专利名称：具有抗过敏效果的乳酸菌的制造方法
技术领域：
本发明涉及通过经口摄取提高生物体内的细胞因子的产生量、具 有优良的抗过敏效果的乳酸菌的制造方法、以该乳酸菌为有效成分的 抗过敏剂及饮食品。
背景技术：
已知乳酸菌除具有改善肠内菌群的平衡、减少肠内腐败产物或改 善粪便性状的效果之外，还具有提高生物体的免疫活性的效果，用作
抗过敏剂的有效成分等(例如，参见特开2004 - 26729号公报(专利 文献l))。通常，为了得到乳酸菌的上述生理效果，必须较大量地 摄取菌体。
另一方面，已知在乳酸菌的培养中使用市售的研究用MRS培养 基等，作为使乳酸菌良好繁殖的添加物，可以使用酵母浸膏、牛肉膏 等营养成分。
容易想到如果使用满足乳酸菌的营养要求的培养基，则乳酸菌如 常地增殖，但想要在工业上大量培养乳酸菌时，存在即使使用满足上 述乳酸菌的营养要求的培养基，也未必能廉价地大量得到具有抗过敏 活性的菌体的问题。
另外，由于MRS培养基是用于研究的，故将由该培养基培养得 到的乳酸菌用于饮食品等时存在问题。因此，希望开发出仅由允许用 作食品与食品添加物的成分构成的培养基。
另外，已知使用作为蛋白质水解物的胨(不被硫酸铵沉淀的部分 水解的蛋白质，用作微生物培养基成分的蛋白质二次衍生物)等成分 作为培养基的营养源之一，但对胨的种类与乳酸菌的抗过敏效果之间 存在关系一无所知。特别是对尽管乳酸菌的菌数本身增加，但有时也
得不到充分的抗过敏活性这一事实也完全不知。
由此，现状是至今没有研究乳酸菌的抗过敏效果与培养基组成之 间的关系，仅着眼于乳酸菌的增殖特性选择培养基组成。
专利文献l:特开2004 - 26729号公报
发明内容
本发明的目的在于提供通过选择可用于饮食品的培养基组成制 造抗过敏效果高的乳酸菌的方法、含有通过该方法得到的乳酸菌作为 有效成分的抗过敏剂、及含有该乳酸菌作为有效成分、具有抗过敏效 果的饮食品。
本发明人为了达到上述目的进行了深入研究，结果发现通过使用 添加了酪蛋白水解物(酪蛋白胨)的培养基，能得到抗过敏效果高的 乳酸菌，从而完成了本发明。
本发明的目的之一在于提供具有抗过敏效果的乳酸菌的制造方 法，其特征在于，使用含有0.01质量％以上、优选为0.01~10质量 %的酪蛋白水解物的培养基培养乳酸菌。
根据本发明，可以通过使用添加了酪蛋白水解物的培养基培养乳 酸菌，得到抗过敏效果更高的乳酸菌。并且，通过使用除酪蛋白水解 物之外还添加有来自畜肉(farmed meat)或鱼贝肉(fish meat)的氮 源的培养基，可以得到更大量的乳酸菌。
另外上述培养基优选含有0.01 ~ 10质量％的酪蛋白水解物。由 此，可以得到抗过敏效果高的乳酸菌。并且，为了促进菌体增殖，可 以使用含有0.01 ~ 10质量％来自畜肉或鱼贝肉的氮源的培养基。作为
畜肉或鱼贝肉的氮源，可以使用来自牛、金枪鱼、鲣等的氮源。
上述乳酸菌优选为嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus )或发酵 豸L才干菌(Lactobacillus fermentum)、干赂享L牙干菌(Lactobacillus casei)、 类干赂專1^干菌(Lactobacillus paracasei)、力口氏享L々干菌(Lactobacillus gasseri)。特别优选为嗜酸乳杆菌L - 92抹(专利生物保藏中心保藏 编号FERMBP- 4981，保藏日1994年3月4日)。除此之外，优选
从上述培养物中采集乳酸菌的菌体并干燥。由此，可以得到抗过敏效 果高的乳酸菌，同时，可以进一步提高用作医药品原料时的安全性。 因此，可以得到含有由上述方法得到的乳酸菌作为有效成分的抗过敏 剂，还可以使用该乳酸菌得到抗过敏效果高的饮食品。
根据本发明，可以通过使用添加了酪蛋白水解物的培养基培养乳 酸菌，较大量地得到抗过敏效果高的乳酸菌。
本发明提供具有抗过敏效果的乳酸菌的制造方法，其特征在于， 所述制造方法使用含有酪蛋白水解物的培养基培养乳酸菌。本发明还
提供具有促进IL- 12产生的效果的乳酸菌的制造方法，其特征在于，
所述制造方法使用含有酪蛋白水解物的培养基培养乳酸菌。
优选方案中，酪蛋白水解物为胰酶水解物。另外，水解产物优选
为胨。培养基优选含有0.01 ~ 10质量％酪蛋白水解物。
其他方案中，乳酸菌为乳杆菌属的乳酸菌。乳杆菌属的乳酸菌优
选为嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus )、发酵乳牙干菌(Lactobacillus
fermentum )、 干酪乳杆菌(Lactobacillus casei )、 类千酪乳杆菌 (Lactobacillus paracasei)或力口氏享'L^干菌(Lactobacillus gasseri) 。 口耆
酸乳杆菌较优选为嗜酸乳杆菌L - 92 4朱(FERM BP - 4981 )。
其他方案中，从培养得到的培养物中采集乳酸菌的菌体并干燥。 另外，其他方案中，培养基含有酪蛋白水解物与来自畜肉或鱼贝
肉的氮源。
本发明提供含有由本发明方法得到的乳酸菌为有效成分的抗过 敏剂及IL- 12产生促进剂。
本发明还提供含有由本发明方法得到的乳酸菌为有效成分的具 有抗过敏效果的饮食品。
需要说明的是，本发明的具有抗过敏效果的乳酸菌的制造方法同
时也可以用作抗过敏剂的制造方法，可以将根据本发明得到的乳酸菌 的培养物用作抗过敏剂。
根据本发明的方法，可以制造IL- 12产生促进效果高的乳酸菌。 本发明的具有抗过敏效果的乳酸菌的制造方法也可以用作含有本乳
酸菌作为有效成分的IL-12产生促进剂的制造方法，并且，本发明 的抗过敏剂可以同时用作含有乳酸菌作为有效成分的IL-12产生促 进剂。IL-12具有抑制IgE产生、抑制过敏的作用已经广为人知。
根据本发明，可以通过使用添加了酪蛋白水解物以及根据需要添 加的来自畜肉或鱼贝肉的氮源的培养基培养乳酸菌，得到具有优良的 抗过敏效果的乳酸菌。另外，由于该培养基可以非常廉价地配制，且 可以有效地促进乳酸菌的增殖，故可以降低乳酸菌的培养成本。并且 可以通过含有由此得到的乳酸菌为有效成分，提供安全性高、具有优 良的抗过敏效果的抗过敏剂及饮食品。
图l表示由使用实施例1的培养基(1) ~ (7)培养得到的乳酸 菌生产的IL- 12的生产量。
具体实施例方式
首先说明用于培养本发明的乳酸菌的培养基。酪蛋白水解物通常 已知为酪蛋白胨、乳肽等，含有大量来自酪蛋白的肽、氨基酸等氮化 合物。酪蛋白水解物通常用作食品原料、培养基成分，可以使用市售 的酪蛋白水解物。
另外，作为为了促进菌体增殖而使用的、来自畜肉或鱼贝肉的氮 源的例子，有浓缩制造水畜产罐头、水畜产加工品时得到的煮汁所得 的氮源，该氮源含有从畜肉、鱼贝肉中溶出的蛋白质、肽、氨基酸等 氮化合物及无机成分，价格低廉。来自畜肉或鱼贝肉的氮源可以使用 市售品，也可以直接浓缩畜肉或鱼贝肉的4是取液，还可以酶解或酸解 上述提取液进行配制。作为畜肉优选使用牛，作为鱼贝肉，优选使用 金枪鱼、鰹。
作为上述酪蛋白水解物，只要是能用于制造饮食品的具有卫生 性.安全性的原料即可使用，没有特别限定，例如，可以使用商品名为
"BACTO CASITONE"、商品名为"BACTOTRYPTONE，，(均为Difco
制)、商品名"Paticase Peptone"(极东制药制)、商品名为"Casein Peptone Plus" ( Organotechnie制)等的酪蛋白水解物。
作为为了促进菌体增殖而使用的、来自畜肉或鱼贝肉的氮源，只 要是能用于制造食品的具有卫生性.安全性的原料即可使用，没有特别 限定，例如，可以使用商品名为"BACTO BEEF EXTRACT" ( Difco 制)、商品名为"Bacterio-N-KS (B) ，， ( MARUHA制)、商品名 为"CULTIVATOR T"(烧津水产制)等的氮源。
本发明中，优选使用含有0.01质量％以上、优选0.01~10质量 %酪蛋白水解物的培养基，如果酪蛋白水解物的含量过少，则不但无 法期待乳酸菌良好地繁殖，还无法大量得到具有充分的抗过敏效果、 即IL- 12诱导能力的乳酸菌。
更优选通过使用含有0.01 ~ 10质量％来自畜肉或鱼贝肉的氮源、 较优选为0.01 ~ 1质量％来自畜肉或鱼贝肉的氮源的培养基，使具有 抗过敏效果的菌体良好地增殖。
另外，除上述基本成分之外，还可以根据需要添加乳糖、葡萄糖、 蔗糖、糊精等糖源、有机或无机盐类、来自畜肉、鱼贝肉、酪蛋白之 外的蛋白的氮源(也包含其水解物)等。上述成分中，优选添加1~ 10质量％糖源、0.5~2质量％有机或无机盐类。另外，也可以根据需 要添加酵母浸膏、其他胨类、肉膏等。
制造，例如，可以在水(优选为蒸馏水或离子交换水)中添加规定量 的来自畜肉或鱼贝肉的氮源及酪蛋白水解物，并根据需要进一步加入 上述其他成分，均匀溶解后，调整pH为6.5~7.0，采用公知的方法
(例如高压灭菌器等)灭菌。
本发明的方法中，可以根据通常的方法使用上述配制得到的培养 基进行乳酸菌的培养，例如，在上述培养基中接种乳酸菌的前培养液
(或用琼脂培养基培养得到的乳酸菌的菌落)，在好氧性、微好氧性 或厌氧性的条件下，于30~45"培养12~72小时即可。需要说明的 是，由于培养中乳酸菌的代谢产物(例如乳酸等)使培养基的
低，故一边测定培养基的pH,适当添加石成性水溶液(氢氧化钠、氢 氧化钾、氢氧化钙、氨等水溶液)，保持培养基的pH在6.5~7.5内 (较优选为6.8 ~ 7.2), —边进行培养。由此通过将培养基的pH保 持在中性附近进行培养，可以使乳酸菌良好地生长，有时也能提高菌 体收率。
作为本发明的培养方法中使用的乳酸菌，例如优选举出保加利亚 乳^干菌(Lactobacillus delbrueckii bulgaricus )、孝L吝丄4干菌(Lactobacillus delbrueckii lactis )、 瑞士吝'L4干菌(Lactobacillus helveticus )、 嗜酸乳 斥干菌 (Lactobacillus acidophilus )、 巻曲豸L酉臾4干菌(Lactobacillus crispatus)、 食淀粉乳杆菌(Lactobacillus amylovorus)、 鸡乳杆菌
(Lactobacillus gallinarum )、力口氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、 约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)、 干酪乳杆菌(Lactobacillus casei )、 类干酪乳杆菌 (Lactobacillus paracasei )、 玉米乳杆菌
(Lactobacillus zeae )、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、 鼠李 津唐孝L^干菌(Lactobacillus rhamnosus )、头豆吝'L才干菌(Lactobacillus brevis )、 高加索酸奶乳杆菌(Lactobacillus kefir)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum )、路氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri )、长双岐杆菌
(Bifidobacterium, longum )、乳双岐杆菌(Bifidobacterium, lactis )、 链状双歧杆菌(Bifidobacterium, catenulatum)等，特别优选具有较强 抗过敏效果的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus) L - 0062抹
(FERM BP-4980) 、 L - 92抹(FERM BP-4981 )、发酵乳杆菌
(Lactobacillus fermentum) CP34抹(FERM BP - 8383 )等。
本发明优选在乳酸菌培养结束后，例如通过过滤、离心分离等方 法从所得的培养物中收集乳酸菌的菌体，并干燥该菌体。由此，可以 提供稳定性更高的乳酸菌作为饮料'食品或医药品的原料。而且，即使 在干燥前通过加热杀菌变成死菌体，也能保持抗过敏效果。另外，优 选将干燥后的菌体粉末化后作为饮料.食品或医药品的原料进行制品 化。
本发明的抗过敏剂含有上述乳酸菌作为有效成分。上述抗过敏剂
可以在上述乳酸菌中根据需要添加赋形剂、甜味剂、酸味剂、维生素 类、矿物质类、色素、香料、增粘多糖类等，制成粉末、颗粒、片剂、 胶嚢剂、糊状、果冻状及各种固态食品或液态饮料。
本发明的抗过敏剂具有免疫激活效果，可以用作免疫激活剂。其
有效摄取量换算成上述乳酸菌体为成人l日lmg 10g,较优选为10 ~ 200mg。
另外，本发明的抗过敏剂可以添加在例如饮料、果冻、糖果、口 香糖、干馏食品、速食品等中进行摄取。此时，优选在上述各种食品 中添加上述乳酸菌，使得能1日摄取1 ~ l,OOOmg、较优选摄取10~ 500mg。
本说明书中明确引用的全部专利及参考文献的内容全部作为本 说明书的一部分引用于此。另外，作为本申请优先权基础的申请、日 本专利申请2005 - 24204号说明书及附图中记载的内容全部作为本说 明书的一部分引用于此。
下面根据实施例更加详细地说明本发明。
实施例1
酉己制使用Casein Peptone Plus的培养基
在10g鱼肉提取物(商品名埃尔利希(Ehrlich，s)肉提取液， 极东制药工业制)、5g酵母浸膏(商品名MEASTP2G、 ASAHI-FH 制)、20g葡萄糖、lg单油酸十聚甘油酯(商品名Polyglycerinester POEME J- 0381V,理研维生素制)、5g乙酸钠结晶(食品添加物头见 格标准)、O.lg硫酸镁结晶(食品添加物规格标准)及2g磷酸氢二 钾(食品添加物规格标准)中加入10g酪蛋白胨(商品名Casein Peptone Plus, Organotechnie制)，加入精制水，定量为1L，用氢氧 化钠调整为pH6.8后，在121。C下在高压灭菌器中灭菌20分钟，配制 培养基1)。
作为对照，分别加入下述胨代替上述培养基成分中的10g Casein Peptone Plus (商品名，Organotechnie制)，进4亍与上述实施例1相
同的处理，配制培养基(2) ~ (7)。
培养基(2 )小麦蛋白胨(商品名小麦蛋白胨El, Organotechnie 制)10g、
培养基(3 )大豆蛋白胨(商品名大豆蛋白胨A2, Organotechnie 制)10g、
培养基(4)大豆蛋白胨(商品名大豆蛋白胨A3， Organotechnie 制)10g、
培养基(5 )大豆蛋白胨(商品名大豆蛋白胨AX, Organotechnie 制)10g、
培养基(6 )植物蛋白胨(商品名植物蛋白胨El, Organotechnie 制)10g、
培养基(7 )酪蛋白胨(商品名胰蛋白胨Nl， Organotechnie制)
10g。
1. 调制乳酸菌
分别在上述实施例1及比较例1中配制得到的培养基1 ) ~7)中 接种3.5 %嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acid叩hilus )L - 92抹(FERM BP -4981 )的前培养液，在35。C下培养18小时。
培养结束后，离心培养液，回收菌体，用灭菌水清洗3次后，用 冷冻干燥装置(东京理化器械制FDU- 830)进行冷冻干燥，得到乳 酸菌粉末。回收全部乳酸菌粉末，测定重量。将得到的乳酸菌粉末混 悬在灭菌水中后，在10(TC下进行杀菌处理10分钟，得到乳酸菌悬浊 液。通过以下的方法以IL- 12诱导能力为指标测定抗过每1效果。
2. IL-12诱导能力的测定 (1 )调制脾脏细胞
在6周龄的BALB/c小鼠(雌)的腹腔内注射浓度为50pg/0.1mL 的OVA溶液(含有等量的Alum)，饲养10天后，通过颈推脱臼处 死小鼠，摘取脾脏。将脾脏细胞混悬在RPMI1640培养基(含有10
% FBS、 25mM HEPES )中，通过70|xm细胞过滤器(FALCON制) 进行单细胞化。在该细胞悬浊液中加入RPMI1640培养基(含有10 %FBS、 25mM HEPES)，调整活细胞数至5xl06/ml，得到脾脏细胞 悬浊液。需要说明的是，活细胞数的测定方法如下在细胞悬浊液中 加入锥虫蓝染色液并混合，用红细胞计算盘数出活细胞数。 试剂
1 ) FBS (胎牛血清)
将冷冻保存的FBS放入56。C恒温水槽中灭活30分钟，放入灭菌 容器中进行冷冻保存。 2) PBS
将80gNaCl、 29gNa2HP04.12H20、 2gKCl、 2gKH2P04溶解于蒸 馏水中，定量为1L，在高压灭菌器中进行灭菌。 3 ) RPMI 1640培养基
将10.2g RPMI1640培养基"日水"(2)(商品名，日水制药制) 溶于1L蒸馏水中，在121。C下蒸汽灭菌20分钟，无菌地加入10% NaHC03、 0.3gL-谷氨酰胺、IO万单位青霉素、O.lg链霉素(GIBCO制)。
(2)脾脏细胞与乳酸菌粉末的共培养(IL-12的诱导) 在96孔平底板(FALCON制)中分别以200jaL/孔添加上述脾脏 细胞悬浊液、以0.01 ~ lpg/孔添加乳酸菌粉末悬浊液、以20吗/孔添 力口OVA，在37。C下、5 0/。C02中培养24小时。 (3 )抗过^:活性指标IL - 12的测定 IL- 12的测定如下进行使用小鼠IL - 12p70测定试剂盒(商品 名"OptEIA Mouse IL - 12 ( p70 ) set"、 BD Phar Mingen制)及96孔 免疫测定用板(NUNC制)对培养上清液进行测定。其结果如图1所 示。
(4)结果
从图1可确认，使用Casein Peptone Plus的培养基1 )的IL - 12 产生诱导能力非常高，使用其他胨的培养基的IL-12产生诱导能力
低。使用Casein Peptone Plus的培养基1 )与使用市售的MRS培养基 的情况相比较，具有相同或更高的IL- 12产生诱导能力。
实施例2
片剂的制备
分另'J力口入1kg酷蛋白凡东(商品名Casein Peptone Plus 、 Organotechnie制)、0.5kg酵母浸膏(商品名酵母胨标准型F Organotechnie制)、2.25kg蔗糖、0.1kg单油酸十聚甘油酯(商品名 SUNSOFT Q-17S、太阳化学制)、0.5kg乙酸钠结晶(食品添加物 规格标准)、0.5kg磷酸氢二钾(食品添加物规格标准)、0.1kg硫酸 镁结晶(食品添加物规格标准)、1kg鱼肉提取液(商品名Bacterio -N-KS (B) ， MARUHA制)，加入精制水，定量至100L，用溶 解50%左右的氢氧化钠(食品添加物规格标准)调整至pH6.8,根据 通常方法在121。C下灭菌20分钟后，冷却至培养温度35。C,配制培 养基。
无菌地接种1 ~5%使用相同的培养基在35。C下培养的引子，搅 拌15分钟后停止搅拌翼，培养直至pH为4.2以下U8小时左右)。 培养结束后，使用离心分离机SC-1型(Westfalia制)处理培养液， 分离为不溶性固态成分与液相。用精制水稀释得到的不溶性固态成分 至与培养基的容量等倍后，同样通过使用离心分离机SC- 1型 (Westfalia制)处理，分离为不溶性固态成分与液相，清洗菌体。进 一步用精制水稀释得到的不溶性固态成分至与培养基的容量等倍，在 100。C下加热10分钟进行杀菌，冷却至60。C以下后，通过使用离心分 离机SC - 1型(Westfalia制)进行处理，分离为不溶性固态成分与 液相，从而得到经清洗、杀菌、浓缩的菌体的分散液。
将菌体的分散液流入冷冻干燥用槽至厚度为lcm,将其放置在保 持-38。C的冷冻库中，冷冻直至初始温度(initial temperature )为-35。C 以下。将冻结后的菌体分散液迅速容纳在起始加热温度设定为40。C的 冷冻干燥机TFD-50LF2 (东洋技研制)中，根据通常的方法干燥直 至得到的干燥物的干燥失重为3%以下。用M-4型奈良式自由賴^卒
机(奈良机械制)粉碎得到的干燥物，用22目的网筛分，得到粒度
均一的菌体粉末。
根据通常的方法用UV - 1型V掺和机(内田工业所制)混合下 述物质5分钟，所述物质为3.2g得到的菌体粉末、55kgPartecSI150 (昭和兴产制)、20kg还原性异麦芽酮糖醇(Palatinose) PNP (三井 物产制)粉末、10kg精制干燥杀菌木薯淀粉(松谷化学制)、9.8kg 葡萄糖(JAS规格标准)、2kgDK酯F - 20W (三荣源FFI制)，得 到含有菌体粉末的压片用粉末。使用Pegasasu 1024HUK - AWC型压 片机(菊水制作所制)，用9mm(])标准R型臼扦，根据常用方法将 压片用粉末整形为每1粒350mg的片剂。
通过l日摄取2粒得到的片剂，可以摄取与用于以花粉症与常年 性过敏性鼻炎患者为对象的临床试验的发酵乳中所含乳酸菌等量的 乳酸菌。根据本发明，可以制造容易连续摄取且廉价的抗过敏剂。
实施例3
饮料的制造
分别添加lkg酪蛋白胨(商品名Casein Peptone Plus 、 Organotechnie制)、0.5kg酵母浸膏(商品名酵母胨标准型F、 Organotechnie制)、2.25kg蔗糖、0.1kg单油酸十聚甘油酯(商品名: SUNSOFT Q-17S、太阳化学制)、0.5kg乙酸钠结晶(食品添加物 规格标准)、0.5kg磷酸氢二钾(食品添加物规格标准)、0.1kg硫酸 镁结晶(食品添加物规格标准)、lkg鱼肉提取物(商品名Bacterio -N-KS (B) ， MARUHA制)，加入精制水，定量至100L，用溶 解50%左右的氢氧化钠调整至pH6.8,根据通常方法在121。C下灭菌 20分钟后，冷却至培养温度35。C,配制培养基。
无菌地接种1~5%使用相同的培养基在35。C下培养的引子，搅 拌15分钟后停止搅拌翼，培养直至OD600达到5.0 ( 18小时左右)。 培养结束后，使用离心分离机SC-l型(Westfalia制)处理培养液， 分离为不溶性固态成分与液相。用精制水稀释得到的不溶性固态成分 至与培养基的容量等倍后，同样通过使用离心分离机SC-1型
(Westfalia制)处理，分离为不溶性固态成分与液相，清洗菌体。进 一步用精制水稀释得到的不溶性固态成分至与培养基的容量等倍，在 105。C下加热3分钟进行杀菌，冷却至60。C以下后，通过使用离心分 离机SC- 1型(Westfalia制)进行处理，分离为不溶性固态成分与 液相，从而得到经清洗、杀菌、浓缩的菌体的分散液。
将菌体的分散液流入冷冻干燥用槽至厚度为lcm,放置在保持 -38。C的冷冻库中，冷冻至初始温度为-35。C以下。将冻结后的菌体的 分散液迅速容纳在起始加热温度设定为40。C的冷冻干燥机TFD-50LF2(东洋技研制)，根据通常的方法干燥至得到的干燥物的干燥 失重为3%以下。用M-4型奈良式自由粉碎机(奈良机械制)粉碎 得到的干燥物，用22目的网筛分，得到粒度均一的菌体粉末。
相对于lt按照通常的方法制得的SNF3。/。左右的乳制品乳酸菌饮 料，添加0.2kg菌体粉末，使用H-50型可变式高压均质化机(三和 机械制)，根据通常的方法使用饮料制造用的板式加热器将在15MPa 下均质化的原液在96。C下杀菌30秒后，在85。C下填充到100mL瓶 中，按照通常的方法进行PP帽的巻边，倒置，对盖部进行杀菌，制 成杀菌乳酸菌饮料。
通过l日摄取1瓶得到的杀菌乳酸菌饮料，可以摄取与用于以花 粉症与常年性过敏性鼻炎者为对象的临床试验的发酵乳中所含的乳 酸菌等量的乳酸菌。根据本发明，可以制造容易连续摄取、且廉价的 具有抗过敏效果的饮料。
权利要求
1、一种乳酸菌的制造方法，所述乳酸菌具有抗过敏效果，其特征在于，所述方法使用含有酪蛋白水解物的培养基培养乳酸菌。
2、 一种乳酸菌的制造方法，所述乳酸菌具有IL-12产生促进效 果，其特征在于，所述方法使用含有酪蛋白水解物的培养基培养乳酸 菌。
3、 如权利要求1或2所述的制造方法，其中，所述酪蛋白水解 物为胰酶水解物。
4、 如权利要求1~3中任一项所述的制造方法，其中，所述水解 物为胨。
5、 如权利要求1 ~4中任一项所述的制造方法，其中，所述培养 基含有0.01 ~ 10质量％酪蛋白水解物。
6、 如权利要求1 ~5中任一项所述的制造方法，其中，所述乳酸 菌为乳杆菌属的乳酸菌。
7、 如权利要求6所述的制造方法，其中，所述乳杆菌属的乳酸 菌为嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus )、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum )、 干酪乳杆菌(Lactobacillus casei )、 类干酪享L杆菌(Lactobacillus paracasei)或力口氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)。
8、 如权利要求7所述的制造方法，其中，所述嗜酸乳杆菌为嗜 酸乳杆菌L - 92 4朱(FERM BP - 4981 )。
9、 如权利要求1~8中任一项所述的制造方法，其中，所述方法 是从进行所述培养得到的培养物中采集乳酸菌的菌体并干燥。
10、 如权利要求1~9中任一项所述的制造方法，其中，所述培 养基含有酪蛋白水解物与来自畜肉或鱼贝肉的氮源。
11、 一种抗过敏剂，所述抗过敏剂含有由权利要求1 ~ 10中任一 项所述的方法得到的乳酸菌为有效成分。
12、 一种具有抗过敏效果的饮食品，所述饮食品含有由权利要求 1 ~ 10中任一项所述的方法得到的乳酸菌为有效成分。
13、 一种IL-12产生促进剂，所述IL-12产生促进剂含有由片又 利要求1 ~ 10中任一项所述的方法得到的乳酸菌为有效成分。
全文摘要
本发明公开一种具有抗过敏效果的乳酸菌的制造方法，其特征在于，所述制造方法使用含有酪蛋白水解物的培养基培养乳酸菌。本发明还提供含有使用本发明方法培养得到的乳酸菌为有效成分的抗过敏剂以及含有使用本发明方法培养得到的乳酸菌为有效成分的、具有抗过敏效果的饮食品。
文档编号A23L2/52GK101098957SQ20068000178
公开日2008年1月2日 申请日期2006年1月4日 优先权日2005年1月4日
发明者吉川彰, 水谷润, 泽田大辅, 藤原茂 申请人:卡尔皮斯株式会社