一种白芨的培育方法

一种白芨的培育方法
【专利摘要】本发明提供了一种白芨的培育方法，包括：将白芨鳞茎接种于培养基中进行培育，所述培养基包括MS培养基、蔗糖、琼脂和DA?6。本发明在MS培养基中添加蔗糖和DA?6用于培育白芨鳞茎，能够明显提高白芨苗的成活率、成苗率、苗高、茎粗、叶片数、叶片质地、根数、根长、根质地、鳞茎重量、鳞茎直径、鳞茎质地、全株重量等性能参数。实验结果表明，本发明提供的培育方法能够提高白芨苗的成活率、成苗率、苗高、茎粗、叶片数、叶片质地、根数、根长、根质地、鳞茎重量、鳞茎直径、鳞茎质地、全株重量等，而且以60g/L的蔗糖结合8mg/L DA?6为培育白芨试管苗的最佳浓度，生产中可利用该浓度对白芨试管苗进行壮苗的培育。
【专利说明】
_种白甚的培育方法
技术领域
[0001] 本发明属于植物种植技术领域，尤其涉及一种白芨的培育方法。
【背景技术】
[0002] 白发(Bletill a striata(Thunb. )Reichb.f ·]又名甘根、连及草、紫兰，为兰科白 芨属多年生草本植物。因其根为白色，且多个连在一起，所以名白芨。白芨花朵一般较大，颜 色鲜艳，白、蓝、黄、粉和紫红等颜色，可作为观赏植物做盆栽、插花。其中紫花三叉白芨鳞茎 呈三叉状，花朵为紫色，故又名紫花三叉白芨。白芨花期一般在4~5月，果荚在7~8月，果荚 成熟收获期一般在11月底。白芨在世界上从亚洲的緬甸北部经我国至日本都有分布。白芨 喜温暖湿润的气候，常生长于较湿润的苔藓层、溪边石壁或林下湿地中，白芨稍耐寒喜阴 凉，耐阴性强，栽培土用排水良好的砂质壤土最好。白芨在我国的分布地区年降雨量在 IlOOmm以上，年平均气温18~20°C，最低日平均气温8~10°C，空气的相对湿度为70%~ 80%。白芨还有极高的药用价值，早在《神农本草经》中有记载 [6]。近年研究表示，白芨含有 联汴类、二氢菲类、联菲类和其它含菲化合物等化学成分，目前已知联菲类主要是白芨联菲 A、B、C和白芨联菲醇六3、(：[7~8]。白芨具有止血、胃黏膜保护作用；可抗菌、抗癌抗肿瘤；以及 对于皮肤创伤早期愈合有重要作用。在临床上可治疗:体内外出血症、烧伤、烫伤、肿瘤。还 可以诱导免疫调节因子的表达、增强天然杀伤性细胞的活性、促进网状内皮系统的吞噬功 能等。白芨也可用于制备可溶性面膜。研究表明，白芨多糖是一种黏性多糖，成膜性良好，可 以在皮肤表面形成一层均匀薄膜，可以减少皮肤水分蒸发，使角质层进一步水化进而保存 皮肤水分。
[0003] 白芨的传统繁殖方式有种子繁殖和分株繁殖，实际生产主要以分株繁殖为主。白 芨种子非常细小，在自然状态下需要必要的共生真菌存在才能成苗。白芨的分株繁殖一般 在春季或秋冬季进行，即地上新叶萌发之前或老叶枯萎之后，通常将带顶叶的假鳞茎分成3 ~5份进行分植。利用老株假鳞茎繁殖的植株生长周期较长，一般需要2~4年。组织培养技 术可以使白芨及其他兰科植物快速繁殖、缩短植株生长周期，也有利于种质保存和培育新 品种，从而使育苗工作规模商品化。近年来，由于白芨经济价值的增长，野生白芨受到严重 的私挖滥采，发展白芨组培技术很有必要。目前国内对白芨组织培养的研究已有一定的进 展，采用的外植体多为种子。例如叶静等建立了采用种子进行无菌播种的白芨快繁体系，并 成功获得无菌苗。但是，该方法培育的白芨苗各项性能参数并不理想。

【发明内容】

[0004] 有鉴于此，本发明的目的在于提供一种白芨的培育方法，本发明提供的方法培育 能够提高白芨苗的成活率、苗高、茎粗、叶片数、叶片质地、根数、根长、根质地、鳞茎重量、鳞 茎质量、全株重等性能参数。
[0005] 本发明提供了 一种白芨的培育方法，包括：
[0006] 将白芨鳞茎接种于培养基中进行培育，所述培养基包括MS培养基、蔗糖、琼脂和 DA-6 ο
[0007] 本发明在MS培养基中添加蔗糖和DA-6用于白芨的培育，能够提高白芨苗的成活 率、苗高、茎粗、叶片数、叶片质地、根数、根长、根质地、鳞茎重量、鳞茎质量、全株重等参数。
[0008] 本发明提供的培养基包括MS培养基，本发明对所述MS培养基没有特殊限制，本领 域技术人员熟知的、市场上购买的MS培养基即可。
[0009] 本发明提供的培养基包括琼脂，所述琼脂的浓度优选为4g/L~5g/L，更优选为 4.8g/L〇
[0010] 本发明提供的培养基包括蔗糖，所述蔗糖的浓度优选为30g/L~90g/L，最优选为 60g/L〇
[0011] 本发明提供的培养基包括DA-6,所述DA-6的浓度优选为4~12mg/L，更优选为4mg/ L、8mg/L 和 12mg/L，最优选为 8mg/L。
[0012] 在一个实施例中，所述培养基中，所述蔗糖的浓度为60g/L，DA-6浓度为8mg/L。
[0013] 在本发明中，所述培养基的pH值为5.6~5.8。
[0014]本发明将白芨鳞茎接种于上述培养基中进行培育，所述培育的温度优选为20°C~ 25°C，更优选为23°C ;所述培育的光照强度优选为1500Lx~2500Lx，更优选为2000Lx;所述 培育的光照时数优选为I Oh~20h，更优选为16h。
[0015] 在本发明中，所述白芨鳞茎优选为白芨试管苗的鳞茎，所述白芨试管苗优选为紫 花三叉白芨试管苗。
[0016] 在培养基中对白芨鳞茎进行培育，出苗后按照需要更换培养基，然后将获得的小 苗移栽至培养土苗盘里在大棚中炼苗，再置于林地土壤中自然生长，待三年成熟后即可收 获。
[0017] 本发明提供了一种白芨的培育方法，包括:将白芨鳞茎接种于培养基中进行培育， 所述培养基包括MS培养基、蔗糖、琼脂和DA-6。本发明在MS培养基中添加蔗糖和DA-6用于培 育白芨鳞茎，能够明显提高白芨苗的成活率、成苗率、苗高、茎粗、叶片数、叶片质地、根数、 根长、根质地、鳞茎重量、鳞茎直径、鳞茎质地、全株重量等性能参数。实验结果表明，本发明 提供的培育方法能够提高白芨苗的成活率、成苗率、苗高、茎粗、叶片数、叶片质地、根数、根 长、根质地、鳞茎重量、鳞茎直径、鳞茎质地、全株重量等，而且以60 g//L的蔗糖浓度和8mg/L 的DA-6为培育白芨试管苗的最佳浓度，生产中可利用该浓度对白芨试管苗进行壮苗的培 育。
【附图说明】
[0018] 图1为本发明实施例提供的白芨鳞茎培养30天的生长情况；
[0019] 图2为本发明实施例提供的白芨鳞茎培养60天的生长情况。
【具体实施方式】
[0020] 下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施 例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通 技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范 围。
[0021] 1.材料与方法
[0022] 1.1实验材料
[0023]实验材料为紫花三叉白芨试管苗，由四川农业大学植物生理系组织培养室提供。 [0024] 1.2实验设计
[0025]本实验以MS作为基本培养基，附加不同浓度蔗糖(30g/L、60g/L、90g/L)，和不同浓 度的04-6(411^/1、811^/1、1211^/1)配比，共12个处理组，以不加04-6为对照（配比浓度见表 1)，琼脂浓度为4.8g/L，pH为5.6~5.8，分别接入紫花三叉白芨试管苗。
[0026] 1.3实验方法
[0027] 将苗龄一致的白芨试管苗剪去地上部分，将大小一致的鳞茎接入不同浓度蔗糖的 培养基，每瓶接种2个白芨鳞茎，每个蔗糖浓度共接种30个，以10个鳞茎为一个重复，设3次 重复，共接种150个白芨鳞茎。接种完的培养基放在培养室在温度为（23 ±2) °C，光照强度 2000LX，光照时数16h/d条件下进行观察培养，记录试管苗生长情况并统计数据。测量指标： 接种株数、成活率、苗高、茎粗、叶片数、叶片质地、根数、根长、根质地、鳞茎重量、鳞茎质量、 鳞茎质地、全株重。实验数据均采用平均数，培养60d后统计。
[0028]实验数据均采用用t检验进行平均数差异显著性比较。其中百分数进行反正弦转 换后再进行检验。
[0029] 2.实验结果及分析
[0030] 2.1不同蔗糖和DA-6浓度对白芨鳞茎生长的影响
[0031 ]表1不同蔗糖和DA-6浓度对白芨鳞茎生长情况的统计分析
[0033](注：显著水平a = 0.05,下同。）
[0034]结果分析可知，培养基中添加 60g/L鹿糖与8mg/L DA-6效果最佳。
[0035] 由表1可知，在12种不同蔗糖和DA-6浓度配比下培养，试管苗的成活率和成苗率有 所不同，但均较高。在蔗糖浓度为60g/L和DA-68g/L浓度配比下白芨鳞茎的诱导成活个数最 多，诱导率为100.〇〇%;成苗率也最高，为90%。
[0036] 2.2蔗糖和DA-6浓度对白芨组培苗地上部生长影响
[0037]表2蔗糖和DA-6浓度对白芨组培苗地上部生长情况的统计分析
[0040]由表2可以看出，12种蔗糖和DA-6不同浓度对白芨试管苗地上部分生长情况影响 不同，但均较好。苗高在蔗糖浓度为60g/L和8mg/LDA-6时最高，为2.45cm，叶片数也最多，为 3.11片，叶片较宽大且平展，颜色呈绿色各实验组苗高均低于此组合。可由此可知，以蔗糖 浓度为60g/L和DA-6 8mg/L为培养白芨组培苗的最佳浓度。
[0041] 2.3不同蔗糖和DA-6不同浓度配比对白芨组培苗全株重量的影响
[0042] 表3白芨试管苗全株生长情况的统计分析
[0044] 从表3可以看出，白芨试管苗全株重量在不同蔗糖和DT-6浓度的影响下数值变化 较大。全株重量在蔗糖浓度为60g/L和DT-6浓度8m g//L配比时出现最大值，为412.73mg，其他 处理组合均低于此处理值。
[0045] 参见图1和图2,图1为本发明实施例提供的白芨鳞茎培养30天的生长情况，其中左 侧培养瓶中为白芨鳞茎在蔗糖30g/L的培养基中的生长情况，右侧培养瓶为白芨鳞茎在蔗 糖30g/L和DA-68mg/L的培养基中的生长情况。图2为本发明实施例提供的白芨鳞茎培养60 天的生长情况，其中左侧培养瓶中为白芨鳞茎在蔗糖30g/L的培养基中的生长情况，右侧培 养瓶为白芨鳞茎在蔗糖30g/L和DA-68mg/L的培养基中的生长情况。
[0046] 实验结果分析表明：由各项测定指标所示，本发明提供的培育方法能够提高白芨 苗的成活率、成苗率、苗高、茎粗、叶片数、叶片质地、根数、根长、根质地、鳞茎重量、鳞茎直 径、鳞茎质地、全株重量等，而且以60 g//L的蔗糖浓度配比8mg/L DA-6为培育白芨试管苗的 最佳浓度组合，生产中可利用该浓度对白芨试管苗进行壮苗的培育。
[0047] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种白芨的培育方法，包括： 将白芨鳞茎接种于培养基中进行培育，所述培养基包括MS培养基、蔗糖、琼脂和DA-6。2. 根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述蔗糖的浓度为30g/L~90g/L，DA-6浓度为4~12mg/L。3. 根据权利要求2所述的培育方法，其特征在于，所述蔗糖的浓度为60g/L，DA-6浓度为 8mg/L〇4. 根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述琼脂的浓度为4g/L~5g/L。5. 根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述培养基的pH值为5.6~5.8。6. 根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述培育的温度为20°C~25°C。7. 根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述培育的光照强度为1500Lx~ 2500Lx〇8. 根据权利要求1所述的培育方法，其特征在于，所述培育的光照时数为IOh~20h。
【文档编号】A01H4/00GK105941160SQ201610436529
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年6月17日
【发明人】田孟良, 刘帆, 杨华, 倪苏, 郑顺林, 黄雪丽, 赵晓敏
【申请人】四川农业大学