专利名称：快速检测结核杆菌的染色液及方法
技术领域：
本发明涉及检测结核杆菌领域，更具体涉及一种快速检测卡氏菌、放线菌的抗酸染色液，本发明还涉及快速检测结核杆菌的操作方法。
目前检测结核杆菌，采用染色液和方法是结核杆菌染色液1、染色液、碱性复红饱和溶液10毫克、5％石炭酸90毫克；2、脱色剂浓盐酸3毫克、95％酒精97毫克；3、复染液2％美蓝酒精溶液30毫克、10％氢氧化钾溶液0.1毫克、蒸馏水100毫克。其操作步骤是(1)将涂片以火焰固定后，滴加石炭酸复红染液，以微火加热，使染液产生蒸汽，切不可沸腾，染液因蒸发减少时，应随时添加染5分钟，冷后水洗。(2)滴加3％盐酸酒精脱色，直至无红色脱落为止，水洗。(3)滴加复染液，复染0.5-1分钟，水洗，干后，镜检。上述方法存在的问题，滴加石炭酸复红染液，加热时间过长，易蒸发干，操作繁杂，掌握有一定难度。
本发明的目的是提供了一种快速检测结核杆菌的染色液，配制容易，染色时间短，抗酸杆菌着色率高。
本发明的另一目的在于提供一种操作方便，快速、准确检测结核杆菌的操作方法。
本发明的目的是这样实现的染色液由以下几种原料配制A、染色液碱性品红 1600-2500毫克石炭酸 2000-2500毫克95％酒精 150-200毫克 蒸馏水 290-320毫克吐温-80 20-24毫克B、脱色液浓盐酸 3毫克95％酒精 97毫克C、复染液亚甲基蓝 150-200毫克95％酒精 15-20毫克蒸馏水 85-100毫克其操作步骤是1、涂片经火焰固定，加石炭酸复红溶液，徐徐加热至蒸汽出现，切不可沸腾，染1分钟(若染色如卡氏菌需要加长时间染2-3分钟，放线菌同结核杆菌)不加热须染3分钟，水洗，用滤纸吸干水份。
2、加脱色液不时摇动玻片至无红色脱落为止，需要0.5-1分钟，水洗，用滤纸吸干水份。
3、加复染液染0.5-1分钟，水洗，干后镜检。
结果抗酸性细菌如结核杆菌呈红色，其它细菌呈蓝色。
抗酸性菌体内含脂类物质较多(含量可高达40％)如结核杆菌体内含有分枝菌酸(是脂类)此物质具有抗酸的性质。染色时，它与石炭酸复红结合，能抵抗酸性酒精的脱色作用，同时，脂类又不易透过细胞膜，不能被脱色。因此，抗酸性菌能保持复红的颜色，相反，非抗酸性菌体内含脂类少，易被酸性酒精脱色，脱色时，不易从细胞膜渗出而脱掉，最后被复染成蓝色。
本发明与现有技术相比，具有以下优点和效果，配比容易，易于被临床医务人员掌握，染色全过程只需2分钟，操作方便，不需用集菌液(尿液除外)，抗酸杆菌着色率高(比不加热阳性率高达100％)，因为抗酸性菌体含脂类物质较多，在摄氏60℃-80℃时易与石炭酸复红结合，形成石炭酸复红脂类复合物，不易被酸性酒精脱色。所以，快速抗酸染色液，阳性率高且重复性强，易保存，易掌握，能快速、操作方便、准确检测结核杆菌。适合各级卫生单位。
实施例1染色液它由下述重量配比的原料配制A、染色液碱性品红 2400毫克石炭酸 2200毫克95％酒精 200毫克 蒸馏水 290毫克吐温-80 24毫克B、脱色液浓盐酸 3毫克95％酒精 97毫克C、复染液亚甲基蓝 180毫克95％酒精 15毫克蒸馏水 85毫克其操作步骤是1、涂片经火焰固定，加石炭酸复红溶液，徐徐加热至蒸汽出现，切不可沸腾，染1分钟(若如卡氏菌需要加长时间染3分钟，放线菌同结核杆菌)不加热须染3分钟，水洗，用滤纸吸干水份。
2、加脱色液不时摇动玻片至无红色脱落为止，需要0.5-1分钟，水洗，用滤纸吸干水份。
3、加复染液染0.5-1分钟，水洗，干后镜检。
结果抗酸性细菌如结核杆菌呈红色，其它细菌呈蓝色。
实施例2A、染色液碱性品红 2500毫克石炭酸 2000毫克95％酒精 150毫克 蒸馏水 300毫克吐温-80 20毫克B、脱色液浓盐酸 3毫克95％酒精 97毫克C、复染液亚甲基蓝 200毫克95％酒精 20毫克蒸馏水 90毫克实施步骤与实施例1相同。
实施例3A、染色液碱性品红 1600毫克石炭酸 2300毫克95％酒精 180毫克 蒸馏水 310毫克吐温-80 23毫克B、脱色液浓盐酸 3毫克95％酒精 97毫克C、复染液亚甲基蓝 190毫克95％酒精 20毫克蒸馏水85毫克实施步骤与实施例1相同。
权利要求
1.一种快速检测结核杆菌的染色液，它由下述重量配比的原料配制的染色液A、染色液碱性品红 1600-2500毫克石炭酸 2000-2500毫克95％酒精 150-200毫克 蒸馏水 290-320毫克吐温-80 20-24毫克B、脱色液浓盐酸 3毫克95％酒精 97毫克C、复染液亚甲基蓝 150-200毫克95％酒精 15-20毫克蒸馏水85-100毫克
2.根据权利要求1所述的一种快速检测结核杆菌的染色液，其特征在于A、染色液碱性品红 2400毫克石炭酸 2200毫克95％酒精 200毫克 蒸馏水 290毫克吐温-80 24毫克C、复染液亚甲基蓝 180毫克95％酒精 15毫克蒸馏水 85毫克
3.根据权利要求1所述的一种快速检测结核杆菌的染色液，其特征在于A、染色液碱性品红 2500毫克石炭酸 2000毫克95％酒精 150毫克 蒸馏水 300毫克吐温-80 20毫克C、复染液亚甲基蓝 200毫克95％酒精 20毫克蒸馏水90毫克
4.根据权利要求1所述的一种快速检测结核杆菌的染色液，其特征在于A、染色液碱性品红 1600毫克石炭酸 2300毫克95％酒精 180毫克蒸馏水 310毫克吐温-80 23毫克C、复染液亚甲基蓝 190毫克95％酒精 20毫克蒸馏水 85毫克
5.一种实现权利要求1所述的一种快速检测结核杆菌的染色液的方法，包括下列步骤A、涂片经火焰固定，加石炭酸复红溶液，加热出蒸汽，染1分钟，不加热染3分钟，水洗，用滤纸吸干水份；B、加脱色液不时摇动玻片至无红色脱落为止，0.5-1分钟，水洗，用滤纸吸干水份；C、加复染液染0.5-1分钟，水洗，干后镜检，便得到抗酸性细菌呈红色，其它细菌呈蓝色。
全文摘要
本发明公开了一种快速检测结核杆菌的染色液及方法，它由以下原料制配，石炭酸复红溶液由碱性品红、酒精、吐温－80、蒸馏水构成，脱色液由浓盐酸、酒精构成，复染液由亚甲基蓝、酒精、蒸馏水构成。其方法是首先涂片经火焰固定，加石炭酸复红溶液，水洗，其次是加脱色液，然后加复染液，水洗，干后镜检。本发明配比容易，易保存，阳性率高，准确检测结核杆菌，操作方便，适合各级卫生单位。
文档编号C12Q1/04GK1398980SQ0111437
公开日2003年2月26日 申请日期2001年7月23日 优先权日2001年7月23日
发明者张华 申请人:张华