一种油菜的联合诱变育种方法
【专利摘要】本发明公开了一种油菜的联合诱变育种方法，包括以下步骤：挑选当季的油菜种子，分别使用乙醇和热水中浸泡，再在投入a?蛋白酶的水溶液中浸泡，进行催芽，将得到的油菜幼芽连续光照培养后再移入培养基中，进行磁感应处理，以株高、出油量为指标，进行初筛，得到有矮杆、高油的油菜幼苗，将筛选出的油菜幼苗移入SH固体培养基中，每隔4h～6h在幼苗根茎部位注射化学诱导剂，每日对幼苗喷洒营养液，连续诱变，将得到的油菜植株移入营养土中，以株高、出油量为指标，反复定向继代育种，每次育种均逐步提高矮杆、高油性状的油菜植株的育种率，即得。本发明采用物理诱变和化学诱变联合育种，有利于拓展油菜的育种方法、提高油菜育种的育种效率。
【专利说明】
一种油菜的联合诱变育种方法
技术领域
[0001] 本发明涉及油菜的育种领域，具体涉及一种油菜的联合诱变育种方法。
【背景技术】
[0002] 油菜榨取的菜籽油是我国的主要食用油之一，富含亚油酸等不饱和脂肪酸和维生 素 E等营养成分，能很好地被机体吸收，具有良好的软化血管、延缓衰老的功效。因此，油菜 的改良育种受到越来越多的关注和探索，以便有效拓宽油菜的遗传背景，扩大其种质资源。
[0003] 而诱变育种能够提高育种突变率，扩大突变谱，大大缩短育种年限，近年来在育种 领域发挥了极大的作用。诱变育种包括物理诱变育种和化学诱变育种。物理诱变是用物理 因子使基因发生突变的过程，诱发范围比较广泛，染色体畸变较多。化学诱变是用化学诱变 剂处理植物材料，以诱发遗传物质的突变的过程，多是基因的点的突变，染色体畸变较少。
[0004] 因此将物理诱变和化学诱变联合育种应用于油菜育种制种，有利于拓展油菜的育 种方法、提高油菜育种的育种效率和育种时间，还有利于油菜育种品种的多样化。
[0005] 中国专利CN201410035450.4公开了一种超重力诱变育种的方法，首先将种子或萌 发种子放入离心机，在超重力范围为200g_5000g的条件下进行超重力诱变，所述超重力诱 变时间为1小时至48小时;然后对诱变后的种子进行筛选，获得诱变株系；并将获得的诱变 株系选育3至4个世代，获得自交系或品种;最后进行杂种杂交选育，即得。但是该专利采用 的超重力诱变方法，种子的死亡率很高，种子在超重力条件下难以萌发，诱变率很低，需要 很大的筛选样本，并且超重力诱导的仪器贵重，操作极为繁琐、难以推广。
[0006] 中国专利CN201510322175.9公开了一种超强抗寒高产高油白菜型冬油菜品种的 育种方法，以冬性白菜型冬油菜品种做母本，冬性白菜型冬油菜丰产品种做父本，杂交得到 F1代;部分F1代在低温人工气候室冷冻，逐渐解除低温胁迫，冬季自然条件下越冬，收获存 活抗寒单株;剩余F1代播种于鉴定圃自然条件下越冬，收获存活抗寒单株;存活抗寒单株为 F2代;F2代单株播种于抗寒鉴定圃，自然条件下越冬，收获安全越冬单株，得F3代;重复获得 F2代的过程依次得到F4代、F5代和F6代;从F6代开始进行株系比较，选择优良株系进入鉴定 圃，获得超强抗寒高产高油的白菜型冬油菜新品种。但是该专利的育种周期很长，且自然突 变体极少，取大量人力手工选择变异体单株，工作极为繁重，需要耗费大量的人力和物力。 [0007]因此需要一种易于推广、诱变效率高、操作流程规范化的现代油菜育种方法。
【发明内容】
[0008] 本发明针对上述问题，提供了一种油菜的联合诱变育种方法。
[0009] 本发明解决上述问题所采用的技术方案是：
[0010] -种油菜的联合诱变育种方法，包括以下步骤：
[0011] 步骤S01，清洗:挑选当季的油菜种子，去除霉变、虫害、霜冻等性状差的种子，精选 后的种子使用乙醇溶液浸泡12h~24h，去除种子表面灰尘及病菌等，之后于清水中浸泡 30min~60min，捞出种子，再用清水淋洗2次~3次；
[0012] 步骤S02，浸种：将经步骤SOI处理的种子，在40°C~50 °C的热水中浸泡2h~3h，捞 出洗净，再在30 °C~36 °C的温度条件下，投入含有1 % wt~3.5 % wt的a-蛋白酶的水溶液中 浸泡3h~6h，捞出，用湿布包住种子，放入保温箱内，在35°C~40°C的温度条件下进行催芽， 得到芽长为3mm~4mm的油菜幼芽；
[0013]步骤S03,低温处理:将步骤S02中得到的油菜幼芽移种于B5培养基中，在氙灯连续 光照，温度为1°C-3°C的条件下培养2天~3天，去除发育不良的幼株，保留长势正常的植株；
[0014] 步骤S04,物理诱导：将步骤S03中得到的油菜幼芽移入SH培养基中，在压力为 0.03MPa~0.08MPa的条件下，将幼芽置于中等强度定向电磁场中进行磁感应处理3天~7 天，同时给予幼芽叶片位置连续光照处理，而根系部位则保持黑暗状态，以株高、出油量为 指标，进行初筛，得到有矮杆、高油的油菜幼苗；
[0015] 步骤S05,化学诱导:将步骤S04筛选出的油菜幼苗移入SH固体培养基中，每隔4h~ 6h在幼苗根茎部位注射化学诱导剂，每日对幼苗喷洒营养液1次，连续诱变15天~20天，得 到苗长为12cm~16cm的油菜植株；
[0016]步骤S06，反复育种:将步骤S05得到的油菜植株，移入营养土中，以株高、出油量为 指标，反复定向继代育种，每次育种均逐步提尚矮杆、尚油性状的油采植株的育种率。
[0017] 进一步地，步骤S01中，乙醇溶液中乙醇的质量分数为70%~75%。
[0018] 进一步地，步骤S02中，催芽的时间为48h~80h。
[0019] 进一步地，步骤S03中，氙灯的功率为200W~350W。
[0020] 进一步地，步骤S04中，磁感应处理具体为:每天在磁感应强度为50mT~80mT的条 件下，对油菜幼芽进行磁感应处理3h~4.5h，连续磁感应处理3天~7天。
[0021] 进一步地，步骤S04中，连续光照处理的参数具体为:光照强度为30001X~45001X。 [0022] 进一步地，步骤S05中，化学诱导剂的成分及其重量份为：咪唑喹啉酸0.8份~2.0 份、硫酸钴1. 〇份~3.5份、9，10-蒽醌0.4份~2.5份、4-氨基联苯0.9份~4.5份、联苯胺0.4 份~1.0份、环氧乙烧0.5份~1.3份、胺横酰0.2份~1.2份、别噪呤醇0.3份~2.9份、5-溴尿 嘧啶0.5份~1.2份、环磷酸鸟苷0.5份~4.0份、硫酸胲0.2份~1.0份、硝基苯0.4份~1.5 份、氯喹0.2份~2.6份、乳酸依沙吖啶0.2份~0.5份、正丁醇12份~20份、蒸馏水100份~ 150 份。
[0023]进一步地，步骤S05中，营养液的成分及其重量份为:葡萄糖酸钙0.5份~1.3份、碘 化钾0.3份~0.8份、碘化铵0.2份~0.6份、氯化镁0.6份~1.4份、硼氢化钠1.2份~1.8份、 硫酸亚铁0.5份~1.5份、柠檬酸锌0.8份~1.8份、磷酸氢二钠0.7份~1.3份、氯化锰0.5份 ~1.6份、蒸馏水200份~300份。
[0024] 进一步地，步骤S06中，营养土的成分及其重量份为:泥炭40份~60份、椰糠50份~ 85份、骨粉45份~75份、河沙30份~50份、草木灰45份~70份、珍珠岩15份~25份、镁硼酸盐 矿石10份~20份、磷镧铺石10份~25份。
[0025]更进一步地，营养土的配制过程为:将所述重量份的泥炭、椰糠、骨粉、河沙、草木 灰、珍珠岩、镁硼酸盐矿石、磷镧铈石，经暴晒过60目~90目筛后，调节营养土的pH值至6.2 ~7.0,即得。
[0026]本发明的优点是：
[0027] 1.本发明采用物理诱导和化学诱导联合诱导的育种方法，这种诱导育种方法集取 两种诱导育种方法的优点，大大提高油菜植株的突变率；
[0028] 2.本发明采用在一定压力和磁场中诱导油菜植株突变，这种突变方法安全、有效、 快捷、极大提高植物的突变率；
[0029] 3.本发明采用的化学诱导经过精密的配比，能够实现油菜的精确诱导；
[0030] 4.本发明育种时间短，性状稳定，具有明显的竞争优势。
【具体实施方式】
[0031] 以下对本发明的实施例进行详细说明，但是本发明可以由权利要求限定和覆盖的 多种不同方式实施。
[0032] 实施例1
[0033] 一种油菜的联合诱变育种方法 [0034] 包括以下步骤：
[0035]步骤S01，清洗:挑选当季的油菜种子，去除霉变、虫害、霜冻等性状差的种子，精选 后的种子使用质量分数为70 %的乙醇溶液浸泡12h，去除种子表面灰尘及病菌等，之后于清 水中浸泡30min，捞出种子，再用清水淋洗2次。
[0036] 步骤S02，浸种:将经步骤S01处理的种子，在40°C的热水中浸泡2h，捞出洗净，再在 30°C的温度条件下，投入含有l%wt的a-蛋白酶的水溶液中浸泡3h，捞出，用湿布包住种子， 放入保温箱内，在35°C的温度条件下进行催芽48h，得到芽长为3_的油菜幼芽。
[0037]步骤S03，低温处理:将步骤S02中得到的油菜幼芽移种于B5培养基中，在200W的氙 灯连续光照，温度为l°c的条件下培养2天，去除发育不良的幼株，保留长势正常的植株。 [0038]步骤S04,物理诱导：将步骤S03中得到的油菜幼芽移入SH培养基中，在压力为 0.03MPa的条件下，将幼芽置于中等强度定向电磁场中，每天在磁感应强度为50mT的条件 下，对油菜幼芽进行磁感应处理3h，连续磁感应处理3天，在光照强度为30001x的条件下，给 予幼芽叶片位置连续光照处理，而根系部位则保持黑暗状态，以株高、出油量为指标，进行 初筛，得到有矮杆、高油的油菜幼苗。
[0039]步骤S05,化学诱导:将步骤S04筛选出的油菜幼苗移入SH固体培养基中，每隔4h在 幼苗根茎部位注射化学诱导剂，每日对幼苗喷洒营养液1次，连续诱变15天，得到苗长为 12cm的油菜植株。其中化学诱导剂的成分及其重量份为:咪唑喹啉酸0.8份、硫酸钴1.0份、 9,10-蒽醌0.4份、4-氨基联苯0.9份、联苯胺0.4份、环氧乙烷0.5份、胺磺酰0.2份、别嘌呤醇 〇. 3份、5-溴尿嘧啶0.5份、环磷酸鸟苷0.5份、硫酸胲0.2份、硝基苯0.4份、氯喹0.2份、乳酸 依沙吖啶0.2份、正丁醇12份、蒸馏水100份。其中营养液的成分及其重量份为:葡萄糖酸钙 〇. 5份、碘化钾0.3份、碘化铵0.2份、氯化镁0.6份、硼氢化钠1.2份、硫酸亚铁0.5份、柠檬酸 锌0.8份、磷酸氢二钠0.7份、氯化锰0.5份、蒸馏水200份。
[0040]步骤S06，反复育种:将步骤S05得到的油菜植株，移入营养土中，以株高、出油量为 指标，反复定向继代育种，每次育种均逐步提尚矮杆、尚油性状的油采植株的育种率。其中 营养土的成分及其重量份为：泥炭40份、椰糠50份、骨粉45份、河沙30份、草木灰45份、珍珠 岩15份、镁硼酸盐矿石10份、磷镧铈石10份。其中营养土的配制过程为:将所述重量份的泥 炭、椰糠、骨粉、河沙、草木灰、珍珠岩、镁硼酸盐矿石、磷镧铈石，经暴晒过60目筛后，调节营 养土的pH值至6.2。
[0041 ] 实施例2
[0042] 一种油菜的联合诱变育种方法 [0043] 包括以下步骤：
[0044]步骤S01，清洗:挑选当季的油菜种子，去除霉变、虫害、霜冻等性状差的种子，精选 后的种子使用质量分数为75 %的乙醇溶液浸泡24h，去除种子表面灰尘及病菌等，之后于清 水中浸泡60min，捞出种子，再用清水淋洗3次。
[0045] 步骤S02，浸种:将经步骤S01处理的种子，在50°C的热水中浸泡3h，捞出洗净，再在 36°C的温度条件下，投入含有3.5 % wt的a-蛋白酶的水溶液中浸泡6h，捞出，用湿布包住种 子，放入保温箱内，在40°C的温度条件下进行催芽80h，得到芽长为4mm的油菜幼芽。
[0046]步骤S03，低温处理:将步骤S02中得到的油菜幼芽移种于B5培养基中，在350W的氙 灯连续光照，温度为3°C的条件下培养3天，去除发育不良的幼株，保留长势正常的植株。 [0047]步骤S04,物理诱导：将步骤S03中得到的油菜幼芽移入SH培养基中，在压力为 0.08MPa的条件下，将幼芽置于中等强度定向电磁场中，每天在磁感应强度为80mT的条件 下，对油菜幼芽进行磁感应处理4.5h，连续磁感应处理7天，在光照强度为45001x的条件下， 给予幼芽叶片位置连续光照处理，而根系部位则保持黑暗状态，以株高、出油量为指标，进 行初筛，得到有矮杆、高油的油菜幼苗。
[0048]步骤S05,化学诱导:将步骤S04筛选出的油菜幼苗移入SH固体培养基中，每隔6h在 幼苗根茎部位注射化学诱导剂，每日对幼苗喷洒营养液1次，连续诱变20天，得到苗长为 16cm的油菜植株。其中化学诱导剂的成分及其重量份为:咪唑喹啉酸2.0份、硫酸钴3.5份、 9,10-蒽醌2.5份、4-氨基联苯4.5份、联苯胺1.0份、环氧乙烷1.3份、胺磺酰1.2份、别嘌呤醇 2.9份、5-溴尿嘧啶1.2份、环磷酸鸟苷4.0份、硫酸胲1.0份、硝基苯1.5份、氯喹2.6份、乳酸 依沙吖啶0.5份、正丁醇20份、蒸馏水150份。其中营养液的成分及其重量份为:葡萄糖酸钙 1.3份、碘化钾0.8份、碘化铵0.6份、氯化镁1.4份、硼氢化钠1.8份、硫酸亚铁1.5份、柠檬酸 锌1.8份、磷酸氢二钠1.3份、氯化锰1.6份、蒸馏水300份。
[0049] 步骤S06，反复育种:将步骤S05得到的油菜植株，移入营养土中，以株高、出油量为 指标，反复定向继代育种，每次育种均逐步提尚矮杆、尚油性状的油采植株的育种率。其中 营养土的成分及其重量份为：泥炭60份、椰糠85份、骨粉75份、河沙50份、草木灰70份、珍珠 岩25份、镁硼酸盐矿石20份、磷镧铈石25份。其中营养土的配制过程为:将所述重量份的泥 炭、椰糠、骨粉、河沙、草木灰、珍珠岩、镁硼酸盐矿石、磷镧铈石，经暴晒过90目筛后，调节营 养土的pH值至7.0。
[0050] 实施例3
[0051] 一种油菜的联合诱变育种方法 [0052] 包括以下步骤：
[0053]步骤S01，清洗:挑选当季的油菜种子，去除霉变、虫害、霜冻等性状差的种子，精选 后的种子使用质量分数为73%的乙醇溶液浸泡18h，去除种子表面灰尘及病菌等，之后于清 水中浸泡45min，捞出种子，再用清水淋洗3次。
[0054] 步骤S02，浸种:将经步骤SO 1处理的种子，在45 °C的热水中浸泡2.5h，捞出洗净，再 在33 °C的温度条件下，投入含有2.3 %wt的a-蛋白酶的水溶液中浸泡4.5h，捞出，用湿布包 住种子，放入保温箱内，在38°C的温度条件下进行催芽64h，得到芽长为3.5mm的油菜幼芽。
[0055]步骤S03，低温处理:将步骤S02中得到的油菜幼芽移种于B5培养基中，在275W的氙 灯连续光照，温度为2°C的条件下培养3天，去除发育不良的幼株，保留长势正常的植株。 [0056]步骤S04,物理诱导：将步骤S03中得到的油菜幼芽移入SH培养基中，在压力为 0.06MPa的条件下，将幼芽置于中等强度定向电磁场中，每天在磁感应强度为65mT的条件 下，对油菜幼芽进行磁感应处理3.8h，连续磁感应处理5天，在光照强度为37501x的条件下， 给予幼芽叶片位置连续光照处理，而根系部位则保持黑暗状态，以株高、出油量为指标，进 行初筛，得到有矮杆、高油的油菜幼苗。
[0057]步骤S05,化学诱导:将步骤S04筛选出的油菜幼苗移入SH固体培养基中，每隔5h在 幼苗根茎部位注射化学诱导剂，每日对幼苗喷洒营养液1次，连续诱变18天，得到苗长为 14cm的油菜植株。其中化学诱导剂的成分及其重量份为:咪唑喹啉酸1.4份、硫酸钴2.3份、 9,10-蒽醌1.5份、4-氨基联苯2.7份、联苯胺0.7份、环氧乙烷0.9份、胺磺酰0.7份、别嘌呤醇 1.6份、5-溴尿嘧啶0.9份、环磷酸鸟苷2.3份、硫酸胲0.6份、硝基苯1.0份、氯喹1.4份、乳酸 依沙吖啶0.4份、正丁醇16份、蒸馏水125份。其中营养液的成分及其重量份为:葡萄糖酸钙 〇. 9份、碘化钾0.6份、碘化铵0.4份、氯化镁1.0份、硼氢化钠1.5份、硫酸亚铁1.0份、柠檬酸 锌1.3份、磷酸氢二钠1.0份、氯化锰1.1份、蒸馏水250份。
[0058]步骤S06，反复育种:将步骤S05得到的油菜植株，移入营养土中，以株高、出油量为 指标，反复定向继代育种，每次育种均逐步提尚矮杆、尚油性状的油采植株的育种率。其中 营养土的成分及其重量份为：泥炭50份、椰糠68份、骨粉60份、河沙40份、草木灰58份、珍珠 岩20份、镁硼酸盐矿石15份、磷镧铈石18份。其中营养土的配制过程为:将所述重量份的泥 炭、椰糠、骨粉、河沙、草木灰、珍珠岩、镁硼酸盐矿石、磷镧铈石，经暴晒过75目筛后，调节营 养土的pH值至6.6。
[0059] 实验例
[0060] 以实施例1~3所述的育种方法培育得到的油菜品种作为实验组，与普通市售油菜 品种进行性能对比测验，分别从播种数量、物理诱变后成活数量、化学诱变后成活数量、每 株植株角果数、单位面积产量、植株高度及出油率七个方面进行考察对比，性能对比实验结 果如表1所示。
[0061] 表1性能对比实验结果
[0062]
[0063] 结论:性能对比实验结果表明，与普通市售油菜对比，本发明实施例中培育的油菜 植株平均角果数为45，比普通组提高了41.7 %，单位面积种子平均产量为2160kg/hm2，比普 通组提高了 16.8%，植株平均高度为36. lcm，比普通组降低了35.8%，种子平均出油率为 44.3%，比普通组提高了23.6%，可见本发明培育的诱变型油菜种子性状优良，具有明显的 经济优势，适合推广应用。
[0064] 以上仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人 员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、 等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种油菜的联合诱变育种方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤SOl，清洗:挑选当季的油菜种子，去除霉变、虫害、霜冻等性状差的种子，精选后的 种子使用乙醇溶液浸泡12h~24h，去除种子表面灰尘及病菌等，之后于清水中浸泡30min~ 60min，捞出种子，再用清水淋洗2次~3次； 步骤S02，浸种：将经步骤SO 1处理的种子，在40 °C~50 °C的热水中浸泡2h~3h，捞出洗 净，再在30°C~36 °C的温度条件下，投入含有1 %wt~3.5 %wt的a-蛋白酶的水溶液中浸泡 3h~6h，捞出，用湿布包住种子，放入保温箱内，在35°C~40°C的温度条件下进行催芽，得到 芽长为3mm~4mm的油菜幼芽； 步骤S03，低温处理：将步骤S02中得到的油菜幼芽移种于B5培养基中，在氙灯连续光 照，温度为1°C_3°C的条件下培养2天~3天，去除发育不良的幼株，保留长势正常的植株； 步骤S04，物理诱导：将步骤S03中得到的油菜幼芽移入SH培养基中，在压力为0.03MPa ~0.08MPa的条件下，将幼芽置于中等强度定向电磁场中进行磁感应处理3天~7天，同时给 予幼芽叶片位置连续光照处理，而根系部位则保持黑暗状态，以株高、出油量为指标，进行 初筛，得到有矮杆、高油的油菜幼苗； 步骤S05,化学诱导：将步骤S04筛选出的油菜幼苗移入SH固体培养基中，每隔4h~611在 幼苗根茎部位注射化学诱导剂，每日对幼苗喷洒营养液1次，连续诱变15天~20天，得到苗 长为12cm~16cm的油菜植株； 步骤S06，反复育种：将步骤S05得到的油菜植株，移入营养土中，以株高、出油量为指 标，反复定向继代育种，每次育种均逐步提尚矮杆、尚油性状的油采植株的育种率。2. 根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，步骤SOl中，所述乙醇溶液中乙醇的质 量分数为70 %~75 %。3. 根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，步骤S02中，所述催芽的时间为48h~ 80h〇4. 根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，步骤S03中，所述氙灯的功率为200W~ 35015. 根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，步骤S04中，所述磁感应处理具体为： 每天在磁感应强度为50mT~SOmT的条件下，对油菜幼芽进行磁感应处理3h~4.5h，连续磁 感应处理3天~7天。6. 根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，步骤S04中，所述连续光照处理的参数 具体为:光照强度为30001x~45001x。7. 根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，步骤S05中，所述化学诱导剂的成分及 其重量份为:咪唑喹啉酸〇. 8份~2.0份、硫酸钴1.0份~3.5份、9，10-蒽醌0.4份~2.5份、4-氨基联苯0.9份~4.5份、联苯胺0.4份~1.0份、环氧乙烧0.5份~1.3份、胺磺酰0.2份~1.2 份、别嘌呤醇0.3份~2.9份、5-溴尿嘧啶0.5份~1.2份、环磷酸鸟苷0.5份~4.0份、硫酸胲 0.2份~1.0份、硝基苯0.4份~1.5份、氯喹0.2份~2.6份、乳酸依沙吖啶0.2份~0.5份、正 丁醇12份~20份、蒸馏水100份~150份。8. 根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，步骤S05中，所述营养液的成分及其重 量份为:葡萄糖酸1丐〇. 5份~1.3份、鹏化钾0.3份~0.8份、鹏化铵0.2份~0.6份、氯化儀0.6 份~1.4份、硼氢化钠1.2份~1.8份、硫酸亚铁0.5份~1.5份、柠檬酸锌0.8份~1.8份、磷酸 氢二钠0.7份~1.3份、氯化锰0.5份~1.6份、蒸馏水200份~300份。9. 根据权利要求1所述的育种方法，其特征在于，步骤S06中，所述营养土的成分及其重 量份为：泥炭40份~60份、椰糠50份~85份、骨粉45份~75份、河沙30份~50份、草木灰45份 ~70份、珍珠岩15份~25份、镁硼酸盐矿石10份~20份、磷镧铈石10份~25份。10. 根据权利要求9所述的育种方法，其特征在于，所述营养土的配制过程为:将所述重 量份的泥炭、椰糠、骨粉、河沙、草木灰、珍珠岩、镁硼酸盐矿石、磷镧铈石，经暴晒过60目~ 90目筛后，调节营养土的pH值至6.2~7.0，即得。
【文档编号】A01G31/00GK105900833SQ201610230564
【公开日】2016年8月31日
【申请日】2016年4月14日
【发明人】林淑录
【申请人】林淑录