一种松杉灵芝菌种的栽培方法
【专利摘要】本发明提供一种松杉灵芝菌种的栽培方法，具体涉及真菌的培养和加工的【技术领域】，该方法包括制作母种、制作原种、接种栽培、出芝管理四个步骤。本发明制备松杉灵芝菌种活性成分高，抗肿瘤功能好，具有很好的经济效益和社会效益，本发明是一种经济实用、成本低、效果好的培养方法；以粮食类原料为主的培养料，添加腐殖酸减少土壤的重金属对菌种的毒害，采用模拟野生松杉灵芝的生长环境技术，提高了松杉灵芝的产量和品质，在松杉灵芝产品安全性上有了保证。有利于传统中药松杉灵芝产品走向标准化、产业化、国际化的道路；使得松杉灵芝品质、有效成分含量上得到显著提高，取得良好的经济效益和社会效益。
【专利说明】一种松杉灵芝菌种的栽培方法
【技术领域】
[0001]本发明属于真菌的培养和加工的【技术领域】，尤其是涉及一种松杉灵芝菌种的栽培方法。
【背景技术】
[0002]松杉灵芝收录在我国中药药典中，与赤芝、紫芝一起被广泛应用于抗肿瘤药品及保健食品当中。经过多年的波动式发展，松杉灵芝已经从单向出口发展到多种加工产品内外销售的局面。而野生松杉灵芝由于其独特的生长环境、绿色安全的传统观念受到人们的追捧，而价格也一直居高不下。目前，关于松杉灵芝的专利申请主要是关于松杉灵芝的提取、多糖制备、子实体分子标记或已有菌种的栽培方法。采用木段、玉米芯、棉子壳、杂草为原料生产的松杉灵芝，其品质往往参差不齐，有效成分各不相同。用纯棉籽壳种植产量偏低、药性下降，而用杂草、中药渣做为原料生产灵芝安全性不稳定。
【发明内容】
[0003]本发明要解决的问题是提供一种松杉灵芝菌种的栽培方法，该方法制备的松杉灵芝菌种活性成分高，抗肿瘤功能好，具有很好的经济效益和社会效益，提高了松杉灵芝的产量和品质，为松杉灵芝产业的可持续发展提供了新途径。
[0004]为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是:
[0005]一种松杉灵芝菌种的栽培方法，包括以下步骤:
[0006](I)制作母种:采集组织分离的菌种松杉灵芝，将菌种接至经过消毒的短椴木空穴内，置于30°C培养箱中恒温暗培养，直至菌丝长满短椴木空穴即得生产母种，其中所述短椴木空穴上培养基的的配方按质量百分比计为破碎的小麦20-30份、小麦麸皮2-5份、琼脂2-5份、碳酸钙0.3-0.7份、乳酸钙0.4-0.6份、硫酸镁0.15-0.25份、维生素0.01-0.03份、腐殖酸0.10-0.15份，含水量55-60% ；
[0007](2)制作原种:将生产母种无菌接入原种袋中，置于25°C培养箱中恒温暗培养，至菌丝吃满料后即得原种，其中原种袋的培养基原料组成按质量百分比计为小麦麸皮70-75份、高粱糠15-20份、碳酸钙2-4份、黄芪提取液0.01-0.03份、当归提取液0.01-0.04份，含水量55-60% ；
[0008](3)接种栽培:将原种无菌接入栽培料袋中，在25°C培养室中避光培养，待栽培袋中的菌丝长满栽培料后，继续遮光后熟培养至菌丝完成后熟期，隔一天进行一次频率为15MHz的高压脉冲直流电放电，模拟森林环境中的自然雷电，促进菌种的增长，其中栽培料的培养基原料组成按质量百分比计为木肩68-72份、高粱糠20-24份、碳酸钙2_5份，腐殖酸0.1-0.3份，含水量60-65% ；
[0009](4)出芝管理:调节温度为25 °C、湿度85-90 %、闪光频率为1HZ的光照100-2001ux，不通气，保持CO2含量在2000ppm以上，待菌柄伸长期结束并进入菌盖生长期时，通气，调整温度为26-28°C，湿度85-95%，闪光频率为100HZ的光照400_5001ux，通气，保持0)2含量小于1200ppm，至菌盖的白边完全变黄时，采摘孢子，从而得到孢子、新鲜子实体，干燥后可得到干燥的子实体以及松杉灵芝菌丝体。
[0010]所述步骤(2)中黄芪提取液、当归提取液为利用粉碎以后的黄芪、当归，经过高温、高压提取成含生药重量组分为10%的提取液体。
[0011]所述步骤(3)中的培养室的空气相对湿度为60-70%。
[0012]本发明制备松杉灵芝菌种活性成分高，抗肿瘤功能好，具有很好的经济效益和社会效益，本发明是一种经济实用、成本低、效果好的培养方法；以粮食类原料为主的培养料，添加腐殖酸减少土壤的重金属对菌种的毒害，采用模拟野生松杉灵芝的生长环境技术，提高了松杉灵芝的产量和品质，从根本上解决松杉灵芝生产与林业生态平衡之间的矛盾，也为松杉灵芝产业的可持续发展提供了新途径；在松杉灵芝产品安全性上有了保证。有利于传统中药松杉灵芝产品走向标准化、产业化、国际化的道路；使得松杉灵芝品质、有效成分含量上得到显著提高，取得良好的经济效益和社会效益。
【具体实施方式】
[0013]实施例1
[0014]一种松杉灵芝菌种的栽培方法，包括以下步骤:
[0015](I)制作母种:采集组织分离的菌种松杉灵芝，将菌种接至经过消毒的短椴木空穴内，置于30°C培养箱中恒温暗培养，直至菌丝长满短椴木空穴即得生产母种，其中所述短椴木空穴上培养基的的配方为:破碎的小麦20kg、小麦麸皮5kg、琼脂2kg、碳酸1? 0.3kg、乳酸钙0.4kg、硫酸镁0.15kg、维生素0.01kg、腐殖酸0.10kg，其余为水，含水量55-60% ；
[0016](2)制作原种:将生产母种无菌接入原种袋中，置于25°C培养箱中恒温暗培养，至菌丝吃满料后即得原种，其中原种袋的培养基原料组成按质量百分比计为小麦麸皮70kg、高粱糠20kg、碳酸钙2kg、重量组分为10%的黄芪提取液0.00lkg、重量组分为10%当归提取液0.001kg，含水量55-60% ;其中，黄芪提取液、当归提取液为利用粉碎以后的黄芪、当归，经过高温、高压提取成含生药重量组分为10%的提取液体。
[0017](3)接种栽培:将原种无菌接入栽培料袋中，在25°C培养室中避光培养，待栽培袋中的菌丝长满栽培料后，继续遮光后熟培养至菌丝完成后熟期，隔一天进行一次频率为15MHz的高压脉冲直流电放电，模拟森林环境中的自然雷电，促进菌种的增长，其中栽培料的培养基原料组成按质量百分比计为木肩68kg、高粱糠24kg、碳酸1? 2kg，腐殖酸0.1kg，含水量60%，培养室的空气相对湿度控制为60-70% ；
[0018](4)出芝管理:调节温度为25 °C、湿度85-90 %、闪光频率为1HZ的光照100-2001ux，不通气，保持CO2含量在2000ppm以上，待菌柄伸长期结束并进入菌盖生长期时，通气，调整温度为26-28°C，湿度85-95%，闪光频率为100HZ的光照400_5001ux，通气，保持0)2含量小于1200ppm，至菌盖的白边完全变黄时，采摘孢子，在菌柄0.5-lcm处割取，千万不可连菌皮一起拔掉，以免引进虫害病害蔓延，得到孢子、新鲜子实体后放入烘干机干燥，含水量达到10%，可得到子实体总重量为9.8kg，得到松杉灵芝菌丝体57kg。
[0019]实施例2
[0020]一种松杉灵芝菌种的栽培方法，包括以下步骤:
[0021](I)制作母种:采集组织分离的菌种松杉灵芝，将菌种接至经过消毒的短椴木空穴内，置于30°C培养箱中恒温暗培养，直至菌丝长满短椴木空穴即得生产母种，其中所述短椴木空穴上培养基的的配方按质量百分比计为破碎的小麦25kg、小麦麸皮3kg、琼脂4kg、碳酸1? 0.5kg、乳酸1? 0.5kg、硫酸镁0.20kg、维生素0.02kg、腐殖酸0.13kg，含水量55-60% ；
[0022](2)制作原种:将生产母种无菌接入原种袋中，置于25°C培养箱中恒温暗培养，至菌丝吃满料后即得原种，其中原种袋的培养基原料组成按质量百分比计为小麦麸皮72kg、高粱糠17kg、碳酸钙3kg、重量组分为10%的黄芪提取液0.002kg、重量组分为10%的当归提取液0.003kg，含水量55-60% ；
[0023](3)接种栽培:将原种无菌接入栽培料袋中，在25°C培养室中避光培养，待栽培袋中的菌丝长满栽培料后，继续遮光后熟培养至菌丝完成后熟期，隔一天进行一次频率为15MHz的高压脉冲直流电放电，模拟森林环境中的自然雷电，促进菌种的增长，其中栽培料的培养基原料组成按质量百分比计为木肩70kg、高粱糠23kg、碳酸1? 3kg，腐殖酸0.2kg，含水量60-65%，培养室的空气相对湿度控制为60-70% ；
[0024](4)出芝管理:调节温度为25 °C、湿度85-90 %、闪光频率为1HZ的光照100-2001ux，不通气，保持CO2含量在2000ppm以上，待菌柄伸长期结束并进入菌盖生长期时，通气，调整温度为26-28°C，湿度85-95%，闪光频率为100HZ的光照400_5001ux，通气，保持0)2含量小于1200ppm，至菌盖的白边完全变黄时，采摘孢子，在菌柄0.5-lcm处割取，千万不可连菌皮一起拔掉，以免引进虫害病害蔓延，得到孢子、新鲜子实体后放入烘干机干燥，含水量达到10%，可得到子实体总重量为9.5kg，得到松杉灵芝菌丝体55kg。
[0025]实施例3
[0026]一种松杉灵芝菌种的栽培方法，包括以下步骤:
[0027](I)制作母种:采集组织分离的菌种松杉灵芝，将菌种接至经过消毒的短椴木空穴内，置于30°C培养箱中恒温暗培养，直至菌丝长满短椴木空穴即得生产母种，其中所述短椴木空穴上培养基的的配方按质量百分比计为破碎的小麦30kg、小麦麸皮5kg、琼脂5kg、碳酸1? 0.7kg、乳酸1? 0.6kg、硫酸镁0.25kg、维生素0.03kg、腐殖酸0.15kg，含水量55-60% ；
[0028](2)制作原种:将生产母种无菌接入原种袋中，置于25°C培养箱中恒温暗培养，至菌丝吃满料后即得原种，其中原种袋的培养基原料组成按质量百分比计为小麦麸皮75kg、高粱糠20kg、碳酸钙4kg、黄芪提取液0.03kg、重量组分为10%的当归提取液0.04kg，含水量 55-60kg ；
[0029](3)接种栽培:将原种无菌接入栽培料袋中，在25°C培养室中避光培养，待栽培袋中的菌丝长满栽培料后，继续遮光后熟培养至菌丝完成后熟期，隔一天进行一次频率为15MHz的高压脉冲直流电放电，模拟森林环境中的自然雷电，促进菌种的增长，其中栽培料的培养基原料组成按质量百分比计为木肩72kg、高粱糠22kg、碳酸1? 5kg，腐殖酸0.3kg，含水量60-65%，培养室的空气相对湿度控制为60-70% ；
[0030](4)出芝管理:调节温度为25 °C、湿度85-90 %、闪光频率为1HZ的光照100-2001ux，不通气，保持CO2含量在2000ppm以上，待菌柄伸长期结束并进入菌盖生长期时，通气，调整温度为26-28°C，湿度85-95%，闪光频率为100HZ的光照400_5001ux，通气，保持0)2含量小于1200ppm，至菌盖的白边完全变黄时，采摘孢子，在菌柄0.5-lcm处割取，千万不可连菌皮一起拔掉，以免引进虫害病害蔓延，得到孢子、新鲜子实体后放入烘干机干燥，含水量达到10%，可得到子实体总重量为9.7kg，得到松杉灵芝菌丝体60kg。
[0031]以上对本发明的三个实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。
【权利要求】
1.一种松杉灵芝菌种的栽培方法，其特征在于:包括以下步骤: (1)制作母种:采集组织分离的菌种松杉灵芝，将菌种接至经过消毒的短椴木空穴内，置于30°C培养箱中恒温暗培养，直至菌丝长满短椴木空穴即得生产母种，其中所述短椴木空穴上培养基的的配方按质量百分比计为破碎的小麦20-30份、小麦麸皮2-5份、琼脂2-5份、碳酸钙0.3-0.7份、乳酸钙0.4-0.6份、硫酸镁0.15-0.25份、维生素0.01-0.03份、腐殖酸0.10-0.15份，含水量55-60% ； (2)制作原种:将生产母种无菌接入原种袋中，置于25°C培养箱中恒温暗培养，至菌丝吃满料后即得原种，其中原种袋的培养基原料组成按质量百分比计为小麦麸皮70-75份、高粱糠15-20份、碳酸钙2-4份、黄芪提取液0.01-0.03份、当归提取液0.01-0.04份，含水量 55-60% ； (3)接种栽培:将原种无菌接入栽培料袋中，在25°C培养室中避光培养，待栽培袋中的菌丝长满栽培料后，继续遮光后熟培养至菌丝完成后熟期，隔一天进行一次频率为15MHz的高压脉冲直流电放电，模拟森林环境中的自然雷电，促进菌种的增长，其中栽培料的培养基原料组成按质量百分比计为木肩68-72份、高粱糠20-24份、碳酸钙2_5份，腐殖酸0.1-0.3 份，含水量 60-65% ； (4)出芝管理:调节温度为25°C、湿度85-90%、闪光频率为1HZ的光照100_2001ux，不通气，保持CO2含量在2000ppm以上，待菌柄伸长期结束并进入菌盖生长期时，通气，调整温度为26-28°C，湿度85-95%，闪光频率为100HZ的光照400_5001ux，通气，保持0)2含量小于1200ppm，至菌盖的白边完全变黄时，采摘孢子，从而得到孢子、新鲜子实体，干燥后可得到干燥的子实体以及药用松杉灵芝菌丝体。
2.根据权利要求1所述的一种松杉灵芝菌种的栽培方法，其特征在于:所述步骤(2)中黄芪提取液、当归提取液为利用粉碎以后的黄芪、当归，经过高温、高压提取成含生药重量组分为10 %的提取液体。
3.根据权利要求1所述的一种松杉灵芝菌种的栽培方法，其特征在于:所述步骤(3)中的培养室的空气相对湿度为60-70%。
【文档编号】C05G3/00GK104488551SQ201410789678
【公开日】2015年4月8日 申请日期:2014年12月18日 优先权日:2014年12月18日
【发明者】季延滨, 李涛 申请人:芝圣（天津）生物科技有限公司