专利名称：水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种水溶性水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法。
背景技术：
水溶性聚乙烯醇纤维在加热后溶于水，在其水溶液中加入添加剂后发生凝胶化， 或在低温下(-l(TC )冷冻形成凝胶，从而将微生物包埋固定在凝胶网络中。常用的添加剂
有硼酸和硼砂，在水溶性聚乙烯醇纤维水溶液中加入硼酸或硼砂，通过化学反应形成凝胶，
其制作步骤为(i)将水溶性聚乙烯醇纤维与水以i : 5 i : io比例相混合，水浴加热至
水溶性聚乙烯醇纤维溶化，然后静置降至常温。(2)将离心后酶/微生物悬浮于0.9^NaCl 溶液中，酶/微生物湿重与NaCl溶液的重量比为1 : 1 1 : 2。将此酶/微生物悬浮液 与水溶性聚乙烯醇纤维溶液以一定比例相混合。(3)用注射器将混合溶液滴加到冷却的饱 和硼酸溶液中，形成直径几毫米的白色球型颗粒。(4)将颗粒在饱和硼酸溶液中浸泡一段时 间，然后用生理盐水洗涤。 但目前这种水溶性聚乙烯醇纤维固定化方法中存在的主要问题是其一，水溶性 聚乙烯醇纤维是一种高粘性物质，并且水溶性聚乙烯醇纤维与硼酸反应较慢，滴下时间相 差不大的两液滴相碰时会粘结在一起，并逐步溶合成一团，即水溶性聚乙烯醇纤维颗粒有 非常强的附聚倾向，使水溶性聚乙烯醇纤维凝胶成球困难；其二，水溶性聚乙烯醇纤维与硼 酸进行反应固定时，硼酸上的三个经基只部分地进行了反应，反应后形成的高聚物凝胶上 还残留有亲水性的轻基，使得固定化颗粒在应用中存在很大的水溶膨胀性，随着使用时间 的增长，强度大大减弱，在实际应用中极为不利。
发明内容
本发明的目的就在于克服现有技术存在的上述不足，而提供一种制备简单、产品 质量高、方法实用的水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法。 为了实现上述目的，本发明是采用如下技术方案，本发明包括以下步骤
(1)将水溶性聚乙烯醇纤维、海藻酸钠、丙烯酞胺与水相混合，水浴加热至溶化，然 后静置降至常温成为水溶性聚乙烯醇纤维溶液；其中，水溶性聚乙烯醇纤维加入量为15 30% ;海藻酸钠加入量为0. 1 3. 0% ;丙烯酞胺加入量为0. 2 10% ;其余量为水；
(2)将酶/微生物悬浮液与所述的水溶性聚乙烯醇纤维溶液以一定比例相混合；
(3)将饱和硼酸溶液加入1 3%氯化钙和0. 1 2. 0%的N，N' —亚甲基双丙烯 酞胺制备交联剂溶液； (4)用注射器或滴管将第3步制备的混合溶液滴加到冷却的交联剂溶液中，使其 形成白色球型颗粒，并在其中浸泡若干小时，然后用生理盐水洗涤。
本发明的有益效果 本发明的水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备技术，可以使固定化颗粒制备简单，颗粒的机械强度明显提高，使用寿命延长。
具体实施例方式
实施例1 本发明包括以下步骤 (1)将15g水溶性聚乙烯醇纤维、1. Og海藻酸钠、5. Og丙烯酞胺与lOOmL水相混 合，水浴加热至溶化，然后静置降至常温； (2)纤维素酶湿重5g，悬浮于10mL 0. 9% NaCl中，与12. 5mL上述溶液相混合。
(3)将饱和硼酸溶液加入1% CaCl2和0. 5%的N， N' —亚甲基双丙烯酞胺制备成 都交联剂溶液； (4)用0. 40mm ID的注射器将(2)中的混合液滴加到冷却的交联剂溶液中，使其形 成2mm直径的白色球型小珠，并在其中浸泡20h，然后用生理盐水洗涤。
实施例2
制备步骤 (1)将20g水溶性聚乙烯醇纤维、1. 0海藻酸钠、4. 0丙烯酞胺与lOOmL水相混合， 水浴加热至溶化，然后静置降至常温； (2)丝抱酵母细胞湿重5g，悬浮于12mL 0. 9% NaCl中，与10mL上述溶液相混合。
(3)将饱和硼酸溶液加入2% CaCl2和0. 8%的N， N' —亚甲基双丙烯酞胺制备成 都交联剂溶液； (4)用胶皮吸管将(2)中的混合液滴加到冷却的交联剂溶液中，使其形成3mm直径 的白色球型小珠，并在其中浸泡24h，然后用生理盐水洗涤。
权利要求
水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法，其特征在于，包括以下步骤(1)将水溶性聚乙烯醇纤维、海藻酸钠、丙烯酞胺与水相混合，水浴加热至溶化，然后静置降至常温成为水溶性聚乙烯醇纤维溶液；其中，水溶性聚乙烯醇纤维加入量为15～30％；海藻酸钠加入量为0.1～3.0％；丙烯酞胺加入量为0.2～10％；其余量为水；(2)将酶/微生物悬浮液与所述的水溶性聚乙烯醇纤维溶液以一定比例相混合；(3)将饱和硼酸溶液加入1～3％氯化钙和0.1～2.0％的N，N’一亚甲基双丙烯酞胺制备交联剂溶液；(4)用注射器或滴管将第3步制备的混合溶液滴加到冷却的交联剂溶液中，使其形成白色球型颗粒，并在其中浸泡若干小时，然后用生理盐水洗涤。
2. 根据权利要求1所述的水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法，其特征在于，包括以 下步骤(1) 将15g水溶性聚乙烯醇纤维、1.0g海藻酸钠、5. Og丙烯酞胺与100mL水相混合，水 浴加热至溶化，然后静置降至常温；(2) 纤维素酶湿重5g，悬浮于10mL 0. 9% NaCl中，与12. 5mL上述溶液相混合；(3) 将饱和硼酸溶液加入1% CaCl2和0. 5%的N， N' —亚甲基双丙烯酞胺制备成都交 联剂溶液。
全文摘要
水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法属于生物化学领域，尤其涉及一种水溶性水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法。本发明提供一种制备简单、产品质量高、方法实用的水溶性聚乙烯醇纤维的生物制备方法。本发明是采用如下技术方案，本发明包括以下步骤(1)将水溶性聚乙烯醇纤维、海藻酸钠、丙烯酞胺与水相混合，水浴加热至溶化，然后静置降至常温成为水溶性聚乙烯醇纤维溶液；(2)将酶/微生物悬浮液与所述的水溶性聚乙烯醇纤维溶液以一定比例相混合；(3)将饱和硼酸溶液加入氯化钙和N，N’－亚甲基双丙烯酞胺制备交联剂溶液；(4)将第3步制备的混合溶液滴加到冷却的交联剂溶液中，使其形成白色球型颗粒，然后用生理盐水洗涤。
文档编号C12N11/00GK101735998SQ20081017915
公开日2010年6月16日 申请日期2008年11月27日 优先权日2008年11月27日
发明者田开 申请人:田开