专利名称：伤寒杆菌血液样本中和增菌培养基的制作方法
伤寒杆菌血液样本中和增菌培养基 技术领域 本发明涉及一种伤寒杆菌血液样本中和增菌培养基，其主要成分是
牛肉膏、蛋白胨、胆盐、硫酸铝钾、氯化钠、小牛血清、葡萄糖、枸橼酸钠经一定的工艺制成。 供血液增菌培养伤寒，副伤寒杆菌用。利用培养试验鉴别细菌的种类，其关键在于准确、快 速、简便。而细菌接种量大小，会直接影响检测结果。往往需要将样本通过不同方法进行增 菌培养，来进行细菌种类的鉴别，这是目前微生物实验室最常用的手段。由于目前培养条件 的应用范围所限，供血液样本伤寒杆菌增菌培养的培养基没有特效的，存在所需接种量大、 培养时间长、特异性差，易出现假阳性或假阴性等问题。随着生物研究的进展，国内外对细 菌鉴别的增菌培养基研究也在不断的发展中。生物工作者一直希望能有一种能克服上述不 足的增菌培养基 一一 伤寒杆菌血液样本中和增菌培养基。
技术背景 本发明的目的在于提供一种能克服已有培养基不足的伤寒杆菌血
液样本中和增菌培养基。与其它同类培养基相比具备下列特点所需接种量小，少量细菌即 可迅速繁殖，在通常室温下或37t:培养7天即可观察结果；特异性强，不易出现假阳性和假 阴性。
发明内容
本发明的要点在于选择合适的组分，并进行合理混配，经加温、溶 解、混合、冷却、分装、高温灭菌等工艺而成一种伤寒杆菌血液样本中和增菌培养基。
本发明选择的配方如下(组分及其重量百分比％ ):牛肉膏(0. 4-0. 6)、小牛血清 (0. 4-0. 6)、蛋白胨(0. 8-1. 0)、氯化钠(0. 4-0. 6)、胆盐(0. 2_0. 4)、硫酸铝钾(0. 2_0. 3)、葡 萄糖(1. 8-2. 0) 、20%枸橼酸钠2. 0-3. 0ml、蒸馏水加至100ml。 本培养基含有枸橼酸钠、胆盐可抑制大多数革兰氏阴性杆菌，而对伤寒杆菌无抑 制作用或抑制力很小；硫酸铝钾可激活伤寒杆菌活性，使生长数量大大增加；氯化钠用于 调整渗透压；牛肉膏、蛋白胨、小牛血清、葡萄糖是培养基中的营养和支持成分。
本发明产品的制备方法是 1)、将牛肉膏、蛋白胨、胆盐、硫酸铝钾、氯化钠混合于水中，加热溶解，矫正pH至 7.8，分装于盐水瓶中，包扎瓶口，高压灭菌1.05kg30分钟； 2)、用虹吸法取上清液，按量其总量，按上述比例加入葡萄糖及枸橼酸钠，矫正pH 至7. 6 ; 3)、上述成分混合溶解后，高压灭菌0. 70kg20分钟； 4)、无菌条件下，加入无菌小牛血清，分装安培瓶，每瓶约5ml，存于冰箱中备用。
无菌操作采取病人静脉血液立即注入伤寒杆菌血液样本中和增菌培养基中，进行
增菌培养，在室温或37t:培养箱中，每天将增菌物移种到血琼脂平板和鉴别血琼脂平板培
养基上，并且继续进行培养和鉴定，增菌培养7天后报告结果。 本发明具有以下优点(1)所需接种量小，少量细菌可迅速繁殖；(2)特异性强，不 易出现假阳性或假阴性。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明
按照下表所列数据(重量百分比％ )及其所述步骤进行配置
配方一牛肉膏0. 4-0. 6
小牛血清0. 4-0. 6
蛋白胨0. 8-1.0
氯化钠0. 4-0. 6
胆盐0. 2-0. 4
硫酸铝钾0. 2-0. 3
葡萄糖1. 8-2. 0
20%枸橼酸钠2. 0-3. 0ml
蒸馏水加至100ml
配方二
牛肉膏0. 5-0. 6
小牛血清0. 5-0. 6
蛋白胨0.9-1.0
氯化钠0. 5-0. 6
胆盐0. 3-0. 4
硫酸铝钾0. 25-0. 3
葡萄糖1. 9-2. 0
20%枸橼酸钠2. 5-3. 0ml
蒸馏水加至100ml
配方三:
牛肉膏0. 4-0. 5
小牛血清0. 4-0. 5
蛋白胨0. 8-0. 9
氯化钠0. 4-0. 5
胆盐0. 2-0. 3
硫酸铝钾0. 2-0. 28
葡萄糖1. 8-1. 9
20%枸橼酸钠2. 0-2. 5ml
蒸馏水加至100ml
配方四
牛肉膏
小牛血清
蛋白胨
0. 45-0. 55 0. 45-0. 55 0. 85-0. 95氯化钠 0. 45-0. 55
胆盐 0. 25-0. 35
硫酸铝钾 0. 22-0. 28 葡萄糖 1.85-1.9
20%枸橼酸钠 2. 2-2. 28ml
蒸馏水 加至100ml
权利要求
本发明涉及一种伤寒杆菌血液样本中和增菌培养基，其主要成分是牛肉膏、蛋白胨、胆盐、硫酸铝钾、氯化钠、小牛血清、葡萄糖、枸橼酸钠经一定的工艺制成；其特征在于具有如下配方(组分及其重量百分比％)牛肉膏(0.4-0.6)；小牛血清(0.4-0.6)；蛋白胨(0.8-1.0)；氯化钠(0.4-0.6)；胆盐(0.2-0.4)；硫酸铝钾(0.2-0.3)；葡萄糖(1.8-2.0)；20％枸橼酸钠2.0-3.0ml；蒸馏水加至100ml。
2. —种权利要求1所述伤寒杆菌血液样本中和增菌培养基的制备方法，其特征在于具有如下的步骤1) 、将牛肉膏、蛋白胨、胆盐、硫酸铝钾、氯化钠混合于水中，加热溶解，矫正pH至7. 8， 分装于盐水瓶中，包扎瓶口 ，高压灭菌1. 05kg30分钟；2) 、用虹吸法取上清液，按量其总量，按上述比例加入葡萄糖及枸橼酸钠，矫正pH至7. 6 ;3) 、上述成分混合溶解后，高压灭菌0. 70kg20分钟；4) 、无菌条件下，加入无菌小牛血清，分装安培瓶，每瓶约5ml，存于冰箱中备用。
全文摘要
本发明涉及一种伤寒杆菌血液样本中和增菌培养基，其主要成分是牛肉膏、蛋白胨、胆盐、硫酸铝钾、氯化钠、小牛血清、葡萄糖、枸橼酸钠经一定的工艺制成。供血液增菌培养伤寒，副伤寒杆菌用。本培养基含有枸橼酸钠、胆盐可抑制大多数革兰氏阴性杆菌，而对伤寒杆菌无抑制作用或抑制力很小；硫酸铝钾可激活伤寒杆菌活性，使生长数量大大增加；氯化钠用于调整渗透压；牛肉膏、蛋白胨、小牛血清、葡萄糖是培养基中的营养和支持成分。本发明具有以下优点(1)所需接种量小，少量细菌可迅速繁殖；(2)特异性强，不易出现假阳性或假阴性。
文档编号C12Q1/10GK101698874SQ20081009344
公开日2010年4月28日 申请日期2008年4月21日 优先权日2008年4月21日
发明者曲奕 申请人:曲奕