一种高产、无公害的花生栽培方法
【专利摘要】本发明涉及一种高产、无公害的花生栽培方法，包括以下步骤:(1)进行整地，挖花生种植沟穴，花生起垄覆膜栽培；(2)将根瘤菌肥与水混合稀释，将根瘤菌肥稀释液喷施于播种后地块的播种沟穴的种子周围，喷施根瘤菌肥稀释液后覆土，进行正常田间管理；(3)在花生结荚期施用符合检测条件的昆虫病原线虫，施用后进行正常田间管理；本发明在播种期施用花生根瘤菌和结荚期施用H06线虫，综合分析表明，达到了花生栽培提高产量和品质，无公害的防治的效果。
【专利说明】一种高产、无公害的花生栽培方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种高产、无公害的花生栽培方法，属于花生栽培【技术领域】。
【背景技术】
[0002] 花生是我国食用植物油的主要来源之一，也是主要的出口创汇农产品。目前，花 生全国种植面积达502万hm 2,总产达1430万t，约占世界花生年产量的60%以上。近几 年，各地花生蛴螬的发生数量呈逐年上升趋势，其中以暗黑鳃和铜绿丽金龟为主。它们以幼 虫（蛴螬）取食荚果，对花生造成严重危害，一般导致减产10 %?20%，严重者达50 %? 80%，甚至颗粒无收。当前，对其防治主要采用化学药剂拌种处理和灌根处理，不仅有害人 体健康，污染环境，还易使蛴螬产生抗药性。
[0003] 昆虫病原线虫（entomopathogenic nematodes, EPNs)是一类专门寄生昆虫的线 虫，通过3龄感染期幼虫对害虫身体的自然开口或节间膜侵入的方式进入寄主体内，并释 放携带的共生细菌，使其在害虫体内繁殖，产生毒素，最终导致害虫死亡。因 EPNs具有寄主 范围广泛，主动寻找寄主，对非靶标生物安全，对环境无副作用，能与许多农药、肥料混用等 优点，已广泛应用于防治蛴螬、地老虎、桃小食心虫、天牛等多种农林害虫。
[0004] 中国专利文献CN101779611A(申请号201010112122. 1)公开了一种昆虫病原线虫 的繁殖方法，采用透明培养容器作为繁殖容器，采用黄粉虫活体作为寄主昆虫，采用植物碎 屑作为培养介质，采用灭菌设备进行灭菌，使用控温培养室进行培养，不仅明显解决了植物 秸杆、木材的废弃污染问题，同时大大降低了生产原料成本、简化了生产和使用步骤，繁殖 培养出的昆虫病原线虫成本低、质量好、防治效果高，可广泛应用于防治农、林、园艺等植物 的地下害虫和隐蔽性害虫。
[0005] 根瘤菌（root nodule bacteria, RNB)是与豆科植物共生形成根瘤并固定空气中 的氮气供植物营养的一类杆状细菌。花生属于豆科作物，可以与根瘤菌形成共生固氮体系， 并直接利用大气中的氮气作为氮源。近年来，在花生种植上单独应用EPNs和RNB都取得较 好的效果。
[0006] 目前，花生栽培上蛴螬的防治仍以化学杀虫剂为主，常使用辛硫磷、吡虫啉和毒死 蜱等进行灌根。化学农药不当使用不但污染花生产量和品质，而且还会因连续多次使用导 致蛴螬产生抗药性，使防治蛴螬更加困难。因此，研究根瘤菌与昆虫病原线虫的配合使用是 科学防控花生蛴螬危害，起到防虫固氮双重效果，确保花生产业持续稳定发展亟需解决的 问题。
【发明内容】
[0007] 本发明针对现有技术的不足，提供一种高产、无公害的花生栽培方法。
[0008] 本方法针对花生蛴螬危害猖獗且又缺乏高效低毒新型防治药剂及如何配合 根瘤菌固氮的技术问题，通过在室内测试了根瘤菌对昆虫病原线虫（Heterorhabdits bacteriophora H06(简称H06)存活及侵染率的影响，在大田条件下根瘤菌和昆虫病原线 虫配合使用能够提高花生产量及防治花生蛴螬的目的，达到花生栽培上提高产量和品质， 无公害的防治的策略。
[0009] 本发明技术方案如下：
[0010] 一种高产、无公害的花生栽培方法，包括以下步骤：
[0011] (1)选择疏松和通气性的土壤进行整地，挖花生种植沟穴，花生起垄覆膜栽培，垄 高8?12cm，宽55?65cm，播种双行，每穴播种两粒，制得播种后地块；
[0012] (2)将根瘤菌肥与水混合稀释，配制根瘤菌浓度为0. 6?1. 0亿/mL的根瘤菌肥 稀释液，将根瘤菌肥稀释液喷施于步骤（1)制得的播种后地块的播种沟穴的种子周围2? 3cm的范围内，每穴喷施量为0. 20?0. 30mL，喷施根瘤菌肥稀释液后覆土，进行正常田间管 理；
[0013] (3)在花生结荚期施用符合检测条件的昆虫病原线虫，每穴施用量为20000? 30000条，施用后进行正常田间管理；
[0014] 上述符合检测条件为同时满足如下a和b的要求：
[0015] a、分别将浓度为 20 亿.πιΓ1 (原液）、1 X ΙΟ6 .πιΓ1 (稀释 2000 倍）、4Χ ΙΟ5 .πιΓ1 (稀 释5000倍）、2X 105 (稀释10000倍）、4X 104 (稀释50000倍）的根瘤菌溶液与 稀释为500IJS · mL-1 (条/mL)线虫悬浮液按体积比100:1比例混合，在24?26°C的条件 下放置24h检测，昆虫病原线虫存活率均为90%以上；
[0016] b、分别将根瘤菌浓度为4X 105 和昆虫病原线虫浓度为100、200、400IJS/头 的混合液、昆虫病原线虫浓度为100、200、400IJS/mL的清水线虫悬浮液和蒸馏水分别处理 蛴螬，在24?26°C的条件下分别处理24、48、72、96h，昆虫病原线虫侵染率差异不显著，且 混合液与清水线虫悬浮液的侵染率之差不高于5%。
[0017] 根据本发明优选的，所述步骤（1)中整地播种时间北方地区为5月5?15日。
[0018] 根据本发明优选的，所述步骤（1)中播种深度为3?7cm。
[0019] 所述步骤（1)中选择疏松和通气性好的土壤，其目的在于为根瘤菌发挥较好固氮 作用及昆虫病原线虫的存活、寻觅、侵染寄主以及建立自然种群提供有利的环境，因此本领 域技术人员可以根据上述目的按照常规技术进行选择。
[0020] 根据本发明优选的，所述步骤（3)中昆虫病原线虫的施用采用如下方式：
[0021] 昆虫病原线虫悬浮液采用穴施、喷雾器喷施或直接浇水灌溉的方式进行施用。
[0022] 根据本发明优选的，所述步骤（3)中昆虫病原线虫悬浮液的线虫浓度为500? 1000IJS · mL'
[0023] 根据本发明优选的，所述步骤⑶中的昆虫病原线虫为Heterorhabdits bacteriophora H06。该昆虫病原线虫种为本领域常规品种，如可以根据中国专利文献 CN101779611A(申请号201010112122. 1)公开的内容进行昆虫病原线虫的繁殖。
[0024] 有益效果
[0025] 本发明在播种期施用花生根瘤菌和结荚期施用H06线虫，其总荚数、荚果重以及 百粒重分别比两者单用增效之和提高了 24. 13?3L 90%，70. 85?76. 52 %和8. 08? 11. 49%，其防虫效果达到了 85. 78%以上，提高了 9. 74?11.31%。综合分析表明，达到了 花生栽培提高产量和品质，无公害的防治的效果。
【专利附图】
【附图说明】
[0026] 图1不同稀释倍数根瘤菌对线虫死亡率影响的柱状图；
【具体实施方式】
[0027] 下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步阐述，但本发明所保护范围不限于 此。
[0028] 室内试验测定
[0029] 1、线虫与根瘤菌相容性测定
[0030] 供试液体花生根瘤菌Bradyrhizobium sp.由宁夏诺得曼生物技术有限公司生 产，活菌数不少于20亿· πιΤΓ1 ;昆虫病原线虫（Heterorhabdits bacteriophora H06 (简称 H06)、Steinernema longicaudum X_7 (简称 X_7)、Steinernema glaseri KG)(简称 KG) 〇 上述昆虫病原线虫均为本领域常用昆虫病原线虫，可以通过普通商业途径获得或自行采集 获得，如H06可根据中国专利文献CN101779611A(申请号201010112122. 1)公开的昆虫病 原线虫的繁殖方法获得。
[0031] 将根瘤菌原液、稀释2000倍、5000倍、10000倍和50000倍稀释液分别与稀释为 500IJS · ml/1线虫悬浮液均匀混合，每个处理设3次重复，以清水线虫悬浮液作对照。在 (25± 1) °C的条件下放置24h，显微镜下每个处理随机检查lmL混合液中线虫的存活数量， 计算存活率。若根瘤菌对线虫的致死作用或者亚致死作用没有超过10%，则继续测定该根 瘤菌对线虫侵染率的影响。参照魏洪义判定昆虫病原线虫对药剂的反应标准：（1)死亡：身 体僵直或卷曲，不活动，对针刺无反应；（2)亚致死：身体卷曲，由于药剂麻痹作用引起痉挛 性或抽搐性活动，对针刺无反应或反应非常迟缓；（3)不受药剂影响：与对照线虫一样，身 体活动舒展或静止不动，静止的线虫经探针触碰后反应迅速。
[0032] 试验结果（图1)表明：不同稀释倍数的花生根瘤菌对线虫均有不同程度的致死 率，但尚未超过10%的致死上限。根瘤菌与线虫混合液线虫死亡率与清水对照的线虫的死 亡率差异不显著。表明根瘤菌对线虫的存活基本没有影响。
[0033] 2、根瘤菌对线虫侵染效果的评价
[0034] 在直径9cm的培养皿中放两张中速滤纸，均匀滴入1. 5ml清水，然后加入根瘤菌和 线虫混合液或清水线虫悬浮液,再放入10头蛴螬幼虫。线虫设100、200、400/头3个剂量， 每处理设4次重复，以蒸馏水处理做空白对照。在（25±1)°C的条件下分别处理24、48、72、 96h，观察记录被线虫侵染的蛴螬幼虫数量，计算线虫对蛴螬的侵染率。
[0035] 表1根瘤菌对线虫侵染率的影响
[0036]
[0037]
【权利要求】
1. 一种高产、无公害的花生栽培方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 选择疏松和通气性的土壤进行整地，挖花生种植沟穴，花生起垄覆膜栽培，垄高 8?12cm，宽55?65cm，播种双行，每穴播种两粒，制得播种后地块； (2) 将根瘤菌肥与水混合稀释，配制根瘤菌浓度为0. 6?1. 0亿/mL的根瘤菌肥稀释 液，将根瘤菌肥稀释液喷施于步骤（1)制得的播种后地块的播种沟穴的种子周围2?3cm 的范围内，每穴喷施量为0. 20?0. 30mL，喷施根瘤菌肥稀释液后覆土，进行正常田间管理； (3) 在花生结荚期施用符合检测条件的昆虫病原线虫，每穴施用量为20000?30000 条，施用后进行正常田间管理； 上述符合检测条件为同时满足如下a和b的要求： a、 分别将浓度为 20 亿· mL'IXlO6 · mL'dXlO5 · mL'SXlO5 · mL'dXlO4 · mL-1 的 根瘤菌溶液与稀释为5001JS · ml/1线虫悬浮液按体积比100:1比例混合，在24?26°C的 条件下放置24h检测，昆虫病原线虫存活率均为90%以上； b、 分别将根瘤菌浓度为4X 105 · ml/1和昆虫病原线虫浓度为100、200、400IJS/头的 混合液、昆虫病原线虫浓度为100、200、400IJS/mL的清水线虫悬浮液和蒸馏水分别处理蛴 螬，在24?26°C的条件下分别处理24、48、72、96h，昆虫病原线虫侵染率差异不显著，且混 合液与清水线虫悬浮液的侵染率之差不高于5%。
2. 如权利要求1所述的花生栽培方法，其特征在于，所述步骤（1)中整地播种时间北方 地区为5月5?15日。
3. 如权利要求1所述的花生栽培方法，其特征在于，所述步骤（1)中播种深度为3? 7cm〇
4. 如权利要求1所述的花生栽培方法，其特征在于，所述步骤（3)中昆虫病原线虫的施 用采用如下方式： 昆虫病原线虫悬浮液采用穴施、喷雾器喷施或直接浇水灌溉的方式进行施用。
5. 如权利要求1所述的花生栽培方法，其特征在于，所述步骤（3)中昆虫病原线虫悬浮 液的线虫浓度为500?10001JS · mL'
6. 如权利要求1所述的花生栽培方法，其特征在于，所述步骤（3)中的昆虫病原线虫为 Heterorhabdits bacteriophora H06。
【文档编号】A01G1/00GK104082006SQ201410334391
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年7月14日 优先权日:2014年7月14日
【发明者】武海斌, 孙瑞红, 辛力, 宫庆涛, 张坤鹏, 张学萍 申请人:山东省果树研究所