产生茶黄素的方法

文档序号:439144阅读:1227来源:国知局

专利名称::产生茶黄素的方法
技术领域
:.本发明涉及茶黄素的产生。尤其地,,本发明涉及一种从儿茶素产生茶黄素的改进的方法,并涉及富集含有茶黄素的包含儿茶素的材料(例如,茶)。本发明也涉及富含茶黄素的叶茶产物。
背景技术
:绿茶叶(摘下的)含有称为儿茶素的无色多酚。在绿叶氧化发酵以产生红茶的过程中,儿茶素经过氧化生物转化,通过其醌转化为已知为茶黄素(TFs)的二聚化合物和已知为茶红素(TRs)的更高分子量的化合物。TFs和TRs是造成红茶浸泡和产物的橙色和棕色的原因,以及对涩味和制成的茶体做出明显贡献。TRs在分子大小上比TFs大且颜色更深。除了影响茶的颜色,认为TFs提供茶的"亮度"和"活度"质量性质。事实上,已知TF含量与红茶的质量相关。另外,已证明TFs具有一些积极的健康效应。这些效应中的某些可能直接与TFs的抗氧化性质有关。所述的效应包括降低血脂水平(如胆固醇)、抗炎性效应和抗肺瘤效应。,因此,需要提供具有提高的TFs水f的产物(尤其是茶产物),以及需要提供更有效的合成TFs的方法。遗憾的是,在茶加工过程中产生TF的优化不是简单地控制单一的化学反应。在TF和TR形成过程中发生的氧化聚合非常复杂,且包括由存在于叶中的多酚氧化酶和/或过氧化酶介导的生物化学氧化,以及反应种类的直接的化学联合。另外,甚至在体外进行和不存在复杂的茶化学成分时,聚合是复杂的。为了举例说明这种复杂性,认为虽然TF形成需要儿茶素二聚(通过其醌),儿茶素也通过TRs的转4化(也通过儿茶素醌)引发TFs的破坏。因为反应的这种复杂结合,TF的形成和破坏速度很好地平衡。因此,在传统的通过批次发酵产生TFs的过程中,TF水平增加到最大值,然后再,降低。当TF水平到达该最大值时,发酵典型地被终止,但这是不经济的,因为系统仍然含有活性剂,所述活性剂可以转化为TFs,,而且,更糟糕的是,已证明这些活性剂在随后的制造后的一个月的存储过程中緩慢地降解TFs(见,J.B.Cloughley,J.Food如'c'1981,1229)。国际专利申请WO01/82713描述了生产红茶的方法,所述红茶看起来和感觉上像传统的加工红茶但具有完全发酵CTC加工的茶(fullerfermentedCTCprocessedtea)的液体特征。方法包括萎凋第一供给的新鲜采集的茶叶,浸渍萎凋的叶,允许浸渍的萎凋的叶发酵以产生浸渍的素坯(dhool),萎凋第二供给的新鲜采集的茶叶,混合从第一供给的叶获得的浸渍的素坯与从第二供给的叶获得的萎凋的叶,碾压混合物,允许混合物发酵并干燥发酵的混合物以产生红茶。才艮道该方法导致混合物的素坯中的TFs增加,大于由在第一和第二供给的TF水平之间的纯粹的添加的关系预测的水平。浸渍的素坯伊乙选包含占干重的10-50%的混合物,其导致包含与浸渍的素坯比较相对高水平的儿茶素的混合物。尽管WO01/82713中公开的方法是理想的产生红茶的方法,所述红茶看起来和感觉上像传统的加工红茶但具有完全发酵CTC加工的茶的TF,含量和浸泡性质,我们认为需要具有,过甚至完全发酵的CTC加工'的茶的TF水平的产物。我们也认为需4提供增加在发酵过程中的可达到的TF的最大水平和/或允许可实现的TF水平的稳定性的方法。我们发现,可以通过控制发酵反应混合物的组分实现这样的目标。发明概述本发明部分地基于以下的实现为了增加在发酵过程中的可达到的TF的最大水平和/或允许可实现的TF水平的稳定性,能够控制在发酵过程中发生的不同的反应速度和路径。尤其地,我们发现在发酵过程中形成具有特定的儿茶素与茶黄素的比例(A)的反应混合物,导致高产量的茶黄素和/或增加的由发酵产生的茶黄素的稳定性。因此,第一方面,本发明提供了产生富含茶黄素的产物的方法,该方法包括以下歩骤(a)提供包含茶黄素的第一材料和包含儿茶素的第二材料;(b)将第一材料的一部分与第二材料的一部分接触,以形成具有0.07-5的儿茶素与茶黄素的重量比例(7)的反应混合物;(c)发酵反应混合物;然后(d)从反应混合物回收产物。第二方面,本发明提供了包含具有每克干叶中大于72mg茶黄素的叶茶产物。优选获得第二方面的叶茶产物,和/或使用第一方面的方法是可获得的。附图简述图1是用于本发明的方法的一种实施方式的反应器的横剖视图。测试和定义茶如本文所用,术语"茶,,指来自中国茶(Came/"aW固^置57VzewsAs1)和/或普碎茶(Came〃z'a57'we打w'51var.a^am^ca)的才才津+。"茶叶,,指未浸泡形式的茶叶和/或茎。已经历发酵步骤的茶称为"红茶",而未发酵的茶称为"绿茶"。部分发酵的茶称为"乌龙茶"。"叶茶产物"指已经干燥至水分含量低于30%的重量的茶叶,更优选水分含量为1-10%的重量。"茶提取物"指用溶剂从茶叶提取并可溶于沸水的固体。茶黄素如本文所用,术语"茶黄素"作为茶黄素、异茶黄素、新茶黄素、茶黄素-3-没食子酸酯、茶黄素-3'-没食子酸酯、茶黄素-3,3'-二没食子酸酯、表茶黄酸、表茶黄酸3'-艰食子酸酯、茶黄酸、茶黄酸-3'-没食子酸酯及其混合物的通称使用。这些化合物的结构是众所周知的(见,侈寸^口,"Tea-Cultivationtoconsumption",K.C.Willson禾口M.N.Clifford(Eds),1992,Chapman&Hall,London,pp.555-601的第17章中的结构xi-xx)。术语茶黄素包括这些化合物的盐的形式。优选的茶黄素是茶黄素、茶黄素-3-没食子酸酯、茶黄素-3'-没食子酸酯、茶黄素-3,3'-二没食子酸酯及其混合物,因为这些茶黄素在如红茶的自然来源中是最丰富的。术语"单没食子酸酯化的茶黄素"作为茶黄素-3-没食子酸酯、茶黄素-3'-没食子酸酯及其混合物的通称。最优选的茶黄素是茶黄素-3-没食子酸酯,因为已发现该茶黄素在降低血脂水平方面最有效。儿茶素如本文所用,术语"儿茶素"用作儿茶素、没食子儿茶素、儿茶素没食子酸酯、没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素、表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素没食子酸酯及其混合物的通称。术语"简单的儿茶素,,用作儿茶素、儿茶素没食子酸酯、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯及其混合物的通称。术语"没食子儿茶素"用作没食子儿茶素、没食子儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯及其混合物的通称。发酵如本文所用,术语"发酵,,指儿茶素向茶黄素和任选地向茶红素的氧化转化。反应混合物或产物中的儿茶素和茶黄素的测定如下使用反相高效液相色谱法对由极限提耳又一部分反应混合物7或叶茶产物产生的茶黄素和儿茶素的量进行定量分析#^新务1.将1重量份的反应混合物或叶茶产物与3重量份的70%(v/v)含水曱醇混合,并在70。C保持IO分钟。2.然后通过经细棉布过滤,从任何固体残渣中除去液体提取物。3.进一步重复两遍提取固体残渣(如果存在),每次使用3份的70%0")含水甲醇。4.然后合并产生的液体提取物,以产生大约9重量份的合并的提取物。5.然后向合并的提取物加入1重量份的含有25mg/mlEDTA和25mg/ml抗坏血酸的蒸馏水的稳、定溶液。6.然后将合并的提耳又物倾注入微型离心管中,并以14000g的相对离心力(RCF)离心10分4中。色i普才主LunaPhenylhexyl5|u,250x4.60mm流速1毫升/分钟柱温箱温度30。C溶剂A:含有2%乙酸的乙腈B:含有2%乙酸和0.02mg/mlEDTA的水注射体积10pi梯度时间%溶剂A%溶剂B步骤0-10分钟595恒比10-40分钟5-1895-85线性梯度40-50分钟1882恒比50-55分钟5050沖洗55-75分钟595恒比定量相对于每日构建的校正曲线的峰面积。才交正曲线由咖啡因构建,且使用单个儿茶素对于咖啡因的相对响应因子计算儿茶素的浓度(来自ISO儿茶素方法-ISO/CD14502-2)。单个的咖啡因标准品(Sigma,Poole,Dorset,UK)用作峰鉴别标志。色i普柱HypersilC18,3p,100x4.60mm流速1.8毫升/分钟柱温箱温度30°C溶剂A:含有2%乙酸的乙腈B:含有2%乙酸的水注射体积10|ul梯度以20。/oA和80%B的恒比。定量儿茶素在色谱分离的开始时以宽的未分辨的峰的形式被洗脱,而茶黄素则在5-15分钟被洗脱。在274nm检测。相对于每日构建的校正曲线测量峰面积。从一系列含有相对于纯的茶黄素标准物以前分析过的已知量的茶提取物的溶液构建校正曲线。连续搅拌槽式反应器术语连续搅拌槽式反应器(CSTR)在化学工程领域是众所周知的,指装配有搅拌装置(例如,叶轮)的罐,一种或多种试剂通过其引入罐中,同时除去产物流。搅拌装置应该使得确保适当的混合。筒单^根据通过罐的平均体积流速区分罐的体'积,给出保留时间(罐内的分散量的试剂花费时间的平均量)。处于稳定状态时,进入罐的质量流速等于离开罐的质量流速。发明详述方法
技术领域
:本发明的方法包括以下步骤9(a)提供包含茶黄素的第一材料和包含儿茶素的第二材料;(b)将第一材料的一部分与第二材料的一部分4妄触,以形成具有儿茶素与茶黄素的重量比例为A的反应混合物;(c)发酵反应界合物;然后(d)从反应混合物回收富含茶黄素的产物。我们发现,当比例W处于0.07-5的范围时,与常规方法比较,茶黄素的产量相对高,和/或由发酵产生的茶黄素的稳定性相对高。不希望受到理论的限制,我们相信高比例的儿茶素的存在导致在反应混合物中的高的茶黄素破坏速度,因而优选A小于3,更优选小于2.5,最优选小于2。但是,我们也相信应该避免过低的儿茶素比例,因为这可能导致低的茶黄素的形成速度,因而优选A大于0.15,更优选大于0.3,最优选至少0.7。优选的茶黄素(茶黄素、茶黄素-3-没食子酸酯、茶黄素-3'-没食子酸酯、茶黄素-3,3'-二没食子酸酯及其混合物)的形成需要来自简单和没食子儿茶素的醌以接触并起反应。因此,优选步骤(b)中的反应混合物的儿茶素包含至少一种简单的儿茶素和至少一种没食子儿茶素。更优选步骤(b)中的反应混合物的儿茶素是儿茶素、没食子儿茶素、儿茶素没食子酸酯、没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素、表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯和表没食子儿茶素没食子酸酯的混合物。简单儿茶素和没食子儿茶素的相对量对茶黄素的破坏和形成速度有影响。尤其地,简单儿茶素的醌能够引发TFs的破坏,并且没食子儿茶素能够通过除去筒单儿茶素的醌而抑制这种破坏。因此,我们认识到,没备子儿茶素在反应混合物中的显著比例乂需要的,由于其保护TFs免受降解的能力,因此,优选步骤(b)中的第一材料和第二材料接触,使得反应混合物的儿茶素包含占儿茶素重量的至少10%的没食子儿茶素,更优选至少20%,最优选至少30%。但是,由于通过没食子儿茶素除去简单儿茶素的醌,过高含量的没食子儿茶素可能导致TFs慢的形成速度。因此,优选步骤(b)中的第一材料和第二材料接触,使得反应混合物的儿茶素包含占儿茶素重量的低于70%的没食子儿茶素,更优选低于60%,最优选低于50%。最优选的没食子儿茶素是表没食子儿茶素没食子酸酯。该方法可以用来从基本上纯的儿茶素合成茶黄素,但优选用来富集茶叶的茶黄素含量。因此,优选至少第一材料和第二材料中的一种是浸渍的茶叶。另外,茶叶中某些内源性的酶催化儿茶素向茶黄素的氧化,因而也优选第"T材料和第二材料中的至少一种是没有经过热处理从而抑制这些的内源性的酶的活性的茶叶。尤其地,优选茶叶没有加热到超过70。C的温度,更优选不超过60。C的温度,最优选不超过50。C的温度。如果第一材料是茶叶,优选至少部分发酵的茶叶。如果第二材料是茶叶,优选基本上未发酵的茶叶。第一材料和/或第二材料可以优选是萎凋的茶叶。也适用于本发明的是茶提取物,尤其是茶的水提取物。因此,第一材料和/或第二材料可以是茶提取物。如果第一材料是茶提取物,优选至少部分发酵的茶提取物。如果第二材料是茶提取物,优选基本上未发酵的茶提取物。可以理解,第一材料和/或第二材料可以分别包含多种物质。第一材料可以包含至少两种物质,例如,选自至少部分发酵的茶叶、至少部分发酵的茶提取物和纯化的茶黄素。第二材料可以包含至少两种物质,例如,选自至少基本上未发酵的茶叶、基本上未发酵的茶提取物、纯化的儿茶素、纯化的没食子儿茶素和纯化的简单儿茶素。材料包含多种物质,这些物质可以在步骤(b)之前或与步骤(b)同时结合。第一材料优选包含占第一材料的干重的0.01-50%的量的斧黄素,更优选0.1-10%,最纟尤选0.5-5%。第一材料也优选包含儿4素。可以通过至少部分发酵第二材料的一部分来适当地提供第一材料。第二材料优选包含占第二材料的干重的7-100%的量的儿茶素,更优选9-50%,最优选10-20%。第二材料的儿茶素优选包含至少一种简单儿茶素和至少一种没食子儿茶素。第二材料的儿茶素优选包含占儿茶素的重量至少10%的量的没食子儿茶素,更优选至少20%,最优选至少30%。可以使第一材料和第二材料以任何适当的方式接触,以冲是供具有需要的比例i的反应混合物。但是,优选材料在液体培养基中接触,最优选水培养基。最优选水培养基是基本上不含緩冲盐的水,因为发现这些盐对于从反应混合物中回收夢黄素是不必要且复杂的。反应混合物优选包含至少一种氧化酶。"氧化酶,,指催化儿茶素向茶黄素的氧化生物转化的酶,可以向反应混合物中添加至少一种基本上纯的形式的氧化酶。适当的酶包括多酚氧化酶和/或过氧化酶。选择性地或另外地,酶可以作为茶叶的部分而存在,尤其是在第一和/或第二材料包含茶叶的情况下。至少一种氧化酶可以选择性地或另外地作为洗过的茶叶制备物的部分而存在。洗过的茶叶制备物包含茶叶,大部分水提取固体已从所述茶叶中被除去,且作为固定的酶来源发挥作用。例如,在S.Bonnely等人,"Amodeloxidationsystemtostudyoxidisedphenoliccompoundspresentinblacktea",FoodCTzem^^y,2003,M,PP.485-495中,描述了合适的洗过的叶制备物。为了有助于在两种材料之间进行物质转移,优选将它们接触,同时应用机械搅拌,例如,通过经如洛托凡制法(Rotorvane)的才齐压机的共挤压。典型地,步骤(b)中的第一材料和第二材料以1.01:1-100:1、更优选1.5:1-50:1、最优选3:1-10:1的占干重的重量比例接触。发酵步骤(c)可以包含任何适当的发酵,包括固态发酵、液态发酵和/或浆状发酵(slurryfermentation)。在至少一种材料是茶叶的情况下,浆状发酵尤其有效。例如,在US3,649,297(TencoBrookeBondLtd)或US3,812,266(ThomasJ.LiptonInc.)中,公开了合适的浆状发酵方法。优选的发酵温度是10-40°C,更优选15-25°C。过低的温度导致慢速发酵,而过高的温度可能导致氧化酶的失活和/或不需要的反应产物的产生。为了提供最有效的发酵,优选在发酵过程中对反应混合物充气。优选充气使得在20。C下、空气饱和的水中产生至少25%的氧浓度,更优选至少50%,最优选70-100%。12发酵持续时间优选至少5分钟,更优选至少30分钟,最优选至少1小时。持续时间也优选少于24小时,更优选少于10小时,最优选少于5小时。,在一种优选的实施方式中,方法包括另汁的步骤将第二材料的至少另外的一部分与反应混合物接触,以在至少部分发酵步骤(c)过程,中保持儿茶素和茶黄素的重量比例在范,围i。更优选将第二材料的多个另外的部分与反应混合物接触,以在发酵步骤(c)的至少20%的持续时间中保持儿茶素和茶黄素的重量比例在范围几更优选至少30%的持续时间,最好为50-90%的持续时间。将第二材料的至少一个另外的部分与反应混合物接触的步骤,可以另外地或选择性地保持反应混合物中的没食子儿茶素占儿茶素重量的10%-70%,更优选20%-60%,最优选30%-50%。在一种尤其优选的实施方式中,在发酵持续时间的至少20%,更优选至少30%,最好为50-90%的持续时间反应混合物中的i保持在稳定状态。通过连续搅拌槽式反应器的方法合适地实现稳定状态。在步骤(d)中产物的回收优选包括停止发酵的步骤。停止发酵优选包括加热反应混合物使反应混合物中的任1"可氧化酶失活,和/或干燥反应混合物至含水量为少于30%,更优选含水量为1-10重量%。如同常规的茶制备方法,通过焙烧反应混合物可以同时实现酶失活和干燥。替代的方法可以用于使酶失活,如向反应混合物中添加有机溶剂。从反应混合物中回收产物可以包括至少一种选自溶剂萃耳又、电渗析、膜分离和色语法的单元操作。溶剂萃取可以包括用在其中茶黄条极其易溶解的溶剂萃取反应混合物。溶剂通常是有机溶剂。色语法包括将反应混合物中的茶黄素与如吸附材料的色谱介质接触。优选,在与色谱介质接触之前,如上所述提取反应混合物。可以作为单一馏分或多个馏分回收产物。例如,可以在多个馏分中回收产物,每个镏分富含单一的茶黄素。色谱介质的使用尤其适于回收这样的多个馏分中的产物。13叶茶产物发现本发明的方法能够产生含有非常高水平的茶黄素的叶茶产物。叶茶产#包含大于72mg/g干叶的茶黄素,优选具少75mg/g千叶的茶黄素,最优选80-150mg/g干叶的茶黄素。通过本方法产生的叶茶产物可以另外包含儿茶素。儿茶素与茶黄素的重量比例优选为上文所述的范围7。叶茶产物的茶黄素优选包含占茶黄素重量的至少90%的茶黄素、茶黄素-3-没食子酸酯、茶黄素-3'-没食子酸酯和茶黄素-3,3'-二没食子酸酯的混合物,更优选95-100%。优选茶黄素包含占茶黄素重量的至少25%的茶黄素-3-没食子酸酯,更优选至少30%,最优选35-50%。叶茶产物优选以如茶袋的浸泡包装来包装。叶茶产物可以用来制备饮料,例如,通过在水介质中浸泡产物。实施例用以下实施例为参考,进一步描述本发明。实施例1本实施例详述表明比例i对于浆状发酵中的茶黄素产量的效应的一系列实验。厕所^l的茶叶是从肯尼亚新鲜空运到Bedford'shire,UK的本实验室的肯尼亚克隆35(KenyaClone35)(从采集至到达的时间为大约20小时),到达时的含水量=76.8重量%。在使用切菜机(AlexanderwerkAWBS150)和三次通过CTC机器(转子速度比例10:1)浸渍之前,在20。C的气温下,将叶在盘中萎凋18小时(含水量降低到70.8重量%)。然后在气流冷冻器中快速冷冻新鲜浸渍的叶。保持叶从第一次切割到冷冻的时间为最小,并经常是少于15分钟。所有的用水为去离子水(18MQ)。^^器使用如图1示意所示的罐式反应器进行所有的实验。反应器包含具有13cm半径和22cm高度的圆筒形储罐(l)。通过4.5cm半径的环形喷雾器(3)的进口管(3a)将空气泵入反应器的底部。环形喷雾器顶部有ll个孔(3b),底部有2个孔。环形喷雾器(3)与罐(1)共中心地分布,因为发现为了实现良好的气体物质转移,应该避免气泡与容器的侧面接触。向下泵送的涡轮搅拌器(2)直接位于喷雾器上面,扫过9cm的半径。搅拌器(2)在使用中以600rpm旋转。为了控制搅拌的反应混合物(10)的循环模式,其中每个快速向内延伸大约反应器直径的10%的4个挡板(4)环绕排列在罐(1)的内部。氧极(未显示)放置于挡板后面,以测量溶解的氧。反应器(l)顶部的端口(5)允许加入反应物和/或除去产物。将整个反应器放置于水浴中,以控制温度为20-25。C。氧浓度为饱和空气浓度的60-100%。(發"进行3个实验以模拟具有可变的保留时间(/r)的CSTR。为了模拟CSTR,首先获得工作浆,这包括向反应器(具有喷雾和搅拌)中的750mL水加入冷冻的浸渍的叶的等份,直至反应器中有需要的重量的处于发酵的不同阶段的叶。冷冻的叶易于称重,且每次添加0.1g之内的需要的重量。一旦反应器中有工作浆,那么继续添加,但为了保持总量恒定,也除去反应混合物的等份。为了4个保留时间,同时进行添加和除去。然后持续发酵180分钟,进行反应混合物的常规采样,以测定茶黄素和儿茶素的含量。表1给出了3个实验的条件。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>豸發4如下进行对照批次发酵。在一个等^f分中,向750mL水加入冷冻的叶(175g),同时对混合物喷雾并搅拌。然后继续发酵180分钟,进行反应混合物的常规采样,以测定茶黄素的含量。如下研究具有大部分新鲜叶和小部分发酵叶的反应混合物的发酵(如国际专利申请WO01/82713记载)。向750mL水加入冷冻的叶(61.25g),并允许发酵进行30分钟,进行搅拌和喷雾。然后将这种发酵的浆与另外的113.75g冷冻的叶合并。然后继续发酵180分钟,进行反应混合物的常规采样,以测定茶黄素的含量。潜^表2显示实验1-5的结果,其中i。是在直接添加最后一等份的冷冻叶之后,反应混合物中的儿茶素与茶黄素的重量比例。因此,对于实验1-3,i^是W的稳态数值。C,^是反应混合物中的茶黄素的最大量。^n。x是实现C^时,加入最后一等份的冷冻叶之后的时间。C/是在实验末期(加入最后一等份的冷冻叶180分钟后),反应混合物中的茶黄素的量。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>从表2的结果可以明显看出,相比儿茶素的量其中茶黄素的量相对较高的反应混合物的发酵,不仅允许茶黄素的相对高的产量(高G皿),也允许茶黄素在反应混合物中增加的稳定性(高C》。实施例2该实施例将批次发酵与本发明的方法进行比较,在本发明的方法中,通过发酵含有另外的纯的儿茶素的茶叶形成第一材料。将0.6g表儿茶素(Sigma-AldrichCo.Ltd,Gillingham,UK)溶于750ml去离子水中。然后将30g冷冻叶(如实施例1所述)与反应器中的表儿茶素溶液(如实施例1所述)混合。接着每2分钟向发酵反应混合物中加入10g冷冻叶的等份,进行24分钟。然后持续发酵180分钟,进行反应混合物的常规采样,以测定茶黄素的含量。力#7除在反应开始时加入单一等份的冷冻叶(150g)外,重复实验6。除没有将表儿茶素溶于去离子水外,重复实验6。潜果表3显示实验6-8的结果,其中,使用与表2相同的符号。表3实验C腿(mg/g付)"(佛&(mg/gi^t)679357275125418874576表3的数据证明向反应混合物中动态加入已经含有TFs的未发酵的叶(实验6-8),导致与等效的批次发酵(实验7)比较,较高的茶黄素产量。另外,实验6的方法也导致有价值的单没食子酸酯化的茶黄素的相对高的产量。在发酵的末期,相比实验7反应混合物的分别为12mg/g干叶和7mg/g干叶,实验6的反应混合物包含22mg茶黄素-3-没食子酸酯/g干叶和13mg茶黄素-3'-没食子酸酯/g干叶。实验8的方法也导致有价值的单没食子酸酯化的茶黄素的相对高的产量,尽管在这种情况下,茶黄素-3-没食子酸酯的量少于茶黄素-3'-没食子酸酯。在发酵的末期,实验8的反应混合物包含16mg茶黄素-3-没食子酸酯/g干叶和18mg茶黄素-3'-没食子酸酯/g干叶。实验6和8的结果比较,证明反应混合物中的简单儿茶素和没食子儿茶素的相对量对于茶黄素产量的影响。在实验6中,加入纯的表儿茶素,相比实验8,其必然减少反应混合物中的没食子儿茶素的比例。结果,实验6的茶黄素的总产量低于实验8。在批次发酵中,观察到甚至更高的效应,这在实验4(没有加入简单儿茶素)和实验7(加入简单儿茶素)的产量的比较是明显的。实施例3该实施例证明含有高水平的茶黄素-3-没食子酸酯的叶茶产物的18生产。^發9将1.2g表儿茶素(Sigma-AldrichCo.Ltd,Gillingham,UK)溶于750ml去离子水中。然后将30g冷冻叶(如实施例1所述)与反应器中的表儿茶素溶液(如实施例1所述)混合。接着每2分钟向发酵反应混合物中加入10g冷冻叶的等份,进行24分钟。然后持续发酵60分钟,并干燥反应混合物至含水量<5%,以产生叶茶产物。潜^叶茶具有总的79mg的茶黄素/g干叶的含量和30mg的茶黄素-3-没食子酸酯/g干叶的含量。权利要求1.一种产生富含茶黄素的产物的方法,该方法包括以下步骤(a)提供包含茶黄素的第一材料和包含儿茶素的第二材料;(b)将第一材料的一部分与第二材料的一部分接触,以形成具有儿茶素与茶黄素的重量比例R的反应混合物;(c)发酵反应混合物;然后(d)从反应混合物回收产物;特征在于R为0.07-5。2.如权利要求1所述的方法,其中,所述第一材料是至少部分发酵的茶叶。3.如权利要求1或2所述的方法,其中,所述第二材料是基本上未发酵的茶叶和/或基本上未发酵的茶提取物。4.如前述权利要求中的任一项所述的方法,其中,所述i小于3,优选小于2.5。5.如前述权利要求中的任一项所述的方法,其中,所述i大于0.15,优选大于0.3。6.如前述权利要求中的任一项所述的方法,其中,所述第一材料和第二材料在步骤(b)中以占干重1.01:1-100:1、优选1.5:1-10:1的重量比例4妄触。7.如前述权利要求中的任一项所述的方法,其中,所述第一材料和第二材料中的至少一,种是浸渍的茶叶。8.如前述权利要^中的任一项所述的方法,其中,所述第一材料包含占第一材料的千重的0.1-10%的量的茶黄素。9.如前述权利要求中的任一项所述的方法,其中,所述第二材料包含占第二材料的干重的7-100%的量的儿茶素。10.如前述权利要求中的任一项所述的方法,其中,所述步骤(b)中的反应混合物的儿茶素包含至少一种简单儿茶素和至少一种没食子儿茶素。11.如权利要求IO所述的方法,其中,所述第一和第二材料在步骤(b)中接触,使得反应混合物的儿茶素包含占儿茶素的重量的10%-70%的量的没食子儿茶素。12.如前述权利要求中的任一项所述的方法,其中,所述发酵步骤(c)包括浆状发酵。13.如前述权利要求中的任r-项所述的方法,其中,所述方法包括另外的步骤将第二材料的至少另外的一部分与反应混合物接触,以在发酵步骤(c)的至少部分过程中保持儿茶素和茶黄素的重量比例在范围A之内。14.如前述斥又利要求中的j壬一项所述的方法,其中,所述至少部分发酵在连续搅拌槽式反应器中进行。15.如前述权利要求中的任一项所述的方法,其中,在至少20%发酵持续时间反应混合物中的比例A处于稳定状态。16.—种包含大于72mg茶黄素/g千叶的叶茶产物。17.如权利要求16所述的叶茶产物,包含至少75mg茶黄素/g干叶,更优选80-150mg茶黄素/g干叶。18.如权利要求16或17所述的叶茶产物,另外包含儿茶素。19.如权利要求18所述的叶茶产物,其中,所述儿茶素与茶黄素的重量比例是0.07-5。20.如权利要求16-19中的任一项所述的叶茶产物,其中,所述茶黄素包含占茶黄素重量的至少25%的茶黄素-3-没食子酸酯。全文摘要本发明提供了一种产生富含茶黄素的产物的方法。该方法包括将第一材料和第二材料接触,以形成具有特定重量比例的儿茶素和茶黄素的反应混合物,发酵反应混合物,然后从反应混合物回收产物。本方法尤其适于产生含有高水平的茶黄素的叶茶产物。文档编号A23F3/14GK101541184SQ200780042607公开日2009年9月23日申请日期2007年11月15日优先权日2006年12月1日发明者G·R·霍奇斯,J·P·奥布霍维克兹申请人:荷兰联合利华有限公司
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