专利名称：一种从青占鱼鱼骨中提取复合多肽液的方法
技术领域：
本发明涉及复合多肽液提取的方法，特别是涉及一种从青占鱼鱼骨中提取 复合多肽液的方法。
背景技术：
青占鱼作为低值海洋鱼类属于海洋中的中上层回流鱼类，近年来，渔获物 中低值小型鱼虾的比重逐渐上升。浙江省温州市作为海洋资源大市，其海洋资源 非常丰富，而青占鱼也是低值鱼中占比重较大的一块。温州的名小吃温州鱼丸, 有时也叫温州鱼面，在温州地区非常流行，这个鱼丸就是用青占鱼肉制成的， 而每年产生的大量青占鱼骨多用作加工价格低廉的鱼粉饲料，或者被作垃圾抛 弃，成为不可回收垃圾，造成资源的极大浪费。这些青占鱼经济价值仍然未得 到充分的利用，青占鱼骨中蛋白含量高，蛋白中支链蛋白含量也较高，若将这
些青占鱼鱼骨生产高F值复合多肽液，不仅可满足我省大力发展的体育事业对高 品质营养补给剂的要求，而且可以拓宽青占鱼骨深加工途径，并将成为海洋经 济的新的增长点。因此，本项目拟研究利用青占鱼鱼骨为原料，通过多酶联合 水解，将其加工成富含高F值小肽的，具有显著抗疲劳功效的多肽营养液。
发明内容
本发明的目的在于提供一种工艺简单、氨基态氮浓度较高的青占鱼鱼骨中 提取复合多肽液的方法。
本发明为达到以上目的，是通过这样的技术方案来实现的 一种从青占鱼鱼骨中提取复合多肽液的方法，依次包括以下步骤
1) 预处理青占鱼鱼骨，将其洗净、绞碎，用去离子水浸泡2-4小时；
2) 酶解用亚麻布过滤除去去离子水，将上述鱼骨按l: 5-l:10的质量比例 的加入水，按鱼骨质量的1%-5%量按动物蛋白水解酶和中性蛋白酶的质量比为 3:1-1:3的比例加入酶，调节pH在5.5-8.5，然后在45-70。C温度下酶解3-7个小时；
3) 灭酶将上述酶解液90-10(TC加热15-30分钟，以使酶失活；
4) 过滤将上述酶解液用亚麻布过滤，滤液在2000-4000rpm离心10-15min， 得到的上清液通过GPC凝胶净化，再通过0.22pm孔径的滤膜过滤除菌，即得到 无菌的复合多肽液；其中氨基态氮浓度为955.48 mg'(100ml)"—l 169.32 mg.(100m1)-1。所述中性蛋白酶为酶活7万、11万或13万的中性蛋白酶。 本发明具有的有益效果是该发明首次使用青占鱼鱼骨提取复合多肽液，
废物利用，提取工艺简单、氨基态氮浓度较高，动物试验证明抗疲劳效果显著。
具体实施例方式
实施例l: 一种从青占鱼鱼骨中提取复合多肽液的方法，依次包括以下步骤:
1) 、预处理称取30克青占鱼鱼骨，将其洗净、绞碎，用去离子水浸泡2小
时；
2) 、酶解用亚麻布过滤除去去离子水，将上述鱼骨加入150毫升的水，加 入庞博公司的动物蛋白水解酶0.225§，酶活7万的中性蛋白酶0.075g，调节pH为 5.5，然后在45t:温度下酶解3个小时；
3) 、灭酶将上述酶解液9(TC加热30分钟，以使酶失活；
4) 、过滤将上述酶解液用用亚麻布过滤，滤液在2000rpm离心10min，得 到的上清液通过GPC凝胶净化，再通过0.22pm孔径的滤膜过滤除菌，即得到无 菌的复合多肽液，其中氨基态氮浓度为955.48 mg乂lOOml)-1。
实施例2: —种从青占鱼鱼骨中提取复合多肽的方法，依次包括以下步骤
1) 、预处理称取30克青占鱼鱼骨，将其洗净、绞碎，用去离子水浸泡4小
时；
2) 、酶解用亚麻布过滤除去去离子水，将上述鱼骨加入300毫升的水，加 入庞博公司的动物蛋白水解酶0.6g，酶活13万的中性蛋白酶0.3g，调节pH为7.5， 然后在50'C酶解4.5小时；
3) 、灭酶将上述酶解液10(TC加热15分钟，以使酶失活；
4) 、过滤将上述酶解液用亚麻布过滤，滤液在4000rpm离心15min，得到 的上清液通过GPC凝胶净化，再通过0.22)im孔径的滤膜过滤除菌，即得到无菌 的复合多肽液；其中氨基态氮浓度为1169.32 mg'(lOOml)"。
实施例3: —种从青占鱼鱼骨中提取复合多肽的方法，依次包括以下步骤
1) 、预处理称取30克青占鱼鱼骨，将其洗净、绞碎，用去离子水浸泡3小
时；
2) 、酶解用亚麻布过滤除去去离子水，将上述鱼骨加入240毫升的水，加 入庞博公司的动物蛋白水解酶0.375g，酶活ll万的中性蛋白酶1.125g，调节pH为 8.5，然后在7(TC酶解7小时；
3) 、灭酶将上述酶解液95。C加热25分钟，以使酶失活；
4) 、过滤将上述酶解液用亚麻布过滤，滤液在3000rpm离心12min，得到的上清液通过GPC凝胶净化，再通过0.22,孔径的滤膜过滤除菌，即得到无 菌的复合多肽液，其中氨基态氮浓度为1055.48 mg《100mi;r1。
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显 然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能 从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护 范围。
权利要求
1、一种从青占鱼鱼骨中提取复合多肽液的方法，其特征在于包括以下步骤1)预处理青占鱼鱼骨，将其洗净、绞碎，用去离子水浸泡2-4小时；2)酶解用亚麻布过滤除去去离子水，将上述鱼骨按1∶5-1∶10的质量比例的加入水，按鱼骨质量的1％-5％量按动物蛋白水解酶和中性蛋白酶的质量比为3∶1-1∶3的比例加入酶，调节pH在5.5-8.5，然后在45-70℃温度下酶解3-7个小时；3)灭酶将上述酶解液90-100℃加热15-30分钟，以使酶失活；4)过滤将上述酶解液用亚麻布过滤，滤液在2000-4000rpm离心10-15min，得到的上清液通过GPC凝胶净化，再通过0.22μm孔径的滤膜过滤除菌，即得到无菌的复合多肽液；其中氨基态氮浓度为955.48mg·(100ml)-1—1169.32mg·(100ml)-1。
2、 根据权利要求所述的一种从青占鱼鱼骨中提取复合多肽液的方法，其特征在于所述中性蛋白酶为酶活7万、11万或13万的中性蛋白酶。
全文摘要
本发明公开了一种从青占鱼鱼骨中提取复合多肽液的方法。包括以下步骤将青占鱼鱼骨洗净、绞碎，用去离子水浸泡；过滤除去去离子水，将鱼骨按1∶5-1∶10的质量比例的加入水，按鱼骨质量的1％-5％量按动物蛋白水解酶和中性蛋白酶的质量比为3∶1-1∶3的比例加入酶，调节pH在5.5-8.5，然后在45-70℃温度下酶解；将上述酶解液90-100℃加热，以使酶失活；用亚麻布过滤，滤液在2000-4000rpm离心10-15min，得到的上清液通过GPC凝胶净化，再过滤除菌得到复合多肽液；其中氨基态氮浓度为955.48mg·(100ml)<sup>-1</sup>-1169.32mg·(100ml)<sup>-1</sup>。该发明废物利用，提取工艺简单、氨基态氮浓度较高，动物试验证明抗疲劳效果显著。
文档编号C12P21/06GK101503728SQ20081016417
公开日2009年8月12日 申请日期2008年12月29日 优先权日2008年12月29日
发明者春 张, 施佳慧, 郭海英 申请人:浙江体育科学研究所