一种美国红火箭紫薇的组织培养方法
【专利摘要】本发明公开了一种美国红火箭紫薇的组织培养方法，包括消毒灭菌、初代培养、继代培养、生根培养和炼苗移栽。以美国紫薇当年生嫩枝条为外植体，经过无菌接种于诱芽培养基上，形成丛生芽后，利用丛生芽再进行继代培养，然后转接到生根培养基上进行生根诱导形成生根苗，生根苗经过炼苗驯化得到再生植株。本发明的方法使美国紫薇的繁殖更为容易，打破了季节与气候的限制，繁殖周期缩短，再生植株成活率得到提高。
【专利说明】一种美国红火箭紫薇的组织培养方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及植物无性繁殖领域，具体涉及一种美国红火箭紫薇的组织培养方法。
【背景技术】
[0002]美国红火箭紫薇是紫薇中花色最鲜红的品种之一，花鲜红如国旗，花簇可达24英寸，花量大，花色艳丽，片植的色块开花时一片火海。花在晴热天为猩红色，多云凉爽天花色略淡，可能有白色斑，新叶微红，老叶绿色略带红晕，叶芽在开花前为深红色，开花时变成樱桃红。6月初始花，可连续开到霜降，花期进行修剪，可多次开花。适应性广，抗逆性强。适合于孤植、丛植，培植为花篱，可制作盆景和桩景。美国红火箭紫薇的组织培养方法是常用的培育繁殖方法，但是现有的组织培养方法存活率较低，容易受季节限制。
【发明内容】
[0003]发明目的:为了克服现有技术中存在的不足，本发明提供一种美国红火箭紫薇的组织培养方法法。
[0004]技术方案:为实现上述目的，本发明提供的一种美国红火箭紫薇的组织培养方法，包括以下步骤:
O消毒灭菌:选取美国红火箭紫薇当年生嫩枝条，用漂白粉浸泡10分钟后，流水冲洗20分钟，在超净工作台上以75%酒精浸泡30秒钟，再转入0.1%升汞溶液中灭菌10分钟，倒去灭菌液，用预先准备好的无菌水冲洗4?5遍，浙干水后，将消毒后的嫩枝接种到诱芽培养基上；
2)进行接种培养:将选取的外植体切成广2厘米的小段接种在配置好的MS培养基上，培养25?30天左右，接种培养基成份为:MS基本培养基，附加2，4—D 1.5mg/L + BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+ 蔗糖 30g/L +琼脂 5 ?7g/L，PH 值控制在 5.5?5.8 ；
3)继代培养:把切下丛生芽接种在MS+BA1.5mg/L + NAA 0.2mg/L +蔗糖30g/L +琼脂5?7g/L，PH值5.6?5.7，MS培养基经1.1kg/cm2高压消毒15?20分钟，在温度25±2。。，光照强度20001uX，每日光照12小时，至28?32天，小芽基部形成愈伤组织，并形成丛生芽，丛生小芽达到l_2cm。一般第一次继代培养时增殖率2?3倍左右，经2?3次继代培养后增殖倍数可达到4-5倍左右。
[0005]4)生根培养:当小苗长至2?3 cm时，转移到生根培养基上培养:生根培养基配方为 1/3MS + NAA0.2mg/L + IBA0.5mg/L + 0.3% 活性炭+ 蔗糖 20g/L，温度控制在 25 ?28V’ pH控制在5.5?5.7 ;光照强度为lOOOlux，每日光照10-12小时。一般15-20天左右可见白色短根形成，经20-25天左右，即可进行炼苗移栽。
5)炼苗和移栽:美国红火箭紫薇组培苗炼苗，先在温度23±2°C之间的温室内拧松瓶盖放置3?5天，然后进行温床过渡移栽。过渡苗床(即温床)建在普通单体的塑料大棚内。移栽的过程中尽量减少伤根，并碰洒1000倍稀释的多菌灵药液。控制温度在2(Γ30度，过渡移栽48?52天，可以上盆移栽。
[0006]有益效果:本发明的方法使美国紫薇的繁殖更为容易，打破了季节与气候的限制，繁殖周期缩短，再生植株成活率得到提高，成活率能够达到95%以上。
【具体实施方式】
[0007]下面结合实施例对本发明作更进一步的说明。
[0008]一种美国红火箭紫薇的组织培养方法，包括以下步骤:
O消毒灭菌:选取美国红火箭紫薇当年生嫩枝条，用漂白粉浸泡10分钟后，流水冲洗20分钟，在超净工作台上以75%酒精浸泡30秒钟，再转入0.1%升汞溶液中灭菌10分钟，倒去灭菌液，用预先准备好的无菌水冲洗4?5遍，浙干水后，将消毒后的嫩枝接种到诱芽培养基上；
2)进行接种培养:将选取的外植体切成广2厘米的小段接种在配置好的MS培养基上，培养25?30天左右，接种培养基成份为:MS基本培养基，附加2，4—D 1.5mg/L + BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+ 蔗糖 30g/L +琼脂 5 ?7g/L，PH 值 5.5 左右；
3)继代培养:把切下丛生芽接种在MS+BA1.5mg/L + NAA 0.2mg/L +蔗糖30g/L +琼脂5?7g/L，PH值5.6左右，MS培养基经1.1kg/cm2高压消毒15?20分钟，在温度25±2°C，光照强度20001uX，每日光照12小时，至30天左右，小芽基部形成愈伤组织，并形成丛生芽，丛生小芽达到l_2cm。一般第一次继代培养时增殖率2?3倍左右，经2?3次继代培养后增殖倍数可达到4-5倍左右。
[0009]4)生根培养:当小苗长至2?3 cm时，转移到生根培养基上培养:生根培养基配方为 1/3MS + NAA0.2mg/L + IBA0.5mg/L + 0.3% 活性炭+ 蔗糖 20g/L，温度控制在 25 ?28°C，光照强度为lOOOlux，每日光照10-12小时。一般15-20天左右可见白色短根形成，经20-25天左右，即可进行炼苗移栽。
5)炼苗和移栽:美国红火箭紫薇组培苗炼苗，先在温度23±2°C之间的温室内拧松瓶盖放置3?5天，然后进行温床过渡移栽。过渡苗床(即温床)建在普通单体的塑料大棚内。移栽的过程中尽量减少伤根，并碰洒1000倍稀释的多菌灵药液。控制温度在2(Γ30度，过渡移栽50天左右，可以上盆移栽。
[0010]上述步骤相同，每个阶段的培养基配方如下:
进行接种培养时接种培养基为=MS基本培养基，附加2，4—D 1.5mg/L + BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+ 蔗糖 30g/L +琼脂 5g/L，PH 值 5.5 ;
继代培养基组分:MS+BA1.5mg/L + NAA 0.2mg/L +蔗糖 30g/L +琼脂 7g/L，PH 值 5.6 ； 生根培养基配方为1/3MS + NAA0.2mg/L + IBA0.5mg/L + 0.3%活性炭+蔗糖20g/L。
[0011]选取1000株植株进行组织培养，最终成活978株，成活率达到97.8%。
[0012]以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出:对于本【技术领域】的技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
【权利要求】
1.一种美国红火箭紫薇的组织培养方法，其特征在于:包括以下步骤: 1)消毒灭菌:选取美国红火箭紫薇当年生嫩枝条，用漂白粉浸泡10分钟后，流水冲洗20分钟，在超净工作台上以75%酒精浸泡30秒钟，再转入0.1%升汞溶液中灭菌10分钟，倒去灭菌液，用预先准备好的无菌水冲洗4?5遍，浙干水后，将消毒后的嫩枝接种到诱芽培养基上； 2)进行接种培养:将选取的外植体切成广2厘米的小段接种在配置好的MS培养基上，培养25?30天； 3)继代培养:把切下丛生芽接种在MS+BA1.5mg/L + NAA 0.2mg/L +蔗糖30g/L +琼脂5?7g/L，PH值5.6?5.7，MS培养基经1.1kg/cm2高压消毒15?20分钟，在温度25±2。。，光照强度20001uX，每日光照12小时，至28?32天，小芽基部形成愈伤组织，并形成丛生芽，丛生小芽达到l_2cm ； 4)生根培养:当小苗长至2?3cm时，转移到生根培养基上培养，温度控制在25?28°C，光照强度为lOOOlux，每日光照10-12小时经20-25天； 5)炼苗和移栽:美国红火箭紫薇组培苗炼苗，先在温度23±2°C之间的温室内拧松瓶盖放置3?5天，然后进行温床过渡移栽，过渡温床建在普通单体的塑料大棚内，移栽的过程中尽量减少伤根，并碰洒1000倍稀释的多菌灵药液，控制温度在2(Γ30度，过渡移栽48?52天，上盆移栽。
2.根据权利要求1所述的美国红叶紫薇的嫁接繁殖技术，其特征在于:所述接种培养基成份为=MS 基本培养基，附加 2，4—D 1.5mg/L + BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L+ 蔗糖 30g/L +琼脂5?7g/L，PH值5.5?5.8。
3.根据权利要求1所述的美国红火箭紫薇的组织培养方法，其特征在于:所述生根培养基的配方为1/3重量含量的MS基本培养基，附加NAA0.2mg/L + IBA0.5mg/L + 0.3%活性炭+蔗糖20g/L, PH值为5.5?5.7。
【文档编号】A01G1/00GK104126506SQ201410346690
【公开日】2014年11月5日 申请日期:2014年7月21日 优先权日:2014年7月21日
【发明者】蔡鸿宇, 史云光, 张荣良, 戴静, 查立胜 申请人:江苏绿苑园林建设有限公司