专利名称：：用于生产适用于巧克力产品的硬质脂肪的方法
技术领域：
：本发明涉及制备硬质脂肪(hardbutter)的方法，特别是作为可可脂代用脂(CBE)或可可脂改良剂(CBI)优良且适用于巧克力产品的硬质脂肪。
背景技术：
：将包括可可脂的硬质脂肪广泛地用于主要包括巧克力的在糖果生产和面包制作领域中的食品、和药物、化妆品等。此类硬质脂肪包含作为主要组分的在分子内具有一个不饱和键的对称甘油三酯(SUS)如1，3-双棕榈酰-2-油酰甘油(POP)、1-棕榈酰-2-油酰-3-硬脂酰甘油(POSt)和1,3-双硬脂酰-2-油酰甘油(StOSt)。通常地，对称甘^三酯作为含此类组分的天然油脂可以获得，该天然油脂如棕榈油、牛油果脂、萨尔脂(salfat)和莫勒脂(mowrabutter)等或其馏分油。其中，将棕榈油用作富含POP的油脂，将莫勒脂用作富含POS的油脂、以及将牛油果脂、萨尔脂等用作富含SOS的油脂。对于硬质脂肪如可可脂代用脂，通常将这些油脂直接或通过以适合方式混合来使用。然而，因为牛油果脂、萨尔脂和莫勒脂等从野生植物获得，且其产量和价格可取决于因素如天气而显著地变化。在最坏的情况下，存在的问题是不能保证该油脂的所需数量。用作富含POP的油脂的棕榈油中熔点馏分(midfraction)(PMF)是能稳定供应的原料，尽管它包含不对称甘油三酯PPO以及对称甘油三酉旨POP(POP/PPO二84/16)。在这方面，已知高PPO含量使得巧克力的物理性能变差，因此曾提出去除PPO的方法。作为去除PPO的方法，已知用溶剂如丙酮的溶剂分馏。然而，在实际使用的条件下，该方法难以控制POP/PPO比且又难以提高POP/PPO至95/5以上。专利文献l提出获得可可脂代用脂的方法，其特征在于使用脂肪酶进行加入棕榈酸至其中的PMF的酯交换反应、从中去除酶和反应溶剂，用膜式分子蒸馏器脱酸、通过柱层析纯化、用溶剂分馏以获得中熔点馏分且将馏分在减压下通过汽提进行脱臭处理。然而，存在的问题是该方法具有复杂的生产步骤。专利文献2公开制备改进的糖果用油脂的方法，其特征在于通过与1，3-选择性脂肪酶接触来重排实质上由饱和及不饱和C16和C18脂肪酸甘油三酯或其馏分组成的单一食用油脂，以及分馏所得物以增加对称双饱和甘油三酯。该方法优良。然而，存在一定的效率差的问题，例如，其生产步骤复杂、其反应时间很长、且第一个24小时的馏分必须去除以在终产物中使水解最小化，这是因为在该方法中，将原料油脂溶解在溶剂如石油醚中并通过预先用水增湿的铈硅石和铈硅石-脂肪酶催化剂的交变层，该交变层7>开在专利文献2中。专利文献3公开了改性油脂的方法，其特征在于将对于甘油三酯l，3-位具有特异性的脂肪酶应用至含50质量％以上对称甘油三酯的油脂中，从而减少不对称甘油三酯的量，在该对称甘油三酯中，饱和长链脂肪酸残基键合至l,3-位及不饱和长链脂肪酸残基结合至2-位，在该不对称甘油三酯中，饱和长链脂肪酸残基键合至l,2-位及不饱和长链脂肪酸残基结合至3-位。该方法优良。然而，存在的问题是固定化脂肪酶的使用量大和反应时间长，这是因为源于米黑毛霉(Mucormiehei)的固定化脂肪酶的使用，该米黑毛霉为具有对l，3-位的特异性的脂肪酶，如该文献所/>开。5因此，需要开发更适合于工业化的用于制备作为可可脂代用脂的硬质脂肪的方法，该方法能减少固定化脂肪酶的使用量及具有短的反应时间。专利文献l:曰本未审专利公布No.平7-155106专利文献2:日本审查专利公布No.平1-39757专利文献3:日本未审专利公布No.平11-16919
发明内容本发明的目的是提供制备硬质脂肪的工业适用方法，该硬质脂肪具有作为可可脂代用脂(CBE)或可可脂改良剂(CBI)的优良性能。棕榈油中熔点馏分包含1，3-双棕榈酰-2-油酰甘油作为主要组分和显著含量的其异构体1，2-双棕榈酰-3-油酰甘油(PPO),1,2-双棕榈酰-3-油酰甘油(PPO)也被称为1-油酰-2，3-双棕榈酰甘油(OPP)。在棕榈油中熔点馏分中，在脂肪酶，特别是粉末形状的脂肪酶作用下进行酯交换反应，该脂肪酶选自由源于嗜热真菌属(Thermomycessp.)、米才艮審(Rhizopusoryzae)和德、氏才艮審(Rhizopusdelemar)的1,3-选择性脂肪酶组成的组，尽管脂肪酶的用量小，但该反应能够在短时间里完成，然后基本去除所得的单棕榈酰双油酰甘油(P02)和/或三棕榈酰甘油(PPP)能够产出具有改进的POP含量的油脂，该油脂能变成具有本身作为可可脂代用脂或可可脂改良剂的优良性能的硬质脂肪。本发明基于这些发现已得以完成。即，本发明提供制备具有1，3-双饱和长链脂肪酸2-单不饱和长链脂肪酸甘油三酯(SUS)/1，2-双饱和长链脂肪酸3-单不饱和长链脂肪酸甘油三酯(SSU)的质量比为9/1以上的油脂的方法，该方法包括在1,3-选择性脂肪酶作用下进行含SUS及SSU的油脂的酯交换反应，该SUS的含量为50质量Q/。以上，该l,3-选择性脂肪酶选自由源于嗜热真菌属、米根霉和德氏根霉的脂肪酶组成的组。图l示出在实施例4中获得的硬质脂肪中固体脂肪的含量。具体实施例方式本发明中用于制备硬质脂肪的作为原料的油脂的实例包括含1，3-双棕榈酰-2-油酰甘油(POP)和1,2-双棕榈酰-3-油酰甘油(PPO)的油脂，其中POP含量为50质量。/。以上，优选55质量％以上。其中，优选源于棕榈油的油脂，特别优选具有60质量％以上POP含量的油脂，且更特别优选棕榈油中熔点馏分。此油脂能通过例如分馏棕榈油的方式获得。此处，将代表脂肪酸的符号说明如下。S:饱和长链脂肪酸U:单不饱和脂肪酸P:棕榈酸St:硬脂酸O:油酸L:亚油酸另外，将其中组合上述符号的简码用作代表甘油三酯种类的符号。通过并排书写三个代表脂肪酸的符号形成的简码表示甘油三酯种类，其中各脂肪酸分别从甘油骨架的sn-1-位向sn-3-位结合。例如，POP是指其中棕榈酸结合至sn-l,3-位及油酸结合至sn-2-位的甘油三酯。另外，除本文中另有具体说明之外，简码也包含具有光学异构体的甘油三酯种类。例如，POSt是指7POSt和StOP的总和，PPO是指PPO和OPP的总和。当代表脂肪酸的符号具有通过下标表示的数字时，所述码是指其中脂肪酸不特别限定它们结合位置的甘油三酯种类。例如，P20是指两个棕榈酸和一个油酸不论其结合位而结合至其中的甘油三酯种类，即PPO、POP和OPP的总和。优选使用基本无高熔点馏分(PPP、P2St)和低熔点馏分(P02、P2L)的此原料油脂，这是因为它可省略在反应后去除高熔点镏分和/或低熔点馏分的步骤。短语"基本无"是指对于高熔点馏分不大于1质量％和对于低熔点馏分不大于7质量％、优选不大于5质量％。例如，用源于米根霉或德氏根霉的脂肪酶进行基本无低熔点馏分的原料油脂的酯交换反应，能够获得简单地通过干法分馏去除高熔点馏分而具有显著改进SUS/SSU质量比的硬质脂肪。本发明的特征在于使用选自由源于嗜热真菌属、米根霉和德氏根霉的脂肪酶组成的组中的脂肪酶作为1,3-选择性脂肪酶。作为源于嗜热真菌属的脂肪酶，优选源于7T^rwom少cw/^2WgeWOM^的脂肪酶。优选将这些脂肪酶在载体如二氧化硅、铈硅石、硅藻土、珠光体和聚乙烯醇上固定化。此固定化脂肪酶可商购自例如NovozymesA/S,商品名称LipozymeTL-IM。作为源于嗜热真菌属的脂肪酶粉末，将由NovozymesJapanLtd制造的LipozymeTL(lOOL)进行膜处理，然后通过喷雾干燥粉末化，并可使用所得物。然而，作为粉末脂肪酶，优选使用源于嗜热真菌属的脂肪酶的粉碎品，将该粉碎品在载体(优选二氧化硅)上固定化。优选该粉碎品是用粉碎机粉碎的粉碎品，以使得该粉碎品8具有不小于llim且小于300pm,优选l至200(im,更优选l至100(im及特别优选20至100^im的平均粒径。在这方面，粉碎机的实例包括研钵、剪切摩擦粉碎机、切碎磨、石磨(微粒化机(mycolloider))、超微粒粉碎机(masscolloider))、咖啡磨、粉末磨、销棒磨(pinmill)、沖击式粉碎机(锤磨、棒磨)、辊式粉碎机、气流式粉碎机、均化器和超声粉碎机等。此外，在本发明中，作为粉末脂肪酶，优选使用含在二氧化硅载体上固定化的源于嗜热真菌属的脂肪酶粉碎品和助滤剂的脂肪酶粉末组合物，该脂肪酶粉碎品具有l至200nm、优选l至100nm且更优选20至100jim的平均粒径。助滤剂的实例包括无机助滤剂如铈珪石和有机助滤剂例如纤维如纤维素及其粉碎品。在这些助滤剂中，优选有机助滤剂，特别是有机聚合物助滤剂。其中，优选纤维素。优选的纤维素的实例包括购自NIPPONPAPERCHEMICALSCo.，Ltd,商品名称KCFrock的纤维素。助滤剂也优选粉末形状且具有10至90pm的平均粒径。脂肪酶粉碎品相对于助滤剂的质量比优选是1/10至10/1，特别地该质量比优选是1/7至2/1。粉末脂肪酶的粒径能够例如用HORIBA,Ltd.的粒径分布分析仪(LA-500)来测定。本发明中，也可使用属于根霉菌(Rhizopus)属的德氏根霉和米才艮審。源于此根霉菌属的脂肪酶的实例包括PicantaseR8000(由Robin制造)和LipaseF-AP15(由AmanoEnzymeInc.制造)等，尽管最适合的脂肪酶包括源于米根霉的脂肪酶DF"Amano"15-K(由AmanoEnzymeInc.制造且又称为脂肪酶D)。这些是粉末脂肪酶。另外，过去曾将脂肪酶DF"Amano"15-K描述为源于德氏根霉的脂肪酶。9作为在本发明中使用的脂肪酶，可使用通过干燥包括脂肪酶培养组分等的含脂肪酶水溶液而获得的脂肪酶。在本发明中，优选使用具有球形和10质量％以下水含量的脂肪酶粉末。特别地，优选的是90质量％以上的脂肪酶寿分末具有1至lOOiim的粒径。同样地，优选通过喷雾干燥已调节至pH6至7.5的含脂肪酶水溶液而制备的脂肪酶4分末。本发明中，优选使用粒状粉末脂肪酶，将该粒状粉末脂肪酶用大豆粉造粒以及随后粉末化。此处，作为大豆粉，优选使用具有脂肪含量5质量％以上的大豆粉。在此大豆粉中，脂肪含量优选是10质量％以上，更优选是15质量％以上，同时优选脂肪含量是25质量％以下。具体地，优选具有18至23质量％脂肪含量的大豆粉。在这方面，包含在大豆粉中的脂肪的实例包括脂肪酸甘油三酯及其类似物。大豆粉中的脂肪含量能够通过例如索氏提取法等容易地测定。作为此大豆粉，能使用全大豆粉。另一选择，作为大豆粉的原料，能使用豆奶。大豆粉能通过经由常规方式粉碎大豆来制备。大豆粉优选具有约0.1至600pm的粒径。粒径能通过与测定粉末脂肪酶的粒径中使用的类似方式来测定。优选粉末脂肪酶具有10质量％以下的水含量，特别优选l至8质量％的水含量。粉末脂肪酶的粒径是任选的。然而，90质量％以上的粉末脂肪酶优选具有l至100pm的粒径。粉末脂肪酶优选具有IO至80fim的平均粒径。粉末脂肪酶优选具有3求形。本发明中使用的粉末化脂肪酶能够通过经由选自由喷雾干燥、冷冻干燥及溶剂沉降后接着干燥组成的组的任一干燥方式干燥水溶液来制备，在该水溶液中溶解和分散脂肪酶和大豆粉。其中溶解和分散脂肪酶和大豆粉的水溶液能通过将脂肪酶10粉末和大豆粉溶解和分散至水中、混合脂肪酶粉末与其中溶解和分散了大豆粉的水溶液、或混合大豆粉与以下描述的含脂肪酶的水溶液来获得。在干燥其中溶解和分散脂肪酶和大豆粉的水溶液的步骤中，脂肪酶和/或大豆粉的颗粒凝集，然后形成包含脂肪酶和大豆粉的粒状物。该粒状物可包含脂肪酶培养组分。其中溶解和分散脂肪酶和大豆粉的水溶液中的水量通过调节水的质量与脂肪酶和大豆粉的总质量来确定。具体地，水的质量优选为脂肪酶和大豆粉的总质量的0.5至1，000倍，更优选1.0至500倍及最优选3.0至100倍。特别地，当粉末脂肪酶通过喷雾干燥来制备时，水的质量优选为脂肪酶和大豆粉的总质量的2.0至1，OOO倍，更优选2.0至500倍及最优选3.0至100倍，这是因为喷雾干燥的设备特性所致。在将含脂肪酶的水溶液用作脂肪酶的原料的情况下，当含脂肪酶的水溶液中脂肪酶的含量未知时，脂肪酶的含量能够通过对含脂肪酶的水溶液冷冻干燥或其它真空干燥来测定从而计算脂肪酶的质量。此处，含脂肪酶的水溶液包括从中去除细胞体的脂肪酶培养溶液、其纯化培养溶液；其中将从这些培养溶液中获得的脂肪酶再次溶解和分散的溶液；其中将商购粉末脂肪酶再次溶解和分散的溶液；以及商购液体脂肪酶。为^是高脂肪酶活性，更优选的是将低分子量组分如盐从溶液中去除。为提高粉末性能，更优选的是将低分子量组分如糖从溶液中去除。粒状粉末脂肪酶可包含助滤剂。尽管当通过与长链脂肪酸甘油三酯和中链脂肪酸甘油三酯接触然后收集来纯化时，能够改进粉末脂肪酶的脂肪酶活性，但上述粉末脂肪酶本身也能够用于油脂的酯交换反应。该操作中使用的长链脂肪酸甘油三酯优选是以下的甘油三酯，该甘油三酯的构成脂肪酸具有14至24个碳原子且特别地为选自由菜^予油、大豆油、葵花冲予油、红花油和玉米油组成的组的植物油。中链脂肪酸甘油三酯优选其构成脂肪酸具有6至12个碳原子的甘油三酯。此脂肪酸甘油三酯可通过已知方法制备且可为商购产品。例如，该商购产品由NisshinOilliOGroup,Ltd提供，商品名称ODO。优选以95:5至50:50的质量比使用长链脂肪酸甘油三酯和中链脂肪酸甘油三酯，这些甘油三酯优选以脂肪酶总质量的2至100倍的量与脂肪酶接触。本发明中，将上述脂肪酶加入至上述原料油脂且将其通过常规方式进行酯交换反应。在该情况下，优选基于100质量份的原料油脂，将0.01至10质量份(优选0.01至2质量份，更优选0.05至l质量份)粉末脂肪酶加入至原料油脂，以及在35至100。C(优选40至80。C,更优选50至80。C及最优选50至75。C)的温度下进行酯交换反应0.1至50小时(优选0.1至20小时及更优选0.5至16小时，或优选0.1至3小时，也优选0.5至2.5小时)。该反应优选以间歇反应进行。反应温度可为反应基质油脂能够熔化且酶能够活化的任一温度。最佳反应时间取决于氧的添加量、反应温度等而变化。在酯交换反应后，进行常规分馏步骤以去除高熔点甘油三酯和低熔点甘油三酯。分馏步骤可使用或不使用溶剂来进行。现说明高熔点甘油三酯的分馏。对于不用溶剂的分馏，优选冷却至20至40。C的温度及去除所得固成分。用于溶剂分馏中的溶剂的实例包括丙酮、己烷、乙醇和含水乙醇等，优选丙酮和己12烷，且特别优选丙酮。此处，优选将50至1000质量^f分溶剂加入至100质量份的酯交换反应产物中，及优选将其冷却至10至40°C的温度以去除固成分(三硬脂酸甘油酯部分)。然后，说明低熔点甘油三酯的去除。低熔点甘油三酯的去除可使用或不使用溶剂，但优选使用溶剂而进行。用于溶剂分馏中的溶剂的实例包括丙酮、己烷、乙醇和含水乙醇等，优选丙酮和己烷，且特别优选丙酮。优选将50至1OOO质量份溶剂加入至1OO质量份的酯交换反应产物或从中去除高熔点馏分的液体部分(无溶剂)，并冷却至-5至2(TC的温度以去除所得固成分(三硬脂酸甘油酯部分)。去除高熔点馏分和去除低熔点馏分的步骤，任何一个可首先进行，尽管优选首先进行去除高熔点馏分的步骤。当在去除高熔点馏分之后去除低熔点馏分时，可将通过溶剂分馏获得的液体部分(三油酸甘油酯部分)从其中蒸馏掉溶剂，然后再加入溶剂至其中以分馏，或可将通过溶剂分馏获得的液体部分连续进行分馏步骤。然而，优选将所得液体部分(三油酸甘油酯部分)在不去溶剂的情况下进一步冷却至-5至20。C的温度以获得固成分(三硬脂酸甘油酯部分)。当进行酯交换反应的原料油是基本无高熔点馏分(SSS)或低熔点馏分(SU2、S2L)的油脂时，酯交换反应后的油脂只包含少量的高熔点馏分或低熔点馏分，因此用于去除无高熔点馏分和/或低熔点馏分的分馏步骤能够省略。短语"基本无"是指不大于l质量％的高熔点馏分及不大于7质量％的低熔点馏分。因此，本发明能够提供以下硬质脂肪，该硬质脂肪包含不小于70质量％的1,3-双棕榈酰-2-油酰甘油(POP)、不小于5质量％的棕榈酰油酰石更脂酰甘油(POSt)、不大于3质量％的三棕榈酰甘油(PPP)、不大于5质量％的双棕榈酰单亚油酰甘油(P2L)及不大于3质量％的单棕榈酰双油酰甘油(P20),且其中POP和POSt的总13含量不小于80质量％,POP/PPO的质量比不小于9/1。此外，在本发明中，POP优选不小于75质量y。。PPP优选不大于2质量％。P2L优选不大于3质量。/。。P20优选不大于2质量y。。此外，POP和POSt的总含量优选不小于87质量％，POP/PPO的质量比优选为95/5至99.9/0.1。特别地，优选POP/PPO的质量比为97/3至99.9/0.1,及更优选为98/2至99.9/0.1。此外，在本发明中，优选在上述酯交换反应后通过分馏基本去除单棕榈酰双油酰甘油(P02)和/或三棕榈酰甘油(PPP)。本发明中，此处短语"基本去除"是指使得待去除物不大于5质量%,及优选不大于3质量％。当将基本无高熔点馏分(SSS)和低熔点馏分(SU2、S2L)的油脂用作原料油脂时，在酯交换反应后的分馏也可省略。短语"基本无"是指对于高熔点馏分(SSS)不大于l质量。/。及对于低熔点馏分(SU2、S2L)不大于7质量。/。，优选不大于5质量％。用于制备本发明中具有SUS/SSU质量比为9/1以上的油脂的原料油脂的实例包括1，3-双饱和长链脂肪酸2-单不饱和长链脂肪酸甘油三酯(SUS)为50质量。/o的油脂。在这些中，优选其中饱和长链脂肪酸是棕榈酸或硬脂酸的油脂，更优选其中饱和长链脂肪酸是棕榈酸的油脂，优选其中单不饱和脂肪酸是油酸的油脂。特别地，优选该油脂源于棕榈油，且更具体地，棕榈油中熔点馏分是优选的。另一选"f奪，含双棕榈酰单油酰甘油为50质量％以上的油脂是优选的。另外，SSU还包括l-单不饱和长链脂肪酸-2,3-双饱和长链脂肪酸甘油三酯(USS)。基本无高熔点馏分(SSS)和低熔点馏分(SU2、S2L)的油脂能省略分馏步骤且是优选的。同样地，能使用上述脂肪酶以制备本发明的具有SUS/SSU质量比为9/l以上的油脂。本发明的巧克力产品包含油脂组分和糖组分，该油脂组分是上述硬质脂肪和可可脂的混合物。优选将上述硬质脂肪以10质量％以上、优选20质量％以上、及最优选30质量％以上引入至油脂组分中。对于糖组分，可使用通常用于巧克力的任何糖。例如，包括蔗糖、果糖及其混合物。也可使用糖醇如山梨糖醇。此外，本发明的巧克力产品可包括其它包含在常规巧克力产品中的可选组分。可选组分的实例包括通常为卵磷脂的乳化剂、调味剂、脱脂奶粉和全脂奶粉等。根据本发明，具有改进的POP/PPO质量比和优良性能的硬质脂肪能够通过在特定1，3-选择性脂肪酶的作用下进行以下油脂的酯交换反应在很短的时间内简单地获得，所述油脂包含POP及PPO,所述POP的含量为50质量Q/。以上，其原料是稳定供应的棕榈油。因此本发明从工业视角具有巨大优势。此外，能够使用如上所述所得的硬质脂肪，从而生产不同的糖果、面包等。特别地，在组合可可脂和甜味剂时，该硬质脂肪能够提供具有改进的酥脆性和良好的口溶性的优良巧克力产品。接着，本发明将通过以下实施例得以详细说明。制备实施例1[制备粉末脂肪酶组合物]将5g的LipozymeTL-IM(NovozymesA/S)用L型樣吏粒化才几(TokushukikakogyoCo.,Ltd)寿分石争。将4分碎的月旨肪酵用粒径分布分析仪LA-500(HORIBA,Ltd)来测定，它们的平均粒径是66.4[im。将5g纤维素粉末(NIPPONPAPERCHEMICALSCo.,Ltd:平均粒径30pm)加入至粉末脂肪酶，获得了粉末组合物。将90g菜籽油和10g的ODO(NisshinOilliOGroup,Ltd)加入至5g粉末组合物，将所得物在25。C搅拌5小时然后过滤。结果，获得了粉末脂肪酶组合物。制备实施例2[制备粉末脂肪酶组合物2]将10%脱臭全脂大豆粉的水溶液预先在121°C下高压灭菌15分钟且冷却至约室温，该脱臭全脂大豆粉在由NisshinCosmoFoodsLtd.制造的商品名称"AlphaplusHS-600"下购卖且具有23质量％的脂肪含量。将三倍量的冷却液在搅拌下加入至由AmanoEnzymeInc.制造的脂肪酶DF"Amano"l5-K的酶溶液,该脂肪酶DF"Amano"15-K也称为脂肪酶D(150000U/ml)。所得溶液用0.5N的NaOH溶液调节至pH7.8,然后用喷雾干燥器CSD-1000:TokyoRikakikaiCo.,Ltd)喷雾干燥。结果，获得了粉末脂肪酶组合物2。比举交例1向10g棕榈油中熔点馏分l(组成62.3质量。/。的POP、11.9质量％的PPO)中加入5质量％的LipozymeRM-IM(源于Mucormiehei-NovozymesA/S的固定化脂肪酶)，然后在搅拌下在70°C反应4小时。将所得溶液过滤以去除固定化脂肪酶，结果获得9.5g反应产物l。实施例1向与用于比專交例1中相同的10g棕榈油中熔点馏分l(组成62.3质量％的POP、11.9质量％的PPO)中加入1.5质量％的由NovozymesA/S制造的LipozymeTL-IM(源于嗜热真菌属的固定化脂肪酶；平均粒径800iim),然后在搅拌下在70。C反应4小时。将所得溶液过滤以去除固定化脂肪酶，结果获得9.6g反应产物2。实施例2向与用于比较例1中相同的10g棕榈油中熔点馏分l(组成62.3质量o/o的POP、11.9质量o/。的PPO)中加入0.2质量。/。的制备实施例1中制备的粉末脂肪酶组合物，然后在搅拌下在70。C反应2小时。将所得溶液过滤以去除粉末脂肪酶，结果获得9.5g反应产物3。实施例3向与用于比较例1中相同的10g棕榈油中熔点馏分l(组成62.3质量o/。的POP、11.9质量o/o的PPO)中加入0.1质量。/。的在制备实施例2中制备的粉末脂肪酶组合物2，然后在搅拌下在70。C反应4小时。将所得溶液过滤以去除粉末脂肪酶，结果获得9.6g反应产物4。的组成和P20的减少量。表2示出了用于酶反应的条件。TAG组成用GLC(GC-2010:ShimadzuCorp.)分析。将TAG组成的分析方法更详细地说明。GLC分析的条件如下所示。柱Rtx-65TG(RestekCorp.)15mx0.1fimx0.25mm检测器FID载气HeSprit比例60:1柱温(。C):350。C(l分钟)—(rc/分钟)—365。C(4分钟)进口温度365°C才企测器温度365°C当根据P3的产生量和P20的减少量比较这些反应进程时，认量和酶反应时间比4交反应时，与比4交例1相比，实施例l中的反应时间相同且实施例1中的酶的量下降至约1/3。实施例2中的酶的量下降至1/25,且实施例2的反应时间下降至1/2。实施例3的反应时间相同且实施例3中的酶的量下降至1/50。从这些发现中，实施例l至3的反应效率与比较例l的相比是才及其良好的。177、I—_—.P^O的减少量-15.915,014.11.4，錢P:棕榈酸、St:硬脂酸、0:油酸、L:亚油S臾、tr:痕量表2反应条件的对比比较例l实施例l实施例2实施例3酶浓度5,0%Jgj^0t间4小时Jgji溫度70。C1.5%4小时700C0.2%2小时706G0,1%4小时70。C实施例4向1,200g的与用于比较例1中相同的棕榈油中熔点馏分l(组成62.3质量。/o的POP、11.9质量o/o的PPO)中加入0.2质量0/0的制备实施例1中制备的粉末脂肪酶组合物，然后在搅拌下在70。C反应2小时。将所得溶液过滤以去除粉末脂肪酶，结果获得1，184g反应产物5。将所得反应产物5(1132g)通过加入5660g丙酮至其中来溶解。将所得溶液冷却至20。C,然后从中去除产生的固相。将所得液体部分冷却至5。C,然后通过从其过滤获得产生的固相。将所得固体部分通过常规方式进行丙酮的去除和纯化，结果获得792g硬质脂肪l(HBl)。原料棕榈油中熔点馏分和硬质脂肪1的TAG组成在表3中示出，它们的P0P/PP0比在表4中示出(表中说明的％表示质量％)。表lTAG组成tap紐Sw、棕榈油中0产物1^产物2a产物3M产物4^取^"熔点馏分1(比较例1)(实施例1)(实施例2)(实施例3)D81722384s8io3,92218663323s^T-^1*4pppppo-ps纷i18TAG组成用GLC(GC國2010:ShimadzuCorp.)分析，POP/PPO比用LC-MS/MS(Quattromicro:NihonWatersK.K)分析。用LC-MS/MS分析POP/(PPO+OPP)的方法将更详细地说明。用于LC-MS/MS的分析条件列于以下。柱常规ODS柱(4.6mmx25cm)双连接洗脱溶剂丙酮/乙腈混合物80/20-100/0梯度模式流速0.5mL/min离子源APCI质量分析部MEM一莫式POP/(PPO+OPP)比通过4吏用由参比材泮牛POP和PPO(FunakoshiCo.，Ltd.)纟会制的才交准曲线来计算。将POP和PPO用不同比例混合，将所得物在上述条件下进行LC-MS/MS。计算M/Z二833(P20)的产物离子M/Z二551(PO)和M/Z二557(PP)的比例，即PO/PP的值，在该值与POP及PPO的标准混合比值之间获得校准曲线。正如参比材料那样，在上述条件下分析试样以获得PO/PP比，且从该校准曲线计算它们的POP/(PPO+OPP)比。表3TAG组成<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>表4POP/(PPO+OPP)t匕(质量t匕)<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>实施例5向700g棕榈油中熔点馏分2(组成65.2质量。/o的POP、5.7质量％的PPO+OPP)中加入0.3质量％的制备实施例2中制备的粉末脂肪酶组合物，然后在搅拌下在50。C反应8小时。将所得溶液过滤以去除粉末酶，获得693g反应产物6。将650g所得反应产物6通过加入3250g丙酮至其中来测定和溶解。将所得溶液冷却至20°C,然后从中去除产生的固相。将所得液体部分进一步冷却至0。C,通过从其过滤获得产生的固相，然后将固体部分通过常规方式去除丙酮和纯化，结果获得435g硬质脂肪2(HB2)。原料椋榈油中熔点馏分2和硬质脂肪2的TAG组成和SOS/(SSO+OSS)比示于表5中(表中说明的％表示质量％)。SOS/(SSO+OSS)比用ChromspherLipids通过HPLC方法分析。这些以用UV(205nm)检测器作为检测器及0.5%乙腈-己烷溶液作为洗脱溶剂的恒溶剂(isocratic)模式分析。现说明此处使用的符号。S是指饱和长链脂肪酸及主要是棕榈酸或石更脂酸。例如，SOS是指POP、POSt、StOP和StOSt的总和。表5TAG组成和SOS/(SSO+OSS;)比TAG纽成(0/0)棕榈油中熔点^分2硬质脂肪2SOS/SSOOSS)_92/8__S:饱和长链脂肪酸(主要地，棕榈酸、硬脂酸)实施例6向350g棕榈油中熔点馏分3(组成73.1质量。/。的POP、4.6质量％的PPO+OPP)中加入0.3质量％的制备实施例2中制备的粉末脂肪酶组合物，然后在搅拌下在50。C反应2小时。将所得溶液过滤以去除粉末酶，获得337g反应产物7。将所得反应产物7进行干法分馏以去除富含PPP的高熔点馏分，将所得低熔,泉馏分纯化。结果获得435g硬质脂肪3(HB3)。原#牛棕榈油中熔点馏分3和石更质脂肪3的TAG组成和SOS/(SSO+OSS)比示于表6中(表中说明的％是指质量％)。SOS/(SSO+OSS)比用ChromspherLipids柱通过HPLC方法分析。这些以用UV(205nm)作为检测器及0.5%乙腈-己烷溶液作为洗脱溶剂的恒溶剂方式分才斤。SOS/(SSO+OSS)_94懲翻图l和表8示出可可脂与棕榈油中熔点馏分1、棕榈油中熔点馏分3或硬质脂肪1的配方中的固体脂肪含量的分析结果。分析了示于表7中的这些配方。表7用于分析固体脂肪含量的油脂的配方配方1配方2配方3棉榈油中熔点馏分1條榈油中熔点顿分3硬质脂肪1可可脂1化15858585表8固体脂肪含量(SFC)固体脂肪含量《％)25,00G27,5eC3H,0。CSFC差值配方151.337.95.8045,5配方249*8€l2043.6配方33S,6■6、5041.4SFC差值在27.5。C的SFC和在32.5。C的SFC之间的差值包含硬质脂肪1的配方1具有在27.5。C的最高固体脂肪含量。然而，配方1具有在32.5。C的最低脂肪含量及在27.5。C的SFC和在32.5。C的SFC之间的最大SFC差值。从这些发现，认为配方表6TAG组成和SOS/(SSO+OSS)比TAG纽成《％)接桐油中熔点it分3硬质脂肪379■6319877:o5JfiJ**lr*2一rP,PPPPPPSS5其22l是最佳酥脆性和口溶性的油脂。实施例7实验性地用上述硬质脂肪(硬质脂肪1、棕榈油中熔点馏分1)以表9中所示配方制备和评价巧克力。在制备巧克力时在其粘性和脱模性上不存在特别的困难。评价所得巧克力关于在20。C储存一周后的酥脆性、光泽和口溶性。结果，使用硬质脂肪l的巧克力l具有良好的口溶性和优良的酥脆性。表9巧克力的配方(质量％)tb^巧克力l对照巧克力2巧克力1糖43.45■43,45可可质量银O40.0"可可脂舍量〕《22.0》(22.0>《22,0)可可脂濕1,0*脂肪1棕桐油中熔点馏分1印磷脂15.0，5力调味剂0,05O.OS0.05评价通过上述方法制备的巧克力关于脱模性、酥脆性、光泽和口溶性。评价结果示于表io中。表IO巧克力棒的评价结果tb^巧克力l巧克力1繊生o厶◎o◎鹏生o錄o这些巧克力通过十位参与者用感官测试来评价。评价标准i兌明嗦口下。酥脆性非常良好的酥脆性23〇良好的酥脆性A较差的酥脆性口溶性非常良好的口溶性〇良好的口溶性A不良的口溶性光泽非常良好〇良好，但是局部显示发暗A发暗脱模性在冷冻15分钟后可以脱模〇在冷冻20分钟后可以脱模A无法脱才莫2权利要求1.一种用于制备油脂的方法，所述油脂具有1，3-双饱和长链脂肪酸2-单不饱和长链脂肪酸甘油三酯(SUS)/1，2-双饱和长链脂肪酸3-单不饱和长链脂肪酸甘油三酯(SSU)的质量比为9/1以上，所述方法包括在1，3-选择性脂肪酶作用下进行包含SUS和SSU的油脂的酯交换反应，所述SUS的含量为50质量％以上，所述1，3-选择性脂肪酶选自由源于嗜热真菌属、米根霉和德氏根霉的脂肪酶组成的组。2.根据权利要求l所述的方法，其中所述脂肪酶源于嗜热真菌属。3.根据权利要求1或2所述的方法，所述方法包含酯交换反应后通过分馏去除所得双不饱和长链脂肪酸单饱和脂肪酸甘油三酯(SU2)和/或三饱和脂肪酸甘油三酯(SSS)。4.根据权利要求1至3任一项所述的方法，其中所述饱和长链脂肪酸为棕榈酸。5.根据权利要求1至4任一项所述的方法，其中所述不饱和长链脂肪酸为油酸。6.根据权利要求1至5任一项所述的方法，其中所述包含1，3-双饱和长链脂肪酸2-单不饱和长链脂肪酸甘油三酯(SUS)和1.2-双饱和长链脂肪酸3-单不饱和长链脂肪酸甘油三酯(SSU)的油脂源于椋榈油。7.根据权利要求6所述的方法，其中所述包含1.3-双饱和长链脂肪酸2-单不饱和长链脂肪酸甘油三酯(SUS)和l,2-双饱和长链脂肪酸3-单不饱和长链脂肪酸甘油三酯(SSU)的油脂是棕榈油中熔点馏分。8.根据权利要求1至7任一项所述的方法，其中所述包含1.3-双饱和长链脂肪酸2-单不饱和长链脂肪酸甘油三酯(SUS)和1，2-双饱和长链脂肪酸3-单不饱和长链脂肪酸甘油三酯(SSU)的油脂包含50质量％以上的双棕榈酰单油酰甘油。9.一种用于制备硬质脂肪的方法，所述方法包含在l,3-选择性脂肪酶作用下进行包含1，3-双棕榈酰-2-油酰甘油(POP)及1，2-双棕榈酰-3-油酰甘油(PPO)的油脂的酯交换反应，所述1，3-双棕榈酰-2-油酰甘油(POP)的含量为50质量％以上，所述1,3-选择性脂肪酶选自由源于嗜热真菌属、米根霉和德氏根霉的脂肪酶组成的组。10.根据权利要求9所述的方法，所述方法包含酯交换反应后通过分馏基本去除单棕榈酰双油酰甘油(PO2)和/或三棕榈酰甘油(PPP)。11.根据权利要求1至10任一项所述的方法，其中将所述源于嗜热真菌属的脂肪酶在载体上固定化。12.根据权利要求l至ll任一项所述的方法，其中所述源于嗜热真菌属的脂肪酶为粉末脂肪酶。13.根据权利要求12所述的方法，其中所述粉末脂肪酶通过粉碎在载体上固定化的脂肪酶来获得。14.根据权利要求11或13所述的方法，其中所述载体是二氧化硅。15.根据权利要求l所述的方法，其中将所述源于米根霉或德氏根霉的脂肪酶成形为含所述脂肪酶和大豆粉的粒状粉末脂肪酶。16.根据权利要求1至15任一项所述的方法，其中所述脂肪酶为包含所述粉末脂肪酶和助滤剂的脂肪酶组合物。17.根据权利要求12至16任一项所述的方法，其中所述粉末脂肪酶具有l至200iam的平均粒径。18.根据权利要求1至17任一项所述的方法，其中所述SUS/SSU的质量比不小于95/5。全文摘要生产油脂的方法，所述油脂具有在1，3-双饱和长链脂肪酸2-单不饱和长链脂肪酸甘油三酯(SUS)和1，2-双饱和长链脂肪酸3-单不饱和长链脂肪酸甘油三酯(SSU)之间的质量比为9/1以上，所述方法包括通过将含SUS和SSU且具有50质量％以上SUS含量的油脂用脂肪酶反应来进行酯交换，该脂肪酶选自由源于属于嗜热真菌属的微生物的脂肪酶、源于米根霉的脂肪酶和源于德氏根霉的脂肪酶组成的组，它们为1，3-选择性脂肪酶。该方法适用于工业规模生产具有用作类可可脂(CBE)或可可脂改良剂(CBI)的优良性能的硬质脂肪。文档编号A23D7/00GK101501203SQ20078003006公开日2009年8月5日申请日期2007年7月19日优先权日2006年7月19日发明者上原秀隆,山内良枝,有本真,根岸聪,真锅珠美,菅沼智巳,铃木顺子,高桥勇申请人:日清奥利友集团株式会社