专利名称：：用于促进追赶生长的营养制剂的制作方法
技术领域：
：本申请涉及用于促进因为遭受生理或心理应激而致使生长被延迟的年幼哺乳动物的追赶生长(catch-upgrowth)的制剂以及该类制剂的应用。本发明特别是涉及包含用于促进追赶生长的成分的协同组合。
背景技术：
：多年来，人们已经意识到，不管是身体上的疾病或损伤还是心理创伤，遭受应激的幼年哺乳动物的生长常常被阻断。如果幼年哺乳动物迅速恢复并且可以获得足够的营养，则可以补偿在应激期间应当进行的生长，并且这种突然迸发的生长被称为"追赶生长"。但是，并不是总会发生这种生长。例如，幼年哺乳动物在疾病或创伤期间和在疾病刚刚痊愈后都可能患厌食症，因此，摄食可能受限。在一些严重的情况中，动物可能永远不能达到其没有遭受应激时将能达到的身高。在包括人在内的幼年(从婴儿期至其仍然进行生长的整个生命时期)哺乳动物中可观察到这种现象。虽然希望能确保补偿生理或心理应激期间降低的生长，但是，追赶生长不能过度也是很重要的，这是因为有迹象表明十分迅速和/或十分过度的追赶生长，特别是嬰儿期的追赶生长可能伴有未来肥胖的风险。因此，本发明的目的是提供一种适于促进曾遭受生理或心理应激的幼年哺乳动物最佳的il^生长的制剂。本发明的概述在导致本发明的一些研究中，本发明的发明人出乎意料地观察到服用特定的成分组合可促进曾遭受应激的幼年哺乳动物的i!A生长。因此，第一方面，本发明提供了一种用于促进追赶生长的营养制剂，其包含含有脂肪酸的脂类源、含量为组合物中脂肪酸的至少0.01%的n3长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)、数量至少为0.001g/g制剂的益生纤维和数量为10M0"cfii/g制剂的益生菌林。在第二方面，本发明提供了n3长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)、益生纤维和益生菌林用于制备促进患病和恢复期幼年哺乳动物的追赶生长的营养制剂或药物应用。本发明进一步提供了一种促进患病或恢复期幼年哺乳动物的il^t生长的方法，其包括给需要其的幼年哺乳动物施用治疗有效量的包含n3LC-PUFA、益生纤维和益生菌林的制剂。本发明的一个优点是提供了促进追赶生长的可能性，其不使用合成激素，而是使用协同的食品级成分的组合。另外，经受应激的幼年哺乳动物常常患有厌食症并且不愿意或不能消耗大量卡路里；本发明的一个优点是在不增加卡路里摄入量、具有平衡的无脂肪和脂肪体重以及不会促进肥胖的情况下提供了促进追赶生长的机会。图1表示了分娩后天数(PND)为15-21天的接受不同饮食的6组大鼠的体重评估。图2表示从PND21-36天，图1中所示的相同大鼠组的体重评估。图3表示从PND21-36天，相同大鼠组的摄食情况。图4表示在PND36天，六组大鼠以g/cm2为单位的体重指数。图5表示在PND36天，六组大鼠以g为单位的附睾(epididimal)和腹膜后脂肪垫重量。本发明的详细描述在本说明书中，下面的术语具有以下给出的含义"益生菌林"指的是活的微生物祠料添加物，其通过改善宿主动物的肠内微生物平衡而对宿主动物产生有益影响(得自"人和动物中的益生菌(ProbioticsinManandAnimals)'，，J.ApplBacteriol.66:365-378，1989)。"益生元"指的是通过选择性刺激结肠中一种或有限数目细菌的生长和/或活性来对宿主产生有益影响，从而改善宿主健康的不易消化的食物成分(得自"人结肠微生物区的饮食调节引入益生元的概念(DietaryModulationoftheHumanColonicMicrobiota:IntroducingtheConceptofPrebiotics)"，J.Nutr.125:1401-1412,1995)。"幼年哺乳动物"指的是从出生至所涉及种属哺乳动物达到其完美身高的年龄的包括人和伴侣动物在内的任何哺乳动物。所述益生菌林优选地是乳酸杆菌属或双岐杆菌属菌林。适宜的乳酸杆菌属菌林包括得自ValioOY，芬兰的鼠李糖乳酸杆菌(Lactobacillusrhamnosus)ATCC53103和副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)CNCM1-2116，特别优选后者。适宜的双岐杆菌属菌林包括得自Morinaga，日本的长双岐杆菌BB536、得自ChristianHansenofDenmark的商标为Bb12的乳双歧杆菌的菌林和乳双歧杆菌CNCM1-3446。可以使用菌林的组合，特别优选乳酸杆菌属和双岐杆菌属的组合。所选择的菌林或菌株组合可以以通过冷冻干燥或喷雾干燥获得的粉末的形式被包括在所述制剂中。或者，该营养制剂还可以包含可发酵的食品如奶或谷类并且可以用所述益生菌林来发酵该食品。益生纤维可选自低聚果糖、低聚半乳糖、低聚唾液糖(sialo-oligosaccharide)、寸氐聚木津唐(xylo-oligosaccharide)、菊粉、阿才立伯股、瓜尔胶、抗性淀粉(resistantstarch)、得自奶的寡糖以及其混合物。优选的益生纤维是低聚果糖、菊粉、阿拉伯胶和低聚半乳糖，特别是70至95%低聚半乳糖和30至5%低聚果糖和40至60%阿拉伯胶、30至40%低聚果糖和10至20%菊粉的混合物。适宜的低聚半乳糖是BorculoDomoIngredients以商标VivinalGOS10销售的物质。适宜的低聚果糖是OraftiS.A以商标RaftiloseP95销售的物质。适宜的菊粉是由OraftiS.A以商标RaftilineHP销售的物质。适宜的阿拉伯胶是CNI以商标FiberGumP销售的物质。益生纤维或纤维混合物的存在总量优选为0.02-0.05g/g制剂。该制剂包含至少一种n-3LC-PUFA如C20或C22n-3脂肪酸。该C20或C22n-3LC-PUFA的存在量优选为所述制剂中所有脂肪酸重量的至少0.1%。n-3LC-PUFA优选是二十二碳六烯酸(DHA，C22:6，n-3)。所述制剂还优选地包含n-6多不饱和脂肪酸如C20或C22n-6脂肪酸。适宜的n-6LC-PUFA是花生四烯酸(AA，C20:4n-6)。C20或C22n-6LC-PUFA的存在量优选为该制剂中所有脂肪酸重量的至少0.1%。n6:n3的比例优选为1:2至8:1，更优选为4:1至8:1。LC-PUFA的来源可以是例如卵脂类、真菌油、低EPA鱼油或海藻油(algaloil)。所述制剂可以以营养添加物的形式存在或者其可以提供全部营养。用于本发明营养制剂的适宜基质的实例有奶、酸奶、凝乳、乳酪、发酵乳和乳制品、以发酵的谷类为基础的产品、以奶为基础的粉末、用于口服和管祠的嬰儿配方和组合物。在一个优选的实施方案中，本发明提供了一种嬰儿配方或儿科营养制剂。除上述协同的成分组合外，其还可以包含蛋白源和/或碳水化合物源。蛋白源可以是任何适宜的饮食蛋白；例如动物蛋白(如乳蛋白、肉蛋白、卵蛋白)、植物蛋白(如大豆、小麦、水稻或豌豆蛋白)、游离氨基酸混合物、或其组合。特别优选乳蛋白如酪蛋白和乳清。在儿科制剂一个优选的实施方案中，蛋白源提供了该组合物能量的7至14%。对于儿科制剂而言，脂质源优选地提供了该制剂能量的30%至50%。组成脂质源的脂类可以是任何适宜的脂肪或脂肪混合物。植物脂肪是特别适宜的；例如豆油、棕榈油、椰子油、红花油、向日葵油、玉米油、芸莒油、卵磷脂等。如果需要的话，也可以加入动物脂肪如乳脂。脂肪源优选包含至少15%中链甘油三酯类并且该脂肪酸的组成是20至40%的饱和脂肪酸、45至60%的单不饱和脂肪酸和10至25%的多不饱和脂肪酸。如果该儿科制剂包含碳水化合物源，则该碳水化合物源优选提供了该制剂能量的40%至60%。可以使用任何适宜的碳水化合物或碳水化合物混合物，例如蔗糖、乳糖、葡萄糖、果糖、玉米糖浆固体和麦芽糖糊精。可以以常规方式在该制剂中包含适宜的维生素和矿物质以满足适宜的指导。如果需要的话，可以向该制剂中混入一种或多种食品级乳化剂，例如单-二甘油酸酯的二乙酰基-酒石酸酯、卵磷脂和单-和二-甘油酸酯。类似地，还可包括适宜的盐类和稳定剂。该制剂优选进行肠道给药，例如以用于用水重构的粉末的形式进行给药。被重构的制剂可以被口服给药或用鼻胃管来进行给药。其可以以任何适宜的方式来进行制备，例如可以通过将饮食性蛋白源、碳水化合物源和脂肪源以适宜的比例掺合到一起来进行制备。如果需要的话，在该掺合物中可以包含乳化剂。可以在这时加入维生素和矿物质，但是通常在稍后加入以避免热降解。可以在掺合前，将任何亲脂性维生素、乳化剂等溶解到脂肪源中。然后，可以混入水(优选已经进行过反渗透的水)从而形成一种液体混合物。水的温度适宜地为约5(TC至80。C以帮助所述成分进行分散。可以使用可通过商业途径获得的液化剂来形成所述液体混合物。然后，将该液体混合物匀化；例如分两步进行匀化。然后，可以对该液体混合物进行热处理以降低细菌负载量。例如，可以在约5秒至5分钟内将该液体混合物迅速加热至约80。C至约150°C。其可以通过蒸汽喷射、高压灭菌器或热交换器；例如板式热交换器来进行。然后，可以将该液体混合物冷却至约60。C至约85。C;例如通过瞬时冷却来进行冷却。然后，可以将该液体混合物再次匀化；例如分两个阶段进行匀化，在第一阶段，在约7MPa至约40MPa下进行匀化，在第二阶段，在约2MPa至约14MPa下进行匀化。然后，为了加入任何热敏感的组分，如维生素和矿物质，可以将该匀化的混合物进一步冷却。这时，适宜地使该匀化组合物的pH和固体含量符合标准。将该进行了勻化的混合物转移到适宜的干燥装置如喷雾干燥器或冷冻干燥器中并将其转化成粉末。该粉末应当具有低于约5%重量的水分含量。这时，可以通过干法混合方^f更地加入所述的益生菌才朱。如果希望制备一种液体制剂，则优选将该匀化的混合物无菌填充到适宜的容器中。容器的无菌填充可以通过将被匀化的混合物预热(例如至约75至85°C)，然后向该匀化混合物中注射蒸汽以将其温度升至约140至160°C;例如约15(TC来进行。然后，将被匀化的混合物冷却(例如通过瞬时冷却)至约75至85'C。然后，将该被匀化的混合物匀化，进一步将其冷却至约室温并将其填充到容器中。用于进行这种性质的无菌填充的适宜装置可以通过商业途径获得。液体配方可以为具有约10至约14%重量固体含量的即可使用的配方形式或者可以为浓缩物形式；其固体含量通常为约20至约26%重量。可以向该液体配方中加入矫味剂。在液体配方的情况中，所述益生菌林优选地被独立包装供给，用于在该液体制剂临被消耗前混合。喂给幼年哺乳动物所需的制剂数量将根据诸如患者的情况、体重和年龄、以及该制剂是否是唯一的营养源之类的因素来进行变化。一般而言，给予足够的制剂以为患者提供1至4g/kg体重/天的补充有如上所示数量的本发明成分的蛋白。如果该营养制剂被用作其它食品的添加物，则每天被给予的营养制剂数量可以相应地降低。用下面的非限制性实施例进一步对本发明进行说明。实施例1下面给出了本发明儿科营养制剂组成的一个实例。给出这种组成仅仅是为了进行说明。该配方具有下面的组成(每100g粉末)总脂肪18.3g，总蛋白13.9g,总碳水化合物59.2g，富含AA的油(真菌的)0.2g，富含DHA的油(低EPA鱼油)0.2g，阿拉伯胶/FOS/菊粉(51。/。/34。/。/15。/。)12g，副干酪乳杆菌CNCM1-2116(Nestle,喷雾干燥的粉末，10E12cfu/g)O.lg，长双岐杆菌BB536(Morinaga，喷雾干燥的粉末，5xlOE12cfu/g)O.lg，钠222mg，钾500mg，氯370mg,磷278mg，钩417mg，镁53mg，锰231ng，维生素A680IU，维生素D180IU，维生素E6.8IU，维生素C36mg，维生素Kl18ng，维生素Bl0.27mg,维生素B20.36mg,维生素B60.36mg,烟酸2.7mg，叶酸91ng，泛酸1.4mg,维生素B120.68ng，生物素6.8ng，胆碱110mg,牛磺酸36mg,肉毒碱18mg，铁4.5mg，碘36吗，铜0,36mg和辞4.5mg。通过将221g粉末与779ml水混合来将该配方重构，从而获得1L即可饮用的制剂。可以对上述组成进行改变以适应关于特定成分数量的国家官方指令。可以根据年龄以足量加入其它痕量元素(例如硒、铬、钼、氟)。实施例2下面的实验证明了对用本发明的营养制剂、添加了本发明组合物的单个组分的营养制剂以及未添加的营养制剂饲养的应激新生大鼠的影响。动物初次怀孕的雌性Long-EvansHooded大鼠购自Janvier(法国)，在其妊娠第10和11天时抵达动物护理设施。将其在恒定的温度和湿度下单独饲养至分娩，并且给其维持12:12的黑暗:光照循环。使其自由进食进水。在该方案进行期间维持祠养条件不变。在分娩后一天(产后第2天-PND2)，将母鼠从其产仔的笼子中取出并确定幼仔的性别。将标准化的一窝8只雄性幼仔随机分配进行抚养。新生儿应激将母鼠以及其幼仔分配到两种饲养条件之一中l)母体分离组，在PND2至14，每天使幼仔与母亲分离180分钟(MS)，或2)触摸对照，每天进行操作(称重和15分钟触摸)，但是不进行母体分离(NS)。在9am,将母鼠从其居住的笼子中取出并在3小时的分离期间(MS母鼠)或者在15分钟的操作期间(NS母鼠)将其保留在等候笼中。将各MS幼仔从其窝里取出、称重并作为一组将其放在毗邻房间中隔离的笼子中。将该隔离的笼子保持在32.0士0.5。C下。在分离期结束时，将幼仔放回到其居住的笼子中并在将其与养育其的母亲放到一起之前，将其在赃褥草上滚动。类似地对得自NS组的幼仔进行处理，但不进行3小时的分离，而是温和地对其触摸15分钟。有5组MS幼仔和1组NS幼仔，各组由8只幼仔组成。一周一次地用清洁的褥草代替其居住的笼子中50%的赃褥草。实验方案5个MS组中的所有幼仔在PND15时都完全与养育其的母亲分离，断奶，进食对照饮食或添加饮食1至4之一。使得自这些组各组的幼仔居住在一起(5只动物/笼)。NS组仍然与其母亲生活在一起直至PND21。从PND15至21，每天监测所有幼仔的体重。在PND21，将NS组的幼仔断奶，使其进食对照饮食。然后，从那时起直至PND36该研究结束时，所有的幼仔都独立居住。从PND15至PND36，MS组的幼仔继续接受其从断奶时开始食用的饮食。每天早晨将其食物代之以新鲜批次并且所有的幼仔都随意进食。饮食从PND15直至PND36，用营养上进行了调整的半合成饮食(改良的AIN93G)对MS组的动物进行饲养，该々欠食的组成如下面的表1中所示。进行了添加的饮食包含一种或多种下面的功能性组分副干酪乳杆菌CNCM1-2116(4x1010cfu(位于0.8mlspent培养基中)/100g饮食);0.4g/100g々欠食菊粉(RaftilineHP,OraftiSA，比利时)，3.6g/100g饮食GOS(VivinalGOS10，BorculoDomoIngredients,荷兰)，2g/100g々欠食花生四烯酸(ARASCO⑧Martek，USA)和2g/100g饮食二十二碳六烯酸(DHASCOMartek，USA)。对照饮食在spent培养基中包含代替益生菌的新鲜MRS、乳糖(Fluka，61340)和代替益生元的数量增加的麦芽糖糊精(GlucidexD12，RoquetteFreres，法国)和代替二十二碳六烯酸和花生四烯酸的数量增加的可可脂和玉米油。同样，仅包含本发明组合物的一种成分的添加々欠食包含适宜的安慰剂成分。表1.饮食的组成<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>统计学将数据表示为均值士SEM的形式。在各组中检查数据的常态和同方差性。在每一个年龄，都用单侧ANOVA然后用Fisher最小显著差异(LSD)对得自PND15至PND21的体重、体重指数和脂肪垫重量数据进行比较以对组间差异进4亍评估。通过重复测量ANOVA和LSD来对得自PND21的体重和摄取量曲线进行比较以对组间差异进行评估。结果结果如附图所示。从图l可以看出，NS组的幼仔在PND15至21期间继续正常生长，而5个MS组的体重都降低直至PND17，然后恢复生长，其中用本发明组合物(添加饮食l)饲养的组表现出最有效的追赶生长。从PND21至36，接受本发明组合物的组的这种趋势加速，在PND36时达到与NS组十分相似的重量(图2)。相比而言，可以看到用对照饮食(即与NS组相同的饮食)饲养的MS组在PND36时体重显著降低。从图2还可以看出，接受添加々欠食4(仅益生菌)的MS组最后也达到了与对照NS组相当的重量。由图3可以看出其原因，图3表明，这一组的摄食量从PND21至36始终高于所有其它组。但是，这种较高的热量摄取似乎不能直接转化成生长。相比而言，接受添加饮食1的MS组的摄食量比接受添加饮食4的MS组低并且与包括接受对照饮食在内的其它组的摄食量相当。此外，从图4和5可以看出，接受添加饮食l的MS组表现出的追赶生长并不伴有体重指数或总机体脂肪质量的增加，因为这些参数与未应激组的参数相当。我们得出的结论是，包含本发明成分的组合的营养制剂可有效促进其生长由于生理或心理应激曾被阻滞的幼年哺乳动物的追赶生长并且该组合是协同性的，因为单独给予的成分的作用总和低于该组合的作用。此外，所述il^t生长并不伴有体重指数的不成比例的增加，因此，其不会增加以后肥胖的风险。权利要求1.一种用于促进追赶生长的营养制剂，其包含含有脂肪酸的脂类源、含量为制剂中脂肪酸的至少0.01％的n3长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)、数量为0.0001至0.05g/g制剂的益生纤维和数量为103-1011cfu/g制剂的益生菌株。2.权利要求l所述的制剂，其还包含数量为该制剂中脂肪酸的至少0.01%的n6LC-PUFA。3.权利要求1或2所述的制剂，其中所述益生菌林是乳酸杆菌。4.权利要求3所述的制剂，其中所述乳酸杆菌是副干酪乳杆菌CNCM1-2116。5.前面任意一项权利要求所述的制剂，其中所述益生纤维的存在量为0.02至0.05g/g制剂。6.前面任意一项权利要求所述的制剂，其中所述益生纤维是低聚果糖、菊粉、低聚半乳糖、阿拉伯胶或其混合物。7.权利要求6所述的制剂，其中所述的益生物质是40至60%阿拉伯胶、10至20%菊粉和30至40%低聚果糖的混合物。8.前面任意一项权利要求所述的制剂，其中n6LC-PUFA:n3LC-PUFA的比例为1:2至8:1。9.权利要求2至8中任意一项所述的制剂，其中所述n3LC-PUFA是二十二碳六蹄酸。10.前面任意一项权利要求所述的制剂，其中所述n3LC-PUFA是二十二碳六烯酸。11.前面任意一项权利要求所述的制剂，其是一种儿科营养制剂。12.n3长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)、益生纤维和益生菌林用于制备用于促进患病和恢复期幼年哺乳动物的il^生长的营养制剂或药物的应用。13.权利要求12所述的应用，其中所述制剂包含含有脂肪酸的脂类源并且n3LC-PUFA的存在量为脂类源中脂肪酸的至少0.01%。14.权利要求12或13所述的应用，其中所述营养制剂或药物还包含n6LC-PUFA。15.权利要求14所述的应用，其中所述n6LC-PUFA的存在量为脂类源中脂肪酸的至少0.01%。16.权利要求12至15中任意一项所述的应用，其中所述益生纤维的存在量为0.0001至0.05g/g制剂。17.权利要求12至16中任意一项所述的应用，其中所述益生菌抹的存在量为103-1011cfu/g制剂。18.权利要求12至17中任意一项所述的应用，其中所述益生菌林是乳酸杆菌。19.权利要求18所述的应用，其中所述乳酸杆菌是副千酪乳杆菌CNCM1-2116。20.权利要求12至19中任意一项所述的应用，其中所述益生纤维的存在量为0.02至0.05g/g制剂。21.权利要求12至20中任意一项所述的应用，其中所述益生纤维是低聚果糖、菊粉、低聚半乳糖、阿拉伯胶或其混合物。22.权利要求21所述的应用，其中所述益生物质是40至60%阿拉伯胶、10至20%菊粉和30至40%低聚果糖的混合物。23.权利要求12至22中任意一项所述的应用，其中n6LC-PUFA:n3LC画PUFA的比例为1:2至8:1。24.权利要求12至23中任意一项所述的应用，其中所述n3LC-PUFA是二十二^P灰六烯酸。25.权利要求14至24中任意一项所述的应用，其中所述n6LC-PUFA是花生四烯酸。全文摘要本发明涉及一种包含n3长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)、益生纤维和益生菌株的营养制剂，其成分以协同方式一起起作用来促进其生长由于遭受生理或心理应激曾被阻滞的幼年哺乳动物的追赶生长。文档编号A23L1/29GK101299934SQ200680041320公开日2008年11月5日申请日期2006年10月2日优先权日2005年10月5日发明者C·L·加尔奇亚-罗德纳斯,G·贝尔贡泽利申请人:雀巢技术公司