专利名称：适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽。
背景技术：
细胞记录槽是为了配合膜片钳技术的开展而设计制造，其用途是提供给 急性分离的活细胞、培养细胞、活体瞬时组织切片等置于其中之后，能继续 保持一个长时间存活的场所，使膜片钳钳制细胞过程得以顺利完成。而且， 细胞记录槽还是提供为维持活体细胞长时间存活而加于细胞外液进行交换的 场所，这种交换是由附属加药装置向细胞记录槽中的活体细胞或切片注入合 符不同要求的、经氧饱和的细胞外液，或者注入混有不同浓度的药物成分的 细胞外液，经充分作用细胞后，由附属的真空泵把细胞记录槽中过多的细胞 外液吸出，但又要保留一定量细胞外液在记录槽中，让细胞或切片沉附在细 胞记录槽底部不被灌流液冲走，便于实验者对细胞或切片进行膜片钳实验。 细胞记录槽还应成为适合附属的加热系统对记录槽进行加热保纟显，维持细胞 记录槽中活体细胞的生理需求的传温导体。目前市面上销售的细胞记录槽， 尽管看似简单，但多为进口产品，价格昂贵， 一个细胞记录槽加上相配的适 配器需要几百美金；另一方面，这些进口细胞记录槽存在着如噪音干扰大、 液体的流动和交换不方便、不易清洗等各自不同的缺陷，不能完全达到上述 提到的各种要求。为克服目前市售细胞记录槽存在的缺陷和不足，需要研发 一种新的适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽。 发明内容
本实用新型的目的是提供一种设计简单，用材随意，容积大小适宜、能 显著降低噪音千扰、透光度和保温效果好、液体的流动和交换方便、易除杂 质、易于清洗的价廉物美的适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽。
为了实现本实用新型的目的，提供一种适用于膜片钳记录技术的细胞记 录槽，包括槽体(l)、细胞槽(2)和加药槽(W)，在槽体的中央有细胞槽，细胞槽 以载玻片(3)为槽底，在细胞槽上部四周拓展有一堰围槽(4)，堰围槽的一端槽底有引流孔道(8)，在堰围槽的另一端有一进药通道(9)，进药通道与加药槽(IO) 连通，灌流液注入到加药槽经进药通道沿堰围槽壁流到细胞槽中；在堰围槽 内与细胞槽外的一角有一盐桥置放孔(5)，在堰围槽外槽体边还有一个贯穿槽 体的盐桥置放孔(5)，银板(7)为L形黏贴在槽体的侧面和底面，并封闭堰围槽 外槽体边的盐桥置放孔下端口。
本实用新型适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽，所述的槽体(l)采用聚 乙烯透明塑胶板制成。为了与倒置显微镜载物台上夹持适配器配套，便于夹 持器对细胞记录槽的夹持、固定，并且记录槽的大小要求与细胞恒温控制器 的加热适配器一致，因此选择槽体长70mm、宽50mm、厚7mm;如果记录槽太 深，就会阻挡膜片钳记录电极的移动，因为膜片钳记录电极的移动距离是在 三维微操作器的控制下进行移动，三维微操纵器的上下、左右、前后移动距 离各仅为20um左右调控范围非常小，不管是前后、左右、上下移动电极， 移动距离非常有限。
本实用新型适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽，所述的细胞槽(2)是以 槽体(l)中央为中心点，挖去长20ram、宽15mm、深7mm的长方体形成槽壁，再 以载玻片(3)为槽底围成的槽。在槽体的底面挖出一个浅槽，浅槽打磨成磨砂 面，载玻片通过密封胶或医用凡士林黏贴在浅槽里；浅槽的长度和宽度超出 细胞槽底长度和宽度，浅槽长边延伸到槽体的边部，使细胞槽既不会渗漏液 体，载玻片又不会突出于槽体底面，有利于记录槽平放在显微镜载物台上。 采用载玻片作细胞槽的槽底，每次做完实验后，去掉载玻片，对记录槽进行 清洗，下次作实验时再更换一块新的载玻片即可，这样的设计既方便记录槽 清洗又有利于对记录槽加热保温，还能保证透光度。本实用新型所用载玻片 为市售医用载玻片。
本实用新型适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽，所述的堰围槽(4)是在 细胞槽上部向四周拓展出一个长30mm、宽25mm、距离槽体表面深3. 5mm的 槽。在堰围槽一端槽底，钻一个直径为2mm的引流孔道(8)，引流孔道直径刚 好能插进临床上使用的用于输液排气管针头，目的是排出堰围槽中的灌流液; 在堰围槽的另一端，有一进药通道(9)，进药通道最低点离堰围槽底lmra，进 药通道与加药槽卿连通，加药槽长10腿、宽5mm深2mm，灌流液通过附属加 药装置注入到加药槽，进药通道是一条狭窄沟渠，把加药槽的灌流液引到堰
4围槽沿槽壁流到细胞槽中。这样让灌流液能很缓慢流入到细胞槽中，可以避 免灌流液直接注入细胞槽造成把贴附在细胞槽底部的活细胞冲走的弊病。
本实用新型适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽，所述的盐桥置放孔(5) 是置放盐桥的孔洞，在细胞槽外和堰围槽内的拐角处钻有一个直径为5mra的 圆孔，另一个在其同一侧的堰围槽外、离槽体边缘2mm处， 一个直径5mm、 贯穿槽体上下的孔洞，两孔洞为盐桥置放孔，盐桥骑跨在这两个孔洞中。
本实用新型适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽，所述的银板(7)为L形， 在银板上焊接有一个银柱(6);在槽体底面的盐桥置放孔四周打磨出一个小浅 槽，经磨砂，并黏贴上薄银板(7)，银板大小完全覆盖过盐桥置放孔的下端口， 银板既起到接地作用，又不让盐桥置放孔渗漏液体。使用细胞记录槽时，银 柱与膜片钳电极夹持器上接地柱通过金属银丝相连，倒U形盐桥骑跨在两个 盐桥置放孔中，组成一条由电极夹持器的地线、银板、盐桥、细胞记录槽中 盐溶液串联在一起的良好传导系统，能显著降低记录槽中盐溶液产生的噪音 对膜片钳记录结果的干扰。
本实用新型由堰围槽壁、细胞槽壁和载玻片合围成可接纳溶液的浴槽， 浴槽下层容积为有效记录槽，上层为堰围槽，在上层有进药通道(9)和引流孔 道(8)，当含有活细胞悬液加入到浴槽并作短暂静止后，用附属的加药装置把 细胞外液通过加药槽柳、经进药通道注入到堰围槽，沿堰围槽壁缓缓流到有 效记录槽，等液体注满有效记录槽及堰围槽后，由于活的心肌细胞特性是容 易附壁吸底，静止一会等活细胞贴附到下层有效记录槽底部后，用恒流泵或 真空泵从堰围槽的引流孔道把堰围槽中混合液抽吸走，直到保留下层有效溶 液量，这个过程经反复进行，由注入细胞外液，到抽吸细胞外液一进一出的 过程，就可冲走浴槽中溶液所含杂质，保持浴槽中溶液的干净度，有利于对 细胞或切片进行膜片钳钳制。
本实用新型设计的细胞记录槽浴槽容积为1. 0 1. 5ml，容积大小适宜。 浴槽容积如果太大，盛装在细胞记录槽中的电解质溶液就会产生很大的电容 电阻，电容电阻过大，就会产生噪音干扰，从而影响了膜片钳的钳制电位。 因为当对细胞或切片进行膜片钳钳制时，浴槽中电解质溶液与记录电极间产 生很大液接电位，这种大的液接电位往往超过了膜片钳放大器的补偿范围， 以致膜片钳无法进行。当然，浴槽的容积也不能太小，否则，浴槽中的液体非常容易被蒸发掉，使沉附在有效记录槽底部的细胞或切片因缺乏营养和氧 气而死亡。
本实用新型适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽具有如下的优点
1、 本实用新型设计简单，用材随意，与目前市场上销售的进口细胞记录 槽相比，价格非常低。
2、 本实用新型设计的槽体厚薄适宜，容积大小严格按实验要求设计为
1.0 1.5ml的规格，大大增加了膜片钳记录电极的可操作性，以及减少液接
电位产生的噪音干扰。
3、 本实用新型盐桥置放孔的设计巧妙，及盐桥置放孔下端口黏贴一块薄
的银板，接地效果非常好，产生的噪音干扰特别小。
4、 本实用新型在细胞槽上部拓展堰围槽是非常合理和必要的，既能交换 浴槽中流动的灌流液，吸走浴槽中过多的液体杂质，又不会因交换灌液体而 影响贴附在有效记录槽底部的活细胞。
5、 本实用新型采用载玻片黏贴在细胞槽背面作为槽底，这样可非常方便 清洗细胞记录槽，每次只需对槽体进行彻底清洗，然后更换干净的载玻片即 可，并且载玻片的透光和温度传导效果很好。
本实用新型用附图作进一步说明
图1为本实用新型细胞记录槽总体结构的俯视示意图。
图中，(l)槽体、(2)细胞槽、(3)载玻片、(4)堰围槽、(5)盐桥置放孔、(6)银 柱、(7)银板、(8)引流孔道、(9)进药通道、(IO)加药槽。
图2为本实用新型细胞记录槽结构的主视剖面示意图。
图3为本实用新型细胞记录槽后侧视示意图。
具体实施方式
实施例1:本实用新型适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽的结构如图1 所示。包括有槽体(l)、载玻片(3)、银柱(6)和银板(7)，槽体上有细胞槽(2)、堰 围槽(4)、两个盐桥置放孔(5)、引流孔道(8)、进药通道(9)和加药槽(10)。
本实用新型细胞记录槽可接纳溶液的容积为1.5ml，制作步骤如下
① 槽体选用聚乙烯透明塑胶板，制成长70隱、宽50咖、厚7ram的槽体；
② 先在槽体中央挖去长20mmX 15mmX7mm的长方体，在挖去长方体的槽
6体上部，从中央向四周拓展出一个长30腿、宽25mm、离槽体表面深3. 5mm的堰围槽；
③ 在堰围槽一端槽底边的中点，钻一个直径为2mm的引流孔道(8);在堰围槽的另一端挖一个长10mm、宽5腿、深2mm的加药槽卿，再从槽体表面开一条从加药槽通向堰围槽的进药通道(9)，进药通道最低点离堰围槽槽底lmm;是一条狭窄明沟渠，可以把进药槽的液体引到堰围槽中。
④ 在槽体背面，挖一个与市售的医用载玻片一样厚和宽的浅槽，浅槽长度和宽度超出挖去的长方体的长度和宽度，浅槽长边一直延伸到槽体边，浅槽打磨成磨砂面；
⑤ 钻两个盐桥置放孔(5):在细胞槽外和堰围槽内的一角钻一个5 ■圆孔，在堰围槽外同一侧，离槽体边缘2mm处也钻一个5腿孔洞，孔洞贯穿槽体上下；
⑥ 在槽体背面、堰围槽外的盐桥置放孔四周挖一个20mmX 12mm的浅槽，浅槽打磨成磨砂面，用L形银板黏贴在槽体的侧面和底面浅槽中，使银板全面封闭槽体底面盐桥置放孔，保证盐桥置放孔不渗漏液体；在银板上焊一银柱(6);
⑦ 将市售医用载玻片(3)用密封胶黏贴在的槽体背面的浅槽中，并保证细胞槽不渗漏液体。本实用新型细胞记录槽就制作完成了。
实施例2:制作本实用新型适合于膜片钳记录技术的细胞记录槽，其基本结构如实施例l，不同之处在于容积为1.0ml。其二引流孔道(8)不设在堰围槽底边中心，而设在堰围槽底边近角落处；其三载玻片(3)用医用凡士林直接黏贴在的槽体背面的浅槽中。
上述实施例1和实施例2制作的本实用新型细胞记录槽，价廉物美、容积大小适宜，透光度和保温性好、使用时液体的流动和交换方便、易除杂质、易于清洗，能显著降低噪音干扰，大大增加了膜片钳记录电极的可操作性。
本实用新型适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽具有设计科学、结构简单，使用方便和价廉物美等优点，适于在膜片钳技术的研究领域推广和应用。
权利要求1、一种适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽，包括槽体、细胞槽和加药槽，其特征在于在槽体的中央有细胞槽，细胞槽以载玻片为槽底，在细胞槽上部四周拓展有一堰围槽，堰围槽的一端槽底有引流孔道，在堰围槽的另一端有一进药通道，进药通道与加药槽连通，灌流液注入到加药槽经进药通道沿堰围槽壁流到细胞槽中；在堰围槽内与细胞槽外的一角有一盐桥置放孔，在堰围槽外槽体边还有一个贯穿槽体的盐桥置放孔，银板为L形黏贴在槽体的侧面和底面，并封闭堰围槽外槽体边的盐桥置放孔下端口。
2、 根据权利要求1所述的适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽，其特征 在于在槽体的底面挖一个浅槽，浅槽打磨成磨砂面，载玻片通过密封胶或医 用凡士林黏贴在浅槽里。
3、 根据权利要求1所述的适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽，其特征 在于银板为L形，在银板上焊接有一个银柱。
4、 根据权利要求l所述的适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽，其特征 在于浴槽的容积为1. 0 1. 5ml。
专利摘要本实用新型涉及一种适用于膜片钳记录技术的细胞记录槽，包括槽体、细胞槽、载玻片、堰围槽、盐桥置放孔、银柱、银板、引流孔道、进药通道和加药槽，细胞槽在槽体中央，以载玻片为槽底，细胞槽上部四周拓展有堰围槽，堰围槽一端槽底有引流孔道，另一端有加药槽和进药通道，灌流液从加药槽注入经进药通道沿堰围槽壁流到细胞槽中；在堰围槽内、外各有一盐桥置放孔，堰围槽外的盐桥置放孔贯穿槽体上下，L形的银板黏贴在槽体侧面和底面，并封闭堰围槽外的盐桥置放孔下端口。本实用新型设计科学、结构简单，噪音干扰小，透光度和保温性好，具有液体流动和交换方便、易除杂质、易清洗、价廉物美等优点，适于在膜片钳技术的研究领域推广和应用。
文档编号C12M3/00GK201276574SQ20082019140
公开日2009年7月22日 申请日期2008年10月13日 优先权日2008年10月13日
发明者唐其柱, 汪晶晶, 腾 王, 王清秀, 甘文云 申请人:武汉大学