专利名称：肿瘤模型与方法
技术领域：
本发明涉及了一种能够揭示人类实体恶性肿瘤与机体组织或器官微环境演进转化-改变综合分子肿瘤生物调控机制、综合分子肿瘤生物应答机制、综合分子肿瘤生物预防治疗机制方法及药物的，肿瘤模型与方法，综合肿瘤模型科学研究实验平台。能够揭示检测、监测人类小原位癌细胞组织的，人类相关分子肿瘤蛋白质组表达谱靶标；揭示拮抗-抑制人类肿瘤细胞组织生长增殖的，人类相关分子肿瘤蛋白质组表达谱靶标、肿瘤相关人类基因表达谱靶标。它涉及生命科学领域、及医药领域。
背景技术：
现代医学科学针对在人类群体中临床自然发病率最高的致死性实体恶性肿瘤，如肺癌、胃癌、乳腺癌、大肠癌、肝癌……，实施的各个科学研究层面的肿瘤科学研究，已经超过一个世纪；迄今在有效预防癌症发生、在针对已经发生肿瘤转移的中晚期致死性实体恶性肿瘤的有效根治或长期有效缓解治疗方面，没有取得解决实质问题的科学研究突破。需要拥有能够实施现代医学、分子生物学、生物化学、遗传学、免疫学、病理生理学、实验动物学等多个不同相关生物科学研究领域——各个相关科学学科协同的综合科学研究，揭示人类实体恶性肿瘤与机体组织或器官微环境演进转化-改变综合分子肿瘤生物调控机制、综合分子肿瘤生物应答机制、综合分子肿瘤生物预防治疗机制方法及药物的，肿瘤模型与方法，综合肿瘤模型科学研究实验平台。能够揭示检测、监测人类小原位癌细胞组织的，人类相关分子肿瘤蛋白质组表达谱靶标；揭示拮抗-抑制人类肿瘤细胞组织生长增殖的，人类相关分子肿瘤蛋白质组表达谱靶标、肿瘤相关人类基因表达谱靶标。
发明内容
本发明公开了一种能够被用于模拟揭示人类实体恶性肿瘤与机体组织或器官微环境演进转化-改变综合分子肿瘤生物调控机制、综合分子肿瘤生物应答机制、综合分子肿瘤生物预防治疗机制方法及药物的，肿瘤模型与方法，综合肿瘤模型科学研究实验平台。能够揭示检测、监测人类小原位癌细胞组织的，人类相关分子肿瘤蛋白质组表达谱靶标；揭示拮抗-抑制人类肿瘤细胞组织生长增殖的，人类相关分子肿瘤蛋白质组表达谱靶标、肿瘤相关人类基因表达谱靶标。
现代肿瘤科学研究所依赖的，实验生物学片面科学认识思维、简单科学方法论及研究实验方法禁锢束缚一个多世纪的现代肿瘤科学研究，只片面注重研究揭示肿瘤生物表达性状、发生机制，能够在动物及人类机体组织或器官发生的生物发生机制、药物及生物治疗机制，长期忽视了动物及人类机体组织或器官的微环境为什么能够发生肿瘤、客观存在微环境对肿瘤生物表达性状、生物发生机制的正负生物调控机制，及肿瘤相应的正负生物应答机制，是动物及人类肿瘤主要发生因素的相关综合科学研究！特别值得注意，具有开拓性科学创新认识、前瞻性科学研究指导意义的是现代肿瘤实验科学研究的重要科学研究手段，已经建立的可移植性动物肿瘤模型，有令人信服的、可重复科学实验结果证实，动物及人类机体微环境演进转化-改变正负生物调控肿瘤细胞克隆生长增殖状态、肿瘤生物表达性状……是动物及人类肿瘤主要生物发生机制；许多重要的肿瘤生物表达性状、生物发生机制，是肿瘤受到机体微环境正负生物调控、肿瘤相应正负生物应答所表达的，获得性肿瘤生物表达性状、生物发生机制。例如，Qgawa等设计实施的致癌物质诱发大鼠肝癌并肺转移动物肿瘤模型实验，揭示诱发大鼠肝癌肿瘤的重要转移生物表达性状、肺转移肿瘤细胞KALL基因与heparanase基因表达明显改变，是受到机体组织或器官的微环境正负生物，由肿瘤相应正负生物应答所表达的、获得性肿瘤生物表达性状、生物发生机制。例如，Fidler实验室在20世纪80年代，比较不同分期人结肠癌在裸鼠肝内生长情况，强调肿瘤细胞的器官特异性转移不仅取决于肿瘤细胞的特征，而且取决于器官的微环境。例如，李雁等设计实施完成的人肝癌裸鼠转移复发的肿瘤模型研究报告中有表述，可移植人类肝癌异质小原位癌细胞组织，与异质肿瘤细胞克隆肿瘤病理分化的高低、体外细胞培养传代增殖速度的快慢，不是决定异质人类小原位癌细胞组织、异质人类肿瘤细胞克隆能够在裸鼠机体微环境中，转化-改变成为具有生长增殖优势人类肿瘤细胞克隆构成、主导肿瘤组织生长的人类肿瘤组织的，肿瘤主要发生因素；而是主要取决于裸鼠机体组织或器官微环境演进转化-改变，对异质人类小原位癌细胞组织、异质人类肿瘤细胞克隆的选择，最终决定其是否能够在机体组织或器官微环境中转化-改变成为，具有生长增殖优势人类肿瘤细胞克隆构成、主导肿瘤组织生长的人类肿瘤组织；正负生物调控异质人类肿瘤细胞克隆生物表达性状、与异质人类肿瘤组织生长。
本发明的目的是，提供一种能够被应用于模拟揭示人类实体恶性肿瘤与机体组织或器官微环境演进转化-改变综合分子肿瘤生物调控机制、综合分子肿瘤生物应答机制、综合分子肿瘤生物预防治疗机制方法及药物的，肿瘤模型与方法，综合肿瘤模型科学研究实验平台。能够揭示检测、监测人类小原位癌细胞组织的，人类相关分子肿瘤蛋白质组表达谱靶标；揭示拮抗-抑制人类肿瘤细胞组织生长增殖的，人类相关分子肿瘤蛋白质组表达谱靶标、肿瘤相关人类基因表达谱靶标。
1.把取自手术获取的近交系小鼠的自发肿瘤肺癌、胃癌、乳腺癌、大肠癌、肝癌……等，约106~108肿瘤细胞或肿瘤小块组织，原位移植、或皮下移植到同种近交系小鼠的相应器官、或皮下；建立能够被应用于模拟在人类机体发生的小原位癌，研究揭示动物及人类肿瘤的某些生物发生机制、生物性质的，那种近交系小鼠自发肿瘤可移植瘤模型——瘤株。
2.取那种小鼠自发肿瘤可移植瘤模型的，机体接种移植瘤株传代增殖量达到109肿瘤细胞——1g肿瘤组织的荷瘤小鼠的血；制取血清。应用荷瘤小鼠20％血清加培养基，体外培养那种小鼠自发肿瘤可移植瘤株细胞，建立应用那种荷瘤小鼠血清体外培养的自发肿瘤可移植细胞系。
3.分别取那种小鼠自发肿瘤可移植瘤模型的，接种移植瘤株0d、7d、14d、21d、28d、35d荷瘤小鼠的血；分别制取血清。分别应用接种移植瘤株0d、7d、14d、21d、28d、35d荷瘤小鼠的20％血清加培养基，模拟接种移植那种自发肿瘤可移植瘤株小鼠不同生命时间发生进程0d、7d、14d、21d、28d、35d机体微环境土壤演进转化-改变，在体外培养那种自发肿瘤可移植细胞系，模拟那种自发肿瘤可移植瘤株小原位癌细胞组织种子，与接种移植那种可移植瘤株荷瘤小鼠机体微环境土壤，在不同生命时间发生进程0d、7d、14d、21d、28d、35d发生多重复杂相互诱导、相互调控转化-改变由最初接种移植自发肿瘤可移植瘤株种子生长增殖受到机体微环境土壤抑制成瘤潜伏期、到机体微环境土壤促进移植自发肿瘤可移植瘤株种子增殖成瘤生长期、继而会发生出致死性占位实体恶性肿瘤组织——肿瘤-微环境演进转化-改变生物调控、生物应答。建立能够综合模拟表达在动物及人类机体发生存在的，具有生长增殖优势肿瘤细胞克隆的小原位癌细胞组织种子——那种自发肿瘤可移植瘤株种子，被移植到一个新动物宿主机体土壤；自发肿瘤可移植瘤株种子传代生长增殖会受到新宿主机体微环境土壤的明显抑制；必须经历种子-土壤多重复杂相互诱导、相互调控转化-改变——肿瘤-微环境演进转化-改变生物调控、生物应答，被移植自发肿瘤可移植瘤株种子在新宿主机体的移植占位肿胀目测观察消退的成瘤潜伏期；而后受到新宿主机体微环境土壤明显抑制的、那种自发肿瘤可移植瘤株种子，才能够被移植新宿主机体微环境土壤演进转化-改变，再次被转化成为具有生长增殖优势、传代生长增殖速度快、能够对机体组织或器官造成致死性生物损伤的、自发肿瘤可移植瘤株种子，继而会传代生长增殖成为对机体组织或器官造成致死性生物损伤的占位实体恶性肿瘤的肿瘤模型与方法，综合肿瘤模型科学研究实验平台。为现代肿瘤实验科学研究，能够综合模拟分析揭示在人机体发生的小原位癌细胞组织种子转化为致死性占位实体恶性肿瘤，与机体组织或器官微环境演进转化-改变的，综合分子肿瘤生物调控机制、综合分子肿瘤生物应答机制、综合分子肿瘤生物预防治疗机制方法及药物，提供切实可以实施的综合生物医学科学研究实验方法。能够揭示检测、监测人类小原位癌细胞组织的，人类相关分子肿瘤蛋白质组表达谱靶标；揭示拮抗-抑制人类肿瘤细胞组织生长增殖的，人类相关分子肿瘤蛋白质组表达谱靶标、肿瘤相关人类基因表达谱靶标。
具体实施例方式
为达到上述目的，实施本发明采用的方案1.制备生物实验材料1.1.1 中国医学科学院肿瘤研究所建立的小鼠乳腺癌MAC891瘤株，是应用具有乳腺癌高自然发病率的TA2近交系小鼠，自发乳腺癌组织连续传代移植于同种TA2近交系小鼠皮下，建立的可移植小鼠B2型乳腺癌瘤株。移植瘤株发病率100％；动物存活时间47d。
1.1.2 TA2近交系小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型小鼠乳腺癌MAC891瘤株按照5×106细胞/0.2ml/每只剂量，分别注射接种于6只TA2小鼠腋下。接种移植瘤株30d~35d，触摸移植瘤株成瘤的长、短径达到1.0~1.5cm时，实施颈椎脱臼法处死荷瘤小鼠，手术剥离取出肿瘤组织，称重；选取其中1个肿瘤细胞组织生长性状最好、没有发生组织坏死、肿瘤重量大于0.6g的肿瘤。采用常规机械法把肿瘤组织制成2.5×107细胞/ml细胞悬液，按照5×106细胞/0.2ml/每只剂量，分别注射接种于70只TA2小鼠腋下；按照1.1.3法，分别于接种移植瘤株不同时间0d乙醚麻醉采血处死20只小鼠，7d、14d、21d、28d、35d各自乙醚麻醉采血处死10只小鼠，制取血清备用。分别手术剥离取出在各自动物机体发生的不同成瘤生长时间肿瘤组织，用卡尺测量肿瘤组织的长、短径，称重，记录；置于2％多聚甲醛、0.5％戊二醛、0.2％苦味酸、0.1mol/L磷酸缓冲液的固定液中固定；制作组织切片Giemsa染色、400×肿瘤细胞组织光镜形态学观察数码照相图片资料储存备用。选取另1个肿瘤细胞组织生长性状最好、没有发生组织坏死、肿瘤重量大于0.5g的肿瘤。用常规机械法把肿瘤组织制成2.5×107细胞/ml单细胞悬液，按照5×106细胞/0.2ml/每只剂量，分别注射接种于30只TA2小鼠腋下、30只TA2小鼠皮下；移植瘤株注射接种于腋下的30只TA2小鼠、30d乙醚麻醉采血处死按照1.4.3法制取血清备用，移植瘤株注射接种于皮下的30只TA2小鼠实施下述2.模拟动物小原位癌—肿瘤与机体微环境演进转化-改变生物调控/生物应答动物实验。
1.1.3 分别制取接种小鼠乳腺癌MAC891瘤株，0d、7d、14d、21d、28d、30d、35d不同荷瘤时间采血的TA2小鼠的血清分别乙醚麻醉接种移植瘤株/不同荷瘤时间采血的TA2小鼠，把动物仰卧固定。正中切口入腹。把肠子用纱布保护好放置在腹腔外左侧。通过尾静脉用5号针注射0.4ml林格氏液，注射速度0.05ml/s~0.1ml/s，注射完毕后先用丝线结扎注射前端止血，再抽出注射针。轻轻分开脊柱前的脂肪，暴露腹主动脉；在腹主动脉远心端用丝线打一个节，再用拉线阻断腹主动脉近心端，然后在其间平行刺入，并松开近心端阻断拉线，立即采血。当动物呼吸减弱时，挤压动物胸腔辅助呼吸同时不断挤出心脏残余血液。或实施动物心脏穿刺采血。分别把接种移植瘤株/不同荷瘤时间采血的裸小鼠的血，注入各自集中收集的4℃低温保存离心管内收集完成后，以2000g离心10min，离心后4℃低温静置60min；然后用血管钳挤压血凝块，挤出内含的血清；弃去血凝块，再以5~10000g离心60min。把取自于接种移植瘤株/不同荷瘤时间采血的TA2小鼠的血清编号——Ln，n＝0d、7d、14d、21d、28d、30d、35d；各自分别用一系列一次性注射器式过滤器进行过滤，最后用0.1μm孔径无菌过滤器进行过滤后；分别把编号血清Ln，n＝0d、7d、14d、21d、28d、30d、35d，各自分置于多个小无菌高密度聚丙烯容器，放置-70℃冰箱保存备用。
1.1.4 配制MCDB170培养基，-D。分别应用接种小鼠乳腺癌MAC891瘤株0d、7d、14、21、28d、35d不同时间采血的小鼠的编号血清Ln，n＝0d、7d、14d、21d、28d、35d，按照小鼠血清∶MCDB170培养基＝1∶4，分别配制综合模拟接种小鼠乳腺癌MAC891移植瘤株的小鼠不同生命时间进程0d、7d、14d、21d、28d、35d机体微环境土壤演进转化-改变的编号培养基，Ln-D，n＝0d、7d、14d、21d、28d、35d。分别应用模拟机体微环境土壤演进转化-改变的编号Ln-D，n＝0d、7d、14d、21d、28d、35d的6种培养基，各自配制小鼠乳腺癌MAC891细胞系2×105/ml的6种培养肿瘤细胞悬液、各自3ml。实施下述3.模拟动物小原位癌—肿瘤与机体微环境演进转化-改变生物调控/生物应答体外培养动物肿瘤细胞实验。
2.模拟动物小原位癌—肿瘤与机体微环境演进转化-改变生物调控/生物应答动物实验2.1模型生物机制特点2.1.1 把具有生长增殖优势、传代生长增殖速度快、能够对机体组织或器官造成致死性生物损伤的、近交系小鼠自发肿瘤可移植瘤株106~108肿瘤细胞或肿瘤小块组织种子，接种到同种近交系小鼠机体微环境土壤，建立近交系小鼠可移植瘤模型；可以被应用于模拟在动物及人类机体发生的小原位癌，研究揭示那种动物肿瘤的某些生物发生机制、生物性质。普遍存在具有生长增殖优势、传代生长增殖速度快、能够对机体组织或器官造成致死性生物损伤的、可移植近交系小鼠自发肿瘤株种子，被移植到一个新的同种近交系小鼠机体微环境土壤，首先受到小鼠机体微环境土壤生长增殖抑制生物调控，必须经历“‘种子-土壤’多重复杂相互诱导、相互调控转化-改变——肿瘤-微环境演进转化-改变生物调控/生物应答”，可移植近交系小鼠瘤株种子在新宿主机体的移植占位肿胀目测观察消退，近似于肿瘤细胞进入增殖休眠抑制状态的成瘤潜伏期；可以被认为是能够模拟表达在动物及人类机体发生存在的，具有生长增殖优势小原位癌细胞组织种子，需要与机体组织或器官微环境土壤，经历多重复杂相互诱导、相互调控转化-改变——肿瘤-微环境演进转化-改变生物调控/生物应答发生进程；才能够被相互转化-改变成为具有对机体组织或器官造成致死性生物损伤恶性生物表性的肿瘤组织种子、与具有适合恶性肿瘤组织种子传代增殖生物表性的机体组织或器官微环境土壤；继而会在动物及人类机体发生出，对机体组织或器官造成致死性生物损伤的占位实体恶性肿瘤组织——获得性肿瘤生物表达性状、生物发生机制，动物及人类肿瘤生物发生机制的实验动物模型。
2.2实验动物模型及分组及实验实施方法2.2.1 接种小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型对照组按照1.1.2法，把小鼠乳腺癌MAC891肿瘤组织制成的细胞悬液，按照5×106细胞/0.2ml/每只剂量，注射接种10只TA2近交系小鼠便于实验观察的、胸肋弧中央处皮下。
2.2.2 接种小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型，注射接种瘤株30d成瘤生长期动物血清，调控移植小鼠乳腺癌MAC891瘤株成瘤潜伏期、肿瘤生长速度组按照1.1.2法，把小鼠乳腺癌MAC891肿瘤组织制成的细胞悬液，按照5×106细胞/0.2ml/每只剂量，注射接种10只裸小鼠便于实验观察的、胸肋弧中央处皮下。在接种瘤株后，每24h一次，距离接种瘤株边缘外5mm处，皮下注射50μl取自接种小鼠乳腺癌MAC891瘤株30d成瘤生长期小鼠的血清；分别轮换在不同位置处，共皮下注射8次。
2.2.3 接种小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型，注射接种瘤株0d成瘤潜伏期动物血清对照组按照1.1.2法，把小鼠乳腺癌MAC891肿瘤组织制成的细胞悬液，按照5×106细胞/0.2ml/每只剂量，注射接种10只小鼠便于实验观察的、胸肋弧中央处皮下。在接种瘤株后，每24h一次，距离接种瘤株边缘外5mm处，皮下注射50μl取自接种小鼠乳腺癌MAC891瘤株0d成瘤潜伏期小鼠的血清；分别轮换在不同位置处，共皮下注射8次。
2.2.4 简化实验接种小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型，调控移植小鼠乳腺癌MAC891瘤株成瘤潜伏期、肿瘤生长速度组按照1.1.2法，把小鼠乳腺癌MAC891肿瘤组织制成的细胞悬液，按照5×106细胞/0.1ml/每只剂量，注射接种10只小鼠右后肢爪垫皮下[6]。待10只小鼠移植瘤的生长直径，有6只能够达到5mm时，截除10只小鼠荷瘤右下肢。取其中一个肿瘤组织生长最好的肿瘤制成2.5×107细胞/ml细胞悬液；按照2.5×106细胞/0.1ml/每只剂量，注射接种10只小鼠左后肢爪垫皮下。
2.2.5 简化实验接种小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型对照组把2.2.4取其中一个肿瘤组织生长最好的肿瘤制成2.5×107细胞/ml细胞悬液；按照2.5×106细胞/0.1ml/每只剂量，注射接种10只小鼠左后肢爪垫皮下；同时对10只小鼠实施与附2.2.4相同的截除右下肢。
2.3实验观察/检测/目的评定2.3.1 目测观察2.2.1/2.2.2/2.2.3组，移植瘤株在每一只实验动物机体上出现的移植占位肿胀，移植占位肿胀消退、到肿瘤占位再次出现的成瘤潜伏期；目测观察实验动物机体上再次出现肿瘤占位，每2d一次用卡尺测量肿瘤占位的长、短径；接种瘤株30d乙醚麻醉采血处死荷瘤小鼠，按照1.1.3法制取血清备用；手术剥离取出肿瘤组织，用卡尺测量肿瘤组织的长、短径，称重。作记录。
2.3.2 给TA2近交系小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型，在移植瘤株处附近皮下、多次注射取自接种小鼠乳腺癌MAC891瘤株30d成瘤生长期小鼠的血清，使成瘤潜伏期移植瘤株接种处局部微环境、发生成瘤生长期的转化-改变，缩短小鼠乳腺癌MAC891移植瘤株在小鼠机体受到抑制的成瘤潜伏期。应用上述2.2.1/2.2.2/2.2.3，TA2近交系小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型，实施机体微环境演进转化-改变，生物调控肿瘤细胞生长增殖状态、肿瘤生物表达性状实验，可信服的科学实验结果，证实动物及人类机体组织或器官微环境演进转化-改变生物调控最初发生、受到机体组织或器官微环境生长增殖抑制生物调控的小原位癌细胞组织，转化-改变成为适合在演进转化-改变微环境中传代增殖、具有生长增殖优势的肿瘤细胞克隆小原位癌细胞组织，最终决定其是否能够在机体组织或器官微环境中，转化-改变成为具有生长增殖优势肿瘤细胞克隆、构成主导肿瘤组织生长的肿瘤组织；正负生物调控肿瘤细胞克隆的生物表达性状、与肿瘤组织生长；继而会在动物及人类机体发生出，对机体组织或器官造成致死性生物损伤的占位实体恶性肿瘤组织——获得性肿瘤生物表达性状、生物发生机制，是动物及人类肿瘤主要生物发生机制。
2.3.3 触摸观察2.2.4/2.2.5组每一只实验动物，移植瘤株在左后肢爪垫皮下成瘤生长状况。待2.2.5组有6只动物左后肢爪垫皮下成瘤生长出可触摸到的肿瘤组织时，对2组动物实施颈椎脱臼法处死各自10只小鼠，手术剥离取出肿瘤组织，用卡尺测量肿瘤组织的长、短径，称重；作记录。2.2.4组动物右后肢爪垫皮下首次接种移植瘤株生长出肿瘤，机体组织微环境演进转化-改变为促进生物调控肿瘤细胞生长增殖的生物调控，截除荷瘤右下肢，再次移植瘤株，在左后肢爪垫皮下成瘤生长出肿瘤的时间、肿瘤体积和重量，比2.2.5组动物初次移植瘤株，在左后肢爪垫皮下成瘤生长出肿瘤的时间短、肿瘤体积和重量大。可以用最简便易行的动物肿瘤模型实验，证实动物及人类机体组织或器官微环境演进转化-改变正负生物调控肿瘤细胞克隆生长增殖状态、肿瘤生物表达性状……是动物及人类肿瘤主要生物发生机制；揭示获得性肿瘤生物表达性状、生物发生机制。
应用2.2.4/2.2.5简化动物肿瘤模型实验，可以为现代肿瘤实验科学研究首先筛选具有肺癌、胃癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、大肠癌、卵巢癌、前列腺癌、黑色素瘤……等，某种动物肿瘤高自然发病率的各种不同品系近交系小鼠，有哪种或哪些种品系近交系小鼠自发致死性占位实体恶性肿瘤，受机体组织或器官微环境演进转化-改变综合分子肿瘤生物调控机制、正负生物调控，相应表达综合分子肿瘤生物应答机制/综合分子肿瘤生物预防治疗机制——获得性肿瘤生物表达性状、生物发生机制，提供最简便易行的肿瘤模型科学实验方法。进而能够为应用动物肿瘤模型相似的综合模拟分析揭示人类群体临床自然发病率最高的肺癌、胃癌、乳腺癌、大肠癌、肝癌……等，哪种或哪些种致死性占位实体恶性肿瘤与机体组织或器官微环境演进转化-改变，综合分子肿瘤生物调控机制/综合分子肿瘤生物应答机制/综合分子肿瘤生物预防治疗机制——获得性肿瘤生物表达性状、生物发生机制，提供相关肿瘤模型科学研究实验依据。
3.模拟动物小原位癌—肿瘤与机体微环境演进转化-改变生物调控/生物应答体外培养动物肿瘤细胞实验3.1模型生物机制特点3.1.1 接种小鼠自发肿瘤可移植瘤模型的，机体血液循环血清分子生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱，在接种移植瘤株后不同生命时间进程发生的演进转化-改变，表达小鼠自发肿瘤可移植瘤模型的肿瘤-微环境演进转化-改变生物调控/生物应答，机体微环境演进转化-改变针对可移植自发肿瘤细胞的重要综合分子肿瘤生物调控机制。分别检测、综合分析接种小鼠自发肿瘤可移植瘤模型，接种移植瘤株0d、7d、14、21、28d、35d不同时间采血的小鼠的编号血清Ln，n＝0d、7d、14d、21d、28d、35d，分子生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱演进转化-改变，能够被应用于模拟分析揭示动物及人类机体组织或器官微环境演进转化-改变正负生物调控自发肿瘤细胞生长增殖状态、肿瘤生物表达性状；生物调控最初发生、受到机体组织或器官微环境生长增殖抑制生物调控的小原位癌细胞组织转化-改变成为，适合在演进转化-改变微环境中传代增殖、具有生长增殖优势的肿瘤细胞克隆小原位癌细胞组织；最终决定其是否能够在机体组织或器官微环境中转化-改变成为，具有生长增殖优势肿瘤细胞克隆构成、主导肿瘤组织生长的肿瘤组织；正负生物调控自发肿瘤细胞克隆的生物表达性状、与肿瘤组织生长——获得性肿瘤生物表达性状、生物发生机制；由动物及人类体微环境演进转化-改变的血清相关分子肿瘤生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱，针对可移植自发肿瘤细胞表达的，重要综合分子肿瘤生物调控机制。分别应用接种小鼠自发肿瘤可移植瘤模型，各自不同肿瘤生命时间进程的编号血清Ln，n＝0d、7d、14d、21d、28d、35d，分别配制能够模拟接种小鼠自发肿瘤可移植瘤株的小鼠不同生命时间进程0d、7d、14d、21d、28d、35d机体微环境土壤演进转化-改变的编号培养基Ln-D，n＝0d、7d、14d、21d、28d、35d，体外培养小鼠自发肿瘤可移植肿瘤细胞；分别检测、综合分析体外培养肿瘤细胞的小鼠基因表达谱，能够被应用于模拟分析揭示最初发生、受到机体组织或器官微环境生长增殖抑制生物调控的，自发小原位癌细胞组织转化-改变成为，适合在演进转化-改变微环境中传代增殖、具有生长增殖优势的肿瘤细胞克隆小原位癌细胞组织；在机体组织或器官微环境演进转化-改变中，转化-改变成为具有生长增殖优势肿瘤细胞克隆构成、主导肿瘤组织生长的肿瘤组织——获得性肿瘤生物表达性状、生物发生机制；由动物及人类机体微环境演进转化-改变的血清相关分子肿瘤生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱，正负生物调控可移植自发肿瘤细胞表达的，演进转化-改变的小鼠肿瘤相关基因表达谱，重要综合分子肿瘤生物应答机制。
3.2实验分组及实验实施方法
3.2.1 1、应用配制的MCDB170培养基、在9cm皮氏培养器皿清洗手术取自小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型的，肿瘤细胞组织生长性状好、没有发生组织坏死的肿瘤组织。2、转入另一个培养器皿，切除多余组织如脂肪组织或生长不良的肿瘤组织，用刀切成约3mm3小块；应用MCDB170培养基清洗。3、把清洗后的肿瘤组织小块，每次取几个组织小块放置在1mm孔径的不锈钢或聚丙烯筛网上，把筛网置于9cm皮氏培养器皿中，应用注射器芯轻轻挤压肿瘤组织；用注射器吸取1.4.4法配制的、培养基L30d-D，吹过筛网将脱落的肿瘤细胞、小肿瘤组织冲入培养器皿中。4、吸取分离的肿瘤组织，置于50μm孔径的筛网上中，重复步骤3。5、应用1.4.4法配制的、培养基L30d-D，将获得的肿瘤细胞悬液配制2×105/ml培养肿瘤细胞悬液。6、应用2~3个35mm培养器皿体，外培养小鼠乳腺癌MAC891瘤株细胞2×105/ml培养肿瘤细胞悬液，建立小鼠乳腺癌MAC891细胞系；在有一定湿度，5％CO2的37℃温箱中培养；每培养72h换1次培养基L30d-D；体外培养建立小鼠乳腺癌MAC891细胞系。
3.2.2 按照1.1.4法，分别应用模拟接种小鼠乳腺癌MAC891瘤株0d、7d、14d、21d、28d、35d小鼠机体微环境土壤演进转化-改变的6种编号培养基Ln-D，n＝0d、7d、14d、21d、28d、35d，各自配制小鼠乳腺癌MAC891细胞系2×105/ml的6种培养肿瘤细胞悬液、各自3ml。在一块24孔板上，分别各自实施6种编号培养基Ln-D，n＝0d、7d、14d、21d、28d、35d，不连续体外培养小鼠乳腺癌MAC891细胞系每种编号培养基各3孔，每孔灌注1ml分别应用各自编号培养基Ln-D，n＝0d、7d、14d、21d、28d、35d配制小鼠乳腺癌MAC891细胞系2×105/ml培养肿瘤细胞悬液；在有一定湿度，5％CO2的37℃温箱中培养；培养72h时各自换1次各自编号培养基Ln-D。培养144h，停止培养；分别收集6种培养基各自3个孔培养的肿瘤细胞，分别做制备涂片Giemsa染色、400×培养肿瘤细胞光镜形态学观察数码照相图片资料储存备用；培养肿瘤细胞生长周期与生长曲线测定；置于液氮冷冻保存，准备做培养肿瘤细胞小鼠基因表达谱检测。
3.2.3 按照1.1.4法，应用L0d-D培养基，配制小鼠乳腺癌MAC891细胞系2×105/ml培养肿瘤细胞悬液4ml，分置于2个10号培养瓶；实施按照培养基的6种编号n＝0d、7d、14d、21d、28d、35d顺序应用Ln-D培养基连续体外培养小鼠乳腺癌MAC891细胞系；在有一定湿度，5％CO2的37℃温箱中培养。养瓶培养3d时换1次编号n＝0d培养基；养瓶培养6d时取出50％~80％培养肿瘤细胞备用，换1次编号n＝7d培养基；培养瓶培养9d时换1次编号n＝7d培养基；培养瓶培养12d时取出50％~80％培养肿瘤细胞备用，换1次编号n＝14d培养基；培养瓶培养15d时换1次编号n＝14d培养基；培养瓶培养18d时取出50％~80％培养肿瘤细胞备用，换1次编号n＝21d培养基；培养瓶培养21d时换1次编号n＝21d培养基；培养瓶培养24d时取出50％~80％培养肿瘤细胞备用，换1次编号n＝28d培养基；培养瓶培养27d时换1次编号n＝28d培养基；培养瓶培养30d时取出50％~80％培养肿瘤细胞备用，换1次编号n＝35d培养基；培养瓶培养33d时换1次编号n＝35d培养基；培养瓶培养36d时结束连续培养，取出培养肿瘤细胞备用。对应用Ln-D培养基连续培养小鼠乳腺癌MAC891细胞系，分别培养6d、12d、18d、24d、27d、30、36d取出的培养肿瘤细胞，分别做制备涂片Giemsa染色、400×培养肿瘤细胞光镜形态学观察数码照相图片资料储存备用；培养肿瘤细胞生长周期与生长曲线测定；置于液氮冷冻保存，准备做培养肿瘤细胞小鼠基因表达谱检测。
3.3实验检测/目的评定3.3.1 通过P3级生物质谱——蛋白质组表达谱检测分析实验室，分别检测1.1.3制备生物实验材料，TA2近交系小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型，分别接种移植瘤株0d、7d、14、21、28d、35d不同时间采血的小鼠的编号血清Ln，n＝0d、7d、14d、21d、28d、35d，各自血清分子生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱。综合对比分析TA2近交系小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型的编号血清Ln，n＝0d、7d、14d、21d、28d、35d，由成瘤潜伏期抑制小原位癌肿瘤细胞生长增殖、到成瘤生长期促进小原位癌肿瘤细胞生长增殖、到发生致死性肿瘤，血清分子生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱演进转化-改变。综合模拟分析揭示动物及人类机体组织或器官微环境演进转化-改变，正负生物调控自发肿瘤细胞生长增殖状态、肿瘤生物表达性状；生物调控最初发生、受到机体组织或器官微环境生长增殖抑制生物调控的自发小原位癌细胞组织转化-改变成为，适合在演进转化-改变微环境中传代增殖、具有生长增殖优势的肿瘤细胞克隆小原位癌细胞组织；最终决定其是否能够在机体组织或器官微环境中转化-改变成为，具有生长增殖优势肿瘤细胞克隆构成、主导肿瘤组织生长的肿瘤组织；正负生物调控自发肿瘤细胞克隆的生物表达性状、与肿瘤组织生长——获得性肿瘤生物表达性状、生物发生机制；由动物及人类机体微环境演进转化-改变的血清相关分子肿瘤生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱，针对可移植自发肿瘤细胞表达的，重要综合分子肿瘤生物调控机制。
3.3.2 通过P3级细胞基因表达谱生物芯片检测分析实验室，应用小鼠基因表达检测生物芯片分别检测3.2.2/3.2.3，分别应用模拟小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型，不同生命时间进程0d、7d、14d、21d、28d、35d机体微环境土壤演进转化-改变的编号培养基Ln-D，n＝0d、7d、14d、21d、28d、35d，分别不连续体外培养小鼠乳腺癌MAC891细胞系、连续体外培养小鼠乳腺癌MAC891细胞系的，与血清相关分子肿瘤生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱生物调控相关的，可移植自发肿瘤细胞表达的，小鼠肿瘤相关基因表达谱。综合对比分析模拟小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型发生肿瘤，由成瘤潜伏期抑制小原位癌肿瘤细胞生长增殖、到成瘤生长期促进小原位癌肿瘤细胞生长增殖、到发生致死性肿瘤不同生命时间进程6种体外培养小鼠乳腺癌MAC891细胞系的，与演进转化-改变的血清相关分子肿瘤生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱生物调控相关的，可移植自发肿瘤细胞表达的，演进转化-改变的小鼠肿瘤相关基因表达谱。综合模拟分析揭示动物及人类机体组织或器官微环境演进转化-改变，生物调控最初发生、受到机体组织或器官微环境生长增殖抑制生物调控的自发小原位癌细胞组织，转化-改变成为适合在演进转化-改变微环境中传代增殖、具有生长增殖优势的肿瘤细胞克隆小原位癌细胞组织；在机体组织或器官演进微环境转化-改变中，转化-改变成为具有生长增殖优势人类肿瘤细胞克隆构成、主导肿瘤组织生长的肿瘤组织——获得性肿瘤生物表达性状、生物发生机制；由动物及人类机体微环境演进转化-改变的血清相关分子肿瘤生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱，正负生物调控可移植自发肿瘤细胞表达的，演进转化-改变的小鼠肿瘤相关基因表达谱，重要综合分子肿瘤生物应答机制。
3.3.3 调出1.1.2制备生物实验材料，创造TA2近交系小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型，在各自动物机体发生的不同成瘤生长时间肿瘤细胞组织的、光镜形态学观察数码照相图片资料；对比分析小鼠乳腺癌MAC891移植瘤株，在小鼠机体演进转化-改变微环境成瘤生长的肿瘤细胞组织形态，与小鼠乳腺癌MAC891细胞系体外培养模拟体内成瘤生长的肿瘤细胞组织形态。
4.动物自发肿瘤生物检测、监控、预防、治疗前瞻性综合科学研究动物肿瘤模型实验4.1模型生物机制特点4.1.1 依照第3项实验综合分析揭示的，近交系小鼠机体微环境演进转化-改变血清相关分子肿瘤生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱，针对可移植自发肿瘤细胞表达的，重要综合分子肿瘤生物调控机制。设计制造能够有效检测、监测相关分子肿瘤生物蛋白质组表达谱靶标的生物芯片，实施可以相似的模拟生物检测、监测人类群体可能发生相似小原位癌细胞组织，针对具有肺癌、胃癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、大肠癌、卵巢癌、前列腺癌、黑色素瘤……等，某种动物肿瘤高自然发病率的近交系小鼠的，分子肿瘤生物检测、监测动物肿瘤模型实验。
4.1.2 依照第3项实验综合分析揭示的，近交系小鼠机体微环境生物调控拮抗-抑制肺癌、胃癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、大肠癌、卵巢癌、前列腺癌、黑色素瘤……等，某种近交系小鼠自发肿瘤细胞组织生长增殖，针对自发肿瘤细胞组织表达的、正负肿瘤生物调控机制小鼠相关分子肿瘤蛋白质组表达谱，自发肿瘤细胞组织相应表达的、正负肿瘤生物应答机制小鼠肿瘤相关基因表达谱。克隆生物调控抑制自发肿瘤细胞生长增殖的小鼠相关分子肿瘤蛋白质组表达谱靶标、在小鼠染色体上相应的cDNA基因，用原核或真核表达系统表达生产cDNA基因重组的、抑制自发肿瘤细胞生长增殖的鼠源蛋白；依照抑制自发肿瘤细胞生长增殖的小鼠肿瘤相关基因表达谱靶标，设计制造能够有效拮抗-抑制自发肿瘤细胞组织生长增殖的生物抗肿瘤治疗药物；首先通过相应的体外培养自发肿瘤细胞生物调控抑制实验，验证抑制自发肿瘤细胞生长增殖的鼠源蛋白、生物抗肿瘤治疗药物，是否针对近交系小鼠自发肿瘤具有较好的生物抗肿瘤抑制作用；再将其实施应用于可以相似的模拟人类群体可能发生的小原位癌，针对某种动物肿瘤高自然发病率近交系小鼠，生物预防肿瘤干预治疗能否延长成瘤潜伏期、生物抗肿瘤治疗能否延长荷瘤动物生存寿命的动物肿瘤模型实验。
4.2实验动物模型分组及实验实施方法应用TA2近交系小鼠，雌性，随机分为4组，每组各24只动物。
4.2.1 TA2近交系小鼠，分子肿瘤生物检测、监测、生物预防肿瘤干预治疗组小鼠饲养5月龄后每14d实施一次小鼠尾静脉穿刺，抽取50~100μl抽取静脉血，应用相应的生物芯片实施分子肿瘤生物检测、监测；抽血后尾静脉注射、或腹腔注射，50~100μl含有被体外肿瘤细胞培养证实、有生物预防肿瘤干预治疗作用的、基因重组抑制自发肿瘤细胞生长增殖的鼠源蛋白。小鼠饲养7月龄后每14d实施一次触摸检查是否发生乳腺癌，作记录。在总共发现有6只小鼠发生乳腺癌时，乙醚麻醉采血处死这6只荷瘤小鼠，按照1.4.3法制取血清；实施血清相关分子肿瘤生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱检测；手术剥离取出肿瘤组织，用卡尺测量肿瘤组织的长、短径，称重，作记录；把6个肿瘤组织各自取一部分，各自应用相应的小鼠基因表达检测生物芯片实施小鼠肿瘤相关基因表达谱检测；把6个肿瘤组织各自置于固定液中固定；制作组织切片Giemsa染色、400×肿瘤细胞组织光镜形态学观察数码照相图片资料储存备用。再次总共发现有6只小鼠发生乳腺癌时，依照上法实施采血处死第二批、第三批、第四批发生肿瘤的6只小鼠。
4.2.2 TA2近交系小鼠，分子肿瘤生物检测、监测对照组小鼠饲养5月龄后每14d实施一次小鼠尾静脉穿刺，抽取50~100μl抽取静脉血，应用相应的生物芯片实施分子肿瘤生物检测、监测；抽血后尾静脉注射、或腹腔注射50~100μl生理盐水。小鼠饲养7月龄后每14d实施一次触摸检查是否发生乳腺癌，作记录。在4.2.1组采血处死第一批发生肿瘤的6只小鼠时，乙醚麻醉采血处死本组记录中首先发生肿瘤的6只荷瘤小鼠，按照1.4.3法制取血清；实施血清相关分子肿瘤生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱检测；手术剥离取出肿瘤组织，用卡尺测量肿瘤组织的长、短径，称重，作记录；把6个肿瘤组织各自取一部分，各自应用相应的小鼠基因表达检测生物芯片实施小鼠肿瘤相关基因表达谱检测；把6个肿瘤组织各自置于固定液中固定；制作组织切片Giemsa染色、400×肿瘤细胞组织光镜形态学观察数码照相图片资料储存备用。在4.2.1组采血处死第二批、第三批、第四批发生肿瘤的6只小鼠时，依照上法实施采血处死本组第二批、第三批、第四批发生肿瘤的6只小鼠。
4.2.3 接种小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型，分子肿瘤生物检测、监测、生物抗肿瘤治疗组把小鼠乳腺癌MAC891肿瘤组织制成的细胞悬液，按照5×106细胞/0.2ml/每只剂量，注射接种本组小鼠便于实验观察的、胸肋弧中央处皮下。在接种瘤株后，每3~7d实施一次小鼠尾静脉穿刺，抽取50~100μl抽取静脉血，应用相应的生物芯片实施分子肿瘤生物检测、监测；抽血后尾静脉注射、或腹腔注射，50~100μl含有被体外肿瘤细胞培养证实、生物抗肿瘤的作用药。在接种瘤株14d后，每2d实施一次触摸检查是否发生乳腺癌；在总共发现有6只小鼠发生乳腺癌时，乙醚麻醉采血处死这6只荷瘤小鼠，按照1.4.3法制取血清；实施血清相关分子肿瘤生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱检测；手术剥离取出肿瘤组织，用卡尺测量肿瘤组织的长、短径，称重，作记录；把6个肿瘤组织各自取一部分，各自应用相应的小鼠基因表达检测生物芯片实施小鼠肿瘤相关基因表达谱检测；把6个肿瘤组织各自置于固定液中固定；制作组织切片Giemsa染色、400×肿瘤细胞组织光镜形态学观察数码照相图片资料储存备用。再次总共发现有6只小鼠发生乳腺癌时，依照上法实施采血处死第二批、第三批、第四批发生肿瘤的6只小鼠。
4.2.4 接种小鼠乳腺癌MAC891移植瘤模型，分子肿瘤生物检测、监测对照组把小鼠乳腺癌MAC891肿瘤组织制成的细胞悬液，按照5×106细胞/0.2ml/每只剂量，注射接种本组小鼠便于实验观察的、胸肋弧中央处皮下。在接种瘤株后，每3~7d实施一次小鼠尾静脉穿刺，抽取50~100μl抽取静脉血，应用相应的生物芯片实施分子肿瘤生物检测、监测；抽血后尾静脉注射、或腹腔注射50~100μl生理盐水。在接种瘤株14d后，每2d实施一次触摸检查是否发生乳腺癌；在总共发现有6只小鼠发生乳腺癌时，乙醚麻醉采血处死这6只荷瘤小鼠，按照1.4.3法制取血清；实施血清相关分子肿瘤生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱检测；手术剥离取出肿瘤组织，用卡尺测量肿瘤组织的长、短径，称重，作记录；把6个肿瘤组织各自取一部分，各自应用相应的小鼠基因表达检测生物芯片实施小鼠肿瘤相关基因表达谱检测；把6个肿瘤组织各自置于固定液中固定；制作组织切片Giemsa染色、400×肿瘤细胞组织光镜形态学观察数码照相图片资料储存备用。在4.2.3组采血处死第二批、第三批、第四批发生肿瘤的6只小鼠时，依照上法实施采血处死本组第二批、第三批、第四批发生肿瘤的6只小鼠。
4.3实验检测/目的评定4.3.1 参照3.3实验检测/目的评定。通过分别针对4组动物肿瘤模型，动物自发生长肿瘤、动物自发生长肿瘤生物预防肿瘤干预治疗，动物移植自发瘤株生长肿瘤、动物移植自发瘤株生长肿瘤生物抗肿瘤治疗，实施连续血清相关分子肿瘤生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱检测、监测，实施自发生长肿瘤细胞、或移植自发瘤株生长肿瘤细胞小鼠肿瘤相关基因表达谱检测，实施成瘤生长肿瘤细胞组织光镜形态学观察，作综合对比分析；综合评定、总结、需要作哪些进一步完善工作，实施可以被现代肿瘤实验科学研究应用于相似的、综合模拟人类群体可能发生的小原位癌细胞组织，针对动物自发肿瘤生物检测、监控、预防、治疗前瞻性综合科学研究动物肿瘤模型实验。
5.建立临床肿瘤病人的综合人类肿瘤模型科学研究实验平台应用临床肿瘤病人手术前，实施有益于肿瘤病人的血浆置换得到的、易于肿瘤病人肿瘤细胞组织生长增殖的血清，用肿瘤病人的血清体外培养手术获得的肿瘤组织细胞，培养得到的临床肿瘤病人的肿瘤细胞系；通过实施上述综合肿瘤模型科学研究实验方法，分别应用健康青年人的正常血清、肿瘤病人的血清，体外培养临床肿瘤病人的肿瘤细胞系，实施相应的分子肿瘤生物检测……建立临床肿瘤病人的综合人类肿瘤模型科学研究实验平台。
6.综合科学研究讨论6.1.1 创造上述能够被现代肿瘤实验科学研究应用于相似的、综合模拟分析揭示人类群体可能发生的小原位癌细胞组织，针对某些种近交系小鼠自发实体恶性肿瘤与机体微环境演进转化-改变，综合分子肿瘤生物调控机制/综合分子肿瘤生物应答机制/综合分子肿瘤生物预防治疗机制方法及药物的，综合动物肿瘤模型科学研究实验平台，进而再依靠综合动物肿瘤模型科学研究实验平台建立，肿瘤生物检测、监控、预防、治疗综合动物肿瘤模型分子生物定量、定性分析数据库，在理论与科学研究方法上，不存在不可实施的现代生物科学技术难点。小鼠的基因组、蛋白质组，与人类的基因组、蛋白质组具有80％~85％同源性。由于现代肿瘤实验科学研究绝对不可以像应用实验动物实施上述综合肿瘤科学研究实验那样，把人应用于做上述那么全面、完整的综合人类肿瘤模型科学研究实验，而不能建立那么全面、完整的综合人类肿瘤模型科学研究实验平台，不能建立那么全面、完整的肿瘤生物检测、监控、预防、治疗综合人类肿瘤模型分子生物定量、定性分析数据库。因此，创造能够相似的综合模拟分析揭示人类群体可能发生的小原位癌细胞组织的，综合分析揭示各种不同品系近交系小鼠的自发肺癌、胃癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、大肠癌、卵巢癌、前列腺癌、黑色素瘤……等，各自不同的自发肿瘤与机体微环境演进转化-改变，综合分子肿瘤生物调控机制/综合分子肿瘤生物应答机制/综合分子肿瘤生物预防治疗机制方法及药物的，各种不同综合动物肿瘤模型科学研究实验平台，进而再建立肿瘤生物检测、监控、预防、治疗综合动物肿瘤模型分子生物定量、定性分析数据库；可以被现代肿瘤实验科学研究应用于，相似的综合模拟分析揭示在人类群体自然临床发生的肺癌、胃癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、大肠癌、卵巢癌、前列腺癌、黑色素瘤……等，相关人类肿瘤与机体微环境演进转化-改变，综合分子肿瘤生物调控机制/综合分子肿瘤生物应答机制/综合分子肿瘤生物预防治疗机制——获得性肿瘤生物表达性状、生物发生机制。提供相关综合肿瘤模型科学研究实验依据，提供切实可以实施的综合肿瘤生物医学科学研究实验方法。针对现代肿瘤实验科学研究具有重大科学研究价值！6.1.2 建立综合动物肿瘤模型科学研究实验平台，和肿瘤生物检测、监控、预防、治疗综合动物肿瘤模型分子生物定量、定性分析数据库。与应用上述综合肿瘤科学研究实验方法，通过建立人类肿瘤裸小鼠可移植瘤模型、实施人类肿瘤细胞体外培养……等，相应的综合人类肿瘤模型科学研究实验，而能够建立的，综合人类肿瘤模型科学研究实验平台，和综合人类肿瘤模型分子生物定量、定性分析数据库。与未来可以应用临床肿瘤病人手术前，实施有益于肿瘤病人的血浆置换得到的、易于肿瘤病人肿瘤细胞组织生长增殖的血清，用肿瘤病人的血清体外培养手术获得的肿瘤组织细胞，培养得到的临床肿瘤病人的肿瘤细胞系；通过实施上述综合肿瘤模型科学研究实验方法，分别应用健康青年人的正常血清、肿瘤病人的血清，体外培养临床肿瘤病人的肿瘤细胞系，实施相应的分子肿瘤生物检测……而能够建立临床肿瘤病人的，综合人类肿瘤模型科学研究实验平台，和综合人类肿瘤模型分子生物定量、定性分析数据库。与未来可以通过针对大样本临床肿瘤病例实施分子肿瘤生物检测、监测得到的数据，而能够建立临床分子肿瘤生物检测、监测的，综合人类肿瘤分子生物定量、定性分析数据库。建立这三个综合肿瘤模型科学研究实验平台、四个肿瘤分子生物定量、定性分析数据库将能够为现代分子肿瘤生物检测科学技术，正确提供今后可以有效检测出当今人类群体临床自然发病率最高的肺癌、胃癌、大肠癌、乳腺癌、肝癌……等，最初发生、受到机体组织或器官微环境生长增殖抑制生物调控，传代增殖106~108肿瘤细胞、尚不能对肿瘤发生位置做出精确定位的、某些种人类小原位癌细胞组织的，人类相关分子肿瘤生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱；正确提供监控人类群体发生的小原位癌细胞组织是否能够转化成为致死性占位实体恶性肿瘤，可有效监测人类群体发生小原位癌细胞组织发生恶性转化的，人类相关分子肿瘤生物物质成分生物质谱——蛋白质组表达谱；设计制造能够有效检测、监测小原位癌细胞组织人类相关分子肿瘤生物蛋白质组表达谱靶标的生物芯片，应用于针对人类群体可能发生的小原位癌细胞组织的分子肿瘤生物检测、监测。将能够为现代医学今后能够生物预防当今人类群体临床自然发病率最高的肺癌、胃癌、大肠癌、乳腺癌、肝癌……等，某些种传代增殖106~108肿瘤细胞、尚不能对肿瘤发生位置做出精确定位的人类小原位癌细胞组织，转化成为致死性占位实体恶性肿瘤；将能够为现代医学今后有效长期缓解治疗某些种已经发生肿瘤转移的中/晚期致死性实体恶性肿瘤；正确提供能够拮抗-抑制人类肿瘤细胞组织生长增殖的，人类相关分子肿瘤蛋白质组表达谱、人类肿瘤相关基因表达谱；依照拮抗-抑制人类肿瘤细胞组织生长增殖的相关蛋白质靶标、相关基因靶标，设计制造能够有效拮抗-抑制人类肿瘤细胞组织生长增殖的药物，应用于临床生物预防癌症、临床抗肿瘤生物治疗。而能够在人类致死性占位实体恶性肿瘤基础医学科学研究方面/临床医学科学研究方面/医药学科学研究方面，取得肿瘤生物检测、监控、预防、治疗综合科学研究突破。
权利要求
1.一种肿瘤模型与方法，其特征在于制取机体生长出动物肿瘤(1)动物(2)血液制品(3)、机体没有生长动物肿瘤(1)同种动物(2)血液制品(4)，分别配制含有血液制品(3)细胞培养基(5)、含有血液制品(4)细胞培养基(5)分别培养动物肿瘤(1)细胞。
2.一种肿瘤模型与方法，其特征在于制取机体生长出动物肿瘤(1)动物(2)血液制品(3)、机体没有生长动物肿瘤(1)同种动物(2)血液制品(4)，分别配制含有血液制品(3)细胞培养基(5)、含有血液制品(4)细胞培养基(5)分别培养动物肿瘤(1)细胞，通过分别对血液制品(3)、血液制品(4)培养动物肿瘤(1)细胞实施基因表达检测(6)对比分析，揭示肿瘤发生机制、治疗机制、方法及药物。
3.一种肿瘤模型与方法，其特征在于制取机体生长出动物肿瘤(1)动物(2)的血液制品(3)、机体没有生长动物肿瘤(1)同种动物(2)血液制品(4)，通过分别对血液制品(3)、血液制品(4)实施生物质谱检测(7)对比分析，揭示肿瘤发生机制、治疗机制、方法及药物。
4.根据权利要求1至3中所述的肿瘤模型与方法，其特征在于动物(2)是近交系动物(8)。
5.根据权利要求1至4中所述的肿瘤模型与方法，其特征在于动物(2)是近交系小鼠(9)。
6.根据权利要求1至5中所述的肿瘤模型与方法，其特征在于动物(2)是具有高肿瘤自然发病率的近交系小鼠(10)。
7.根据权利要求1至6中所述的肿瘤模型与方法，其特征在于血液制品(3)、血液制品(4)是动物血清(11)。
8.根据权利要求1至7中所述的肿瘤模型与方法，其特征在于动物肿瘤(1)是人类肿瘤(12)、培养动物肿瘤(1)细胞是培养人类肿瘤(12)细胞。
9.根据权利要求1、2、3、8中所述的肿瘤模型与方法，其特征在于血液制品(3)是肿瘤病人的血浆(13)、血液制品(4)是健康人的血浆(14)。
10.根据权利要求1、2、3、8中所述的肿瘤模型与方法，其特征在于血液制品(3)是肿瘤病人的血清(15)、血液制品(4)是健康人的血清(16)。
全文摘要
本发明名称为肿瘤模型与方法，涉及生命科学领域、及医药领域。提供了一个能够被应用于揭示人类实体恶性肿瘤与机体组织或器官微环境演进转化－改变综合分子肿瘤生物调控机制、综合分子肿瘤生物应答机制、综合分子肿瘤生物预防治疗机制方法及药物的，肿瘤模型与方法，综合肿瘤模型科学研究实验平台。能够揭示检测、监测人类小原位癌细胞组织的，人类相关分子肿瘤蛋白质组表达谱靶标；揭示拮抗－抑制人类肿瘤细胞组织生长增殖的，人类相关分子肿瘤蛋白质组表达谱靶标、肿瘤相关人类基因表达谱靶标。
文档编号C12Q1/68GK1857740SQ20061007251
公开日2006年11月8日 申请日期2006年4月11日 优先权日2006年4月11日
发明者叶新新 申请人:叶新新