含有核黄素和芝麻素类的组合物的制作方法

专利名称：含有核黄素和芝麻素类的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及可增强核黄素生理活性的组合物且含有核黄素和芝麻素类的组 合物，更详细地说，涉及可预防及/或减轻各种疾病及外伤所引起的疼痛的具 有镇痛作用的组合物、或可预防及/或减轻肉体及/或精神疲劳的具有抗疲劳 作用的组合物及含有该组合物的饮食品。
背景技术：
核黄素(Riboflavin)也称为维生素B2 (Vitamin B2)，是在维生素中被分 类为水溶性维生素的生理活性物质。此核黄素对包括白内障在内的许多眼部疾 病的预防、治疗很有帮助，也可改善眼部充血、干燥、瘙痒、眼睛疲劳的症状 (自由百科全书维基百科《Wikipedia》因特网 htt。:〃.ia. witoedia. org/)。此外，已报道作为核黄素的生理活性，核黄素类 化合物具有免疫功能赋活作用(专利文献l)，核黄素类化合物作为中毒性休克 的预防治疗剂行之有效(专利文献2)。
而且，有关于核黄素的生理活性为镇痛作用的报道。例如，通过大量摄取 核黄素，从而具有预防偏头痛的效果(非专利文献l)，对于炎症类疼痛，以3 100mg/kg浓度进行腹腔内给药时，镇痛作用呈用量依赖性，但对神经性疼痛无 效(非专利文献2)，以1 50mg/kg浓度口服给药时，在福尔马林试验中的镇痛 效果25mg为最强，即使增加到75mg，其效果也不增加等(非专利文献2， 3)。
此外，已知包括维生素B2在内的维生素B族的抗疲劳作用、即维生素B族 的疲劳恢复及疲劳预防作用(专利文献3)。且用于在疲劳时、皮肤干燥时摄取 的含有维生素Bi、维生素B2和维生素Bs的营养补助食品、保健饮料也有市售。
专利文献1日本特开平5_201864号公报
专利文献2日本特开平10-29941号公报专利文献3日本特开2Q05—23008号公报 非专利文献l Schoenen，J., NEUROLOGY, 50， 466-470， 1998 非专利文献2 European Journal of Pharmacology, 421， 157-164, 2001 非专利文献3 European Journal of Pharmacology, 492， 35-40， 2004发明内容如上所述，虽已有关于核黄素的生理活性的种种报道，但其效果还很不充 分，主要是以补充其他化合物的生理活性为目的来配合核黄素，而关于增强核 黄素自身的生理活性，至今未有提示，也未有公开。且如上所述，虽已知维生 素B族的抗疲劳作用，但关于核黄素(维生素B2)的具体的抗疲劳作用还没有 任何公开。本发明的目的在于提供对人、动物等安全，因此可持续摄取且可增强核黄 素的生理活性的组合物，特别是饮食品。本发明者为解决上述课题锐意研究，结果令人惊讶地发现将核黄素与芝麻 素类同时摄取，可增强核黄素的生理活性。具体地说，如上所述，发现单独将 核黄素口服给药时其镇痛作用的效果有极限，但通过与芝麻素一同摄取，核黄素的效果得到增强，且可发挥单独摄取核黄素时所不能获得的镇痛效果。且本发明者使用为了评价疲劳度而被作为模型的浸水负荷模型动物所进行的游泳试验来进行评价的结果，发现核黄素具有抗疲劳作用。并且发现通过并用芝麻素类，其抗疲劳作用会产生单独摄取核黄素所起不到的作用，且发挥核黄素和芝麻素类的优异的协同作用，从而完成了本发明。即本发明涉及如下所述的包括饮食物的组合物。1. 组合物，其含有核黄素和芝麻素类。2. 上述1中所述的组合物，其中，核黄素的总量为l时，芝麻素类总量的 比例(重量比)为4.5以下。3. 上述1或2中所述的组合物，其中，芝麻素类是含有1重量％以上芝麻素类的芝麻素类浓缩物。4. 上述1 3中任一项所述的组合物，其中，芝麻素类是芝麻素及/或异芝麻素。5. 上述1 4中任一项所述的组合物，其中，核黄素是核黄素磷酸钠或核黄素四丁酯中的任一个。6. 上述1 5中任一项所述的组合物，其为口服用组合物。7. 镇痛剂，其中，含有作为有效成分的核黄素和芝麻素类。8. 抗疲劳剂，其中，含有作为有效成分的核黄素。9. 抗疲劳剂，其中，含有作为有效成分的核黄素和芝麻素类。10. 芝麻素类的使用，其用于提高核黄素的生理活性。


图1表示芝麻素类对镇痛作用的影响。图2表示由核黄素(维生素B》和芝麻素类组合所起的镇痛作用。 图3表示由核黄素(维生素B2)和芝麻素类组合所起的镇痛作用的协同效果。图4表示由核黄素和芝麻素类组合所起的抗疲劳作用。 图5表示由核黄素和芝麻素类组合所起的抗疲劳作用。
具体实施方式
(核黄素)本发明的核黄素(本说明书中也标记为'维生素B2')，包括核黄素衍生物、或这些衍生物的药理学上允许的盐。在此，核黄素衍生物或其药理学上允许的盐，具体地说可为黄素单核苷酸(F画)、黄素腺嘌呤二核甘酸(FAD)、核黄素四 丁酸酯、核黄素磷酸钠(维生素B2磷酸酯)、磷酸核黄素的monodi,ethanolamine 盐、核黄素四丁酸酯(维生素B2四丁酯)去色黄素(Leucof lavin )、 monohydroflavin、去色黄素磷酸酯(Xeucoflavin phosphate ester)、去色黄 素单核苷酸(Leucoflavin mononucleotide )、或去色黄素腺嘌呤二核甘酸 (Leucoflavin adenine dinucleotide)等，但其中优选使用吸收性高的核黄 素磷酸钠、稳定性优异的核黄素四丁酸酯。本发明中，上述核黄素中的任一种均可单独或多个同时使用。且对上述物质的制造方法不作任何限定，可使用天 然提取品、微生物发酵品、合成品中的任一种。 (芝麻素类)
本发明的芝麻素类包括芝麻素及其类似物。上述芝麻素类似物中除表芝麻
素以外，还有例如日本特开平4一9331号公报中记载的二氧杂二环[3.3.0]辛 烷衍生物。芝麻素类的具体例，例如芝麻素、芝麻酚素(sesaminol)、表芝麻 酚素(印isesaminol)、芝麻林酚素(sesamolin)等，这些物质的立体异构体 或外消旋体可单独或混合使用，本发明中，可优选使用芝麻素及/或表芝麻素。 此外，芝麻素类的代谢体(例如日本特开2001 — 139579号公报中记载)，只要
能显示本发明的效果，即为本发明的芝麻素类中所包含的芝麻素类似物，可用 于本发明中。
本发明中使用的芝麻素类，不受其形态、制造方法等任何限制。例如，芝 麻素类选择芝麻素时，通常可使用通过公知的方法(例如，日本特开平4一9331 号公报中记载的方法)从芝麻油中提取的芝麻素(为芝麻素提取物或纯化物)， 但也可直接使用市售的芝麻油(液状)。但是，使用芝麻油时，由于有时芝麻油 特有的风味感官评价不受欢迎，所以，优选使用从芝麻油中提取的无味无臭的 芝麻素提取物(或芝麻素纯化物)。此外，使用芝麻油时，因芝麻素含量低，所 以，要配合适合量的芝麻素时，所需要的含有核黄素(维生素B2)的组合物的 每给药单位的体积过大，会给摄取带来不便。特别是为用于口服给药而形成制 剂时，制剂(片剂、胶囊等)过大，会使摄取产生障碍。因此，从摄取量越少 越好的观点出发，优选使用芝麻油中的芝麻素提取物(或芝麻素纯化物)。
由此，芝麻素类优选使用芝麻素类的浓縮物。浓缩的程度，可根据芝麻素 类的种类、配合的组合物的形态适当设定，但通常优选使用浓缩到芝麻素类为1 重量％以上的芝麻素类浓縮物。芝麻素类浓缩物中的芝麻素类含量，更优选20 重量％以上，进一步优选50重量％以上，更进一步优选70重量％以上，最优 选浓縮(纯化)到90重量％以上的浓縮物。
本发明中使用的芝麻素类，如上所述，因是从以往的食品中发现的化合物 或其类似化合物，所以安全性方面很优异，这是显而易见的。这从如下实验也可证明，以芝麻素2. 14g/day/kg对7周龄的ICR雄性小鼠连续给药(口服给药) 2星期，未发现任何异常症状。
对于本发明中使用的芝麻素类、特别是芝麻素及/或表芝麻素，本申请人 曾发现其具有调节自律神经的作用(国际公开W02004—105749)，但是对于本发 明的具有增强镇痛作用的作用、抗疲劳作用却一无所知，对于其使核黄素的生 理活性增强的结论也从未有公开、提示。 (镇痛作用及药剂)
本发明作为预防及/或减少人或动物、特别是人的疼痛的镇痛剂非常有效。 在此，动物是指农场动物、宠物动物及实验动物，具体地说，农场动物是指牛、 马、猪、山羊、绵羊等的家畜，鸡、鸭、鹌鹑、火鸡、鸵鸟等的家禽，鲫鱼、 鲫的幼鱼、加吉鱼、竹荚鱼、鲤鱼、虹鳟、鳗鱼等鱼类等需在农场上饲养的动 物；宠物动物是指狗、猫、狨猴、小鸟、仓鼠、金鱼等所谓的观赏动物，也称 为伴侶动物；实验动物是指小鼠、大鼠、豚鼠、比格犬(Beagle)、迷你猪、猕 猴、食蟹猴等在医学、生物学、农学、药学等领域中用于研究的动物。
本发明的镇痛剂，以一过性的轻度疼痛到慢性难忍的巨痛为对象。对于疼 痛来说，通常通过使用镇痛剂可控制疼痛，但其效果也未必充分，对于关节痛、 神经痛、腰痛等慢性疼痛(疼痛)而言，只不过能一时性地抑制疼痛，或者由 于持续服用镇痛剂，带来很多产生胃肠障碍、肾脏障碍、肝脏障碍等副作用的 问题。此外，此关节痛、神经痛、腰痛等的疼痛有随增龄而增加的趋势，近年 来伴随急速的老龄化，不再仅仅要求单纯地改善除去疼痛，对预防疼痛的社会 需求也在不断增高。
本发明的镇痛剂，对上述的各种疼痛及伴随这些疼痛的疾病非常有效。本 发明的镇痛剂，通过并用芝麻素类可协同增强核黄素的镇痛作用，与以往的镇 痛剂相比可发挥优异的镇痛作用。并且是以长年作为饮食品摄取的核黄素和芝 麻素类为有效成分，所以无副作用，可持续摄取。因此，通过日常摄取，不仅 能期待减轻慢性疼痛，还可预防伴随疼痛的疾病(月经痛等)，成为新型的镇痛 剂。因感觉强烈的人和感觉不强烈的人对疼痛的感觉很有差别，没有客观的尺 度，是正常情况还是病态无法明确判断的情况较多，所以不希望作为以往的镇痛剂那样通过药剂给药进行治疗，而是希望其为可日常摄取的饮食品的形态， 鉴于以上情况，本发明也非常有效。 (抗疲劳作用及药剂)本发明的组合物除上述镇痛作用以外，作为人、动物的抗疲劳剂也很有效。 在此，动物是指成为上述镇痛剂的对象的动物，但其中，本发明的抗疲劳剂可 用于能感知疲劳的人、农场动物、宠物动物及实验动物，特别优选用于人。农 场动物是指牛、马、猪、山羊、绵羊等的家畜、赛马、猎犬等，宠物动物是指 狗、猫等，实验动物是指小鼠、大鼠、豚鼠、比格犬、迷你猪、猕猴、食蟹猴 等在医学、生物学、农学、药学等领域中用于研究的动物。疲劳是指连续给与身体或精神上的负荷时所出现的一时性的身体及精神上 执行力下降的现象，执行力下降，是指身体上及精神上的工作能力的质或量的 下降。本发明的"疲劳"，包括慢性疲劳综合症和过劳死。本发明的抗疲劳剂是指使上述疲劳减弱的作用、使疲劳恢复的作用，具体 地说，指提高运动、工作部位(包括脑)的劳动持续时间及抑制相同运动量、 工作量下疲劳物质的增加(提高耐力'增强体力)，改善即使运动、工作部位 不疲劳而其脑、神经等却感到疲劳的状态，以及促进运动、工作部位的疲劳状 态恢复到通常状态的效果。且本发明的抗疲劳剂所针对的目的慢性疲劳综合症，是指给日常生活带来 障碍的长期的全身疲劳感、倦怠感、低烧、淋巴结肿大、肌肉痛、关节痛、精 神神经症状等基本的症状。本发明的抗疲劳剂可治疗此慢性疲劳综合症，即缓 和慢性疲劳综合症的各种症状使其向正常状态转移。并且本发明的抗疲劳剂所 针对的目的过劳死，是指在重度的过劳状态下，尽管已不能保持身体的活力， 但却不能充分感知疲劳，其结果使脑血管疾病、心脏疾病发病导致永久性不能 劳动或死亡的状态。本发明的抗疲劳剂可治疗慢性疲劳综合症，并可预防由此 引起的过劳死。本发明的抗疲劳作用，即"抗疲劳剂"的效果，例如可通过以下试验证实， 即浸水睡眠剥夺试验中游泳时间的测定。使用浸水伺养条件下不能取得充分的 睡眠、休息的姿势，在肉体上精神上均得不到休息的环境下饲养的小鼠，使其在负重状态下游泳，通过测定其游到鼻子没入水中IO秒以上为止的时间，确认 其疲劳度。由于此动物模型是肉体及精神疲劳的模型，所以，如果通过投给被 测物质可延长游泳时间的话，即可确认为可预防或改善身体上及精神上的疲劳 以及身体上及精神上的疲劳所导致的肌肉痛等的痛苦，增强体力从而延长到达 精疲力竭的时间，在疲劳状态下维持身体活力等，对疲劳有抗性。
本发明的抗疲劳剂，通过服用该抗疲劳剂而不易感到疲劳，且具有恢复疲 劳的效果。即在体育运动等肌肉运动过程中感到肉体疲劳时、在计算操作等的 连续作业中感到精神疲劳时服用，可期待疲劳的恢复，这已毋庸置疑，在预先 服用之后再进行劳动、体育运动等时也可预防疲劳。且通过在进行体育运动之 前或过程中摄取，可期待提高耐力。而且通过日常摄取，还可预防精神疲劳及 由精神疲劳所引起的疾病。
(含有核黄素和芝麻素类的组合物)
由于本发明是在核黄素中含有芝麻素类，所以可使核黄素的生理活性、例 如镇痛作用、抗疲劳作用协同增强，同时可通过作为健康食品利用，通过各自 成分的生理作用，达到增进健康的目的。
本发明的含有核黄素和芝麻素类的组合物中，只要能期待其各自的生理作 用，对其配合量无限制。通常，核黄素可按厚生劳动省规定的日本人的营养需 要量来配合，具体地说，每l天成人男子为1.2mg，成人女子为1.0mg。另外， 由于还没有关于核黄素引起健康障碍的最大极限的报道，所以其配合量无上限， 但通常成人每1天应为100mg以下，优选50mg以下的程度。且配合的芝麻素类， 通常成人每1天应为1 200mg，优选5 100mg的程度。
另一方面，期待增强核黄素的生理活性，在核黄素中配合芝麻素类，用核 黄素换算(本说明书中，也标记为"核黄素当量")时，相对于核黄素的总量l， 配合的芝麻素类的总量比例按重量比为4.5以下，优选4.0以下，进一步优选
3.5以下。虽然预想为配合的芝麻素类的比例越高越能增强核黄素的作用，但如 不在上述的比例范围内，就得不到良好的协同效果。只要是能获得所需要的作 用例如镇痛作用、抗疲劳作用的协同效果的量，对配合的芝麻素类的下限值无 限制，可参考上述的日用量来配合。 一般来说，用核黄素换算时，相对于核黄素的总量l，芝麻素类的总量比例按重量比为0.01以上，优选0.5以上，更优 选0. 1以上，进一步优选1以上。
核黄素的生理活性之一镇痛作用中，已确认口服摄取核黄素当量为30mg的 核黄素磷酸钠和50mg或100mg的芝麻素类时，即重量比为核黄素芝麻素=1: 1.67或1: 3.33时，可提高核黄素磷酸钠的镇痛作用(实施例1、 2)。且本发 明者确认的核黄素的生理活性之一抗疲劳作用中，口服摄取核黄素当量为25mg 或50mg的核黄素磷酸钠和50mg的芝麻素类时，即重量比为核黄素芝麻素类 =1: 2或1: l时，可提高核黄素磷酸钠的抗疲劳作用，但口服摄取核黄素当量
为10mg的核黄素磷酸钠和50mg的芝麻素类时，即重量比为核黄素芝麻素类 =1: 5时，却不增强核黄素磷酸钠的抗疲劳作用(实施例3， 4)。
将本发明的组合物作为医药组合物利用时，其给药形态可用液剂、片剂、 颗粒剂、散剂、胶囊剂、干糖浆剂、丸剂等形态口服给药，也可用注射剂等的 形态给药，其形态可根据病情、其发展状况、其他的条件适当选择。此外，本 发明的有效成分核黄素(除核黄素四丁酯以外)为水溶性，芝麻素类为脂溶性， 所以，也可各自以其他形态摄取。具体地说，通过将核黄素的颗粒与水一同摄 取，同时摄取将芝麻素类溶解在油脂中而后填充的软胶囊的方法，或根据吸收 速度不同设置时间差来摄取的方法等，均可达到镇痛作用。
本发明组合物的给药量，也可根据对象、病情、其发展状况、其他给药形 态等条件适当选择，但以获得人(成人)为对象时的镇痛作用及/或抗疲劳作 用为目的而口服给药时， 一般可将1 200mg、优选2 100mg左右以1天1 3 次左右的频率连续给药。
本发明中，只要不影响其效果，除核黄素和芝麻素类以外，可配合任意所 需的成分。例如，除维生素E、维生素C等的维生素类、矿物质类、激素、营养 成分、香料等的生理活性成分以外，还可适当配合形成制剂时可配合的乳化剂、 紧张剂(等渗剂)、缓冲剂、助溶剂、防腐剂、稳定剂、抗氧化剂等。本发明的 组合物，如上所述，可作为镇痛剂及/或抗疲劳剂利用，但考虑到可加成或协 同地发挥核黄素(维生素B2)和芝麻素类具有的其他各种生理作用，所以，不 仅利用于上述医药组合物，还优选利用于健康食品。这里所说的健康食品，可列举为如胶囊剂、片剂一样，以本发明的含有核 黄素和芝麻素类的组合物本身为有效成分的制剂或食品，以及在一般的食品中， 将上述本发明组合物作为成分之一配合从而将对生物体具有的镇痛作用、抗疲 劳作用等各种功能赋予该食品中的功能性食品(包括特定保健用食品、条件特 定的保健用食品)。且进一步包括如下食品等，其特征在于，附有以用于预防乃 至于减轻生物体疼痛为目的、以减轻生物体疲劳或促进疲劳恢复为目的的标记， 且具有镇痛作用及/或抗疲劳作用。
含有核黄素和芝麻素类的健康食品，其形态无特别限制，例如可制成粉末 状、颗粒状、片剂状等的固体状；溶液状、乳液状、分散液状等的液状；或糊 状等的半固体状等的任意形态。
实施例
以下，通过试验例及实施例，更具体地说明本发明，但本发明不限于以下 内容。
试验例1.芝麻素类的镇痛作用
没有关于芝麻素类的镇痛作用的报道。因此，对芝麻素类的镇痛作用进行 了探讨。
作为镇痛作用试验，用将Moon等的醋酸扭体(Writhing)试验(Biol. Pharm. Bull. (2005))改变一部分后的方法进行。具体试验方法如下。从日本Clea公 司(Clea Japan, Inc.)购入Wistar系雄性大鼠(5周龄)，在1星期试验环境 下驯化后，将显示发育顺利的动物用于试验。在进行醋酸扭体(Writhing)试 验3天之前，将大鼠每组6只分成3组，对照组将橄榄油以5ml/kg的用量使用 探头口服给药，剩余2组将芝麻素类[芝麻素/表芝麻素混合物；芝麻素表芝 麻素(重量比)=5: 5]分别以50、 100mg/kg的用量溶解在橄榄油中，使用探 头口服给药。然后，在试验2天前同样给药，再在试验前一天的早晨、傍晚2 次，也就是总计4次给药。试验当天，对从前一天夜晚开始断食一夜的大鼠， 将生理盐水以5ml/kg 口服给药，在其1小时后，将含有1%醋酸的生理盐水以 lml/170g进行腹腔内给药，从给药之后开始，计算从给药开始30分钟以内的扭体(Writhing)次数。
其结果如图1所示。芝麻素类给药组(Sesamin50mg，Sesaminl00mg)与对 照组(Olive)相比，可看出一些扭体(Writhing)次数增加的趋势，证明芝麻 素类在醋酸扭体(Writhing)试验中不具有镇痛作用。
实施例l.核黄素(维生素B2)和芝麻素类的镇痛作用(1) 验证了芝麻素类提高核黄素(维生素B2)的镇痛作用。从日本Clea公司(Clea J即an，Inc.)购入Wistar系雄性大鼠(7周龄)，1星期试验环境下驯化后，将 显示发育顺利的动物用于试验。在进行醋酸扭体(Writhing)试验3天前将大 鼠每组6只分成4组，其中2组以5ml/kg橄榄油使用探头口服给药，剩余2组 与试验例1同样，将芝麻素类分别以50、100mg/kg的用量溶解于橄榄油(5ml/kg) 中，使用探头口服给药，与试验例1同样总计进行4次给药。在试验当天，对 从前一天夜晚开始断食一夜的大鼠，对照组以5ml/kg生理盐水口服给药，剩余 3组将维生素B2 (核黄素磷酸钠；nacalai tesque公司)按核黄素当量30mg/kg 的用量溶解于生理盐水中口服给药，根据试验例1，计算扭体(Writhing)次数。 其结果如图2所示。相对于对照组(01ive+Saline)的扭体(Writhing) 次数，在维生素82单独组(01ive+VB2)中显示降低的趋势，证明了维生素B2 的镇痛作用。与此维生素B2单独组(01ive+VB2)相比，在芝麻素类和维生素B2 的组合组(Sesamin50mg+VE2， Swsaminl00mg+VE2)中，在芝麻素类100mg/kg、 50mg/kg任一组中扭体(Writhing)次数均减少。证明通过与芝麻素类组合，维 生素B2的镇痛作用得到了增强。
实施例2.核黄素(维生素B2)和芝麻素类的镇痛作用(2) 证实了实施例l的重复性。从日本Clea公司(Clea Japan, Inc.)购入 Wistar系雄性大鼠(5周龄)，l星期试验环境下驯化后，将显示发育顺利的 动物用于试验。在进行醋酸扭体(Writhing)试验3天前将大鼠各组10 18 只分成4组，其中2组(1组、2组)将橄榄油以5ml/kg使用探头口服给药， 剩余2组(3组、4组)与实施例1同样将芝麻素类以100mg/kg的用量溶解 在橄榄油中，使用探头口服给药，与实施例1同样总计4次给药。试验当天， 对从前一天夜晚开始断食一夜的大鼠的4组中的2组(l组、3组)，将生理盐水以5ml/kg 口服给药，剩余2组(2组、4组)将维生素B2 (核黄素磷酸 钠；nacalai tesque公司)以核黄素当量30呢/kg的用量溶解在生理盐水中口 服给药，根据试验例1的方法计算扭体(Writhing)次数。
其结果如图3所示。相对于对照组(Olive+Saline)的扭体(Writhing) 次数，维生素B2单独组(01ive+VB2)中可看出减少趋势(抑制率10. 5%),芝麻 素类单独组(Sesamin+Saline)与试验例1同样未看出镇痛作用，但在维生素 B2和芝麻素类的组合组(Sesamin+VB2)中大幅度减少(抑制率26.6%)，可证明 维生素B2和芝麻素类的协同镇痛效果(Tukey多重比较检验的结果，维生素B2 和芝麻素类的组合组与对照组之间，P<0.05，与芝麻素类单独组之间，p< 0.01)。
实施例3.核黄素和芝麻素类的抗疲劳作用(1)
成为被测物质的核黄素及芝麻素类均与实施例1相同，即使用芝麻素/表
芝麻素混合物(芝麻素表芝麻素(重量比)=5: 5)及核黄素(核黄素磷酸 钠；nacalai tesque公司)。
通过浸水睡眠剥夺试验评价对疲劳的效果。评价用将Tanaka等的方法 (Neurosience， Let. 352， 159 — 162， 2003)改变一部分后的方法实施。即被 测动物使用8周龄的雄性Balb/c小鼠，以小鼠的平均体重均等的方式，l组9 只，按表1所示将小鼠分成7组。表1中核黄素的值，表示将使用的核黄素磷 酸钠换算成核黄素的值。其中，6组作为浸水睡眠剥夺应激组，代替地垫(纸片)， 通过将水温23。C的自来水放入伺养箱以使水深为7mm进行饲养，对小鼠实行浸 水睡眠剥夺。在2天的浸水睡眠剥夺中，将各个被测样品芝麻素1天1次、强 制口服给药2天。被测样品中，芝麻素类溶解于橄榄油中，核黄素溶解于蒸馏 水中。给药顺序按核黄素、芝麻素类的顺序，对照用蒸馏水、橄榄油强制口服 给药。
浸水饲养2天后，在小鼠的尾部加上相当于体重的8%的重物后使其游泳， 测定其游到没入水中IO秒以上为止的时间。浸水饲养组(浸水睡眠剥夺应激组) 的小鼠与通常饲养组的小鼠相比游泳时间縮短，但根据被测样品给药组小鼠能 在多大程度上抑制游泳时间的縮短，即可判定对疲劳的效果。表l
组i (com) 通常饲养对照组
组2 浸水饲养对照组
组3 浸水饲养核黄素组
组4 浸水饲养核黄桌组
组5 浸水饲养芝麻素组
组6 浸水饲养核黄素+芝麻素组
组7 浸水饲养核黄素+芝麻素组
蒸馏水+橄榄油
蒸馏水+橄榄油
核黄素25.0mg/kg+橄梭油
核黄^ 50. fl鹏/kg+橄榄油
蒸馏水+芝麻素5G. Gmg/kg
核黄尜25. Ou)g/kg +芝麻素50. Offlg/kg
核黄索50. Onig/kg +芝麻素50. Omg/kg
结果如图4所示。由图可看出，浸水饲养对照组的游泳时间与通常饲养对 照组比縮短了。另一方面，芝麻素、核黄素的给药组分别抑制了游泳时间的缩 短，通过将其同时给药，可协同地增强其效果。
实施例4.核黄素和芝麻素类的抗疲劳作用(2)
除了如表2所示将小鼠分成6组以外，与实施例3同样，测定核黄素和芝 麻素类的抗疲劳作用。表2中核黄素的值，表示将使用的核黄素磷酸钠换算成 核黄素的值。
表2
组l (cont) 通常饲养对照组
组2 浸水饲养对照组
组3 浸水饲养核黄素组
组4 浸水饲养芝麻素组
组5 浸水饲养核黄紧+芝麻紧组
组6 浸水饲养核黄素+芝麻素组
蒸馏水+橄榄油
蒸馏水+橄榄油
核黄素10. Omg/kg+橄榄油
蒸馏水+芝麻素50. 0mg/kg
核黄桌10. 0mg/kg+芝麻尜50. 0呢/kg
核黄索50. Omg/kg+芝麻素50. 0腿/kg
结果如图5所示。由图可看出，在芝麻素为50mg/kg，核黄素为10mg/kg时 未能发挥芝麻素和核黄素的协同效果。说明希望有协同效果时，相对于用核黄 素换算的核黄素的总量为1，芝麻素类的总量按重量比计算应比5. 0小。实施例5.制剂例 (制剂例l)颗粒剂 芝麻素 维生素B2 醋酸维生素E 二氧化硅 玉米淀粉
0. Olg 0. Olg 0. 25g 20. 5g 179. 0g
将以上粉体均一混合后，加入10%羟丙基纤维素 乙醇溶液100ml,根 据常法揉匀、挤出、干燥后获得颗粒剂。 (制剂例2)胶囊剂
60,0% 30.0% 0. 15% 0.51%
明胶 甘油
对羟基苯甲酸甲酯 对羟基苯甲酸丙酯 水
在含有上述成分的软胶， 获得l粒200mg的软胶囊。 芝麻素 维生素B2 甘油脂肪酸酯
小麦胚芽油 (制剂例3)片剂 芝麻素 维生素B2 淀粉
蔗糖脂肪酸酯 二氧化硅
〖剂皮膜中，将以下所示的组合物按照常法填充，
10. Omg 1. Omg 15. Omg 15. Omg
250mg
O.Olg O.lg , 9. 0g 9.0g将上述物质混合，用单冲式压片机压片，制造直径为9ram、重量为300mg 的片剂。
(制剂例4)保健饮料 呈味DL—酒石酸钠
琥珀酸 甜味液糖 酸味柠檬酸 维生素维生素C 芝麻素 维生素B2 维生素E 环糊精 香料 氯化钾
配合上述成分，加水至10升
(制剂例5)片剂 维生素B2
淀粉
羟丙基纤维素 二氧化硅
0. lg
0. 009g
800g
12g 10g
lg
3g 3g
5g
15ml
lg
0. 5g
。此保健饮料每1次约饮用100ml 。
0. lg 280g 2.0g 10. Og
混合上述物质，用单冲式压片机压片后制造直径为8mm、重量为250mg的片剂。
(制剂例6)保健饮料 果糖葡萄糖液糖 拧檬果汁
维生素B2
1.1kg
40g 5g
0.2g咖啡因 5g 环糊精 5g
香料 5g 配合上述成分，加水至10升。此保健饮料每1次约饮用100ml。 本发明的含有核黄素和芝麻素类的组合物，通过芝麻素类的并用摄取，而
具有协同发挥核黄素所具有的生理活性、例如镇痛作用、抗疲劳作用的效果，
对人、动物等安全，因此，本发明的组合物可持续摄取。
权利要求
1.组合物，其含有核黄素和芝麻素类。
2. 权利要求1中所述的组合物，其中，核黄素的总量为l时，芝麻素类总 量的比例(重量比)为4.5以下。
3. 权利要求1或2中所述的组合物，其中，芝麻素类是含有1重量％以上芝麻素类的芝麻素类浓縮物。
4. 权利要求1 3中任一项所述的组合物，其中，芝麻素类是芝麻素及/或表芝麻素。
5. 权利要求1 4中任一项所述的组合物，其中，核黄素是核黄素磷酸钠或核黄素四丁酯中的任一个。
6. 权利要求1 5中任一项所述的组合物，其为口服用组合物。
7. 镇痛剂，其中，含有作为有效成分的核黄素和芝麻素类。
8. 抗疲劳剂，其中，含有作为有效成分的核黄素。
9. 抗疲劳剂，其中，含有作为有效成分的核黄素和芝麻素类。
10. 芝麻素类的使用，其用于提高核黄素的生理活性。
全文摘要
本发明涉及含有核黄素和芝麻素类的组合物。该组合物中核黄素的总量为1时，芝麻素类的总量可以4.5以下的比例(重量比)配合，通过并用摄取芝麻素类，从而具有协同改善核黄素所具有的镇痛作用、抗疲劳作用的效果。本发明的组合物对人、动物等安全，因此可持续摄取，并且提供与以往的具有镇痛作用的食品、具有抗疲劳作用的食品相比具有极为优异效果的组合物，特别是医药品、饮食品。
文档编号A23L2/52GK101410115SQ200780008798
公开日2009年4月15日 申请日期2007年3月15日 优先权日2006年3月15日
发明者前田哲史, 小野佳子, 斋藤佳世, 立石法史, 竹本大辅 申请人:三得利株式会社