一种小驳骨再生植株的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种小驳骨再生植株的快速繁殖方法，包括小驳骨无菌花药的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、炼苗移栽等步骤，本发明方法采用花药离体培养，可以获得大量的再生植株，遗传稳定性强，周期短，操作可控。
【专利说明】 一种小驳骨再生植株的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及小驳骨组织培养的快繁方法，属于植物栽培【技术领域】。
【背景技术】
[0002]小驳骨，GendarussavulgarisNees,爵床科,又名接骨木、接骨筒、乌骨黄藤，常绿小灌木，喜欢湿润的气候环境，生于村旁或路边的灌丛中，有栽培。资源分布:分布于台湾、广东、海南、广西、云南等地。叶含β_谷留醇。根含生物碱爵床脂素和挥发油。味辛；苦；性平。祛风湿；散瘀血；续筋骨。主风湿痹痛；月经不调；产后腹痛；跌打肿痛；骨折。目前常用于扦插繁殖，其它繁殖系数尚未见报道。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种小驳骨组织培养的快繁方法，本发明方法采用花药离体培养，可以获得大量的再生植株，遗传稳定性强，周期短，操作可控。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取小驳骨当年的花药，蒸馏水中清洗5min，超净工作台上70%酒精处理20s，0.1%升汞处理6min,无菌水冲洗5次，消毒处理过的小驳骨花药使用6°Co_y射线5_10Gy处理,接入N6+ZT1.0mg/L+IAA0.25mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度4001x，光期8h，温度24°C，诱导出来的愈伤组织放入培养基N6+2，4-D0.4-0.5mg/L+KT0.4-0.5mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照21001x，温度24°C，将培养出来的小驳骨芽苗放入萘乙酸200mg/L+吲哚丁酸200mg/L的混合液，直接插入营养袋基质中，用水浇透，每隔一周用0.1%的高锰酸钾和600倍的多菌灵交替消毒，扦插后覆盖70%的遮阳网，温度控制在25°C，湿度80%以上，保持通风透气。
[0005]采用本发明制备的小驳骨成活率高，周期短，产量大，能耗少，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取小驳骨当年的花药，蒸馏水中清洗5min，超净工作台上70%酒精处理20s，0.1%升汞处理6min,无菌水冲洗5次，消毒处理过的小驳骨花药使用6°Co_y射线5_10Gy处理,接入N6+ZT1.0mg/L+IAA0.25mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度4001X，光期8h，温度24 °C，诱导出来的愈伤组织放入培养基N6+2，4-D0.4mg/L+KT0.4mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照21001x，温度24°C，将培养出来的小驳骨芽苗放入萘乙酸200mg/L+吲哚丁酸200mg/L的混合液，直接插入营养袋基质中，用水浇透，每隔一周用0.1%的高锰酸钾和600倍的多菌灵交替消毒，扦插后覆盖70%的遮阳网，温度控制在25°C，湿度80%以上，保持通风透气，成活率86%。
[0008]实施例2
取小驳骨当年的花药，蒸馏水中清洗5min，超净工作台上70%酒精处理20s，0.1%升汞处理6min,无菌水冲洗5次，消毒处理过的小驳骨花药使用6°Co_y射线5_10Gy处理,接入N6+ZT1.0mg/L+IAA0.25mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度4001X，光期8h，温度24 °C，诱导出来的愈伤组织放入培养基N6+2，4-D0.5mg/L+KT0.5mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照21001x，温度24°C，将培养出来的小驳骨芽苗放入萘乙酸200mg/L+吲哚丁酸200mg/L的混合液，直接插入营养袋基质中，用水浇透，每隔一周用0.1%的高锰酸钾和600倍的多菌灵交替消毒，扦插后覆盖70%的遮阳网，温度控制在25°C，湿度80%以上，保持通风透气，成活率87%。
[0009]实施例3
取小驳骨当年的花药，蒸馏水中清洗5min，超净工作台上70%酒精处理20s，0.1%升汞处理6min,无菌水冲洗5次，消毒处理过的小驳骨花药使用6°Co_y射线5_10Gy处理,接入N6+ZT1.0mg/L+IAA0.25mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度4001X，光期8h，温度24 °C，诱导出来的愈伤组织放入培养基N6+2，4-D0.4mg/L+KT0.5mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照21001x，温度24°C，将培养出来的小驳骨芽苗放入萘乙酸200mg/L+吲哚丁酸200mg/L的混合液，直接插入营养袋基质中，用水浇透，每隔一周用0.1%的高锰酸钾和600倍的多菌灵交替消毒，扦插后覆盖70%的遮阳网，温度控制在25°C，湿度80%以上，保持通风透气，成活率88%。
【权利要求】
1.一种小驳骨再生植株的快速繁殖方法，包括小驳骨无菌花药的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取小驳骨的花药，对其进行消毒处理； (2)取步骤(I)消毒处理过的小驳骨花药使用6tlCo-Y射线5-lOGy处理，接入N6+ZT1.0mg/L+IAA0.25mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织诱导，pH5.8，光照强度4001x，光期8h，温度24°C ； (3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入培养基N6+2，4-D0.4-0.5mg/L+KT0.4-0.5mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照21001x，温度24°C ； (4)取步骤(3)分化出来的芽苗进行炼苗移栽。
2.按照权利要求1所述的一种小驳骨再生植株的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(O中所述小驳骨花药的获得为，取小驳骨当年的花药，蒸馏水中清洗5min，超净工作台上70%酒精处理20s，0.1%升汞处理6min，无菌水冲洗5次。
3.按照权利要求1所述的一种小驳骨再生植株的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)中小驳骨炼苗移栽的方法为将培养出来的小驳骨芽苗放入萘乙酸200mg/L+吲哚丁酸200mg/L的混合液，直接插入营养袋基质中，用水浇透，每隔一周用0.1%的高锰酸钾和600倍的多菌灵交替消毒，扦插后覆盖70%的遮阳网，温度控制在25°C，湿度80%以上，保持通风透气。
【文档编号】A01H4/00GK104255512SQ201410540493
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年10月14日 优先权日:2014年10月14日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司