专利名称:小麦抗白粉病基因Pm21的分子标记的制作方法
技术领域:
本发明小麦抗白粉病基因Pm21的分子标记,提供了与小麦抗白粉病基因Pm21紧 密连锁的共显性分子标记,属于作物遗传育种与生产领域。
二背景技术:
由专性寄生真菌小麦白粉菌引起的小麦白粉病是危害小麦生产的一种世界性病 害。小麦白粉菌具有小种多、变异快、适应范围广等特点,小麦生产中使用抗性基因时,白粉 菌群体往往会因寄主抗性基因的选择作用而发生协同进化,克服抗性基因,导致病害大流 行(植物病理学报,1995,25 :116)。随着分子标记技术的产生和不断发展完善,利用分子标 记技术标记抗病基因,并用于标记辅助育种已成为筛选抗病基因聚合体、选育抗病品种的 有效方法(张庆利等2004Agricultural Science in China, 2004, 3 (6) :409-415)。而建 立与抗病基因紧密连锁的分子标记,是进行分子标记辅助育种的基础。
本研究利用F2分离群体分组法(BSA)对抗白粉病基因Pm21进行了 SSR标记分析, 寻找与Pm21连锁的SSR标记。 本实验所用材料是以Chancellor为背景带有抗病基因Pm21的小麦近等基因系 为抗病亲本,以不具有任何抗病基因的小麦品种Chancellor为感病亲本,配制杂交组合 Pm21XChancellor,获得杂种&。 自交,获得&分离群体。
三
发明内容
本发明的目的是提供了与小麦抗白粉病基因Pm21紧密连锁的共显性分子标记, 有效用于Pm21的跟踪检测和标记辅助育种。而且利用该分子标记在早代就可以进行选择, 提高选择的准确性,縮小育种群体,并且不受环境、生长季节的限制,结合加代技术能大大 縮短育种年限、提高育种效率。
步骤一 分离群体的创建 Pm21XChancellor获得F!种子,F!自交,得F2分离群体。
步骤二 白粉病抗性接种及鉴定 用当前小麦白粉菌的优势小种NO. 15号小种对抗、感亲本、所有的&单株进行 两次接种, 一次在三叶期(盛宝钦等1988植物保护,1988, 1 :49-501988), 一次在拔节期 (CI匪TY),同时以感病亲本Chancellor为感病对照。在感病对照充分发病的条件下,调查 抗、感分离情况,每隔2-3天重复调查一次,病级鉴定按盛宝钦等(1988)提出的反应型标准 (0-4级)进行。 步骤三F2代群体的分子标记分析
步骤四分子标记获得 根据连锁交换规律,利用扩增获得的&代群体各单株基因型资料与田间鉴定 获得的对应各单株的抗、感反应型资料构建7对分子标记与Pm21基因的连锁图谱,利用 MAPMARKER3. 0计算各标记与Pm21基因间的遗传距离。
权利要求
小麦抗白粉病基因Pm21的分子标记,其特征在于小麦抗白粉病基因Pm21的分子标记的获得方法,包括步骤一分离群体的创建Pm21×Chancellor获得F1种子,F1自交,得F2分离群体;步骤二白粉病抗性接种及鉴定用当前小麦白粉菌的优势小种NO.15号小种对抗、感亲本、所有的F2单株进行两次接种,一次在三叶期,一次在拔节期,同时以感病亲本Chancellor为感病对照,在感病对照充分发病的条件下,调查抗、感分离情况,每隔2-3天重复调查一次,病级鉴定按盛宝钦等提出的反应型标准0-4级进行;步骤三F2代群体的分子标记分析建立抗病池和感病池从Pm21×Chancellor的F2代分离群体中随机选取10个抗病单株的DNA等量混合,随机选取10个感病单株的DNA等量混合;步骤四分子标记获得根据连锁交换规律,利用扩增获得的F2代群体各单株基因型资料与田间鉴定获得的对应各单株的抗、感反应型资料构建分子标记与Pm21基因的连锁图谱。
全文摘要
本发明小麦抗白粉病基因Pm21的分子标记,属于作物遗传育种与生产领域。本研究筛选出与Pm21基因连锁的SSR标记,它们可有效地用于Pm2基因的标记辅助选择。以该标记为路标,可以进行Pm21基因的精细定位或通过染色体步移法接近Pm21基因,从而为Pm21基因的克隆打下基础。
文档编号C12Q1/68GK101748133SQ200810238658
公开日2010年6月23日 申请日期2008年12月19日 优先权日2008年12月19日 公开号200810238658.0
发明者曹淑兰 申请人:曹淑兰