专利名称:动物活体肌肉组织基因电脉冲导入仪的制作方法
技术领域:
本实用新型涉及一种生物工程技术中用于活体导入基因的电脉冲发生装置,特别 是一种动物活体肌肉组织基因电脉冲导入仪。
技术背景
目前DNA疫苗和基因治疗的研究中一个十分重要的技术难关是如何提高将基因导 入动物活体细胞内的效率。研究和开发能将外源性DNA安全而高效地导入组织细胞中 的仪器是解决这个问题的关键。采用特定的电场使活体细胞处在脉冲电场之中,能显 著地增强细胞膜的通透性,从而使DNA分子能大量地进入细胞内,提高DNA疫苗和基 因治疗的效果。电穿孔(Electroporation, EP)是将靶向组织暴露于短暂的方波电脉 冲环境中,诱导细胞膜产生短暂可逆的穿孔,在膜穿孔期间,许多分子(包括药物、 质粒)进入细胞。
电脉冲已被用于活体内皮肤、肝脏、肿瘤细胞和肌肉组织中转染DNA。尽管研究采 用的设备、参数、载体和动物不同,但是已有的研究结果证实,肌肉注射质粒DNA结 合电穿孔,成功地将基因导入肌肉组织,使用基因电脉冲导入仪向动物肌肉组织中导 入质粒DNA,能够使肌肉组织成为生物反应器,长期持续合成分泌蛋白质进入血液。动 物研究证实,采用低场强(200V/cm以下)、长脉冲(20ms-50ms每个脉冲)方波电穿 孔,增强了动物肌肉组织中DNA转染效率,可以将表达量提高100至1000倍。这种简 便、有效、稳定的传递方法在DNA疫苗和基因治疗应用方面具有巨大潜力,而且通过 控制电穿孔,可以实现控制DNA表达的特定方式和时间,消除动物个体差异。
目前,随着活体组织电穿孔应用技术的发展,国内外己有多种相应功能的仪器出 售。如WJ-2005D智能活体基因导入仪。目前同类产品存在以下问题电极为2针电极 且正负电极固定。2针电极作用电场面积小,对活体组织实施电穿孔时,易造成组织中 注入的DNA不在电场作用范围内,影响了 DNA转化率和表达效率。
发明内容
为了克服现有体内基因导入仪的不足,本实用新型的目的是提供一种程序控制、 操作参数可调、可连续放电并形成较宽的电场,进而提高DNA转化率和表达效率的动 物活体肌肉组织基因电脉冲导入仪。本实用新型的目的是通过以下技术方案实现的包括电源VCCl+、中央处理器 IC1,其特征在于设有至少3针电极,所述每针电极均包含电极a和电源VCC3+。 上述的电极a最好为3至7针。 上述的电极a的电压回路中最好设有控制器J。
上述的动物活体肌肉组织基因电脉冲导入仪最好设有显示器、报警器LS的至少一种。
与现有技术相比,本实用新型通过程序控制、操作参数可调、可连续放电并形成 较宽的电场,进而提高DNA转化率和表达效率。
图1是本实用新型实施例的电路图。
图中al a5为电极,bl b5为电极接地端,D1 D4为发光晶体二极管,D5为晶体 二极管,C1 C4为电容器,J为继电器,JK为继电器J的控制接点,IC1 IC7为集成芯 片,K1 K5为开关,LED1 LED4为数码管,LS为报警器,Q1 Q16为晶体开关管, R1 R51为电阻,U1 U5为光耦合器,VCCl+、 VCC2+、 VCC3+为直流电源。
具体实施方式
参照附图l,是本实用新型实施例的电路图,包括电源VCCl+、中央处理器IC1, 中央处理器IC1采用8051单片机芯片,在中央处理器IC1的22~26脚上连接有5针电 极al a5,每针电极均包含电极a(l 5)和电源VCC3+,电源VCC3+为0~260V可变电 压电源,在电极al a5的电压回路中设有开关管Q8、 Q10、 Q12、 Q14、 Q16,该开关 管的控制极与中央处理器IC1之间设有由功放器IC2 IC5、光耦合器U1 U5、开关管 Q7、 Q9、 Qll、 Q13、 Q15组成的控制器,功放器IC2、C5为SN7407集成世片,驱动 光电偶合器U1 U5 ,同时电极al a5的电压回路中还设有控制器J,控制器J为继电 器,其控制接点JK设于电极al a5的电源VCC3+的电压回路中,为能够及时了解电脉 冲导入仪的工作状况,在中央处理器IC1上还设有显示器、报警器LS,显示器由4个 位数码管LED广LED4组成。
权利要求1、一种动物活体肌肉组织基因电脉冲导入仪,包括电源VCC1+、中央处理器IC1,其特征在于设有至少3针电极,所述每针电极均包含电极a和电源VCC3+。
2、根据权利要求1所述的动物活体肌肉组织基因电脉冲导入仪,其特征在于所 述的电极a为3至7针。
3、 根据权利要求1或2所述的动物活体肌肉组织基因电脉冲导入仪,其特征在于 所述的电极a的电压回路中设有控制器J。
4、 根据权利要求1或2所述的动物活体肌肉组织基因电脉冲导入仪,其特征在于 设有显示器。
5、 根据权利要求3所述的动物活体肌肉组织基因电脉冲导入仪,其特征在于设有 显示器。
6、 根据权利要求1或2所述的动物活体肌肉组织基因电脉冲导入仪,其特征在于 设有报警器LS。
7、 根据权利要求3所述的动物活体肌肉组织基因电脉冲导入仪,其特征在于设有 报警器LS。
8、 根据权利要求4所述的动物活体肌肉组织基因电脉冲导入仪,其特征在于设有 报警器LS。
9、 根据权利要求5所述的动物活体肌肉组织基因电脉冲导入仪,其特征在于设有 报警器LS。
专利摘要本实用新型公开了一种动物活体肌肉组织基因电脉冲导入仪,包括电源VCC1+、中央处理器IC1,其特征在于设有至少3针电极,所述每针电极均包含电极a和电源VCC3+。与现有技术相比,本实用新型通过程序控制、操作参数可调、可连续放电并形成较宽的电场,进而提高DNA转化率和表达效率。
文档编号C12M1/42GK201261786SQ20082011544
公开日2009年6月24日 申请日期2008年6月2日 优先权日2008年6月2日
发明者刘守仁, 勇 姬, 宋志强, 皮文辉 申请人:新疆农垦科学院