本发明涉及植物组织培养技术,具体涉及一种促进油菜生根的培养基。
背景技术:
油菜属十字花科芸苔属植物,是一种重要的油料作物,其产品既可以加工成人类食用油、工业润滑油,也可以作为绿肥和堆肥。据报道,在2014-2015年间,全球的菜籽油产量超过269.8万吨,为第三大产油植物。通过转基因技术快速获得理想性状油菜栽培种,现在已被广泛使用,据国际农业生物技术应用服务组织(isaaa)统计,2016年转基因作物种植面积达1.851亿公顷,且全球种植的油菜有24%为转基因品种(http://www.isaaa.org),获得转基因油菜的普遍做法是农杆菌介导转化法,通过组织培养获得转基因油菜,而组织培养技术的最后一步就是组培得到的抗性芽的生根。
目前报道最多的油菜生根培养基就是在培养基里添加萘乙酸(naa)或吲哚丁酸(iba)激素,但添加的浓度从0.1mg/l到2mg/l不等,生根效果也不尽相同,这为转基因油菜的应用推广带来了极大的困难。
技术实现要素:
针对现有技术的不足,本发明旨在提供一种促进油菜生根的培养基的改良,用添加不同浓度的naa或iba激素的培养基促进油菜生根,筛选出最佳生根培养基配方,提高油菜生根效率。
为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
一种促进油菜生根的培养基的改良,包括如下组分:ms4.43g/l+蔗糖30g/l+琼脂粉8g/l+agno35mg/l+0.1–2mg/lnaa或iba,ph值为5.8。生根培养环境:25℃、相对湿度60%-70%,2000勒克斯(lx)光照16h/日。
进一步的实施例中,所述培养基包括如下组分:ms4.43g/l+蔗糖30g/l+琼脂粉8g/l+agno35mg/l+0.1mg/lnaa,ph值为5.8。生根培养环境:25℃、相对湿度60%-70%,2000勒克斯(lx)光照16h/日。
本发明的优点在于:
本发明方法通过比较报道过的油菜生根用的不同植物生长激素和浓度,筛选到了最适合油菜生根激素和浓度,在节约了激素等的成本和生根处理时间的同时,得到了92.5%的生根率、平均须根数13个、主根较长且于切割位点处生根的良好生根效果。本发明成功获得了油菜生根添加的植物生长激素种类和浓度,为油菜的遗传转化研究奠定了坚实的基础,同时也为油菜等植物的快速生根提供了有效地方法。
具体实施方式
以下通过具体实施范例对本发明的技术方案作进一步说明。
实施例1
种子灭菌后,播种于种子萌发培养基(ms培养基2.22g/l+蔗糖30g/l+琼脂粉8g/l),5日后(苗长至8–10cm),切取其根上部分(距离自然生根部位不短于1cm,根上部分约6–8cm,下称无根苗),在生根培养基(4.43g/lms培养基+30g/l蔗糖+8g/l琼脂粉+5mg/lagno3)内分别添加0.1–2mg/l的naa/iba两种植物激素(设一未添加激素作为对照),生根培养环境:25℃、相对湿度60%-70%,2000勒克斯(lx)光照16h/日。比较其对无根苗的生根效果,每组40株无根苗,每日统计无根苗生根情况,24日后,用水洗去生根培养基,测量再生根的主根长、生根部位(再生根最底端距离切割点距离)和须根数。
表:不同生根培养基对油菜的生根效果比较
生根率=(生根的油菜/无根苗总数)×100%
实验结果表明,油菜在添加了0.1mg/lnaa的生根培养基生根效果就好,24日后,生根率最高,为92.5%,须根数最多,主根较长,且于切割位点部位生根,生根效果最好。
但是,上述具体实施方式只是示例性的,是为了更好的使本领域技术人员能够理解本专利,不能理解为是对本专利包括范围的限制;只要是根据本专利所揭示精神的所作的任何等同变更或修饰,均落入本专利包括的范围。