一种枯草芽孢杆菌组合物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及农药技术领域，特别是枯草芽孢杆菌组合物及其应用。
【背景技术】
[0002] 粮食安全是关系我国国民经济发展、社会和谐稳定的重大战略问题，随着人民生 活改善，对粮食安全性的要求也越来越高。保障无公害、优质安全的粮食供给和实现农业资 源的可持续发展利用是新世纪农业生产面临的最大挑战，近年来，由于种植条件的改善及 气候等因素的影响，水稻穗期重大真菌病害（稻瘟病、稻曲病）频繁发生，不仅严重影响了 稻米的产量和品质，而且利用化学药剂防治水稻病害会给生态环境造成污染，增加了稻米 中农药化学物质的残留，给人类健康造成一定的危害，近年来我国频发爆出的农药中毒事 件也是在给社会敲响警钟，减少粮食作物的化学农药残留已经成为各级政府、学者和农民 共同关注的热点，开发出一种安全、环保的绿色杀菌剂已经是刻不容缓的责任。
[0003] 生物农药具有无污染、无残留、环境相容性好且不易使病原菌产生抗药性等特点， 已经日益引起人们的重视，但是在田间使用生物农药仍然存在一些问题，例如：容易受到气 候和环境的影响导致防效不稳定、药效作用较缓慢等，目前有效解决这一问题的方法之一 是开展生物农药与其他低毒农药复配，构建协同控制水稻病害的技术体系。这样既可以高 效、快速的杀灭植物病原菌，另外杀菌剂中的有益微生物还可以改善微环境，诱导植物产生 抗病性等作用，可以有效持久的控制水稻作物病害的发生和流行。
[0004] 江苏省农科院植保所从水稻田间土壤中分离获得一株枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis)T-500,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏编 号：CGMCC NO :6058,该菌株已于2012年9月7日申请专利，申请号为201210328716. 5,经室 内平板测定及盆栽实验证明，该菌株对水稻稻瘟病、稻曲病及纹枯病均有良好的防治效果， 目前，江苏省农业科学院植保所已经研发了 100亿/克枯草芽孢杆菌T500干悬浮剂，相关 制备方法已于专利201310301606. 4公开。
[0005] 春雷霉素又名春日霉素，英文名（kasugamycin，KSM)，化学名称为（5-氨基-2-甲 基-6-(2,3,4,5,6-羟基环己基氧代）四氢吡喃-3-基）氨基-(1-亚氨醋酸。熔点 ：236? 239°C，原药为浅黄色粉末，在有机溶剂中难溶，在25°C水中溶解12. 5 % (W/V)，原药对人、 畜、家禽的急性毒性均低，大白鼠急性经口毒性22000mg/kg，小白鼠急性经口为20000mg/ kg，兔则为20900mg/kg，对鱼、虾类的毒性很低，只有滴滴涕的八千分之一，属于低毒杀菌 剂。春雷霉素对水稻上的稻瘟病有优异防效和治疗作用，水稻抽穗期和灌浆期施药，对结实 无影响。
[0006] 申请号为201310697647. X的中国专利公开一种有效活性成分为春雷霉素与枯草 芽孢杆菌的组合物，虽然也涉及了水稻稻瘟病，主要是针对水稻叶瘟病开展防效试验，对于 水稻穗期其他重要病害并未涉及；目前，用于同时防治水稻穗颈瘟和稻曲病的有效组合物 并未见诸报道。
【发明内容】
[0007] 针对目前大量使用化学农药防治稻瘟病、稻曲病，污染生态环境，严重影响稻米品 质的现状，提出一种对水稻稻瘟病、稻曲病具有良好防治效果的杀菌剂，该杀菌剂抑菌效果 迅速，农药残留少，本发明是这样实现的：
[0008] -种枯草芽孢杆菌组合物，枯草芽孢杆菌组合物的组分为枯草芽孢杆菌T500干 悬浮剂和6 %春雷霉素可湿性粉剂，它们的质量比为1:0. 1-10。
[0009] 本发明中所述枯草芽孢杆菌组合物中，所述枯草芽孢杆菌T500干悬浮剂的活菌 量为 8X109cfu/g。
[0010] 本发明所述枯草芽孢杆菌组合物在防治水稻稻瘟病和稻曲病中的应用。
[0011] 本发明所述所述枯草芽孢杆菌组合物应用中，所述的稻瘟病为穗稻瘟病。
[0012] 本发明所述所述枯草芽孢杆菌组合物应用中，将组合物的稀释500-2000倍数后 使用。
[0013] 本发明将枯草芽孢杆菌T500与春雷霉素混合后室温放置，经活性检测，枯草芽孢 杆菌T500活菌量不受影响，与春雷霉素具有良好的生物相容性，可以实现长期共存；枯草 芽孢杆菌T500和春雷霉素复配后可以优势互补，既能发挥春雷霉素高效快速的抑菌作用， 又能发挥枯草芽孢杆菌T500在水稻植株定殖诱导植株产生抗病性、持久控制水稻稻瘟病 和稻曲病的作用；本发明首次针对水稻穗期重大病害进行防治，经室内检测和田间药效试 验发现该合物能够有效防治水稻穗颈瘟和稻曲病，提高了防治效果而且减少了化学药剂使 用量，降低农药残留，改善生态环境。
【附图说明】
[0014] 图1为枯草芽孢杆菌T500干悬浮剂与春雷霉素的生物相容性检测结果示意图。
【具体实施方式】
[0015] 实施例中涉及水稻稻瘟病、稻曲病菌由江苏省农科院植保所生防研宄室提供；
[0016] 枯草芽孢杆菌T500由专利201210328716. 5公开，江苏省农科院植保所提供；
[0017] 枯草芽孢杆菌T500干悬浮剂由专利201310301606. 4实施例3公开，活菌量为 8X 109cfu/g，江苏省农科院植保所提供；
[0018] 55%春雷霉素、6%春雷霉素可湿性粉剂均由延边春雷生物药业有限公司生产；
[0019] 实施例中涉及培养基：
[0020] PDA培养基：马铃薯20g、葡萄糖20g、琼脂12g，蒸馏水1000ml，ρΗ5· 5-6. 5 ;
[0021] PDA液体培养基：马铃薯20g、葡萄糖20g，蒸馏水1000ml，ρΗ5. 5-6. 5 ;
[0022] YPGA培养基：葡萄糖5g，蛋白胨5g，酵母膏5g，琼脂12g，蒸馏水1000ml，ρΗ7. 0 ;
[0023] YPG培养液：葡萄糖5g，蛋白胨5g，酵母膏5g，蒸馏水1000ml，ρΗ7. 0 ;
[0024] 实施例1枯草芽孢杆菌Τ500发酵液对水稻病害（稻瘟病、稻曲病）的抑制作用
[0025] 供试菌株：将水稻稻瘟病、稻曲病菌菌株分别用PDA培养基，于28°C培养1周备 用；
[0026] 供试药剂：将枯草芽孢杆菌T500在YPGA培养基上活化，然后将活化菌株接种到 YPG培养液中，置于140r/min、30°C摇床内培养48h制备发酵液，发酵液中菌含量为1? 8X109cfu/ml〇
[0027] 测定方法：
[0028] (1)对稻瘟病菌的抑菌活性测定：在室内条件下，采用平板对峙法，将PDA培养基 培养好的稻瘟病菌，在无菌条件下用直径5mm的灭菌打孔器，自菌落边缘切取菌饼，用接种 器将菌饼接种到PDA培养基平板中央，菌丝面朝上，置于28°C恒温箱内培养3-4天，然后在 PDA培养基上对峙三点放置6mm无菌滤纸片，将枯草芽孢杆菌T500发酵液吸取IOul于滤 纸片上，置于28°C恒温箱内培养，同时设立无菌水处理为对照，每处理重复3次，计算各处 理抑菌率：
【主权项】
1. 一种枯草芽孢杆菌组合物，其特征在于，枯草芽孢杆菌组合物的组分为枯草芽孢杆 菌T500干悬浮剂和6%春雷霉素可湿性粉剂，它们的质量比为1:0. 1-10。
2. 根据权利要求1所述枯草芽孢杆菌组合物，其特征在于所述枯草芽孢杆菌T500干悬 浮剂的活菌量为8X109cfu/g。
3. 如权利要求1所述枯草芽孢杆菌组合物在防治水稻稻瘟病和稻曲病中的应用。
4. 如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的稻瘟病为穗稻瘟病。
5. 如权利要求3或4所述的应用，其特在于，将枯草芽孢杆菌组合物稀释500-2000倍 后使用。
【专利摘要】本发明公开一种枯草芽孢杆菌组合物，所述组合物组分为枯草芽孢杆菌T500干悬浮剂和6%春雷霉素可湿性粉剂，它们的质量比为1:0.1-10；所述草芽孢杆菌组合物可应用于防治水稻稻瘟病和稻曲病；本发明首次针对水稻穗期重大病害进行防治，经室内检测和田间药效试验发现该合物能够有效防治水稻穗颈瘟和稻曲病，提高了防治效果而且减少了化学药剂使用量，降低农药残留，改善生态环境。
【IPC分类】A01N43-16, A01P3-00, A01N63-00
【公开号】CN104542713
【申请号】CN201410809507
【发明人】刘永锋, 孟祥坤, 于俊杰, 俞咪娜, 尹小乐
【申请人】江苏省农业科学院
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月22日