专利名称：食品中活菌总数的快速检测方法
技术领域：
食品卫生检验——细菌学方法背景情况介绍菌落总数指每克或每毫升样品中含有的活细菌总数。菌落总数检测是食品、化妆品、药品、环境卫生等各领域样品卫生检验的基本指标之一。该指标指示产品生产过程的一般卫生状况和产品的卫生质量，并可在生产各环节中监测各工序的产品卫生质量的变化情况。
原国家标准规定的检测方法是平板菌落计数法，对不同样品培养1～2天后计数形成的菌落数，即代表样品中的活菌数。该方法得到计数结果至少需要2天时间。要实现样品的快速检测，必须摆脱长时间培养的方法。
本发明采用将样品接种在含有特殊培养剂的薄膜上培养和显色，然后在显微镜下扫描计数的方法实现样品中活细菌数的快速检测。
本方法的工作原理牛奶是一种优质的细菌培养基，在37℃条件下牛奶中的天然菌可以迅速生长繁殖形成微小的菌团，将其接种在特定培养基上使微菌团呈色就可以在低倍镜下对其进行计数。采用显微镜下扫描和软件分析技术即可实现对食品样品中活细菌数量的快速检测。
检测操作步骤样品进行均质处理使其中所含有的活细菌充分分散；接种一定量样品于含有特定培养基的承载膜上；置于适温下进行培养后；将膜置于显微镜下进行扫描计数。实现本发明检测方法的途径是①适当的承载膜，要求膜可以支持样品中的活细菌在营养基质上生长并在膜上形成微菌落、可以使微菌落固定在膜上并呈色、膜经染色后其透明度适于在显微镜下用透射光观察且膜的颜色与菌落颜色反差明显；②样品分散处理方法；③特定的培养基配方可以使细菌菌落呈现颜色而膜呈现不同的颜色；④显微扫描装置；⑤图象分析、识别与计数技术；⑥对各种待检样品的检测灵敏度不低于国标方法。
权利要求
1.本发明是将样品经过分散处理后，接种于浸透特定营养液的承载膜上经3～5代培养形成微菌落并呈色以进行活菌计数的方法；该承载膜允许营养物质通过，以保证细菌在其上生长的营养需求；具有一定的透明度可以直接在显微镜下观察微菌落；具有一定强度能经受处理和转移。
2.在本权利要求1中提到的可以吸收特定培养基以支持样品中的活细菌生长并在膜上形成微菌落的承载膜，其透明度适于在显微镜下用透射光观察；膜的强度允许对其进行成型、灭菌、接种、转移等操作。
3.在本权利要求1中提到的样品处理程序；包括溶解、稀释、均质等步骤。
4.在本权利要求1中提到的特定的培养基配方可以使细菌在膜上生长形成菌落并使菌落呈现颜色。
全文摘要
本发明是对样品进行均质处理使其中所含有的活细菌充分分散，接种一定量样品于承载膜上，置于培养基质上于37℃培养，对培养后的承载膜进行固定和染色，将膜置于显微镜下进行扫描计数。本检测方法的优点是①样品只经过短时间培养，检测时间短，约3～5小时可以得到检测结果；②通过显微观测识别菌落；③对各种待检样品的现场检测，灵敏度不低于国标方法。
文档编号C12Q1/04GK1605630SQ20031010012
公开日2005年4月13日 申请日期2003年10月10日 优先权日2003年10月10日
发明者张彩, 陈庆森, 庞广昌, 胡志和, 阎亚丽 申请人:天津商学院