专利名称：大蒜胚性愈伤组织诱导的培养基的制作方法
技术领域：
本发明属于大蒜组织培养技术，特别是大蒜胚性愈伤组织高效诱导的培养基。
背景技术：
植物受创伤后，在伤面新生的组织称为愈伤组织。植物组织培养中诱导外植体细胞分裂形成的愈伤组织，大都不是损伤的结果，而是利用外源的植物激素类物质诱导细胞开始分裂形成的，常用的有生长素类物质如2，4-二氯苯氧乙酸、萘乙酸、吲哚乙酸和细胞分裂素如6-苄基嘌呤等。生长素和细胞分裂素按一定浓度和比例配合使用，易于诱导出愈伤组织。愈伤组织一般分为两类，一类是疏松愈伤组织(非胚性愈伤组织)，一类是胚性愈伤组织。只有胚性愈伤组织在适宜的条件下，才可以继续再分化，形成胚状体，进而形成芽、根，再生出完整植株。目前大蒜茎尖组织培养中胚性愈伤组织诱导率偏低，一般在32％以下。
发明内容
本发明的目的是克服大蒜茎尖组织培养中胚性愈伤组织诱导率低的问题，提供一种大蒜茎尖组织培养中胚性愈伤组织高效诱导的培养基，用于大蒜的科研和生产。
本发明的技术方案如下该大蒜胚性愈伤组织诱导的培养基是将6-苄基嘌呤6-BA、2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D、水解酪蛋白CH、蔗糖、琼脂溶解于基本培养基MS中而成的，其各组份的用量为以1L基本培养基MS加入量计MS 1L6-BA1.0-2.0mg2，4-D 0.05-0.5mgCH 200mg蔗糖20g琼脂6g优选为
MS 1L6-BA 1.0mg2，4-D 0.5mgCH 200mg蔗糖 20g琼脂 6g上述原料中，MS为基本培养基，提供培养组织生长发育所需的无机营养和部分有机营养元素；6-苄基嘌呤6-BA和2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D是植物生长调节剂，具有促进培养组织形成胚性愈伤组织的作用；、水解酪蛋白CH提供有机多肽类营养元素；蔗糖提供培养组织生长发育所的碳素营养；琼脂主要作用是固化培养基，起支撑作用。
上述各组份的用量是发明人在理论分析的基础上进行大量试验摸索总结得出的，按上述比例配制培养基，具有较好诱导效果。
上述培养基的制作方法是将6-BA、2，4-D、CH、蔗糖、琼脂溶解于MS，搅拌均匀，PH值调整为5.8-6.0之间即可。
本发明的积极效果是利用本培养基大蒜茎尖组织培养中胚性愈伤组织的诱导率均大于34％，并可达到82％左右。
具体实施例方式
以下通过实施例进一步阐述本发明的有益效果实施例1培养基配方MS 1L6-BA1.0mg2，4-D 0.05mgCH 200mg蔗糖20g琼脂6g实施例2培养基配方
MS 1L6-BA1.0mg2，4-D 0.5mgCH 200mg蔗糖20g琼脂6g实施例3培养基配方MS 1L6-BA2.0mg2，4-D 0.5mgCH 200mg蔗糖20g琼脂6g试验方法及结果将上述实施例的培养基用于大蒜胚性愈伤组织诱导试验材料大蒜徐州白蒜鳞茎上约0.1mm长的茎尖分生组织。
方法在体视显微镜下剥取大蒜茎尖分生组织放入培养基上，茎尖分生组织与培养基要结合紧密，每试管接种1个茎尖分生组织，置于25℃、光强约2000Lux、每日光照12小时，培养4周后统计结果见下表大蒜胚性愈伤组织诱导率(4周) 由表中结果分析得出如下结论实施例3中培养基所诱导出的愈伤组织中胚性愈伤组织只有34.0％，约65％为非胚性愈伤组织；实施例1中的培养基所诱导出非胚性愈伤组织占29.1％、胚性愈伤组织占65.5％；实例2中培养基所诱导出的愈伤组织胚性愈伤组织诱导率为81.5％。
综合以上分析，得出大蒜茎尖培养胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为MS 1L6-BA1.0mg2，4-D 0.5mgCH 200mg蔗糖20g琼脂6g。
权利要求
1.一种大蒜胚性愈伤组织诱导的培养基，其特征在于，它是将将6-苄基嘌呤6-BA、2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D、水解酪蛋白CH、蔗糖和琼脂溶解于基本培养基MS中制成，其各组份的用量为以1L基本培养基MS加入量计MS1L6-BA 1.0-2.0mg2，4-D0.05-0.5mgCH200mg蔗糖 20g琼脂 6g。
2.根据权利要求1所述的培养基，其特征是，各组份的用量为MS1L6-BA 1.0mg2，4-D0.5mgCH200mg蔗糖 20g琼脂 6g。
全文摘要
本发明公开了一种大蒜胚性愈伤组织诱导的培养基。它是将6－苄基嘌呤6－BA、2，4－二氯苯氧乙酸2，4－D、水解酪蛋白CH、蔗糖和琼脂溶解于基本培养基MS中制成，利用本发明大蒜茎尖组织培养中胚性愈伤组织的诱导率可达82％，可应用于大蒜的工厂化生产。
文档编号C12N5/04GK1857065SQ20061008591
公开日2006年11月8日 申请日期2006年5月26日 优先权日2006年5月26日
发明者张允刚 申请人:江苏徐淮地区徐州农业科学研究所