奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法
【专利摘要】本发明公开了一种奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法，采用到继代周期的健康奇异核桃乌拉克组培苗作为生根材料，将其经过暗培养处理，然后转入生根培养基进行光培养和暗培养交替进行的生根培养，20-24天后即可得出瓶种植的组培生根苗，其生根率达65-75％，大棚成活率达65％-85％。本发明所提供的奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法，不受季节等因素的影响，为其工厂化生产提供理论依据和技术支撑，并能高效、快速提供均一稳定的种苗，加速良种推广速度。本发明适用于奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根培育。
【专利说明】奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物培植领域，涉及一种植物生根方法，具体涉及一种奇异核桃乌拉 克组培苗瓶内的生根方法。
【背景技术】
[0002] 核桃是一种难于生根的经济林树种，不同核桃品种生根特性有显著差异。据美 国加州大学Gale McGranahan 2004年报道，在实验室所采用的3个核桃主栽品种圣冷特 (Sunlan)、强特勒（Chandler)、维纳（Vina)中，生根情况差异很大，生长势强，树姿直立的 品种圣冷特最易生根，生根率达到94% ;强特勒生根能力处于中水平，达到55% ;维纳则是 最难生根的品种，生根率只有27%。该研究也证实核桃品种或基因型是决定核桃生试管苗 生根的关键因素。
[0003] "核桃试管苗生根的研究进展"李春燕等，《北方园艺》，2013(01) :190-193页中公 开了核桃品种不同，基因型不同，其生根能力或生根潜能的表达也存在较大差异，表现在不 同树种和品种个体间发生不定根的能力差异悬殊。
[0004] "IBA和暗处理对核桃组培苗生根的影响"李春燕等，《山西林业科技》，2011年12 月，第40卷第4期，30-31页，以"金博香6号"核桃组培苗为试材，探讨了 IBA浓度和暗处 理天数对核桃组培苗生根的影响，在其最佳条件下，生根率可达65. 56%。并且指出：不同 生长素对核桃生根诱导效果不同。不定根生产过程不仅取决于内源生长素的含量，还涉及 到激素间的平衡。
[0005] "铁核桃离体培养与快速繁殖"王沙沙等，《植物生理学报》，2014, 50 (4)，527-537 页，公开了以优良单株"纳雍-1"的单芽茎段为外植体，建立了铁核桃（Juglans sigillata) 离体培养与快速繁殖的体系，其最高生根率为71. 73%，
[0006] 而奇异核桃（Juglans hindsii XJ. regia)属于胡桃科（Juglandales)胡桃属 (Juglans)，系美国北加州黑核桃与核桃的杂交种，其中父本为核桃，母本为北加州黑核桃。 该树种乌拉克Vlach是从奇异核桃中选出的优良株系，是一个核桃站木品种，于2010年经 国内著名核桃专家奚声珂教授从美国加州引进，其具有明显的杂种优势，明显优于现有的 核桃砧木，生长势好，具有抗线虫、疫霉属病菌，根瘤菌，蜜环菌等引起的病害。适生范围广， 能在pH > 5的土上正常生长，pH = 9的钙质土上正常生长。该品种具有一定的抗寒性，适 宜生长在雨润丰富地区，雨量> 500mm的区域均能正常生长。由于其长势旺，特别适合作为 早实核桃的砧木，增强树势。用其做砧木，一般6年即可达初盛果期。同时，该树种为落叶 硬阔乔木，生长势强，树干通直，是城镇绿化和农田林绿化的优良材料，与黑核桃相比，其材 质略浅，介于黑核桃与核桃之间，可作为硬阔材使用，目前国内此类木材多属进口。
[0007] "奇异核桃快繁技术研究"裘晓梅等，《内蒙古林业科技》，第39卷，第2期，52-54 页，公开了以奇异核桃带腋芽茎段为外植体进行试管繁殖，腋芽萌生培养基和分化、继代 培养均为DKW+IBA 1.0mg/L。使用"二步法"诱导生根效果较好，最适诱导生根培养基为 DKW+IBA 2. 5mg/L，生根培养基为无植物激素的DKW，生根率可达到65%。由于奇异核桃属 于杂交种，每一颗种子培养的出的奇异核桃苗均属于不同的基因型。
[0008] 而目前国内市场上奇异核桃均为接穗，株系来源混乱，尚无无性系植根苗。奇异核 桃（vlach)枝条扦插生根率低，植物组织培养作为无性繁殖方式，成为将该优良无性系进 行繁殖的必然方式，但由于其生根难的问题，目前尚未形成产业化。目前苗木市场上核桃砧 木品种繁多，良莠不齐，且多为种子播种而得，后代存在性状分离的问题，优良性状难以稳 定遗传，现有研究中虽有核桃组培快繁的报道，但由于其难生根，无法形成工厂化生产。因 此，研究一种奇异核桃（vlach)的生根方法，并将其推广将极大提高林业产业的经济效益， 具有重要的意义。
【发明内容】
[0009] 本发明要解决的技术问题，是提供一种奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法， 该生根方法，不受季节等因素的影响，为其工厂化生产提供理论依据和技术支撑，并能高 效、快速提供均一稳定的种苗，加速良种推广速度，并且生根率可达到65-75 %，大棚成活率 达 65-85%。
[0010] 为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：
[0011] 一种奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法，它包括以下步骤：
[0012] (1)选取植株高度为2-5cm、继代周期为18-23天、叶色为绿色或墨绿色的奇异核 桃组培苗作为生根材料，切除基部叶片、腋芽至基部留出1-2厘米的茎段，得到生根材料a ;
[0013] (2)将生根材料a中的小苗基部插入生根I培养基中进行暗培养，暗培养时间为 48-72小时，温度为20-28°C，得到生根材料b ;
[0014] (3)将生根材料b转入生根II培养基中，光照和暗培养交替进行，光照培养条件为 13小时光照，光照强度2000-3000勒克斯，温度为23-27°C ;暗培养条件为暗培养11小时， 温度为19_23°C，得到生根材料c ;其中，生根II培养基是体积比为1:1的营养液：基质；
[0015] (4)将生根材料C培养20-24天，制得奇异核桃乌拉克组培生根苗。
[0016] 作为本发明的一种限定，所述步骤（2)中的生根I培养基为：以1/4-1份核桃专用 培养基DKW为基础培养基，添加4-16mg/L吲哚丁酸IBA、30-60g/L蔗糖和4-8g/L琼脂，pH 为 5. 5-6. 0。
[0017] 作为本发明的另一种限定，所述步骤（3)中的营养液为以1/4-1份核桃专用培养 基DKW为基础培养基，添加0? 01-0. 03mg/L吲哚丁酸IBA和20-50g/L蔗糖，pH为5. 5-6. 0 ;
[0018] 本发明还有一种限定，所述基质为蛭石或体积比为1:1的草炭：珍珠岩或体积比 为1:1:1的蛭石：草炭：珍珠岩中的一种。
[0019] 本发明所提供的生根方法所对应的生根效果是鉴于生根方法中所涉及所有技术 参数组合后的效果，单独采用其中的一种或几种均不能够达到相应的技术效果，将其中的 一种或几种技术参数经过简单替换后也不能达到相应的技术效果。
[0020] 由于采用了上述的技术方案，本发明与现有技术相比，所取得的技术进步在于：
[0021] 本发明采用奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法，是植物组织培养进入工厂化 生产不可或缺的一步。其中，将到继代周期的健康奇异核桃乌拉克组培苗作为生根材料，将 其经过暗培养处理，然后转入生根培养基光培养和暗培养交替进行生根培养，20-24天后即 可得出瓶种植的组培生根苗，其生根率达65-75%，大棚成活率达65-85%。本发明所提供 的奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法，不受季节等因素的影响，为其工厂化生产提供 理论依据和技术支撑，并能高效、快速提供均一稳定的种苗，加速良种推广速度。
[0022] 本发明适用于奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根培育。
[0023] 本发明下面将结合具体实施例作进一步详细说明。
【具体实施方式】
[0024] 实施例1 一种奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法
[0025] -种奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法，它包括以下步骤：
[0026] (1)选取植株高度为3cm、继代周期为20天、叶色为绿色或墨绿色的奇异核桃组培 苗（来自于中国林科院奚声珂教授实验室）作为生根材料，切除基部叶片、腋芽至基部留出 1厘米的茎段，得到生根材料a ;
[0027] (2)将生根材料a中的小苗基部插入生根I培养基中进行暗培养，暗培养时间为 36小时，温度为24°C，得到生根材料b ;
[0028] 其中，生根I培养基为：以1份核桃专用培养基DKW为基础培养基，添加8mg/L吲 哚丁酸IBA、50g/L蔗糖和6g/L琼脂，pH为5. 5。
[0029] (3)将生根材料b转入生根II培养基中，光照和暗培养交替进行，光照培养条件 为13小时光照，光照强度2500勒克斯，温度为25°C ;暗培养条件为暗培养11小时，温度为 21 °C，得到生根材料c ;其中，生根II培养基是体积比为1:1的营养液：基质；
[0030] 其中，营养液为以1/4-1份核桃专用培养基DKW为基础培养基，添加0. 01mg/L吲 哚丁酸IBA和30g/L蔗糖，pH为5. 5 ;
[0031] 所述基质为蛭石或体积比为1:1的草炭：珍珠岩或体积比为1:1:1的蛭石：草炭： 珍珠岩中的一种。
[0032] (4)将生根材料c培养24天，制得奇异核桃乌拉克组培生根苗，生根率为75%，大 棚生长率为85%。
[0033] 实施例2-6奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法
[0034] 实施例2-6分别为一种奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法，其与实施例1相 似，不同之处仅在于方法中所涉及的技术参数不同，具体参见下表：
[0035]
【权利要求】
1. 一种奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法，其特征在于它包括以下步骤： (1) 选取植株高度为2-5cm、继代周期为18-23天、叶色为绿色或墨绿色的奇异核桃组 培苗作为生根材料，切除基部叶片、腋芽至基部留出1-2厘米的茎段，得到生根材料a ; (2) 将生根材料a中的小苗基部插入生根I培养基中进行暗培养，暗培养时间为48-72 小时，温度为20-28°C，得到生根材料b ; (3) 将生根材料b转入生根II培养基中，光照和暗培养交替进行，光照培养条件为13小 时光照，光照强度2000-3000勒克斯，温度为23-27°C ;暗培养条件为暗培养11小时，温度 为19-23°C，得到生根材料c ;其中，生根II培养基是体积比为1:1的营养液：基质； (4) 将生根材料c培养20-24天，制得奇异核桃乌拉克组培生根苗。
2. 根据权利要求1所述的奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法，其特征在于所述步 骤⑵中的生根I培养基为：以1/4-1份核桃专用培养基DKW为基础培养基，添加4-16mg/ L 吲哚丁酸 IBA、30-60g/L 蔗糖和 4-8g/L 琼脂，pH 为 5. 5-6. 0。
3. 根据权利要求1所述的奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法，其特征在于：所述 步骤（3)中的营养液为以1/4-1份核桃专用培养基DKW为基础培养基，添加0. 01-0. 03mg/ L 吲哚丁酸 IBA 和 20-50g/L 蔗糖，pH 为 5. 5-6. 0。
4. 根据权利要求1所述的奇异核桃乌拉克组培苗瓶内的生根方法，其特征在于：所述 基质为蛭石或体积比为1:1的草炭：珍珠岩或体积比为1:1:1的蛭石：草炭：珍珠岩中的一 种。
【文档编号】A01H4/00GK104381132SQ201410606374
【公开日】2015年3月4日 申请日期:2014年10月31日 优先权日:2014年10月31日
【发明者】陈丽闽, 奚声珂, 林大为, 张承妹, 董举文 申请人:上海杉一植物科技有限公司