起明显的种内竞争，比例过低导致产卵率很低，无法到达大规模繁育的目的。
[0014]所述步骤(2)中养虫笼内放置有营养物质，该营养物质一般可以采用带有营养液的脱脂棉，所用的营养液为蜂蜜水或糖水或其他营养液，这样可以保证成虫交配时营养的持续供给，尤其是水分的供给，提高繁殖的效率和质量。之所以采用绵球作为载体可以防止营养液过多而导致成虫被淹死；同时可以循环使用，减少了饲养的成本。
[0015]本发明所述的养虫笼以及人工气候箱中的温度为22_25°C，相对湿度为60-65%，由于幼虫成长为成虫的过程中，温度与相对湿度有着决定性作用，为了防止幼虫的过快或过慢生长而造成成虫的体质差异，将温度和相对湿度控制在上述的范围内。
[0016]经过上述步骤饲养的铃木氏果蝇成虫，可以作为试验的供试昆虫使用；也可使成虫继续交配产卵而得到2代体或更多的后代体以供研究，在成虫进行交配繁殖时，一般采用上述的步骤(2)进行操作即可。
[0017]现有饲养方法采用的均是葡萄作为饲养的饲料，饲养的环境条件要求较高，且由于葡萄本身易腐烂等缺点，使得现有的饲养方法存在着较大的缺陷；与现有公开的饲养方法相比，本发明采用人工合成饲料培养基在养虫笼内实现了大规模饲养。本发明采用人工合成饲料培养基后，饲料的保质时间增长，耐高温高湿的能力加强，因此才可以将养虫笼以及人工气候箱中的温度设定为22-25°C，相对湿度设定为60-65%。由于温度湿度的增加，提高了铃木氏果蝇的成长速度，较之现有技术可以更快更好的培养出合格健康的供试铃木氏果妮。
[0018]本发明所述的人工合成饲料培养基，其原料配比按照重量份计:香蕉泥100-130份，苹果泥100-130份，玉米粉40-50份，蔗糖20-25份，酵母粉20-25份，防腐剂1_2份，琼脂8-10份。
[0019]香蕉和苹果中含有多种的营养成分和较高的能量，其中的碳水化合物、蛋白质、月旨肪以及多种微量元素和维生素含量与葡萄相似，作为主要的营养物质为铃木氏果蝇提供营养，可以满足铃木氏果蝇生长的需要。为了更好地补充果蝇发育所需的其他营养成分并且减少香蕉泥和苹果泥的用量，发明所述的人工合成饲料培养基中还添加了玉米粉、酵母粉和蔗糖。本发明采用的香蕉泥和苹果泥都是新鲜水果称重后再用调料机搅拌而制成的。
[0020]研究过程中，发明人对香蕉和苹果的重量比进行了考察，发现当香蕉的用量过大，苹果的用量减少时，饲料黏度大，不利于幼虫的活动和取食，而且饲料容易变干，不适于实际应用；当香蕉的用量减少，苹果用量增大时，饲料营养不足，且苹果含水量大，导致饲料太软不易成块，不利于实际操作；当香蕉与苹果的重量比为1:1时，饲料的营养配比最佳，软硬度适宜有弹性，水分含量适当。
[0021]除了上述主料之外，该人工合成饲料培养基内的琼脂的主要作用是使饲料凝固成形。琼脂用量过大，使饲料内部间隙变小，影响幼虫的爬行取食；用量过小，起不到凝固作用。防腐剂用量过大会产生一种次生物质，影响果蝇的产卵量和卵的孵化或者导致畸形；防腐剂用量过小不能起到抑菌作用。经实验验证众多防腐剂中，山梨酸对卵和幼虫的影响最小，而其他防腐剂如苯甲酸和苯甲酸钠等会降低卵的孵化率并且影响幼虫的发育，因此，本发明防腐剂采用山梨酸。采用该种防腐剂可以有效的延长人工合成饲料培养基的存放时间，方便了各个时间段对于铃木氏果蝇的大量饲养，同时控制其用量又不会对铃木氏果蝇的生长产生影响。
[0022]发明人发现，所述的人工合成饲料培养基中，其原料配比按照重量份计，香蕉泥100份，苹果泥100份，玉米粉50份，蔗糖25份，酵母粉25份，防腐剂1份，琼脂10份时，取得的效果最好。
[0023]其具体加工步骤为:
[0024](I)按比例分别称取各原料，备用
[0025](2)将玉米粉，酵母粉，蔗糖混匀，加入1.5-2倍重量的水，搅拌均匀；
[0026](3)将琼脂粉加入到35-45倍重量的水中，加热溶解后搅拌均匀，制成琼脂溶液；
[0027](4)将步骤(3)制得的琼脂溶液倒入步骤(2)制得的混合液中，搅拌均匀，继续加热至混合液沸腾，将玉米粉煮熟；
[0028](5)将香蕉泥和苹果泥混匀后加入到步骤(4)制得的混合液中，搅拌均匀，停止加热，然后加入防腐剂，搅拌均匀，冷却备用。
[0029]首先，加工过程中，用水量过少会造成原料板结，使得饲料硬度变大，不利于幼虫钻蛀取食；用水量过大导致饲料软烂不能成块，而且湿度大，饲料容易发霉，因此，加工过程中，玉米粉、酵母粉以及蔗糖中加入1.5-2倍重量的水，琼脂粉中加入35-45倍重量的水。
[0030]由于加热状态下可以有效灭菌，而且容易将香蕉泥和苹果泥与其他原料混合，所以本发明中将香蕉泥和苹果泥混匀加入到步骤(4)制得的混合液中后，再停止加热。
[0031]采用这种方法制得的人工合成饲料培养基，其中的各种营养成分不会相互影响，可以起到较好的协调作用，同时由于采用了较好的防腐措施，使得饲料的保存时间进一步延长，达到了全年度的不间断使用，减少了对于纯天然葡萄饲料的依赖程度，另外利用了香蕉和苹果这种更为容易取得的资源作为饲料的主料，丰富的铃木氏果蝇饲料的多样性，同时也为在不同喂养环境下铃木氏果蝇的培养效果提供了较好的对比。
[0032] 综上所述，本发明采用香蕉泥和苹果泥代替葡萄对铃木氏果蝇进行饲养，降低了对葡萄的依赖，使得在饲养过程中不会由于葡萄的季节性停产而造成饲料的紧张，实现了连续化饲养；同时由于香蕉和苹果泥合成饲料较之天然葡萄，其品质的均一性和稳定性有着极大的提高，这样就保证了所饲养出的铃木氏果蝇品质的一致性，不会由于饲料的关系而造成铃木氏果蝇品质的大起大落，对于生物实验而言，这种一致性极其重要；由于人工合成饲料培养基中所含有的刺激成分较低，就保证了繁殖出来的各代铃木氏果蝇不会由于农药等刺激成分而产生抗药性，提高了铃木氏果蝇对于试验的敏感度，从而提高了生物实验的准确率和真实性。采用本发明所述的饲养方法，较之现有的供试铃木氏果蝇饲养方法，其存活率，化蛹率，羽化率，单雌产卵量有了较大的提高，为供试铃木氏果蝇的正常供应提供了有利条件。
【具体实施方式】
[0033]实施例1
[0034]一种供试铃木氏果蝇的人工饲养方法，其具体步骤为:
[0035](I)选用2cmX20cmX30cm的密胺仿瓷托盘,在其内放一滤纸,在滤纸上滴水,使滤纸湿润，并将人工合成饲料培养基放在滤纸上；培养基大小为0.5cmX20cmX29cm ；
[0036](2)将450只铃木氏果蝇成虫(雌:雄=1.5:1)释放在设有营养物质的养虫笼内，使成虫进行交配，并将步骤(1)中的托盘移入养虫笼内，使成虫在人工合成饲料培养基上产卵；养虫笼大小为IOOcmX 50cmX 50cm ;
[0037](3)将成虫在同一时间段内所产的卵及其人工合成饲料培养基移至人工气候箱中，饲养5天后，幼虫近老熟时，开始化蛹羽化得到成虫。
[0038]养虫笼以及人工气候箱中的温度为22°C，相对湿度为65%。
[0039]所述营养物质为带有营养液的脱脂棉，所用的营养液为蜂蜜水。
[0040]所述的人工合成饲料培养基，其原料配比按照重量份计:香蕉泥100份，苹果泥100份，玉米粉50份，蔗糖25份，酵母粉25份，山梨酸1份，琼脂10份。
[0041]其加工的具体步骤为:
[0042](I)按比例分别称取各原料，备用
[0043](2)将玉米粉，酵母粉，蔗糖混匀，加入1.5倍重量的水，搅拌均匀；
[0044](3)将琼脂粉加入到45倍重量的水中，加热溶解后搅拌均匀，制成琼脂溶液；
[0045](4)将步骤(3)制得的琼脂溶液倒入步骤(2)制得的混合液中，搅拌均匀，继续加热至混合液沸腾，将玉米粉煮熟；
[0046](5)将香蕉泥和苹果泥混匀后加入到步骤(4)制得的混合液中，搅拌均匀，停止加热，然后加入防腐剂，搅拌均匀，冷却备用。
[0047]实施例2
[0048]一种供试铃木氏果蝇的人工饲养方法，其具体步骤为:
[0049](I)选用2cmX20cmX30cm的密胺仿瓷托盘,在其内放一滤纸,在滤纸上滴水,使滤纸湿润，并将人工合成饲料培养基放在滤纸上；培养基大小为0.5cmX20cmX29cm ；
[0050](2)将500只铃木氏果蝇成虫(雌:雄=1.5:1)释放在设有营养物质的养虫笼内，使成虫进行交配，并将步骤(1)中的托盘移入养虫笼内，使成虫在人工合成饲料培养基上产卵；养虫笼大小为IOOcmX 50cmX 50cm ;
[0051](3)将成虫在同一时间段内所产的卵及其人工合成饲料培养基移至人工气候箱中，饲养6天后，幼虫近老熟时，开始化蛹羽化得到成虫。
[0052]养虫笼以及人工气候箱中的温度为25°C，相对湿度为60%。
[0053]所述营养物质为带有营养液的脱脂棉，所用的营养液为糖水。
[0054]所述的人工合成饲料培养基，其原料配比按照重量份计:香蕉泥130份，苹果泥130份，玉米粉50份，蔗糖20份，酵母粉22份，山梨酸2份，琼脂8份。
[0055]其加工的具体步骤为:
[0056](I)按比例分别称取各原料，备用
[0057](2)将玉米粉，酵母粉，蔗糖混匀，加入2倍重量的水，搅拌均匀；
[0058](3)将琼脂 粉加入到35倍重量的水中，加热溶解后搅拌均匀，制成琼脂溶液；
[0059](4)将步骤(3)制得的琼脂溶液倒入步骤(2)制得的混合液中，搅拌均匀，继续加热至混合液沸腾，将玉米粉煮熟；
[0060](5)将香蕉泥和苹果泥混匀后加入到步骤(4)制得的混合液中，搅拌均匀，停止加热，然后加入防腐剂，搅拌均匀，冷却备用。
[0061]实施例3
[0062]一种供试铃木氏果蝇的人工饲养方法，其具体步骤为:
[0063](I)选用2cmX20cmX30cm的密胺仿瓷托盘,在其内放一滤纸,在滤纸上滴水,使滤纸湿润，并将人工合成饲料培养基放在滤纸上；培养基大小为0.5cmX20cmX29cm ；
[0064](2)将550只铃木氏果蝇成虫(雌:雄=1.2:1)释放在设有营养物质的养虫笼内，使成虫进行交配，并将步骤(1)中的托盘移入养虫笼内，使成虫在人工合成饲料培养基上产卵；养虫笼大小为IOOcmX 50cmX 50cm ;
[0065](3)将成虫在同一时间段内所产的卵及其人工合成饲料培养基移至人工气候箱中，饲养6天后，幼虫近老熟时，开始化蛹羽化得到成虫。
[0066]养虫笼以及人工气候箱中的温度为23°C，相对湿度为60%。
[0067]所述营养物质为带有营养液的脱脂棉，所用的营养液为蜂蜜水。
[0068]所述的人工合成饲料培养基，其原料配比按照重量份计:香蕉泥120份，苹果泥120份，玉米粉40份，蔗糖21份，酵母粉25份，山梨酸1.5份，琼脂9份。
[0069]其加工的具体步骤为:
[0070](I)按比例分别称取各原料，备用
[0071](2)将玉米粉，酵母粉，蔗糖混匀，加入1.6倍重量的水，搅拌均匀；
[0072](3)将琼脂粉加入到40倍重量的水中，加热溶解后搅拌均匀，制成琼脂溶液；
[0073](4)将步骤(3)制得的琼脂溶液倒入步骤(2)制得的混合液中，搅拌均匀，继续加热至混合液沸腾，将玉米粉煮熟；
[0074](5)将香蕉泥和苹果泥混匀后加入到步骤(4)制得的混合液中，搅拌均匀，停止加热，然后加入防腐剂，搅拌均匀，冷却备用。
[0075]实施例4
[0076]一种供试铃木氏果蝇的人工饲养方法，其具体步骤为:
[0077](I)选用2cmX20cmX30cm的密胺仿瓷托盘,在其内放一滤纸,在滤纸上滴水,使滤纸湿润，并将人工合成饲料培养基放在滤纸上；培养基大小为0.5cmX20cmX29cm ；
[0078](2)将600只铃木氏果蝇成虫(雌:雄=1.5:1)释放在设有营养物质的养虫笼内，使成虫进行交配，并将步骤(1)中的托盘移入养虫笼内，使成虫在人工合成饲料培养基上产卵；养虫笼大小为IOOcmX50cmX50cm ；
[0079](3)将成虫在同一时间段内所产的卵及其人工合成饲料培养基移至人工气候箱中，饲养5天后，幼虫近老熟时，开始化蛹羽化得到成虫。
[0080]养虫笼以及人工气候箱中的温度为24°C，相对湿度为63%。
[0081]所述营养物质为带有营养液的脱脂棉，所用的营养液为糖水。
[0082]所述的人工合成饲料培养基，其原料配比按照重量份计:香蕉泥100份，苹果泥100份，玉米粉42份，蔗糖22份，酵母粉20份，山梨酸1.2份，琼脂10份。
[0083]其加工的具体步骤为:
[0084](I)按比例分别称取各原料，备用
[0085](2)将玉米粉，酵母粉，蔗糖混匀，加入1.7倍重量的水，搅拌均匀；
[0086](3)将琼脂粉加入到37倍重量的水中，加热溶解后搅拌均匀，制成琼脂溶液；
[0087](4)将步骤(3)制得的琼脂溶液倒入步骤(2)制得的混合液中，搅拌均匀，继续加热至混合液沸腾，将玉米粉煮熟；
[0088](5)将香蕉泥和苹果泥混匀后加入到步骤(4)制得的混合液中，搅拌均匀，停止加热，然后加入防腐剂，搅拌均匀，冷却备用。
[0089]实施例5
[0090]一种供试铃木氏果蝇的人工饲养方法，其具体步骤为:
[0091](I)选用2cmX20cmX30cm的密胺仿瓷托盘,在其内放一滤纸,在滤纸上滴水,使滤纸湿润，并将人工合成饲料培养基放在滤纸上；培养基大小为0.5cmX20cmX29cm ；
[0092](2)将600只铃木氏果蝇成虫(雌:雄=I:1)释放在设有营养物质的养虫笼内，使成虫进行交配，并将步骤(1)中的托盘移入养虫笼内，使成虫在人工合成饲料培养基上产卵；养虫笼大小为IOOcmX 50cmX 50cm ;
[0093](3)将成虫在同一时间段内所产的卵及其人工合成饲料培养基移至人工气候箱中，饲养5天后，幼虫近老熟时，开始化蛹羽化得到成虫。
[0094]养虫笼以及人工气候箱中的温度为25°C，相对湿度为65%。
[0095]所述营养物质为带有营养液的脱脂棉，所用的营养液为蜂蜜水。
[0096]所述的人工合成饲料培养基，其原料配比按照重量份计:香蕉泥100份，苹果泥100份，玉米粉45份，蔗糖23份，酵母粉23份，山梨酸1.7份，琼脂8.5份。
[0097]其加工的具体步骤为:
[0098](I)按比例分别称取各原料，备用
[0099](2)将玉米粉，酵母粉，蔗糖混匀，加入1.5倍重量的水，搅拌均匀；
[0100](3)将琼脂粉加入到42倍重量的水中，加热溶解后搅拌均匀，制成琼脂溶液；
[0101](4)将步骤(3)制得的琼脂溶液倒入步骤(2)制得的混合液中，搅拌均匀，继续加热至混合液沸腾，将玉米粉煮熟；
[0102](5)将香蕉泥和苹果泥混匀后加入到步骤(4)制得的混合液中，搅拌均匀，停止加热，然后加入防腐剂，搅拌均匀，冷却备用。
[0103]比较例
[0104]在相同的条件下，采用葡萄作为饲料的常规饲养方法和实施例1所述的方法喂养铃木氏果蝇，每个处理重复10次。每个处理接200~300粒卵，保证每个培养皿内的幼虫头数大于100。蛹期每天24h分三个时段观察，及时收集蛹，作好记录，称蛹重。然后将每种处理10次重复所的到的蛹混合，从中随机取蛹100对或200对，每一对放入直径为3cm的培养皿中产卵，培养皿铺上湿润滤纸，加带蜂蜜水的小棉球。计算铃木氏果蝇的存活率，化蛹率，羽化率，蛹重和单雌产卵量。结果见表1
[0105]表1饲养铃木氏果蚬的效果
[0106]
【权利要求】
1.一种供试铃木氏果蝇的人工饲养方法，其特征在于:其具体步骤为: (1)选用密胺仿瓷托盘，在其内放一滤纸，在滤纸上滴水，使滤纸湿润，并将人工合成饲料培养基放在滤纸上； (2)将铃木氏果蝇成虫释放在养虫笼内，使成虫进行交配，并将步骤(1)中的托盘移入养虫笼内，使成虫在人工合成饲料培养基上产卵； (3)将成虫在同一时间段内所产的卵及其人工合成饲料培养基移至人工气候箱中，饲养5-6天后，幼虫近老熟时，开始化蛹羽化得到成虫。
2.根据权利要求1所述的供试铃木氏果蝇的人工饲养方法，其特征在于:所述的人工合成饲料培养基，其原料配比按照重量份计:香蕉泥100-130份，苹果泥100-130份，玉米粉40-50份，蔗糖20-25份，酵母粉20-25份，防腐剂1-2份，琼脂8-10份。
3.根据权利要求1所述的供试铃木氏果蝇的人工饲养方法，其特征在于:养虫笼以及人工气候箱中的温度为22-25°C，相对湿度为60-65%。
4.根据权利要求1所述的供试铃木氏果蝇的人工饲养方法，其特征在于:所述步骤(1)中人工合成饲料培养基的厚度为0.3-0.6cm。
5.根据权利要求1所述的供试铃木氏果蝇的人工饲养方法，其特征在于:所述步骤(2)中养虫笼内放置有营养物 质。
【文档编号】A01K67/033GK103931565SQ201410163572
【公开日】2014年7月23日 申请日期:2014年4月22日 优先权日:2014年4月22日
【发明者】翟一凡, 于毅, 周仙红, 林清彩, 庄乾营, 张安盛, 门兴元, 李丽莉 申请人:山东省农业科学院植物保护研究所