专利名称：干细胞与胶原促生脑组织的制备及应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医学生物材料技术领域和组织工程学领域，具体涉及到一种细胞与胶原促生脑组织的制备及应用。
背景技术：
随着医疗科学技术的进步及医学材料的不断发展，近年来在医疗领域以胶原蛋白为基础的产品获得了显著的发展，如中国专利，专利号为021212779，专利名称为医用胶原蛋白材料及其制造工艺就公开了一种医用胶原蛋白材料，由牛肌腱组织为基料，经过除杂、清洗、酸、碱、酶处理、硫酸软骨素交联、冷冻干燥及环氧乙烷灭菌等工序制成具有孔隙、海绵状医用胶原蛋白材料，具有结构稳定、生物相容性好、可吸收的特点。目前，已在临床上用于硬脑膜、硬脊膜的修复和防粘连。使用这种材料同时应用组织工程技术扩大和延伸到其他治疗领域是生物医学领域的重要课题。
目前，对因脑血栓或脑血管病变所引起的脑实质的局部病变坏死大多采用保守药物治疗，一般情况坏死脑组织无法修复，其相应引发的后遗症是长期而且很难治愈。组织工程学是以生物材料、细胞和生长因子为基础的复合方法用于组织修复再生。在软骨损伤、脑膜缺损、周围神经缺损以及其他组织损伤都已得到应用，其特点不仅仅是修复有损伤的组织而是使其受损组织再次形成具有其功能的相同组织。由于脑实质在供应大脑血液的动脉血管受到血栓阻塞时，血管远端的脑实质缺血坏死，形成腔穴。神经胶质细胞的生长阻止干扰了脑组织的再生，病变的后果造成许多严重后遗症。如何利用生物材料、细胞为基础的组织工程技术修复受损的脑组织是本发明要解决的课题。
发明内容
本发明的目的是提供一种高纯度的I型胶原蛋白配以自体骨髓干细胞的复合生物材料，植入损伤部位用于修复受损的脑组织。
为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案进行制备干细胞与胶原促生脑组织由牛肌腱组织为基料，经过除杂、清洗、酸、碱、酶处理、硫酸软骨素交联，将蛋白纯度在95％以上的I型胶原蛋白在冷冻干燥工艺下制成具有50-200μ孔隙、可降解的1×10毫米柱状海绵载体。取20～50毫升自体骨髓血，经一周标准温箱培养，将分离出的骨髓干细胞种植于柱状胶原内；再经两周标准温箱培养，使其骨髓干细胞含量达到200～600万；将1-5个携带干细胞的胶原柱，采用三维定位无创技术将带有干细胞的胶原柱导入坏死腔穴中。其内的干细胞在胶原上生长，阻断胶质细胞的增生，治疗因脑血管疾病所引起的脑组织坏死或因软化所造成的脑实质病变，从而促进坏死组织的新生，使病人的症状得到不同程度的改善。
具体实施方法干细胞胶原促生脑组织在动物身上进行的实验表明由牛肌腱组织为基料，经过除杂、清洗、酸、碱、酶处理、硫酸软骨素交联，将蛋白纯度在95％以上的I型胶原蛋白在冷冻干燥工艺下制成具有50-200μ孔隙、可降解的1×10毫米柱状海绵载体。取20毫升自体骨髓血，经一周标准温箱培养，将分离出的骨髓干细胞种植于柱状胶原内；再经两周标准温箱培养，使其骨髓干细胞含量达到200～600万；将3个携带干细胞的胶原柱，采用三维定位无创技术将带有干细胞的胶原柱导入坏死腔穴中。细胞胶原脑组织在脑坏死腔穴中植入后，干细胞很快在胶原上生长，阻断了胶质细胞的增生，促进坏死脑组织的新生，症状得到不同程度的改善。
本发明提供一种纯度高的I型胶原蛋白和干细胞的脑组织，可以促进干细胞在胶原上生长，阻断胶质细胞的增生，修复受损的脑组织，有效的治疗因脑血管疾病所引起的脑组织坏死、软化所造成的脑实质病变，使病人的症状得到不同程度的改善。
权利要求
1)一种干细胞胶原促生脑组织的制备方法及应用，步骤如下由牛肌腱组织为基料，经过除杂、清洗、酸、碱、酶处理、硫酸软骨剂交联，将蛋白纯度在95％以上的I型胶原蛋白在冷冻干燥工艺下制成具有50-200μ孔隙、可降解的1×10毫米柱状海绵载体。取20～50毫升自体骨髓血，经一周标准温箱培养，将分离出的骨髓干细胞种植于柱状胶原内；再经两周标准温箱培养，使其骨髓干细胞含量达到200～600万，构成细胞胶原脑组织。将1-5个携带干细胞的胶原柱，采用三维定位无创技术将带有干细胞的胶原柱导入坏死腔穴中是细胞胶原脑组织的应用方法。
2)根据权利要求1所述干细胞胶原促生脑组织的制备方法，其特征在于蛋白纯度在95％以上的1×10毫米柱状海绵I型胶原为载体。
3)根据权利要求1所述干细胞胶原促生脑组织的制备方法，其特征在于取20～50毫升自体骨髓血，经一周标准温箱培养，将分离出的骨髓干细胞种植于柱状胶原内；再经两周标准温箱培养，使其骨髓干细胞含量达到200～600万，构成细胞胶原脑组织。
4)根据权利要求1所述干细胞胶原促生脑组织是通过三维定位无创技术将带有干细胞的胶原柱导入坏死腔穴中。
全文摘要
本发明公开一种干细胞胶原促生脑组织的制备及应用，由牛肌腱组织为基料，经过除杂、清洗、酸、碱、酶处理、硫酸软骨剂交联，将蛋白纯度在95％以上的I型胶原蛋白在冷冻干燥工艺下制成具有50－200μ孔隙、可降解的1×10毫米柱状海绵载体。取20～50毫升自体骨髓血，经一周标准温箱培养，将分离出的骨髓干细胞种植于柱状胶原内；再经两周标准温箱培养，使其骨髓干细胞含量达到200～600万；将1－5个携带干细胞的胶原柱，采用三维定位无创技术将带有干细胞的胶原柱导入坏死腔穴中。其内的干细胞在胶原上生长，阻断胶质细胞的增生，治疗因脑血管疾病所引起的脑组织坏死、软化所造成的脑实质病变，从而促进坏死组织的新生，使病人的症状得到不同程度的改善。
文档编号C12N5/08GK1796545SQ20041010159
公开日2006年7月5日 申请日期2004年12月24日 优先权日2004年12月24日
发明者于海鹰, 许和平 申请人:于海鹰, 许和平