用于欧洲油菜的新杂交系统的制作方法

专利名称：：用于欧洲油菜的新杂交系统的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种欧洲油菜(Brassicanapus)核条件性雄性不育系统。本发明的实施方案提供了预基础(prebasic)(雄性不育)雌性系(MsMsrfrf)、(雄性能育)保持系(msmsrfrf)、基础(雄性不育)雌性系(Msmsrfrf)和杂交系。进一步提供了用于生产那些品系的方法。本发明的进一步的实施方案涉及与不育性、能育性和保持系等位基因分别相关的标记，以及那些标记在提供杂交系统中的应用。发明背景来自芸苔属植物的含油种子是一种愈加重要的农作物。作为植物油的来源，在商业重要性上其目前仅排在大豆和棕榈之后，与向日葵相当。其油被用作为色拉油和烹饪用油，并且在生物燃料(生物柴油)中起着日益重要的作用。芸苔油(Brassicaoil)即菜籽油(rapeseedoil)最初由于其相对高水平的芥子酸，因此对人有害。芥子酸通常以基于总脂肪酸含量的30-50%(重量)的浓度存在于自然栽培品种中。当植物科学家鉴定到低芥子酸种质时(Stefansson，1983)，就克服了该问题。尽管在它们的总脂肪酸组成中具有小于2%的芥子酸(一致的零点精度(singlezeroquality))的这些品种出产食用油，但在高蛋白质粕(meal)中称为芥子油苷(GSLs)的含硫化合物的持续存在仍然是进一步市场扩张的主要约束。由于种子中存在GSLs，因此阻碍了油菜籽粕被广泛接受用于动物营养。此外，由于在提炼油过程中在酶裂解下以及在破碎过程中通过内源性酶——黑芥子酶作用消化下，芥子油苷可导致抗营养分解产物(例如硫氰酸盐、异硫氰酸盐和亚硝酸盐)的产生，因此它们也是不希望有的。结果，开发了所谓的“双低”品种(在油中低芥子酸以及在提炼油后在固体粕中低芥子油苷)，其具有基于总脂肪酸含量的小于2%(重量)的芥子酸含量，以及小于30μmol/g无油粕的芥子油苷含量。在加拿大首先开发了这些油菜优质品种，被称为双低油菜(canola)。目前，欧洲法律所允许的最大阈值为通过HPLC所测量的，25μmol总芥子油苷(GSL)/克(g)种子(8.5%水分含量)(EU法令2294/92)。当通过TMS测量时，在加拿大栽培的双低春油菜(springcanola)品种必须具有小于30μmolGSLs/g风干的无油粕(0%水分含量)的GSL水平。在欧洲和加拿大所通常栽培的双零油菜品种的GSL水平明显低于阈值水平，为官方阈值水平的60%或甚至更低。然而，为了登记双低油菜品种，许多国家需要甚至更低的芥子油苷水平。此外，植物科学家已尝试改良菜籽油的脂肪酸组成(R6bbelen,1984；Ratledge等，1984；Robbelen,1975；Rakow&McGregor,1973)。尤其是，在温带农业区中冬油菜(欧洲油菜(BrassicanapusL.ssp.oleifera(Metzg.))，十字花科)是一种重要的含油种子生产作物。在德国，在2006年大约1.5百万公顷(12%的总农业区)播种油菜。油菜(oilseedrape)是一种具有约1/3远交的优势自花传粉作物(Becker等，1992)。油菜籽植物的育种业已集中于通过利用所述植物的高自交亲和性所得到的开放传粉种子。在杂种栽培品种开发中，对该用于油菜种子生产的显著的杂种优势产生了兴趣(Riaz等，2001)。杂种优势意味着通过两个遗传学上不同的、纯合基因型杂交得到的杂种与它们的亲本相比，具有生长和产量优势(Shull，1922)。油菜籽杂种在产量上总显示显著的杂种优势。在油菜籽杂交育种初期，多位作者报道了对于欧洲油菜(BrassicanapusL.)F1杂种的种子产量值得考虑的杂种优势(Schuster，1969；Robbelen,1985；Grant&Beversdorf，1985；Lefort-Buson等，1987；Brandle&McVetty,1989；Paulmann&Frauen,1991；Stefansson,1983；Brandle&McVetty,1990；Shen,2005)。大体上，在春油菜籽中杂种优势水平可高达20%-30%,以及在冬油菜籽中为约30%-40%。杂种种子的有效生产既需要鉴定杂种优势群(heteroticgroups)(遗传上差异基因库；Melchinger&Gumber，1998，Becker&Link,2000)又需要一种用于那些杂种优势群定向杂交的方法。在冬油菜中，在欧洲登记的一代杂种品种是使用INRAogura体系的杂交系组合以及使用MSL体系的全恢复的杂种(详见下文)。然而，与优良近交系相比，杂种优势效应仍是适中的。然而，相对低的产量增加并不是由杂交系统的低效所引起的，而是由于数十年的育种以及政府法规(例如芥子油苷或芥子酸含量)的缘故，因此在油菜籽中缺少遗传多样的基因库，其还造成有限的种质变异性。更多样的基因库会产生较强的杂种优势效应，但在最近才开始对它们的开发。尽管如此，对于在未来实现油菜籽显著增产，商业上有用的杂交系统是主要的先决条件。那些增产不仅是食物目的的需求增加所需，还是生物燃料(生物柴油)需求的快速增加所需。除化学试剂诱导的雄性不育(CHA)之外，在芸苔属品种中已研究了三种基于遗传学的杂交系统原则育种人员使用了自交不亲和(Si)、细胞质雄性不育(CMS)和核雄性不育(WS；以前也称为雄性核不育或遗传雄性不育，GMS)的芸苔属植物作为母本(关于蔬菜中杂交系统的评述参见Kumar等，2004)。SI植物由于它们的遗传组成(geneticconstitution)，因此无法自花传粉，并且CMS和匪S雌株也不能产生花粉。因此，所有这些植物必须通过雄性能育亲本异花传粉。在使用这些植物中，育种人员尝试改善种子生产的效率和Fl杂种的品质，以及减少育种成本。当不使用Si、CMS或匪S植物进行杂交时，由于亲本能同时经历异花传粉和自花传粉，因此更难以在后代(Fl代)中获得并分离期望的性状。对于在商业化杂种种子生产中利用杂种优势，简单且有效的传粉控制系统是关键步骤。如果亲本之一是Si、CMS或匪S植物，则无法自花传粉或不能产生花粉，仅会发生异花传粉。通过在杂交中除去一方亲本品种的花粉，植物育种人员确信获得了质量一致的杂种种子，前提是亲本是质量一致的并且育种人员实施单交。自交不亲和性系统迄今为止尚未开发用于油菜籽的商业上可用的SI系统。加拿大专利CA2，143，781描述了一种用于十字花科作物的杂交育种方法，其中通过将自交不亲和的雄性不育系的母本与父本杂交生产Fl种子。然而，对于SI主要问题在于大规模繁殖SI亲本系，其使得该系统难以商业应用。细胞质雄性不育(CMS)=CMS是一种母系遗传的现象，其遗传因子位于胞质器线粒体的基因组中。这种植物产生功能性花粉粒的能力严重受损。对于CMS系统，恢复系基因是显性核基因，其抑制细胞质的雄性不育效应。在cms植物中雄性不育的表现是隐性核基因(称为保持系等位基因；rf)和雄性不育特异性胞质基因组之间不亲和性的结果。用于油菜籽植物Fl杂种商业性生产的CMS系统是Polima(pol；Fu,1981),Kosena禾口Ogura系统(Ogura,1968；Makaroff,1989；PeIlan-DeIourme等，1987；US5，254，802；US20040237141,US20020032916,EP0599042；US6,229，072)。在中国，Polima细胞质雄性不育(PolCMS)系统已主要用于杂种油菜籽生产。然而，由于其固有局限，例如不育性的不稳定性、有限数量的恢复系以及细胞质的潜在不利影响，因此大面积使用具有单一CMS细胞质的杂种并不理想。polCMS的主要不利之处在于在高温下雄性不育的不稳定性。在相对低或高的温度条件下雄性不育系能变得部分能育(Yang&Fu,1987)。Ogura(ogu；Ogura,1968；Pelletier等，1983；Heyn,1976)禾口Kosena系统均依赖于萝卜来源的CMS基因。已将一种用于Ogura细胞质雄性不育植物的育性恢复系从萝卜(Raphanussativus)(萝卜(radish))中转移到芸苔中(Pelletier等，1987)，因为油菜籽缺少相应于所述CMS基因的Rf等位基因。Ogura系统描述于EP0599042、EP0671121和W02005/074671中。描述了来源于萝卜的恢复系等位基因的表型(W092/05251；DeIourme等，1991)。最初，Ogura恢复系材料显示与其育性恢复基因紧密连锁的降低的雌性能育性和高含量的芥子油苷，其通过漫长回交得以克服(Delourme等，1991,Renard等，1997)。EP1493328描述了一种生产用于Ogura细胞质雄性不育的欧洲油菜双低恢复系的方法。尽管在艰辛地回交后，在那些品系中芥子油苷含量降低了，但似乎存在某些与Rf等位基因相关的固有问题例如在较高温度下产量下降、降低的结实率和每个长角果减少的胚珠数(Pellan-De1ourme&Renard,1988；DeIourme等，1994)、较低的种子产量、弱抗病性和倒伏易感性。这些特性的某些与恢复系等位基因紧密连锁(Delourme等，1994，1995)并有数据暗示那些特性的某些可能对恢复系等位基因是内源的，并且通过育种或甚至使用分离的恢复系等位基因的转基因方法可能无法得到克服。CMS系统的一个固有缺点在于纯合CMS雌性系的繁殖。由于雄性不育，因此CMSA雌性系无法自花传粉，其必须通过将所述A系与雄性能育的并且在遗传学上相同于A系的保持系B系杂交而得以保持。该杂交的结果是雄性不育CMSA系。核雄性不育(匪S)核雄性不育(早期称为雄性核不育gms)受来自细胞核区域的基因控制。大多数天然存在或诱导的雄性不育突变体在自然界中是隐性的，但在甘蓝类蔬菜(例如卷心菜和花椰菜)和遗传转化的雄性不育系中存在极少例外(Kaul，1988，Williams等，1997)。尽管产生了具有功能的花粉，但是因为花粉没有裂开或植物的特殊花形态，如在番茄中位置性不育(Atanassova，1999)和在茄子中功能性雄性不育(Phatak&Jaworski，1989)，因此某些突变体的花粉无法自受精(selffertilize)0出现优势隐性雄性不育表明在任何基因控制的小孢子发生(花粉发育过程)、雄蕊发育或小配子发生(雄配子发育过程)中，gms是突变的结果。NMS系统具有几乎不带有不利细胞质效应的完全且稳定的不育性优点。在欧洲油菜中已发现了几种匪S突变体，并且也已报道了这些突变体的不育性受一种基因(Takagi，1970；Mathias,1985；Hu，2000)、两种基因(Li等，1985，1988，1993，1995；Hou等，1990；Tu等，1997a)、三种基因(Chen等，1998；Wang等，2001)和具有复等位基因的一种基因(Song，2005)控制。然而，该系统在实践上难以操作并且常常显示对环境效应如热的高敏感性。因此，与CMS系统相比，在油菜籽生产中应用该显性匪S法则相差很远，主要因为复杂的能育性遗传以及在分离种群中区分不同基因型的困难。用于纯合两型系的育种过程是非常复杂的，并且使用传统的育种方法鉴定回交或自身世代中具有预期性状的不同基因型(MsRf)是费力费时的。在中国，有三种匪S系统已被用于杂交育种中，以及有几种杂种已登记。尽管隐性匪S具有优点(其仅需要两系)，但其还具有难以驱动整个雄性不育群的致命缺陷。由于gms在整个回交中都被保持，因此在杂种种子生产中，在田地中50%的雄性能育分离子(Msms)需要鉴定并在它们脱落花粉之前除去。可例如通过标记辅助选择实现从雌性系中除去50%的雄性能育植物(Tu等，1999)。然而，这些方法昂贵、费力且在商业上没有竞争力。由于非常冗长的保持过程以及未利用蔬菜作物中合适的标记基因，因此gms的利用只局限于非常少的蔬菜中。迄今为止没有开发油菜籽中的系统。对于特定的核雄性不育基因鉴定能育细胞质(H0rner&Palmer，1995)是一项感兴趣的研究领域，其一旦成功，就可提供最有效地利用品系如cms系的机会。一种特殊类型的核ms系统是转基因雄性不育系统，其在1990年初期得到早期开发(Mariani，1992)。由于花药或花粉特异性基因和启动子序列的分离、克隆和鉴定(Williams等，1997)，因此这些系统变得可以接受。然而，转基因系统必须经历漫长且耗费巨大的政府批准过程，使得与其他系统相比，那些系统处于明显的竞争不利中。环境敏感的雄性不育(enms)系统植物中某些nms系是条件突变体，因此意味着在特定的环境中，雄性不育突变体植物变成雄性能育。在针对不育性和能育性表现确定关键的环境(通常是温度或光周期)之后，上述GMS突变体被分成环境敏感的核雄性不育(enms)系。在蔬菜作物中，已报道了主要的温度敏感的enms系(表1)。从实际应用的观点来看，在温度和光周期敏感的雄性核不育系统中，对于能育性/不育性表现需要分别鉴定关键的温度或光周期。表1蔬菜中环境敏感的雄性不育突变体蔬菜突变体参考文献卷心菜TGMS,PGMSRundfeldt,1961抱子甘蓝(Brusselssprout)TGMSNieuwhof,1968「花椰菜TGMSDickson,1970胡椒TGMS,TCMSDaskalov,1972;Shifriss,1997*胡萝卜TGMSKaul,1988番蒜_TGMS_Rick,1948;Sawhney,1983TGMS-热敏感的基因雄性不育PGMS-光周期敏感的基因雄性不育*TCMS-热敏感的细胞质雄性不育表格来自Kumar等，2004使用enms系的杂种种子生产更具吸引力，原因在于容易进行雄性不育系的种子繁殖。可在其表现雄性能育性状的环境中繁殖enms系的种子，与此同时可在其表现雄性不育的另一环境中生产杂种种子。NPZ("NorddeutschePflanzenzuchtLembke，，)MSL系统MSL(雄性不育Lembke)系统是一种NPZ/Lembke提供的系统，目前在欧洲市场有售(Pinochet等，2000)。在2006年，在欧洲使用该系统生产的杂种覆盖了大约1.15百万公顷的面积(其中在德国为850，000公顷(Frauen等，2007))。据称MSL系统是在1984年于NPZ育种场中基于自发突变和选择得到的(Frauen，1999；Paulmann&Frauen,1999)。在德国，1996年批准了第一种恢复的MSL杂种品种(Frauen&Baer，1996)，与优良的常规非杂种品种相比显示增加了大约12%的产量。该系统被描述为一种可供选择的CMS系统(Frauen，1999；“Hybridrapsfiebel”，Rapoolpromotionmaterial)，其使用了用于繁殖不育母系的能育保持系以衍生全恢复的杂种。对于该雄性不育系统，所有已知的常规油菜籽栽培品种以及品系都是恢复系。这种情况以及所宣称的该系统来源于自发突变暗示了其不同于其他已知的不育系统。公众既不知道MSL系统的亲本系，也不知道制备该杂种种子的方法，其作为商业秘密得到保持。这限制了使用MSL系统及其在油菜籽品种中的更广泛地应用。MSTakagi通过Y-照射诱变，Takagi(1970)在日本品种Murasakinatane中诱导了雄性不育。该系统被Takagi描述为单基因隐性。Theis(1990)在他的博士论文(P.14-18)中描述了MSTakagi受两种基因控制，一种是纯合隐性的雄性不育基因以及另一种是显性的“修饰基因”。Theis描述了MSTakagi在正常田地条件下是不育的，但可在7-10后于一周的温度处理(38°C日白天温度/18°C夜间温度)下恢复能育性(p.49)。Theis进一步提议通过用不育的、温度处理的植物的花粉给不育植物授粉生产100%能育亲本系(P.55)。然而，公众不知道该系统的商业应用并且也没有开发在商业上可行的其杂交系统。对于不育基因或“修饰基因”，Takagi和Theis都没有描述纯合系。当讨论核雄性不育系统时，Denis等(1993)描述了Takagi系统，涉及该系统问题的一个原因是缺少标记基因，其使得在后代中不能分选雄性不育或雄性能育植物，因此需要提供纯合系(详细讨论参见如下)。如上所述，目前在商业上仅使用两种杂交系统(I)NPZMSL系统，但其起源未知，和(2)0gUra系统，因为某些与恢复系等位基因连锁的农艺学缺点，因此也不是最佳的。另外能获得的InVigor杂种双低油菜系统(BayerCropScience)是一种转基因系统，因此涉及高管理费用和公众关注。然而，这几个系统在数量上有限。因此，不仅从经济角度还从农业原因来看，额外的系统应当有益在作物如油菜籽中大量使用单一杂交系统会致使种群在抗病时容易受伤，这种易伤性在同一遗传种群中可能更容易地传播。平行利用几种杂交系统会提供较大的遗传变异并会减少这种易伤性。因此本发明待解决的问题是提供一种代替的在商业上可行的新的油菜籽核雄性不育杂交系统，其产生了商业上可行的油菜籽粕和油，并且是一种便利且具成本效益的生产杂种种子(优选具有不超过25μπι01/克9%水分含量的风干种子的芥子油苷含量)的方法，此外其不具有目前所用系统的缺点。通过本发明解决了该问题。附图描述图1恢复的杂交系统(RHS)遗传和品种发展。用于Ms系和保持系固定的育种计划以及随后用于杂交系统的杂交计划。该计划的上半部分描述了MsMsrfrf基因型(预基础雌性系)和msmsrfrf基因型(保持系)的固定。下半部分描述了用于提供杂种种子的杂交计划，首先通过将预基础雌性系(MsMsrfrf)和保持系(msmsrfrf)杂交提供基础雌性系(Msmsrfrf)，然后通过将基础雌性系(Msmsrfrf)与恢复系(msmsRfRf)杂交提供杂种种子。图2与雄性能育植物的花相比，显示条件性雄性不育植物(在温度诱导的再受精后)的白色条纹/白色斑点表型的图。A在高温诱导的再受精后，条件性雄性不育欧洲油菜植物的白色条纹/白色斑点表型。B白色条纹/白色斑点花(雄性不育欧洲油菜植物；左边的花)与雄性能育欧洲油菜植物的正常的花(右边的花)的比较。C:与A相同，具有通过重叠的阴影线区域标记的白色区域D与B相同，具有通过重叠的阴影线区域标记的白色区域E雄性能育欧洲油菜植物的花。图3显示条件性雄性不育欧洲油菜植物的芽败育表型的图像。A具有芽败育的雄性不育植物的不育枝B-D:在于同一枝条上具有不育和能育的花的热处理后雄性不育植物的枝条E在热处理受精和自交后具有荚的雄性不育植物枝条图4:A显示与不育性连锁以及之后与Ms等位基因(alt1)分离连锁的多态性的BSA候选标记的分布图。在雄性能育集团(bulks)中显示的片段的大小与对于雄性能育亲本所观察到结果的相同。然而，雄性不育集团显示了两条片段对于雄性不育亲本观察到一条，以及对于雄性能育亲本也观察到一条。该观察结果与期望值一致，因为对于Ms等位基因，雄性不育植物可以既是纯合的又是杂合的。B通过引物HiNK6702和6707(分别为SEQIDNOs:13和14)组合在雄性能育(F)和雄性不育(S)系中获得的扩增产物的琼脂糖分布图。图5根据荧光发射类型及其强度，使用在三块不同的云簇(clouds)中分离的纯合不育(MsMs)、杂合不育(Msms)或纯合能育(msms)植物，针对标记SR0002A获得的典型的SNP图。图6标记序列NR1116。加下划线的是用于SSR扩增的正向和反向引物。SSR自身以黑体字母标出。在该序列的5’-末端，某些核苷酸无法得到清楚鉴定，因此用可代表A、T、C或G的“N”标记。图7标记序列NR2525。加下划线的是用于SSR扩增的正向和反向引物。SSR自身以黑体(bold)字母标出。图8标记序列NR2219。加下划线的是用于SSR扩增的正向和反向引物。SSR自身以黑体字母标出。图9:A=SNP共有序列1(SEQIDNO3)B=SNP共有序歹Ij2(SEQIDNO6)显示的是能育和不育等位基因的共有序列。突变区示于(括号)中，并且对于能育和不育单倍体型均列出核苷酸(详情参见实施例)。在共有序列1的5’-末端的黑体字母标记的是SSR重复的3’-末端。图10:TaqMan检测基本原理(来自Pre_DevelopedTaqManAssayReagentsAllelicDiscriminationProtocol；件号4312214Rev.C5/2005；AppliedBiosystems)图11横贯5条拟南芥(Arabidopsisthaliana)染色体的23种芸苔候选基因的拟南芥同系物的图位。以碱基对表示的物理距离列于条左侧，拟南芥基因的参考ID列于条右侧。图12显示了纯合不育(rfrf)、纯合能育(RfRf)和杂合能育(Rfrf)植物个体实例的来源于PUT-161a-Brassica_napus-59218的SSCP标记的GeneMapper输出结果。定义应当理解本发明不限于如在此描述的具体方法学、实验方案、细胞系、植物种或属、构建体和试剂。还应当理解在本文中使用的术语仅为了描述具体实施方案的目的，并不意在限制本发明的范围，其仅受限于附加的权利要求。应当指出，除非上下文另有清楚指示，当在本文中以及在附加的权利要求中使用时，单数形式“a”、“an”和“the”包括复数。因此，例如提及“一种植物”时，则是提及一种或多种植物并包括本领域技术人员所知的其等价物，等等。当在本文中使用时，词语“或”指具体列表的任何一个成员，并且还包括该列表成员的任意组合(即还包括“和”)。术语“约”在本文中用于指大约地、约略地、左右或在......附近。当术语“约”与数值范围连用时，其通过延伸所列数值的上边界和下边界从而改变了该范围。一般而言，术语“约”在本文中用于改变数值使之高过并低于设定值，具有20%，优选10%上下的变化(更高或更低)。高于温度，术语“约指士1.0°C，优选士0.5°C。在术语约用于本发明上下文的情况下(例如与温度或分子量值连用)，优选精确值(即没有“约”)。术语“等位基因”指基因的一种或多种可供选择的形式中的任何一种，所有的等位基因均涉及至少一种性状或特性。在二倍体细胞中，给定基因的两个等位基因占据了一对同源染色体上的相应基因座。在某些情况下(例如对于QTLs)，其更准确地指“单倍体型”(即染色体区段的等位基因)而非“等位基因”，然而，在那些情况下，术语“等位基因”应当理解为包含术语“单倍体型”。如果两个个体在一个特定的基因座上具有相同的等位基因，以及如果等位基因由一个共同的祖先遗传而来(即该等位基因是同一亲本等位基因的拷贝)，则该等位基因被称为“后裔一致(identicalbydescent)”。另一种情况是等位基因是“状态一致(identicalbystate)”(即等位基因看上去是相同的，但来源于等位基因的两个不同拷贝)。对于连锁研究后裔一致性信息是有用的；尽管后裔一致性信息可能是特别有用的，但是后裔一致性和状态一致性信息都可用于例如在本文中描述的那些相关研究中。在本发明的范围中，术语“回交”被理解为指一种其中将杂种后代与亲本之一重复杂交的方法。术语“芸苔(Brassica)”指芸苔属，非常具体地指其中的种mapus(欧洲油菜)、campestris(舌甘菜)、oleraceacvTastie(甘蓝)、oleraceacvSnowballY(花挪菜)禾口oleraceacvEmperor(花莲甘蓝)。术语“欧洲油菜(Brassicanapus)”或“油菜(oilseedrape)”指欧洲油菜的植物、种子、植物部分和细胞，并包括一年生春油菜、半年生(biannual)冬油菜以及半年生中间型油菜。在上下文中，一年生或半年生表示品种是否能越过冬季生长期生长。一般而言，冬油菜在西北欧种植，而春油菜则主要在加拿大、中国、印度、澳大利亚和南美种植。油菜(oilseedrape)来源于甘蓝(B.oleracea)与甜菜(B.campestris)的种间杂交。因此，该术语也包括任何由这两个品种实施的再整合。一种优选的春油菜是双低油菜型油菜。包括了用于表达低芥子油苷含量的遗传手段并在欧洲市售的代表性的冬油菜品种包括例如CAPITOL、cv.CAMPALA,cv.CALIFORNIUM(可获得自Dekalb，孟山都的商标)、cv.LORENZ,CV.0ASE(可获得自RAP00L)。包括了用于表达低芥子油苷含量的遗传手段并加拿大市售的代表性的春油菜品种包括例如cv.BULLET、cv.GARRISON和cv.KRISTANA(各自可获得自Svalofffeibull)。其他包括了用于表达低芥子油苷含量的遗传手段并在欧洲市售的冬油菜品种包括cv.APEX、cv.NKFAIR、cv.VIKING、cv.BILLY、cv.LADOGA和cv.CASTILLE。在含油种子芸苔中这样低的芥子油苷含量足以提供给粕以增加的商业价值。术语“欧洲油菜-特异性DNA序列”指与显示与其最大相似性的物种欧洲油菜(或产生(整合)自即芜菁(Brassicarapa)和甘蓝(Brassicaoleracea)的两种欧洲油菜中的任何一种)的基因组序列具有大于80%，优选大于85%，更优选大于90%，还更优选大于95%，仍更优选大于97%，最优选大于99%的核苷酸序列同源性的多核苷酸序列。术语“双低油菜(Canola)”指一种产生包含小于2%芥子酸的油类的欧洲油菜，并且种子的固体成分必须包含小于30μM/g风干无油固体的3-丁烯基芥子油苷、4-戊烯基芥子油苷、2-羟基-3丁烯基芥子油苷、2-羟基-4-戊烯基芥子油苷的任何一种或任何混合物。如同本领域所公认的一样，术语“染色体”在本文中用于指包含细胞核DNA并在其核苷酸序列中携带线性基因阵列的细胞核中的自我复制的遗传结构。术语“条件性雄性不育”指一种可为某些条件所诱导和/或抑制的雄性不育表型(即不能产生能育花粉)。因此，通过应用所述某些条件，植物可从雄性不育“转换”为雄性能育表型。雄性不育可由多种因素引起，并可例如表现为完全缺少雄性器官(花药)、花粉退化、花粉不育等。基于条件的强度，从雄性不育“转换”为雄性能育可以是完全或不完全的。最优选地，在本发明的上下文中，术语“条件性雄性不育”指温度依赖的雄性不育，从而指一种核雄性不育表型，其中不育性是温度依赖的并且能在高于35°C(优选35°C-43°C，更优选37°C-40°C，最优选在约39°C；优选暴露如本文中所规定的优选的热处理时间以及随后在如本文所规定的环境温度下生长)的温度下恢复能育性。“基因”在本文中定义为一种由DNA序列组成的遗传单位，该DNA序列占据了染色体上特定位置并包含针对生物体中特定特性或性状的遗传指令。“遗传工程”、“转化”和“遗传修饰”在本文中都用作为将分离的和克隆的基因转移入另一生物体的DNA，通常是染色体DNA或基因组中的同义词。术语“基因型”指细胞或生物体的遗传组成。个体的“对于遗传标记组的基因型”包括对于存在于个体中的一个或多个遗传标记基因座，特定的等位基因。如本领域所知的，基因型可涉及单基因座或多基因座，与基因座相关或不相关和/或连锁或不连锁无关。在某些实施方案中，个体的基因型涉及一种或多种基因，所述一种或多种基因涉及与目标表型(例如本文中所定义的数量性状)表达相关的一种或多种基因。因此，在某些实施方案中，基因型包含位于数量性状的一个或多个遗传基因座上的，存在于个体中的一个或多个等位基因的总和。在某些实施方案中，用单倍体型(在本文中如下定义的)来表示基因型。术语“种质”指种群或另一个组个体(例如物种)的基因型的总和。术语“种质”还可指植物材料；例如一组充当各种等位基因库的植物。短语“适应种质”指被证明具有遗传优势的植物材料；例如对于给定的环境或地理区域，而短语“非适应种质”、“粗种质”和“外来种质”指未知或未被证明具有遗传价值的植物材料；例如对于给定的环境或地理区域；同样，在某些实施方案中，短语“非适应种质”指不是已建立的繁殖种群一部分并且与该已建立的繁殖种群的成员不具有已知关系的植物材料。术语“芥子油苷”指在种子已被磨碎并提取油之后，仍留在在种子的固体成分_固体粕中的硫基化合物。它们的结构包括与脂肪族烃结合的葡萄糖(3_丁烯基芥子油苷、4-戊烯基芥子油苷、2-羟基-3-丁烯基芥子油苷和2-羟基-4-戊烯基芥子油苷)或与芳香族烃结合的葡萄糖(3-吲哚基甲基芥子油苷、1-甲氧基-3-吲哚基甲基芥子油苷)。脂肪族芥子油苷也称为烯基芥子油苷。芳香族芥子油苷也称为吲哚。术语“总芥子油苷含量”指在所示材料例如在粕或干燥种子中包含的所有芥子油苷的总和。总芥子油苷含量可以ymol(芥子油苷)/克种子(例如9%水分含量的风干种子)或粕来显示。术语“单倍体型”指从一个亲本遗传来的个体等位基因的组合。因此，二倍体个体具有两个单倍体型。术语“单倍体型”可更加狭义地用于指与表型性状相关的物理连锁和/或未连锁的遗传标记(例如序列多态性)。短语“单倍域”(haplotypeblock)(有时在文献中也简称为单倍体型)指一组两种或更多种在单条染色体(或其一部分)上物理连锁的遗传标记。通常，每个域都具有几个共同的单倍体型，并且可挑选唯一鉴定这些单倍体型中每一个的遗传标记亚组(即“单倍体型标签”)。术语核苷酸或氨基酸序列的“同源性”、“序列相似性”或“序列同一性”指两条或更多条序列的同一性或相似性的程度，并可按惯例通过使用已知的软件或计算机程序如BestFit或Gap成对比较程序(GCGWisconsin程序包，GeneticsComputerGroup,575ScienceDrive,Madison,Wis.53711)进行测定。BestFit使用Smith和Waterman,AdvancesinAppliedMathematics2:482-489(1981)的局部同源性算法来发现两条序列间同一性或相似性最佳的片段。通常通过在整个比较窗口上比较两条序列的一部分以鉴定并比较局部区域的序列相似性，从而进行两条或更多条多核苷酸或聚氨基酸序列之间的序列比较。比较窗口通常为约20-200个连续的核苷酸。使用Needleman和Wunsch，J.Mol.Biol.48=443-453(1970)的方法，Gap执行一条序列的全部与另一条相似序列的全部的全局比对。当使用序列比对程序例如BestFit来测定DNA序列同源性、相似性或同一性程度时，可使用默认设置，或可选择合适的打分矩阵来优化同一性、相似性或同源性得分。类似地，当使用程序如BestFit来测定两条不同的氨基酸序列之间的序列同一性、相似性或同源性时，亦可使用默认设置，或可选择合适的打分矩阵如blosum45或blosumSO来优化同一性、相似性或同源性得分。“同源重组”指在相同的核苷酸序列区域中，两个DNA分子或配对染色体的染色单体之间的DNA片段的交换(“互换”)。“重组事件”在本文中被理解为指减数分裂交换。术语“杂合的”指在同源染色体的相应基因座上存在不同的等位基因时所存在的遗传状况。术语“纯合的”指在同源染色体的相应基因座上存在相同的等位基因时所存在的遗传状况。在植物育种上下文中，术语“杂种”、“杂种植物”和“杂种后代”指一种植物，其是由不同品系或品种或种的植物杂交产生的子代或遗传上不同的亲本，所述杂交包括但不限于在两种近交系(例如遗传上杂合的或主要杂合的个体)之间的杂交。短语“单交F1杂种”指由两种近交系之间杂交产生的F1杂种。在核酸上下文中，术语“杂合体(hybrid)”指在互补核苷酸碱基之间通过氢键形成的双链核酸分子或双链体。术语“杂交(hybridise)”或“退火”指在互补碱基之间核酸序列单链通过氢键形成双螺旋区段的过程。短语“近交系”指遗传上纯合的或接近纯合的种群。例如，可通过几个循环的兄弟/姐妹育种或自交得到近交系。在某些实施方案中，对一种或多种目标表型性状进行近交系纯育。“近交”、“近交个体”或“近交后代”是采样自近交系的个体。术语“近交”指基本上纯合的个体或品系。术语“基因渗入(基因渗入)”、“基因渗入(introgressed)”和“基因渗入(introgressing)”指一种既是天然又是人工的过程，籍此通过杂交，一种物种、品种或栽培品种的基因组区域移入另一物种、品种或栽培品种的基因组中。该过程可任选地通过与轮回亲本回交而得以完成。术语“连锁”及其语法上的变型指在同一染色体上不同基因座处的等位基因分离联合超过预期碰巧组合的倾向，如果它们的传递是独立的话，在某些实施方案中，是它们的物理邻近的结果。短语“连锁不平衡”(也称为“等位基因关联”)指一种现象，其中当从亲本分离给子代时，在处于两个或更多个基因座上的特定等位基因倾向于以连锁群联合，具有较在给定种群中所预期的它们的个体频率更高的频率。例如，当遗传标记等位基因和QTL等位基因同时出现时，它们可显示连锁不平衡，具有较预期来自个体等位基因的那些频率更高的频率。连锁不平衡可能产生的几个原因包括但不限于在染色体上密切邻近的等位基因。术语“连锁群”指位于同一条染色体上的全部基因或遗传性状。在连锁群中，那些近得足以在一起的基因座会在遗传杂交中显示连锁。由于交换概率随染色体上基因间物理距离的减小而增加，因此在直接的遗传检测中在连锁群中其位置彼此远离的基因就不显示任何可检测的连锁。术语“连锁群”主要用于指在尚未进行染色体定位的情况下，在遗传系统中显示连锁行为的遗传基因座。因此，在本发明的上下文中，术语“连锁群”与(物理实体的)染色体同义。术语“基因座”指在给定物种的染色体上的位置(例如基因、遗传标记等的)。术语“分子标记”或“遗传标记”指一种用于肉眼观察核酸序列特性差异的方法中的指示物。其涉及一种与一种或多种目标基因座相关的个体基因组(例如存在于个体基因组中的核苷酸或多核苷酸序列)的特征。在某些实施方案中，取决于上下文，在目的种群中或在多态性占据的基因座中遗传标记是多态的。遗传标记包括例如单核苷酸多态性(SNPS)、indelS(即插入/缺失)、简单序列重复(也称为微卫星标记；SSRs)、限制性片段长度多态性(RFLPs)、随机扩增多态DNAs(RAPDs)、分裂扩增多态序列(CAPS)标记、多样性阵列技术(DArT)标记和扩增片段长度多态性(AFLPs)等。额外的标记包括插入突变、序列特异性扩增区(SCARs)或同工酶标记或限定了特定的遗传和染色体位置的在本文中所述的标记的组合。遗传标记可例如用于定位染色体上包含在表型性状表达中有助于变异性的等位基因的遗传基因座。短语“遗传标记”还可指一种与基因组序列互补的多核苷酸序列，例如用作探针的核酸的序列。遗传标记可在物理上位于染色体上的位置中，该位置位于与该遗传标记相关的遗传基因座之内或之外(即分别为基因内或基因外)。换种说法，虽然遗传标记通常在相应于目标基因座的基因的染色体上位置未被鉴定并且在遗传标记和目标基因座之间的重组率不为零时使用，但本文中所公开的主题还可使用在物理上位于遗传基因座(例如在相应于一种基因的基因组序列内部，例如但不限于在基因的内含子或外显子中的多态性)边界之内的遗传标记。在本发明的某些实施方案中，一种或多种遗传标记包含1-10种标记，以及在某些实施方案中，一种或多种遗传标记包含多于10种的遗传标记。在本发明的范围中，术语“基于标记的选择”被理解为指在核酸与期望性状相关的情况下，使用遗传标记来检测来自植物的一种或多种核酸以鉴定携带有负责期望(或不期望的)性状的基因的植物，使得那些植物可用于(或免于)选择育种计划。在本发明的范围中，术语“微卫星或SSRs(简单序列重复)标记”被理解为指一种由多个DNA碱基短序列重复组成的遗传标记，其见于遍及植物的DNA的基因座上，并且有可能是高度多态的。短语“核酸”指可相应于核苷酸链的任何单体单元的物理链，包括核苷酸聚合物(例如典型的DNA或RNA聚合物)、修饰的寡核苷酸(例如包含对于生物学RNA或DNA非典型的碱基的寡核苷酸，例如2'-0-甲基化寡核苷酸)等。在某些实施方案中，核酸可以是单链、双链、多链或它们的组合。除任何明示的序列之外，除非另有指示，本发明的具体核酸序列任选地包含或编码的互补序列。短语“表型性状”指个体外观或其他可检测的特性，由其基因组与环境的相互作用而产生。术语“多数”指多于一个的实体。因此，“多数个体”指至少两个个体。在某些实施方案中，术语多数指多于全体的一半。例如，在某些实施方案中，“多数种群”指多于种群成员的一半。术语“后代”指特定杂交的后裔。通常，后裔由两个个体繁殖而产生，尽管某些物种(特别是某些植物和雌雄同体的动物)能自交(即同一植物充当雄配子和雌配子的供体)。后裔可以是例如FpF2或任何后代。短语“质量性状”指一种受一种或几种显示主要表型效应的基因控制的表型性状。因此，质量性状通常是简单遗传的。在植物中的实例包括但不限于花色、穗轴颜色和抗病性，例如玉米大斑病(Northerncornleafblight)抗性。在本发明的范围中，“PCR(聚合酶链反应)”被理解为指一种产生相对大量的DNA特定区域，从而使多种基于那些区域的分析变成可能的方法。在本发明的范围中，“表型”被理解为指一种遗传受控性状的可区分的特性。“植物”是处于任意发育阶段的任意植物，特别是种子植物。“植物细胞”是一种包含原生质体和细胞壁的植物结构和生理学单位。植物细胞可以分离的单细胞或培养细胞的形式存在，或作为更高级组织单位例如植物组织、植物器官或全植物的一部分。“植物细胞培养物”指植物单位例如原生质体、细胞培养物细胞、植物组织中的细胞、花粉、花粉管、胚珠、胚囊、合子和处于不同发育阶段的胚的培养物。“植物材料”指叶、茎、根、花或花部分、果实、花粉、卵细胞、合子、种子、插条、细胞或组织培养物或植物的任何其他部分或产物。“植物器官”是一种具有截然不同且可见结构的并且分化的植物部分，例如根、茎、叶、花芽或胚。当在本文中使用时，“植物组织”指一群组织成结构和功能单位的植物细胞。包括处于植物或培养物中的任何植物组织。该术语包括但不限于全植物、植物器官、植物种子、组织培养物和任何组织成结构和/或功能单位的植物细胞群。在该术语与如上所列的或包含于该定义中的任何特定类型的植物组织连用或不存在该术语时，并不意在排除任何其他类型的植物组织。术语“植物部分”指植物的一部分，包括单细胞和细胞组织，例如在植物中完整的植物细胞、可再生植物的细胞团和组织培养物。植物部分的实例包括但不限于来自花粉、胚珠、叶、胚、根、根尖、花药、花、果、茎、枝条和种子的单细胞和组织；以及花粉、胚珠、叶、胚、根、根尖、花药、花、果、茎、枝条、接穗、砧木、种子、原生质体、愈伤组织等。在本发明的范围中，“多态性”被理解为指在一个种群中两种或更多种不同类型的基因、遗传标记或遗传性状的存在。术语“种群”指享有共同的遗传起源的在遗传上异质的植物集合。术语“优势雄性不育”指在至少100株植物的种群中，不超过10%，优选不超过5%，更优选不超过的在所有那些植物上的花具有产生能育花粉的功能性雄性器官。应当理解单株植物可同时具有能育和不育的花。在优选的实施方案中，不超过10%，优选不超过5%，更优选不超过的在单株植物上的花具有产生能育花粉的功能性雄性器官。术语“探针”指一种会与靶核酸序列分析物或其cDNA衍生物中的互补序列形成氢键双链体的单链寡核苷酸序列。当在本文中使用时，术语“引物”指一种能退火至扩增靶标上，让DNA-聚合酶附着，从而在置于其中引物延伸产物的合成被诱发的条件(即在核苷酸和用于聚合的物质如DNA聚合酶存在下以及处于合适的温度和pH下)下时作为DNA合成引发点的寡核苷酸。在扩增中为了达到最高效率，(扩增)引物优选是单链。优选地，引物是一种寡脱氧核糖核苷酸。引物必须足够长以致于在用于聚合的物质存在下能引发延伸产物的合成。引物的精确长度取决于许多因素，包括温度和引物组成(A/T和G/C含量)。如在DNA扩增领域例如在PCR扩增中所通常使用的，双向引物对由一条正向和一条反向引物组成。当在本文中使用时，应当理解“引物”可指多于一条引物，特别是在关于要被扩增的靶区末端序列的信息有些含糊的情况下。因此，“引物”包括包含代表序列中可能变化的序列的引物寡核苷酸的集合，或包括能使典型的碱基配对得以进行的核苷酸。可通过任何合适的方法制备寡核苷酸引物。用于制备特定序列的寡核苷酸的方法是本领域已知的，包括例如合适序列的克隆和限制性酶切以及直接化学合成。化学合成方法可包括例如磷酸二酯或三酯法、二乙氨基磷酸酯(diethylphosphoramidate)法和披露于例如US4，458，066中的固相载体法。视情况，通过可检测的掺入手段例如通过光谱、荧光、光化学、生物化学、免疫化学或化学手段可检测的，引物可被标记。在包含合适的盐类、金属阳离子和PH缓冲系统的反应介质中，在足够量的四种脱氧核糖核苷酸三磷酸酯(dATP、dGTP、dCTP和dTTP，即dNTPs)或类似物存在下，聚合剂催化了寡核苷酸引物的模板依赖的延伸。合适的聚合剂是已知催化引物和模板依赖的DNA合成的酶类。已知的DNA聚合酶包括例如大肠杆菌DNA聚合酶I或其Klenow片段、T4DNA聚合酶和TaqDNA聚合酶。使用这些DNA聚合酶用于催化DNA合成的反应条件是本领域已知的。该合成的产物是由模板链和引物延伸链组成的双链分子，其包括靶序列。这些产物又用作模板用于另一轮的复制。在第二轮复制中，第一次循环的引物延伸链用其互补引物进行退火；合成产生了通过引物序列或它们的互补序列结合5'-末端和3'-末端的“短”产物。变性、引物退火和延伸的重复循环导致为引物所限定的靶区的指数式累积。运行足够的循环以获得所需数量的饱含核酸靶区的多核苷酸。该所需数量可改变，并取决于产物多核苷酸所服务的作用。PCR法为手册所详细描述，并且是技术人员所知的。在通过PCR扩增后，可通过在高至中等严格杂交和洗涤条件下与探针多核苷酸杂交检测靶多核苷酸，其形成了带有靶序列的稳定的杂合体。如果预期探针与靶序列会基本上完全互补(即约99%或更多)，则使用严格条件。如果预期有某些错配，例如如果预期变体品系具有探针不会完全互补的结果，则杂交严格性可降低。然而，要选择消除非特异性/不定结合的条件。影响杂交并且选择性抗非特异性结合的条件是本领域已知的，并描述于例如Sambrook和RuSSell，2001中。一般而言，更低的盐浓度和更高的温度增加杂交条件的严格性。在本发明的范围中，“PCR引物”优选被理解为指在DNA特定区域的PCR扩增中使用的单链DNA的相对短的片段。术语“子代”植物指由一种或多种亲本植物或其后代的营养体或有性生殖获得的作为后代的任何植物。例如，子代植物可通过克隆或自交亲本植物或通过杂交两种亲本植物获得，并可包括与F1或&或更远的世代自交获得。F1是由亲本产生第一代子代，亲本至少之一首次用作性状供体，而第二代子代(F2)或后代尔3、&等)则是由FpF2等自交产生的范本。因此，F1可以是(以及通常是)由两种不分离亲本(对于一种性状，不分离系是纯合的)杂交产生的杂种，而F2则可以是(以及通常是)由所述F1杂种自花传粉产生的子代。“重组”是减数分裂过程中两条同源染色体之间的信息交换。双重组的频率是单重组体频率的产物。例如，可发现在IOcM区域中的重组体具有10%的频率，则发现双重组体具有10%xl0%=的频率(1厘摩规定为在测交中的重组体后代)。术语“RHS”或“恢复的杂交系统”指本发明的基于核雄性不育的杂交系统。在本发明的上下文中，短语“有性杂交”和“有性生殖”指配子融合产生后代(例如通过受精，例如在植物中通过传粉产生种子)。在某些实施方案中，“有性杂交”或“异花受精”是某一个体受精自另一个体(例如在植物中异花传粉)。在某些实施方案中，术语“自交”指通过自花受精或自花传粉产生种子；即花粉和胚珠来自同一植株。在本发明的范围中，“选择育种”被理解为指一种利用具有或显示所需性状的植物作为亲本的育种计划。术语“严格条件”或“严格杂交条件”包括提及与其他序列相比，在多肽会与其靶序列杂交的情况下，在更大程度上可检测到的条件(例如至少超过背景2-倍)。严格条件是序列依赖的且在不同的情况下会有不同。通过控制杂交和/或洗涤条件的严格性，可鉴定与探针100%互补的靶序列(同源探查)。可选地，可调节严格条件以容许某些序列中的错配，使得能检测到较低程度的相似性(异源探查)。一般而言，严格条件是那些其中盐浓度低于大约1.5MNa离子，通常为约0.01-1.OMNa离子(或其他盐类)；pH7.0-8.3；以及对于短探针(例如10-50个核苷酸)，温度为至少约30°C，和对于长探针(例如大于50个核苷酸)，温度为至少约60°C的条件。还可通过添加去稳定剂如甲酰胺获得严格条件。例证性的低严格条件包括在37°C下使用30-35%甲酰胺，IMNaCl,1%SDS(w/v；十二烷基硫酸钠)的缓冲溶液进行杂交，以及在50-55°C下于IX-2XSSC(20XSSC=3.OMNaCl/0.3M柠檬酸三钠)中洗涤。例证性的中等严格条件包括在37°C下于40-45%甲酰胺，IMNaCl,1%SDS中杂交，以及在55-60°C下于0.5X-IXSSC中洗涤。例证性的高严格条件包括在37°C下于50%甲酰胺，IM恥(1，1%305中杂交，以及在60-651下于0.1\55(中洗涤。特异性通常是杂交后洗涤的函数，关键因素是离子强度和最终洗涤溶液的温度。对于DNA-DNA杂合体，Tm可从Meinkoth和Wahl(Anal.Biochem.，138:267_284，1984)的方程式中近似得到Tm=81.5°C+16.6(logΜ)+0.41(%GC)-0.61(%form)-500/L；其中M是单价阳离子的摩尔浓度，%GC是DNA中鸟苷和胞嘧啶核苷酸的百分数，%form是杂交溶液中甲酰胺的百分数，以及L是碱基对中杂合体的长度。Tm是在50%的互补靶序列与完全匹配的探针杂交(在规定的离子强度和PH下)时的温度。Tm每降低约1°C，就意味着的错配；因此，可调节Tm、杂交和/或洗涤条件以与所需同一性的序列杂交。例如，如果寻找具有大约90%同一性的序列，则1可降低10°C。一般而言，对于特定序列及其互补序列，严格条件选择为在规定的离子强度和PH下低于热熔点(Tm)约5°C。然而，高严格条件可利用在比热熔点(Tm)低1、2、3或4°C下进行杂交和/或洗涤；中等严格条件可利用在比热熔点(Tm)低6、7、8、9或10°C下进行杂交和/或洗涤；低严格条件可利用在比热熔点(Tm)低11、12、13、14、15或20°C下进行杂交和/或洗涤。使用上述方程式、杂交和洗涤组合物以及所需的Tm，本领域技术人员应当理解固有地描述了杂交和/或洗涤溶液的严格性变化。如果所需的错配程度导致低于45°C(水溶液)或32°C(甲酰胺溶液)的Tm，则优选增加SSC浓度，使得可使用更高的温度。关于核酸杂交白勺大量指导见于:Tijssen,LaboratoryTechniquesinBiochemistryandMolecularBiology-HybridizationwithNucleicAcidProbes,PartI,第2章〃Overviewofprinciplesofhybridizationandthestrategyofnucleicacidprobeassays",Elsevier,N.Y.(1993)；禾口CurrentProtocolsinMolecularBiology,第2章，Ausubel,等，编，GreenePublishingandffiley-Interscience,NewYork(1995)。严格杂交的方法是本领域已知的，其条件可通过本领域已知手段进行计算。这披露于Sambrook等，MolecularCloning:ALaboratoryManual,第2版·，ColdSpringHarborLaboratoryPress,1989,ColdSpringHarbor,N.Y.禾口CurrentProtocolsinMolecularBiology，Ausebel等，编，JohnWileyandSons，Inc.，2000中。测定序列同一性百分数的方法是本领域已知的，其实例为GCG计算机序列分析软件(GCG，Inc,MadisonWis.)。在本发明的范围中，“测交植物”(testerplant)被理解为指一种用于在遗传学上鉴定要被测试的植物中性状的植物。通常，将要被测试的植物与“测交系”植物杂交，并记录杂交后代中性状的分离比率。术语“测交系”指具有标准基因型、已知特性和确认性能的品系或个体。“测交亲本”是来自在有性杂交中用作亲本的测交系的个体。通常，测交亲本与其所要杂交的个体无关，并且在遗传学上也与之不同。当与个体或近交系杂交用于表型评估时，测交系通常用于产生F1后代。短语“顶交组合”指将单测交系与多个品系杂交的过程。产生该杂交的目的是要确定杂种后代的表型特性；也就是说，评估多种品系中的每一种在通过测交系杂交来源于其的杂种后代中产生所需表型的能力。术语“品种”或“栽培品种”指一群在结构或遗传特征和/或特性上能与相同种中的其他品种区分的相似的植物。发明详述本发明提供了一种用于生产欧洲油菜杂种种子的商业上可行的系统。该系统使用了显性核雄性不育基因。可通过显性恢复系等位基因恢复能育性。本发明的贡献包括但不限于1.提供条件性核雄性不育系，其包含以纯合子存在的雄性不育基因(基因型MsMsrfrf)。有可能通过提供用于作为本发明一部分的雄性不育基因的遗传标记，从而提供该品系。2.提供一种通过经特定的热处理导入能育性，繁殖以未改变类型存在的条件性雄性不育系的方法。3.提供欧洲油菜保持系，其既不包含核雄性不育基因，也不包含恢复系等位基因(基因型msmsrfrf)的功能性拷贝。由于在所有杂交系统中雌性系的繁殖是主要的数量限制且昂贵的步骤，因此现有系统提供了在2-步操作中繁殖雌性系首先，发现本发明的系统是一种环境敏感的核雄性不育(enms)系统。由于在田间生长条件下不育性可能意外丢失，因此大多数这些系统在商业上并不可行，而现有系统可通过高温处理转换开关，因此上述不育性的意外丢失不太可能在油菜籽正常生长的条件下发生。通过利用enms特性的本发明的自交方法，使用该系统提供了足够数量的预基础雌性系。在第二步中，将预基础雌性系与保持系(msmsrfrf)杂交产生包含以杂合形式存在的雄性不育基因(基因型Msmsrfrf)的雄性不育基础雌性系。当在本文中使用时，术语“预基础雌性系(prebasicfemale)”指例如具有基因型MsMsrfrf的条件性(例如高温调节的)雄性不育欧洲油菜品系，该基因型可例如获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子(参见以下第1节“提供预基础雌株和种子的方法”)，其中所述欧洲油菜雌株是i.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是纯合的，ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(rf等位基因)是纯合的，iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度时，恢复优势雄性能育表型。此外，当在本文中使用时，术语“基础雌性系(basicfemale)”指例如具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物(参见以下第2节“基础种子生产”)，其中所述欧洲油菜雌株是i.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是杂合的，ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(rf等位基因)是纯合的，iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度时，恢复优势雄性能育表型。在杂种种子生产中预基础和基础雄性不育雌性系都适合作为雌性系。最后，当在本文中使用时，术语“保持系”指具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物，其基因型存在于在保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子中(参见以下第2.1节，“保持系”)，其中所述欧洲油菜植物是i.对于可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子的能育等位基因(ms等位基因)是纯合的，ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(rf等位基因)是纯合的，和iii.优势雄性能育。本发明的杂交系统的特殊优点在于实际上每个可能获得的油菜籽品系都包含功能性恢复系等位基因，并且能用作为雄性能育系以与(雄性不育)雌性系组合来产生杂种种子。在提供商业上可行的核雄性不育杂交系统中，一个最阻碍的困难是繁殖和增殖(雄性不育)雌株。在大多数系统中，仅起始于对于Ms等位基因是杂合的植物的繁殖是可行的。这就导致需要选取所有那些作为完全缺少Ms等位基因的自交结果的植物。因此，其对于提供条件性不育系统是有利的，其中能育性/不育性可基于在正常生长条件下不存在的以及其中能育性/不育性的分布几乎完整的因素而被转换开/关。迄今为止没有描述这样的在商业上可行的系统。现在，令人惊奇地发现某些包含于MSL杂种种子中的组分可被利用来获得商业化gms系统。在工作期间，观察到惊人的且意外的与Takagi系统的相似性。尽管本发明的杂交系统的遗传学分离自杂交系(事实上，雄性不育植物最初选自市售NPZ杂交系“Panther”；参见实施例3)，该杂交系不能与Takagi种质明确连锁(以及在事实上被描述属于cms系统)，但是仍有某些表型指示(例如热敏感性)来假定该遗传学至少的相似性。基于业已开发的MSL材料标记(参见实施例)以及通过利用这些标记，分离了本发明系统的组分。然而，现在无法获得Takagi原系的种子，因此不可能进行详细的比较。即使Takagi种质中的遗传学会等同于在此描述的某一种质，但是Takagi的原文以及Theis(1990)的相关的后继工作都没有提供对于本发明下文所述内容的启示。如果不了解杂交系统的确切遗传，那么将其简化成商业上可行的方法就行不通。Theis描述了如下的Takagi系统如果对于隐性雄性不育(ms)基因是纯合的植物在非纯合的隐性形式中还包括了所谓的修饰基因(md)，则仅存在雄性不育植物。结果，Theis推定一种隐性雄性不育基因和一种显性修饰基因。然而，本发明人的发现完全不同通过提供标记，使得在Takagi系统下的两种基因的分离变得有可能，证实了显性雄性不育(Ms)基因和隐性恢复系等位基因(rf等位基因)。能育性恢复通过存在于所有基于非Takagi的品系(事实上所有公众可得到的欧洲油菜品系)中的显性恢复系等位基因(rf等位基因)是有可能实现的。显然，Theis没有分离这两种基因，也没有提供对于这些基因是26纯合的品系(如通过在其的杂交试验中的分离方式所证实的)。如在本发明的上下文中所证实的，Theis错误命名为“ms等位基因”的该基因无法同样地提供雄性不育表型。与此相反，其仅仅是恢复系等位基因(rf)的无活性形式。这种Theis命名为“修饰基因”的基因事实上是雄性不育基因。基于没有标记，这样的分离分析可能是非常麻烦的事实，这并不令人惊奇。其他与Ms等位基因连锁的表型特性并不适合用于区分杂合个体和纯合个体。因此，Theis提供了令人误解的信息，其会阻碍本领域技术人员开发商业上可行的杂交系统。此外，隐性雄性不育基因与商用杂交系统中的许多困难相关。同样从这一角度来看，Theis的教导偏离了Takagi系统的商业应用。此外，提供纯合的雄性不育系仍无法产生商业上可行的系统。两个重要的问题需要解决首先，纯合雄性不育(Ms)系(在本发明的上下文中，称为预基础雌株)的繁殖问题，其使得所有其他迄今已知的核雄性不育系统在商业上都不可行。其次，提升至商业规模的问题。该纯合Ms系的繁殖问题已为本发明通过提供条件性、热诱导的再受精方法所解决。该方法使雄性不育预基础系得以容易繁殖。尽管预基础雌株能大体上直接用作雌性系用于杂种种子的生产，但是热处理步骤并不适合于提供足够数量的所述品系。因此，本发明的方法使用了重新设计的步骤，其中将条件性雄性不育(预基础雌性)系与保持系杂交以再次提供雄性不育种子。该种子对于雄性不育基因是杂合的，但仍具有条件性雄性不育表型。只有通过提供既不具有功能性ms等位基因又不具有功能性恢复系等位基因的保持系该繁殖才得以可能。该重新设计的步骤是商业上可行的系统所需要的。有趣地以及作为本发明的具体创造性和有利特征，能育恢复系等位基因存在于所有非-Takagi系中，即实际上存在于所有可获得的欧洲油菜品系中。这是有益的，因为这意味着实际上在杂种种子生产过程中所有品系都可用作雄性系，无需基因渗入恢复系等位基因。与例如Ogura系统相比，这是一个明显的优点，并且惊人地相似于其遗传学公众未知的NPZMSL系统，尽管NPZMSL系统据说是一种细胞质雄性不育(cms)系统(Frauen，1999)。1.提供预基础雌株和种子的方法本发明的第一个实施方案涉及一种生产或繁殖具有基因型MsMsrfrf的条件性(高温调节的)雄性不育欧洲油菜品系的种子(适合作为预基础雌性系用于生产欧洲油菜杂种种子)的方法，所述方法包括步骤a)提供具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物，该基因型存在于在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子中，其中所述条件性雄性不育欧洲油菜植物是i.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的雄性不育基因(Ms等位基因)是纯合的，和ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480或4148下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因)是纯合的。和iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度时，恢复优势雄性能育表型，和b)将所述条件性雄性不育欧洲油菜植物暴露于高于35°C的温度至少4小时，和27c)将步骤(b)中获得的热处理的条件性雄性不育欧洲油菜植物暴露于低于33°C的温度，直至雄性能育花发育，和d)使具有在步骤(c)中获得的所述雄性能育花的欧洲油菜植物自花传粉，让种子发育，并收获种子，其中所收获的种子特征在于它们是具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系的种子。术语“基因型MsMsrfrf”指一种对于显性Ms等位基因是纯合的以及对于隐性保持系等位基因(也称为功能失常的恢复系等位基因或rf等位基因)也是纯合的植物。该基因型可存在于芸苔属植物，优选欧洲油菜植物的任何遗传背景中，前提是不存在功能性恢复系等位基因(Rf等位基因)拷贝。在本发明的一个优选的实施方案中，在上述生产或繁殖具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系的种子的方法的步骤(a)中提供的条件性雄性不育欧洲油菜植物进一步特征在于iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于优选低于25°C的温度，更优选暴露于低于20°C的温度，但至少在容许正常生长的温度例如至少12°C，优选至少14°C，更优选至少16°C下之时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于优选35°C_43°C的温度，更优选暴露于37°C-40°C的温度，最优选暴露于约39°C的温度时，恢复优势雄性能育表型；最优选暴露如下(例如在步骤b中)规定的优选的热处理时间以及随后在如下(例如在步骤c中)规定的环境温度下生长。在本发明的一个优选的实施方案中，在上述生产或繁殖具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系的种子的方法的步骤(b)中，条件性雄性不育欧洲油菜植物在开花之前和/或开花期间暴露于约35°C-约43°C，优选约36-约42°C，更优选约37°C-约41°C，还更优选约38-约40°C和最优选约39°C的温度至少4小时，优选至少8或12小时，更优选至少24或36小时，还更优选至少48或96小时和最优选至少112小时。在本发明的一个进一步优选的实施方案中，在上述生产或繁殖具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系的种子的方法的步骤(c)中，将条件性雄性不育欧洲油菜植物暴露于低于30°C，优选低于28°C，更优选16-25°C，还更优选18_20°C的温度，直至雄性能育花发育。对于Ms等位基因是纯合的欧洲油菜植物代表了本发明的贡献。因此，本发明的另一个实施方案涉及一种具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物，其基因型可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子，其中所述条件性雄性不育欧洲()(femaleconditionallymalesterileBrassicanapusplant)ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的雄性不育基因(Ms等位基因)是纯合的，ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因)是纯合的，iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度时，优势雄性不育，iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度时，恢复优势雄性能育表型。在本发明的上下文中，如上所述具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物也称为“预基础雌性系”或“预基础雌株”。优选地，所述具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物可获得自通过本发明的生产预基础雌性种子的方法所生产的种子。本发明的另一个实施方案涉及种子，其生长成所述具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物、所述植物的部分，以及所述植物在杂种种子生产过程中的应用。优选地，所述植物的遗传背景不是杂种，更优选其是一种欧洲油菜近交系。优选地，所述植物部分选自种子、小孢子、原生质体、细胞、胚珠、花粉、营养体部分、子叶、合子。在本发明的一个优选的实施方案中，具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物，其基因型可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子，进一步特征如下iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于优选低于25°C的温度，更优选暴露于低于20°C的温度，但至少在容许正常生长的温度例如至少12°C，优选至少14°C，更优选至少16°C下之时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于优选35°C_43°C的温度，更优选暴露于37°C-40°C的温度，最优选暴露于约39°C的温度时，恢复优势雄性能育表型；优选暴露如本文中所规定的优选的热处理时间以及随后在如本文所规定的环境温度下生长。在本发明的一个优选的实施方案中，在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子用于获得具有基因型MsMsrfrf的雄性不育欧洲油菜植物(即在此所披露的预基础雌性系)。在本发明的一个进一步优选的实施方案中，任何NorddeutschePflanzenzuchtHans-GeorgLembkeKG(NPZ)在德国基于他们的MSL系统生产的种子可用于获得具有基因型MsMsrfrf的雄性不育欧洲油菜植物。这样的种子的实例包括但不限于品系j0ker、Pr0nt0、Panther、Artus>Baldur>Elan>Marcant>Mendel>Talent>Taurus>Tenno>Titan>Trabant>Zeppelin>Visby、Horus和Siesta的种子。其他可获得具有基因型MsMsrfrf的雄性不育欧洲油菜植物的种子的实例包括但不限于如Alkido、Mika、Fangio、Elektra和Libretto的种子。在本发明的一个进一步优选的实施方案中，在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子被用于生产或繁殖具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物的种子的方法中，如用于以上所描述的方法中。本发明的预基础雄性不育系优选具有不大于50ymol/克9%水分含量的风干种子(小于40iimol/克，更优选5-35iimol/克，最优选10-25ymol/克)的总芥子油苷含量。应当指出在预基础雌性系繁殖中利用的热处理(如在加热室环境下)在某些情况下，增加芥子油苷含量至超过30umol/克的水平。同样，由于在种子生产中的低结实率，因此从不育的基础雌性系收获的h杂种可能超过30ymolGSL。然而，这并不是品系遗传的结果，而是因为环境胁迫之故，与此同时由本发明的杂种植物(F2种子)所产生的籽粒中芥子油苷水平处于商用水平(具有不超过25ymol/克9%水分含量的风干种子的总芥子油苷含量(优选1-22umol/克，更优选5-20umol/克，最优选8-17umol/克))。1.lMs等位基因，其相关的表型和标记关于在布达佩斯条约下进行的保藏物以及关于Ms、Rf、ms、rf等位基因或任何包含它们的组合的基因型，术语“可获得”指这些基因或基因型可获得自所述保藏材料，但也29可获得自其他材料。获得自其他材料的基因的序列可不同于所保藏的材料中基因的序列(“变体”)。因此，术语“Ms等位基因”包含可获得自保藏材料的基因及其变体。因此，在本发明的一个优选的实施方案中，Ms等位基因是存在于在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子中Ms等位基因或其遗传变体，与存在于在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子中的Ms等位基因相比，该遗传变体赋予基本上相同的表型。在本发明的一个优选的实施方案中，在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子用于获得雄性不育等位基因(Ms等位基因)。在本发明的一个进一步优选的实施方案中，雄性不育等位基因(Ms等位基因)还可获得自NorddeutschePflanzenzuchtHans-GeorgLembkeKG(NPZ)在德国基于他们的MSL系统生产的种子。这样的种子的实例包括但不限于品系Joker、Pronto、Panther、Artus、Baldur、Elan、Marcant、Mendel、Talent、Taurus、Tenno、Titan、Trabant、Zeppelin、Visby、Horus和Siesta的种子。其他可获得雄性不育等位基因(Ms等位基因)的种子的实例包括但不限于如Alkido、Mika、Fangio、Elektra和Libretto的种子。此外，雄性不育等位基因(Ms等位基因)还可获得自Syngenta(或其附属公司之一)生产的种子，例如但不限于品系NKPetrol、NKKaribik、NKSpeed、NKOctans、NKKick、NKTechnik、NKPicolo、NKCaravel的种子。当在本文中使用时，“基本上相同的表型”指赋予条件性(优选高温调节的)核雄性不育表型的能力。优选地，如果获得自其他来源，则所述其他来源的起源是Takagi(1970)提供的突变的品系。应当理解尽管Ms等位基因可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子，但所述Ms等位基因可获得自的其他来源仍可存在(以相同或不同的形式存在)。在本发明的上下文中提供的基因和基因型(无论获得自保藏物还是其他来源)的相同和/或相似性都可通过与所述基因或基因型连锁的下述一种或多种特性而得以证实。在本发明的上下文中利用的Ms等位基因的最主要特性和独特性质在于能育性能通过实际上任何公众可获得的欧洲油菜品系(除由Takagi种质产生的品系之外)而得以恢复，但不为其种子在保藏编号NCIMB41481下保藏的保持系所恢复的这一事实。本发明所提供的保持系包含以纯合子(rfrf)存在的保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因)，而“常规的”欧洲油菜植物则包含以功能型(RfRf)存在的恢复系。除来源于Takagi种质的种质之外，尚不知道不包含至少一个Rf等位基因功能拷贝的品系。结果，发现在本发明之日实际上所有可获得的油菜籽品系都是恢复系。推测在Takagi种质中出现双突变的两种基因Ms和rf的存在对于本发明所披露的功能性杂交系统是必不可少的。这还意味着通过使用保藏材料，Ms或rf等位基因的存在可容易地确定。基于Ms等位基因的雄性不育系可通过与其种子在保藏编号NCIMB41481下保藏的保持系杂交得以“保持”其雄性不育表型，但还可通过与任何恢复系杂交而得以恢复能育性(参见以下实施例)。因此，Ms等位基因与雄性不育表型连锁，所述雄性不育表型可为任何包含至少一个显性Rf等位基因的植物当在本文中提及时，所谓的“恢复系植物”)恢复(至少在后代的一部分中)能育性，但不为来源于在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子(保持系)的植物恢复能育性。因此，Ms等位基因优选具有赋予条件性核雄性不育表型的特性，其a)通过暴露于高于35°C的温度，暂时恢复能育性，b)在至少一部分的&植物中恢复能育性，所述&植物获得自具有基因型MsMsrfrf或Msmsrfrf的雄性不育植物与任何包含至少一个显性Rf等位基因的欧洲油菜植物的杂交，和c)在&植物中得以保持，所述&植物获得自具有所述Ms等位基因赋予的条件性雄性不育表型的植物与来源于在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子的雄性能育植物的杂交。在本发明的一个优选的实施方案中，Ms等位基因优选具有赋予条件性核雄性不育表型的特征，其a)通过暴露于高于35°C的温度，优选暴露于35°C_43°C的温度，更优选暴露于37°C-40°C的温度，最优选暴露于约39°C，暂时恢复能育性；优选暴露如本文中所规定的优选的热处理时间以及随后在如本文所规定的环境温度下生长，b)在至少一部分的&植物中恢复能育性，所述&植物获得自具有基因型MsMsrfrf或Msmsrfrf的雄性不育植物与任何包含至少一个显性Rf等位基因的欧洲油菜植物的杂交，或在所有&植物中恢复能育性，所述&植物获得自具有基因型MsMsrfrf或Msmsrfrf的雄性不育植物与对于Rf等位基因是纯合的欧洲油菜植物，即具有基因型RfRf的欧洲油菜植物的杂交。和c)在h植物中得以保持，所述&植物获得自具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育植物(例如一种具有所述Ms等位基因赋予的雄性不育表型的植物)与来源于在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子的植物的杂交。“能育性的时序恢复”指仅有在高温处理过程中诱导的花发育成雄性能育花，而在此之前或之后诱导的花则只发育成雄性不育花，即使在同一植物上发育。因此，高温处理是暂时的，同样能育性恢复也是暂时的并且与高温处理的持续时间相关。因此，通过将雄性不育植物与如下植物杂交a)任何包含至少一个Rf等位基因，优选对于Rf等位基因(恢复系植物)是纯合的雄性能育、自交的欧洲油菜植物，和b)来源于在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子的植物，可清楚地鉴定Ms等位基因的存在与否。“恢复系植物”或“恢复系”指任何包含至少一个Rf等位基因的能育的、自交的欧洲油菜植物，优选对Rf等位基因是纯合的。恢复系植物包括所有被商业化作为种子用于栽培的(开放传粉的，非杂种)欧洲油菜能育近交系，优选在本发明的优先权日之前。本发明人没有发现例外。合适的恢复系还包括在2006年12月0E⑶品种列表上的那些恢复系(确认合格的0ECD品种列表-2006/2007；2006年12月；http://www.oecd.org/dataoecd/1/44/33999447.PDF；http://www.oecd.org/document/14/0,2340,en_2649_33909_2485070_l_l_l_l,00.html)，优选被商业化作为种子用于栽培(用于油料生产)的非杂交系，更优选在所述0ECD列表上那些没有标记为“d”(只要它们代表杂交亲本系，就是近交系)或“b”(杂种)的品种。虽然该特性是只有在下文中提供的本发明的杂交系统才有的，但仍有其他与Ms等位基因连锁或与之相关的特性。在本发明的一个优选的实施方案中，条件性雄性不育表型和/或Ms等位基因与选自如下的一种或多种特性连锁和/或与之相关I.在具有Ms等位基因赋予的雄性不育表型的植物中的芽败育表型，II.在具有Ms等位基因赋予的雄性不育表型的植物中的白色条纹或白色斑点花瓣表型，和III.在包含至少一个拷贝的Ms等位基因的雄性能育和雄性不育植物中，存在Ms等位基因特异性标记。在本发明的另一个优选的实施方案中，条件性雄性不育表型和/或Ms等位基因与选自由如下组成的组(“MS基因标记组”)的一种或多种标记(Ms等位基因标记)连锁和/或与之相关I.选自由如下组成的NR1116标记区中多态性(突变)组的标记a)具有位于相应于SEQIDNO:3中第85位的位置处的A的单核苷酸多态性标记，b)具有位于相应于SEQIDNO:3中第87位的位置处的G的单核苷酸多态性标记，c)具有位于相应于SEQIDNO3中第139位的位置处的A的单核苷酸多态性标记，d)具有位于相应于SEQIDNO记，e)具有位于相应于SEQIDNO记，f)具有位于相应于SEQIDNO记，g)具有位于相应于SEQIDNO记，h)具有位于相应于SEQIDNO记，i)具有位于相应于SEQIDNO记，j)具有位于相应于SEQIDNO记，k)在位于相应于SEQIDNO:3中第221位的位置处的5'-TTGGTGAACAATC-3‘缺失突变，1)在位于相应于SEQIDNO:3中第328-330位的位置处的5'-GAA-3'插入突变，II.选自由如下组成的NR2525标记区中多态性组(突变)的标记a)具有位于相应于SEQIDNO6中第60位的位置处的A的单核苷酸多态性标记，b)具有位于相应于SEQIDNO6中第92位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，c)具有位于相应于SEQIDNO6中第105位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，d)具有位于相应于SEQIDNO6中第158位的位置处的C的单核苷酸多态性标记，e)具有位于相应于SEQIDNO6中第431位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，3中第214位的位置处的C的单核苷酸多态性标3中第218位的位置处的G的单核苷酸多态性标3中第277位的位置处的G的单核苷酸多态性标3中第286位的位置处的A的单核苷酸多态性标3中第312位的位置处的T的单核苷酸多态性标3中第319位的位置处的T的单核苷酸多态性标3中第359位的位置处的C的单核苷酸多态性标f)在位于相应于SEQIDNO6中第82位的位置处的单核苷酸缺失突变，g)在位于相应于SEQIDNO:6中第17-25位的位置处的5‘-TGAGCAAAA-3‘缺失突变，III.选自由如下组成的SNP标记组的标记a)在使用包含SEQIDNO:12所示的核苷酸序列(不育等位基因特异性探针HiNK6701)的SNP-探针(SNP-探针1)的SNP检测(优选基于TaqMan的SNP检测)中，阳性信号，和使用包含SEQIDNO:11所示的核苷酸序列(能育等位基因特异性探针HiNK6700)的SNP-探针(SNP-探针2)，阴性信号，b)在使用包含SEQIDNO:17所示的核苷酸序列(不育等位基因特异性探针HiNK6775)的SNP-探针(SNP-探针3)的SNP检测(优选基于TaqMan的SNP检测)中，阳性信号，和使用包含SEQIDNO:18所示的核苷酸序列(能育等位基因特异性探针HiNK6776)的SNP-探针(SNP-探针4)，阴性信号，IV.选自由如下组成的SSR标记组的标记a)由使用SEQIDNOs:1和2所示的引物的PCR反应产生的具有96.7(+/_1.0)bp的表观分子量的PCR片段，b)由使用SEQIDNOs4和5所示的引物的PCR反应产生的具有192.8(+/_0.3)bp的表观分子量的PCR片段，和V.选自与SEQIDNOs:3、6、11和18所示的序列至少之一连锁的标记组的标记，其中一种或多种标记(Ms等位基因标记)还包括选自如下序列的分离的核苷酸序列，所述序列I.与在上述I.-V.中定义的标记序列具有至少80%的序列同一性，或II.在严格条件下与在上述I.-V.中定义的标记序列杂交，或III.包含在上述I.-V.中定义的标记序列的至少25个连续的核苷酸。在一个优选的实施方案中，条件性雄性不育表型和/或Ms等位基因与选自NR1116标记区中多态性(突变)组的标记连锁和/或与之相关，所述NR1116标记区由至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个组1的突变组成，更优选由至少在相应于5￡0IDNO:3中第214位(T/C)和第218位(T/G)的位置处的突变组成。优选地，该NR1116标记区存在至少1、2、3、4、5、6或7个组II的突变，更优选存在至少在相应于SEQIDNO:6中第158位的位置处的突变。此外，与条件性雄性不育表型和/或Ms等位基因连锁和/或与之相关的上述组V的一种或多种标记可与SEQIDNOs:3、6、11和18所示的1、2、3条或所有的序列连锁。如上所述的标记可用于本发明的多个其他方面中。然而，本发明的方面不限于使用在本申请中披露的标记。进一步强调的是这些方面还可使用没有在本文中明确披露的标记或仍待鉴定的标记。术语“SNP”或“单核苷酸多态性”指当在物种成员之间或个体中配对染色体或等位基因之间，优选在基因组(或其他共有序列)中单核苷酸(优选A、T、C或G)不同时，发生的核苷酸(优选DNA)序列变异。例如，来自不同个体的两条测序的DNA片段，AAGCCTA对AAGCTTA，包含了单个核苷酸的差异。在该情况下，可以说存在两个等位基因C和T。单核苷酸多态性可落入基因的编码序列、基因的非编码区或基因间的基因间区中。由于遗传密33码的简并性，编码序列中的SNPs可未必改变所产生的蛋白的氨基酸序列。其中两种类型都产生相同的多肽虚序列的SNP称为“同义的”(有时称为沉默突变)，如果产生了不同的多肽序列，则它们是非同义的。没有位于蛋白编码区中的SNPs仍可具有基因剪接、转录因子结合或非编码RNA序列的结果。然而，像这样的SNP可能根本不具有功能相关性，并且可能仅仅与某一表型和/或基因型“连锁”或相关(即与所述基因型和/或表型具有一定可能性的分离)。术语“SNP-探针”指适合于检测SNP的探针，更优选适合于自动化检测的标记的探针(如下所述)。短语“相应于SEQIDNO:Y中第X位的位置”指SEQIDNO:Y所示的序列是共有序列。在具体植物(其中SNP存在与否有待检测)中相应的序列(在大多数情况下)将不同于所述共有序列。然而，在一个优选的实施方案中，可确定在所述共有序列与所述具体植物中的所述序列的比对中的序列同一性。序列比对是一种排列核苷酸(例如DNA)的一级序列以鉴定可能是序列之间功能上、结构上或进化关系上结果的相似性区域的方法。比对的核苷酸残基序列Aligned通常在矩阵中排成行。空位可插入残基之间，使得具有同一或相似特性的残基能在连续的栏中进行比对。可通过例如ClustalW或BLAST程序产生序列比对。如果在一次比对中两条序列享有共同的祖先，则错配可解释为点突变以及空位可解释为indels(即插入或缺失突变)，即由于它们彼此趋异，从而在漫长的时间中导入到一个或两个谱系中的突变。因此，作为缺失和突变的结果，所述具体植物中的序列与共有序列的长度可以不同。结果，特异性SNP的绝对位置(如由序列起点所测定的)也可以不同。然而，当以适当的方式进行比对时，那些位置仍然彼此匹配。短语“相应于SEQIDN0:Y中第X位的位置”指这样的事实，并因此意味着尽管在获得自具体植物的序列中绝对位置可以不同，但是在与共有序列(“Y”)的比对中，其仍会匹配所示位置(“X”)。术语“SNP检测”指任何一种本领域已知适合于检测或显现单核苷酸多态性的方法。这些方法可例如基于杂交。通过将互补的DNA探针与SNP位点杂交，业已开发了几种调查SNPs的应用(Rapley&Harbron，2004)。这样的方法包括动力等位特异性杂交(DASH)。其他用于SNP检测的方法包括使用利用了包含荧光团和荧光猝灭剂的特异性工程化的单链寡核苷酸探针的分子信标(Abravaya等，2003)。SNPs还可通过包含排列在小芯片上的成百上千条探针的高密度寡核苷酸SNP阵列进行检测，使得大量的SNPs能同时得到调查(Rapley&Harbron,2004)。此外，各种酶包括DNA连接酶、DNA聚合酶和核酸酶已用于产生高保真SNP基因分型方法。另一种方法是基于限制性片段长度多态性(RFLP)。业已基于PCR开发了多种SNP检测方法。这样的方法包括四引物ARMS-PCR，其在一次PCR反应中使用两对引物来扩增两种等位基因。Flap核酸内切酶(FEN)是一种催化结构特异性切割的核酸内切酶。该切割对错配高度敏感并能用于调查SNPs，具有高度特异性(Olivier，2005)。在基础侵入者测定(basicInvaderassay)中，被叫做裂解酶的FEN与两条特异性寡核苷酸探针结合，其与靶DNA—起可形成为裂解酶所识别的三层型结构(Olivier，2005)。引物延伸是一种两步过程，第一步包括探针与紧接SNP核苷酸上游碱基的杂交，然后是‘微测序(mini-sequencing)’反应，其中DNA聚合酶通过添加与该SNP核苷酸互补的碱基延伸杂交的引物。检测该掺入的碱基并确定SNP等位基因(SyVanen，2001；Rapley&Harbron,2004)。Illumina公司的Infinium检测是一种基于引物延伸法的全基因组基因分型流水线的实例。在Infinium检测中，超过100，000条SNPs可被基因分型。该检34测在引物延伸反应中使用了半抗原标记的核苷酸(Gimderson等，2006)。寡核苷酸连接酶检测利用了DNA连接酶，其催化DNA片段的3'末端与直接相邻的DNA片段的5‘末端的连接。通过杂交两条直接跨越SNP多态位点的探针，该机制可用于调查SNP(Rapley&Harbron,2004)。在本发明的上下文中，最优选的是使用TaqMan_检测来检测SNPs。术语“TaqMan检测”通常指一种使用双重标记的荧光团探针(TaqMan探针；Heid等，1996)的定量实时PCR法。在PCR指数期过程中，而非在常规PCR终点，TaqMan实时PCR通过荧光团测量产物积累。该产物的指数式增加则被用于确定阈值循环，CT，即检测到荧光明显指数式增加时PCR循环的数目，并且其与存在于反应中的DNA模板的拷贝数直接相关。不同于常规PCR，在TaqMan实时PCR中，将探针(即与处于DNA模板中并位于两条引物之间的20-60个核苷酸的区段互补的单链寡核苷酸)添加到反应中。荧光报道分子或荧光团(例如6-羧基荧光素，简称FAM，或四氯荧光素，简称TET)以及猝灭剂(例如四甲基若丹明，简称TAMRA，或二氢环吡咯并吲哚三肽“小沟结合物”，简称MGB)被分别共价连接于探针的5'和3'末端(Kutyavin，2000)。连接在探针上的荧光团和猝灭剂之间密切接近，从而抑制了来自荧光团的荧光。在PCR过程中，当DNA合成开始时，Taq聚合酶的5'至3'核酸外切酶活性降解了一定比例的已退火到模板上的探针。探针降解释放了来自其的荧光团并破坏了与猝灭剂的密切相邻，从而减轻了猝灭效应，并产生了荧光团的荧光。因此，在实时PCR热循环仪检测到的荧光与在PCR中释放的荧光团和存在的DNA模板的量成正比。更具体地说，对于SNP检测，在Taqman检测中使用TaqDNA聚合酶的5’-核酸酶活性来进行SNP基因分型。Taqman检测与PCR反应同时进行，当PCR反应进行时可实时读出结果(MCGuigan&RalSton，2002)。该检测需要会扩增包括SNP多态位点的区域的正向和反向PCR引物。使用结合有一种或两种与该SNP多态位点杂交的等位基因特异性探针(优选的SNP-探针，例如本发明的SNP-探针1、2、3或4)的FRET，实现了等位基因区分。所述探针(例如本发明的SNP-探针1、2、3或4)优选具有与它们的核酸核心序列的5’末端相连的荧光团以及与它们的3’末端相连的猝灭剂分子。当探针是完整的时候，猝灭剂会留下来接近荧光团，除去荧光团的信号。在PCR扩增步骤过程中，如果等位基因特异性探针与SNP等位基因完全互补，则其会结合靶DNA链，然后当其由PCR引物延伸DNA时为Taq聚合酶的5’-核酸酶活性所降解。探针降解导致荧光团与猝灭剂分子分离，从而产生可检测的信号。如果等位基因特异性探针没有完全互补，则其会具有较低的解链温度并且不会有效结合。这就阻止了核酸酶作用于探针(MCGuigan&RalStOn，2002)。该Taqman检测是基于PCR的，并且对设备要求相对简单。该Taqman检测可通过在一次反应中组合多达7个SNPs的检测从而实现多重检测(Syvanen，2001)。还参见Affymetrix(2007)Genome-WideHumanSNPArray5.0.[在线]网址http://www.affymetrix.com/products/arrays/specific/genome_wide/genome_wide_snp_5.affx(检索日期2007年2月27日)。用于基于TaqMan的SNP检测的试剂和详细实验方案是可获得且得以描述的(US5，876，930；Livak等，1995；Pre-DevelopedTaqManAssayReagentsAllelicDiscriminationProtocol；件号4312214Rev.C5/2005；AppliedBiosystems)。另外的SNP检测法对于本领域技术人员是公知的，并且是基于DNA的物理特性、单链构象多态性的，使用了温度梯度凝胶电泳或变性高效液相色谱、整个扩增子的高分辨率解链或测序。术语“PCR片段”指通过利用一条或多条引物、DNA聚合酶(优选耐热DNA聚合酶)和一次或多次扩增循环，获得自靶DNA(例如基因组DNA)扩增的核酸片段(优选DNA片段)。聚合酶链反应(PCR)是一种经酶促复制用于指数式扩增DNA的生化和分子生物学技术。由于PCR是一种体外技术，因此其能得以进行而无针对DNA形式的限制，并且可对其进行广泛修改以执行大阵列的基因操作。术语“表观分子量”指如与分子量标准物比较所测量得到的分子(例如DNA片段)的分子量。例如，该分子量可通过凝胶(例如琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶)电泳(以平板凝胶、毛细管或本领域已知的其他手段)得到测量。优选地，通过使用DNA测序仪和荧光标记的探针作为标准物进行分子量测定。更具体地说，当在本发明的上下文中使用时，表观分子量指通过使用3700DNA分析仪或等效设备，在与GeneScan500R0X大小标准物(R0X染料标记的大小标准物，用于片段分析数据的可重现大小分级)相比下测定的分子量。该GeneScan500R0X大小标准物被设计用来分级35-500个核苷酸范围内的DNA片段，并提供35、50、75、100、139、150、160、200、250、300、340、350、400、450、490和500个核苷酸的16条单链标记片段。由这些短片段产生的大小曲线使得GeneScan500R0X大小标准物能理想地用于多种片段分析应用中，例如微卫星、片段长度多态性和相对荧光定量。每条DNA片段都用R0X荧光团标记，当在变性条件下运转时其产生单峰。在另一个优选的实施方案中，Ms等位基因、ms等位基因和/或雄性不育表型进一步特征在于定位于欧洲油菜染色体N7上，优选处于标记序列NRl116(例如SEQIDNO21)和NR2525(例如SEQIDNO22)之间，更优选与NRl116具有2.8cM的距离以及与NR2525具有6.OcM的距离，还更优选处于SNP标记SR0002A和SR0003B之间，最优选与SR0002A具有大约2.8cM的距离以及与SR0003B具有大约3.3cM的距离。术语“标记序列NR1116”指如SEQIDNO21所示序列及其变体，该变体i)与SEQIDNO21所示序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在严格条件下与SEQIDNO21所示序列杂交，或iii)包含SEQIDNO21所示序列的至少25个连续的核苷酸。术语“标记序列NR2525”指如SEQIDNO22所示序列及其变体，该变体i)与SEQIDNO22所示序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在严格条件下与SEQIDNO22所示序列杂交，或iii)包含SEQIDNO22所示序列的至少25个连续的核苷酸。术语“SNP标记SR0002A”指包含通过SEQIDNOs8和10所示的引物对扩增的SNP突变的片段，其优选在使用包含SEQIDNO:12所示的核苷酸序列(不育等位基因特异性探针HiNK6701)的SNP-探针1的SNP检测(优选基于TaqMan的SNP检测)中，对于能育等位基因，产生阴性信号，以及优选在使用包含SEQIDNO:11所示的核苷酸序列(能育等位基因特异性探针HiNK6700)的SNP-探针2中，产生阳性信号(以及对于不育等位基因则结果是相反的)。术语“SNP标记SR0003B”指包含通过SEQIDNOs15和16所示的引物对扩增的SNP突变的片段，其对于能育等位基因，优选在使用包含SEQIDNO17所示的核苷酸序列(不育等位基因特异性探针HiNK6775)的SNP-探针3的SNP检测(优选基于TaqMan的SNP检测)中产生阴性信号，以及优选使用包含SEQIDNO:18所示的核苷酸序列(能育等位基因特异性探针HiNK6776)的SNP-探针3，产生阴性信号(以及对于不育等位基因则是相反的)。因此，以纯合子存在的雄性不育基因(Ms等位基因)与雄性不育表型连锁，其-可通过与任何包含至少一个显性功能性Rf等位基因(恢复系等位基因)的植物杂交恢复能育性，和-能通过与来源于在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子的植物(保持系)杂交得以保持，其中所述Ms等位基因选自a)可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的Ms等位基因，和b)具有相同的表型特性的其变体(即与雄性不育有关)。更优选，所述Ms等位基因是处于在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子中的Ms等位基因，其与一种或多种选自如下的特性连锁和/或与之相关I.在具有Ms等位基因赋予的条件性雄性不育表型的植物中的芽败育表型，II.在包含至少一个拷贝的Ms等位基因的雄性能育和雄性不育植物中，一种或多种选自MS基因标记组(如上定义的)的标记，III.在具有Ms等位基因赋予的雄性不育表型的植物中的白色条纹或白色斑点花瓣表型，或所述Ms等位基因的变体，其显示具有相同恢复特性的条件性雄性不育表型。因此，在一个优选的实施方案中，对于与雄性不育表型连锁的雄性不育基因(Ms等位基因)具有基因型MsMsrfrf的雄性不育欧洲油菜植物是纯合的，其-通过与任何包含至少一种显性功能性Rf等位基因的植物(恢复系)杂交可恢复能育性，和-其可通过与来源于在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子的植物(保持系)杂交得以保持，其中所述的Ms等位基因选自a)可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的Ms等位基因，和b)具有相同的表型特性的其变体(即雄性不育)。当在包含Ms基因(即与Rf等位基因存在与否无关)的雄性能育和雄性不育植物中都存在与Ms等位基因标记(如上定义的特性II.)的连锁时，仅在雄性不育表型(即在Rf等位基因不存在的情况下)中可观察到芽败育和白色条纹或白色斑点花瓣的表型特性(分别是特性I.和III.)。因此，该观察结果能容易地区分雄性不育和雄性能育植物。应当理解，尽管在保藏的种子中Ms等位基因与Ms等位基因标记(如上定义的特性II.)和/或芽败育和/或白色条纹或白色斑点花瓣的表型特性(分别是如上定义的特性I.和III.)连锁，但是在育种计划过程中，可能存在这样一种情况，在该情况下所述连锁可能丢失或被有意或无意破坏。破坏所述连锁的可能性取决于标记与Ms等位基因的距离。本领域技术人员熟知如何破坏标记和所连锁的基因之间的连锁。然而，还是有可能通过额外的标记分析、表型分析或杂交实验来证实在这样的具有保藏的种子中的Ms等位基因的改性品系中Ms等位基因的一致性。对于白色条纹或白色斑点花瓣的表型(特性III.)，迄今为止尚不清楚其是否直接由Ms等位基因或与之紧密连锁的基因所致。存在某些该表型无法观察到或不能清楚表达的品系。然而，还知道这样的表型可为其他表型所遮蔽，例如在花瓣中具有高水平类胡萝卜素表达的表型。迄今为止，没有发现雄性不育表型和芽败育表型(特性I.)的分离。结果，很可能该表型或是与Ms等位基因紧密连锁或就由之所引起。当涉及Ms或ms等位基因，使用术语“变体”时，指优选不影响Ms等位基因的功能性但可影响其序列的遗传变异。在原系(例如Takagi原系)繁殖过程中，可能会偶然发现存在于Ms等位基因的基因序列中但不影响其功能的某些序列多态性或体细胞突变。这样的突变可位于基因的功能非相关区域例如内含子中。优选地，与可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子的Ms等位基因或可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子的ms等位基因相比，Ms等位基因和/或ms等位基因变体的基因同一性大于90%，优选大于95%，更优选大于98%。或者，变体优选在严格条件(优选中等严格条件，更优选高严格条件)下仍与可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子的Ms等位基因杂交。由于Ms等位基因是一种ms等位基因的功能失常的拷贝(其可能是一种在欧洲油菜发育中与花粉或花药有关的功能基因)无法被排除(事实上有可能)，因此关于Ms等位基因，术语变体还包括ms等位基因(或如上定义的其变体)的其他功能失常型，只要那些变体能通过在保藏编号NCIMB41481下保藏的保持系保持不育性即可。这样的变体通过例如不同的突变、缺失、截短等可不同于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子的Ms等位基因。当涉及Ms或ms等位基因，使用术语“变体”时，还指在与上述Ms或ms等位基因相同的区中定位的Ms或ms等位基因的变体，即该变体也被定位在欧洲油菜染色体N7上，优选处于标记序列NR1116(例如SEQIDNO:21)和NR2525(例如SEQIDNO:22)之间，更优选分别与NRl116具有2.ScM的距离以及与NR2525具有6.OcM的距离，还更优选处于SNP标记SR0002A和SR20003B之间，最优选分别与SR0002A具有大约2.8cM的距离以及与SR0003B具有3.3cM的距离。该类型的变体还优选在严格条件(优选中等严格条件，更优选高严格条件)下与可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子的Ms等位基因杂交。优选地，Ms或ms等位基因的变体显示与对以上Ms等位基因所描述的具有相同的恢复特性的条件性雄性不育表型。1.2rf等位基因及其表型术语“保持系等位基因”、“功能失常的恢复系等位基因”或“rf等位基因”指不存在功能性恢复系等位基因(rf等位基因)，以及更具体地说，可获得自在保藏编号NCIMB41480和/或41481下保藏的欧洲油菜种子的rf等位基因及其变体。该rf等位基因优选与如下表型特性连锁并以如下表型特性为特征a)不能恢复Ms等位基因赋予的雄性不育表型的能育性，和b)能保持Ms等位基因赋予的雄性不育表型。应当理解尽管保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因或rf)可获得自在保藏编号NCIMB41480和/或41481下保藏的欧洲油菜种子，但可存在其他可获得所述rf等位基因的来源。在本发明的一个优选的实施方案中，在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子或在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子用于获得保持系等位基因(rf等位基因)。在本发明的一个进一步优选的实施方案中，保持系等位基因(rf等位基因)还可获得自NorddeutschePflanzenzuchtHans-GeorgLembkeKG(NPZ)在德国基于他们的MSL系统生产的种子。这样的种子的实例包括但不限于品系Joker、Pronto、Panther、Artus,Baldur>Elan>Marcant>Mende1>Talent>Taurus>Tenno>Titan>Trabant、Zeppelin、Visby、Horus和Siesta的种子。其他可获得保持系等位基因(rf等位基因)的种子的实例包括但不限于如Alkido、Mika、Fangio、Elektra和Libretto的种子。此外，保持系等位基因(rf等位基因)还可获得自Syngenta(或其附属公司之一)生产的种子，例如，获得自品系NKPetrol、NKKaribik、NKSpeecUNKOctans、NKKick、NKTechnik、NKPicolo、NKCaravel的种子。保持系等位基因(rf等位基因)与雄性不育保持表型连锁，其以纯合子存在使得由Ms所致的雄性不育表型得以表达。所述雄性不育保持表型可通过至少一种功能性显性Rf等位基而你装。所述Rf等位基因可获得自任何基于非Takagi的种质。除来源于Takagi种质的种质之外，尚不知道不包含至少一个功能性Rf等位基因拷贝的品系。结果，实际上发现在本发明之日可获得的所有油菜籽品系都是恢复系。在本发明的另一个优选的实施方案中，rf等位基因、Rf等位基因和/或雄性不育保持表型进一步的特征在于定位于欧洲油菜染色体N19上，优选在标记序列NR2219(例如SEQIDNO23)和NR3454(例如SEQIDNO:26)之间，更优选与NR2219具有10.2cM以及与NR3454具有26.5cM的距离，最优选在标记序列NR3454(例如SEQIDNO26)禾口PUT-161a-Brassica_napus-59218(例如SEQIDNO31)之间，更优选与NR3454具有26.5cM以及与PUT-161a-Brassicanapus-59218具有4.IcM的距离。当在本文中使用时，术语“标记序列NR2219”指如SEQIDNO23所示序列及其变体，该变体i)与SEQIDNO23所示序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在严格条件下与SEQIDNO23所示序列杂交，或iii)包含SEQIDNO23所示序列的至少25个连续的核苷酸。当在本文中使用时，术语“标记序列NR3454”指如SEQIDNO26所示序列及其变体，该变体i)与SEQIDNO26所示序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在严格条件下与SEQIDNO26所示序列杂交，或iii)包含SEQIDNO26所示序列的至少25个连续的核苷酸。当在本文中使用时，术语“标记序列PUT-161a_Brassicanapus-59218”指如SEQIDNO31所示序列及其变体，该变体i)与SEQIDNO31所示序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在严格条件下与SEQIDNO31所示序列杂交，或iii)包含SEQIDNO31所示序列的至少25个连续的核苷酸。因此，保持系等位基因(rf等位基因)以纯合子与雄性不育保持表型连锁，该保持系等位基因a)不能恢复包含至少一个Ms等位基因的植物的能育性，b)能保持包含至少一个Ms等位基因的植物的不育性，其中所述rf等位基因选自a)可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子的rf等位基因，和b)与恢复和保持Ms等位基因赋予的雄性不育有关的具有相同的表型特性的其变体。在本发明的另一个优选的实施方案中，条件性雄性不育保持表型和/或rf等位基因与一种或多种标记连锁和/或与之相关，所述标记选自由SSR标记组成的组(“rf等位基因标记组”)，该SSR标记由具有240.8(+/-0.4)bp的表观分子量的PCR片段组成，该PCR片段来自使用具有如SEQIDNOs19和20所示序列的引物的PCR反应。因此，在一个优选的实施方案中，对以纯合子与雄性不育保持表型连锁的保持系等位基因(rf等位基因)，具有基因型MsMsrfrf或msmsrfrf的欧洲油菜植物是纯合的，该保持系等位基因-不能恢复包含至少一个Ms等位基因的植物的能育性，-能保持包含至少一个Ms等位基因的植物的不育性，-与一种或多种选自rf等位基因标记组(如上定义的)的标记连锁，其中所述rf等位基因选自a)可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子的rf等位基因，和b)具有相同的表型特性的其变体。在本发明的上下文中，具有基因型msmsrfrf的欧洲油菜植物称为“保持系”或“保持系植物”。当涉及rf或Rf等位基因使用时，术语“变体”指优选不影响rf等位基因功能性但可影响其序列的遗传变异。在原系(例如Takagi原系)繁殖过程中，可能会偶然发现存在于rf等位基因的基因序列中但不影响其功能的某些序列多态性或体细胞突变。这样的突变可位于基因的功能非相关区域例如内含子中。优选地，与可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子的rf等位基因或可获得自任何恢复系的Rf等位基因相比，rf等位基因和/或Rf等位基因变体的基因同一性大于90%，优选大于95%，更优选大于98%。或者，变体优选在严格条件(优选中等严格条件，更优选高严格条件)下仍与可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子的rf等位基因杂交。由于rf等位基因是一种Rf等位基因(其可代表一种涉及欧洲油菜中花粉或花药发育的功能基因)的功能失常型无法被排除(事实上其可能)，因此关于rf等位基因，术语变体还包括Rf等位基因(或如上定义的其变体)的其他功能失常型，只要那些变体能保持在保藏编号NCIMB41480下保藏的雄性不育Ms系的不育性即可。这样的变异可不同于可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的种子的rf等位基因，例如通过不同的突变、缺失、截短等。已如上所述，当涉及rf或Rf等位基因使用时，术语“变体”还指在与上述rf或Rf等位基因相同的区中定位的rf或Rf等位基因的变体，即该变体还定位于欧洲油菜染色体N19上，优选处于标记序列NR2219(例如SEQIDNO23)和NR3454(例如SEQIDNO26)之间，更优选与NR2219具有10.2cM的距离以及与NR3454具有26.5cM的距离，最优选处于标记序列NR3454(例如SEQIDNO26)和PUT-161a-Brassica_napus_59218(例如SEQIDNO:31)之间，更优选与NR3454具有26.5cM的距离以及与PUT-161a-Brassica_napus_59218具有4.IcM的距离。该类型的变体还优选在严格条件(优选中等严格条件，更优选高严格条件)下与可获得自保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的种子的rf等位基因杂交。优选地，该rf或Rf等位基因的变体显示与对以上rf或Rf等位基因所描述的相同的表型特性。1.3优选的组合更进一步地，在一个特别优选的实施方案中，本发明涉及一种生产或繁殖具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系(适合作为雄性不育预基础雌性系用于生产欧洲油菜杂种种子)的种子的方法，所述方法包括步骤a)提供具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物，其基因型可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子，其中所述条件性雄性不育欧洲油菜植物是i.对于与雄性不育表型连锁的雄性不育基因(Ms等位基因)是纯合的，所述雄性不育表型可通过与任何包含至少一种显性功能性Rf等位基因(恢复系基因)的植物杂交而得以恢复能育性，以及其可通过与来源于在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子的植物(保持系)杂交而得以保持，和其中所述Ms等位基因选自I)可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的Ms等位基因，和II)具有基本上相同的表型特性(即赋予核条件性雄性不育表型)的其变体，和其中所述Ms等位基因优选是在在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子中与一种或多种选自如下的特性连锁和/或与之相关的Ms等位基因I.在具有Ms等位基因赋予的雄性不育表型的植物中的芽败育表型，II.在包含至少一个拷贝的Ms等位基因的雄性能育和雄性不育植物中，存在一种或多种选自MS基因标记组(如上定义的)的标记，III.在具有Ms等位基因赋予的雄性不育表型的植物中的白色条纹或白色斑点花瓣表型，或其变体，其赋予核条件性雄性不育表型(通过保持系(如上定义的)可保持的，但通过任何包含Rf等位基因的植物可恢复能育性的；并因此具有基本相同的表型特性)，ii.对于保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因)是纯合的，其中以纯合子存在的所述保持系等位基因(rf等位基因)与雄性不育保持表型连锁，该雄性哺育保持表型无法恢复包含至少一种Ms等位基因的植物的能育性，以及能保持包含至少一种Ms等位基因的植物的不育性，和其中所述rf等位基因选自I)可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子的rf等位基因，和II)具有相同的表型特性的其变体，以及其中所述rf等位基因优选为处于在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子中的rf等位基因，该等位基因与一种或多种选自rf等位基因标记组(如上定义的)的标记连锁和/或与之相关，或所述rf等位基因的变体，其具有基本上相同的表型特性(即保持Ms基因赋予的核条件性雄性不育表型)，iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度(优选暴露于低于25°C的温度，更优选暴露于低于20°C的温度，但至少在容许正常生长的温度例如至少12°C，优选至少14°C，更优选至少16°C下)之时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度(优选35°C-43°C，更优选37°C-40°C，最优选在约39°C；优选暴露如本文中所规定的优选的热处理时间以及随后在如本文所规定的环境温度下生长)时，恢复优势雄性能育表型，b)在开花之前和/或开花期间将所述条件性雄性不育欧洲油菜植物暴露于约35-430C的温度(优选约36°C-约42°C，更优选约37°C-约41°C，还更优选约38°C-约400C，最优选约39°C)至少4小时(优选至少8或12小时，更优选至少24或36小时，还更优选至少48或96小时，最优选至少112小时)，和c)将步骤b)中获得的热处理的条件性雄性不育欧洲油菜植物暴露于低于33°C的温度(优选低于30°C，更优选低于28°C，还更优选14°C-25°C，最优选18°C-20°C)，直至雄性能育花发育，和d)使具有在步骤(C)中获得的所述雄性能育花的欧洲油菜植物自花传粉，让种子发育，并收获所述具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系的种子。对于Ms等位基因是纯合的欧洲油菜植物代表了本发明的贡献。因此，本发明的另一个实施方案涉及具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物，该基因型可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子，其中所述条件性雄性不育欧洲油菜雌株是i.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的雄性不育基因(Ms等位基因)或其具有相同的表型特性(即它们赋予核条件性雄性不育表型(其是通过保持系(如上定义的)可保持的，但通过任何包含Rf等位基因的植物可恢复能育性))的变体是纯合的，其中所述雄性不育基因(Ms等位基因)或其变体与雄性不育表型连锁，通过与任何包含至少一种功能性Rf等位基因(恢复系等位基因)的植物杂交，其能恢复能育性，和通过与来源于在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子(保持系)的植物杂交其能被保持，以及其中所述Ms等位基因优选与选自如下的一种或多种特性连锁和/或与之相关I.在具有Ms等位基因赋予的雄性不育表型的植物中的芽败育表型，II.在包含至少一个拷贝的Ms等位基因的雄性能育和雄性不育植物中，一种或多种选自MS基因标记组(如上定义的)的标记，和III.在具有Ms等位基因赋予的雄性不育表型的植物中的白色条纹或白色斑点花瓣表型，ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因)或其具有相同表型特性(即它们保持Ms基因赋予的核条件性雄性不育表型)的变体是纯合的，其中以纯合子存在的所述保持系等位基因(rf等位基因)或其变体与不能恢复包含至少一个Ms等位基因的植物能育性以及其能保持包含至少一个Ms等位基因的植物的不育性的雄性不育保持表型连锁，iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度时，恢复优势雄性能育表型。在本发明的一个优选的实施方案中，具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物，该基因型可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子，进一步具有如下特征I.当在开花之前和/或开花期间(参见上述iii.)暴露于优选低于25°C的温度，更优选暴露于低于20°C的温度，但至少在容许正常生长的温度例如至少12°C，优选至少14°C，更优选至少16°C下之时，优势雄性不育，和II.当在开花之前和/或开花期间暴露于优选35°C_43°C的温度，更优选暴露于370C-40°C的温度，最优选暴露于约39°C的温度时，恢复优势雄性能育表型；优选暴露如本文中所规定的优选的热处理时间以及随后在如本文所规定的环境温度下生长。在本发明的上下文中，如上所述具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物被称为“预基础雌性系(预基础雌株)”。1.4热处理步骤使用热诱发的能育性诱导进行预基础雄性不育雌性系(基因型MsMsrfrf)的繁殖。在一个优选的实施方案中，优势雄性不育和优势雄性能育表型之间的“转换”优选指不是所有的植物和/或不是单株植物中所有的花都具有相同的表型(不育性/能育性)。因此，能育和不育的花可在一定程度上并行出现在同一植物上。然而，本发明的条件性雄性不育植物(预基础或基础雌株)优选在低于30°C的温度下于单一植物上具有大于80%(优选大于90%，更优选大于95%，还更优选大于98%)的雄性不育花(最优选基本上在所有的植物上都不出现任何孕性花(fertileflowers))，但在高于35°C的温度下产生大于20%(优选大于40%，更优选大于60%，最优选大于80%)的雄性能育花。雄性能育花与雄性不育花的比率优选在热暴露结束后1-2周进行测定。如果应用约1周的热处理，则该比率优选在热暴露开始后约2-3周进行测定。包含Ms等位基因(以及没有Rf等位基因)植物的雄性不育表型可通过暴露于高温恢复为雄性能育表型，所述高温优选约35-43°C(更优选37°C-40°C，最优选约39°C)。在开花之前和开花期间处于低于28°C，优选低于25°C，更优选20°C的温度下仅存在雄性不育表型。然而，在开花之前和/或开花期间处于高于35°C的温度下孕性花生长。发现在大约39°C的温度下存在花发育和热暴露之间的最佳比率，即由升高温度所诱发的热胁迫导致的损害易为植物所应付，而反之雄性能育花的发育则足以被诱导来获得上述在同一植物上雄性能育花与雄性不育花的比率。热暴露可在带有温度(允许误差士1°C)和湿度控制的人工气候室(RedekerKaeltetechnik；D-3279ILage,Germany)中进行。在一个进一步优选的实施方案中，在温室隔室中进行热暴露，在其中可应用类似的温度动态变化。还优选在生长期期间在塑料大棚田地中进行热处理，通过天然加热或使用任何类型的加热器进行额外加热施加高温。甚至有可能将雄性不育植物保持在田地中，如果在开花期期间生长的田地提供了足够的温度水平的话。关于高温处理，术语“暴露”指用高温进行处理，优选另外处于最佳生长条件下如处于高湿度(>80%)、施肥和作物保护处理等之下。暴露优选进行至少4小时，优选至少8或12小时，更优选至少24或36小时，还更优选至少48或96小时，最优选至少112小时(“热处理时间”)。在正常(环境)温度(优选在约19°C-22°C)下，热处理时间可以是连续或断续的一段时间。优选地，应用的热处理时间为1-14天，更优选3-10天，还更优选4-9天或5-8天，最优选约7天。如上所述，热处理并不一定指在整个时间段内处于高温下的处理。在本发明的一个优选的实施方案中，针对预基础雌性系受精的热处理的实施具有白天温度/夜间温度改变，以避免过度的温度胁迫。这减少了对植物的热胁迫。优选在白天增加供热(如上定义的)，而在夜晚温度减少供热至低于33°C，优选低于30°C，更优选低于28°C，还更优选降低至16_25°C，最优选19_22°C的温度。优选地，通过将热处理时间调节至日夜时间段，使之均勻分布于上述周期中。日/夜比为约0.51-约31，优选约11-约2.51，更优选约1.21-约2.01，最优选约1.81(优选具有39°C(白天温度)-21.5°C(夜间温度)的日夜间温度)。在本发明的一个优选的实施方案中，再热处理/生长室中通过人造光调节日夜时间段。优选使用至少lOOOOlux的人造日光。取决于暴露的温度和时间，植物可包含能育和不育的花。然而，如果在开花过程结束之前停止热暴露，则除雄性能育花之外可发育出额外的雄性不育花。然而，优选调节暴露的温度和时间以产生具有多于30%(优选多于50%)雄性能育花的预基础植物。在热暴露和孕性花发育已被诱导后，可将植物转移到“常规”条件(通常低于28°C的温度)_例如在温室中)下并继续这些花的发育(尽管不会诱导更多的孕性花，但已诱导的芽会开放为孕性花)。优选地，将热处理的欧洲油菜植物转移到具有低于33°C，优选低于30°C，更优选低于28°C，还更优选16-25°C，最优选18°C-20°C的温度的环境中)，直至雄性能育花发育。通常，植物在这些条件下保持约5-14天(优选5-7天)，直至雄性能育花发育。如此获得的雄性能育Ms预基础植物是“自花受精的”，即它们能自花传粉。这样的自花传粉能在具有或不具有人工干预的情况下发生。然而，重要的是不发生与其他芸苔属植物的异花传粉。因此，植物或孕性花要与不同的传粉者保持隔离。可通过例如刷子介导的花粉转移或其他本领域已知方法增加自交。在成功的传粉(自交)后，热处理的“已受精”植物可用作雄性系(传粉者)与作为雄性不育雌性系的相同基因型的无热处理的品系相组合。可选地，热处理的品系可用作单系，即代表雌性系和雄性系。两种操作在此在此都被理解为基于相同的遗传背景的自花传粉。在传粉后，让已被传粉的植物发育为成熟的种子，如本领域技术人员所知的进行收获并贮存用于进一步的应用(例如用于生产基础雌性种子)。应当指出_以及也是本发明的一个优选的实施方案-无需将所有预基础雄性不育雌性系(基因型MsMsrfrf)植物暴露于热处理用于获得预基础雄性不育雌性系的花粉。为了获得足够量的花粉，只要预基础雄性不育雌性系植物的一部分或只要这些植物的某些或一些用升高的温度进行处理。使用在经处理的植物中获得的花粉给其他预基础雄性不育雌性系植物传粉。为了获得足够数量的花粉，必须暴露于热处理中的植物的数目是本领域技术人员已知的。2.基础种子生产大体上，预基础雌性系应适合作为(雄性不育)雌性系直接用于杂种种子的生产。然而，尽管可在相当大规模的程度(在开花期之前或开花期过程中提供了足够的热量用于雄性能育性诱导的气候室中或天然条件下进行生长)上进行通过热处理步骤的繁殖，但是其在商业上吸引力较小，原因在于加热室的专用设备所产生的额外费用，或在天然条件下低的和/或不可控的种子产量。因此，本发明的一项创造性贡献在于提供无需热处理繁殖雄性不育表型、品系和种子的步骤。其可通过将预基础(雄性不育)雌性系与不包含Ms等位基但仅包含保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；保持系；基因型msmsrfrf)的保持系杂交而实现。这样的杂交产生了仍然是雄性不育但仅包含一个拷贝的Ms等位基因的品系。该雄性不育预基础雌性系和作为雄性系的保持系的杂交可用于在商业规模上提供雄性不育基础种子(即雄性不育基础雌性系的种子)。因此，本发明的另一个优选的实施方案涉及一种生产具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系种子的方法，该品系适合作为(雄性不育)基础雌性系用于生产欧洲油菜杂种种子，所述方法包括步骤a)提供作为雌株的具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育(预基础)欧洲油菜植物，该基因型可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子，其中所述具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜雌株是i.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的雄性不育基因(Ms等位基因)是纯合的，和ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因)是纯合的，和iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度时，恢复优势雄性能育表型，和b)提供作为雄株的具有基因型msmsrfrf的雄性能育保持系欧洲油菜植物，该基因型可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子，其中所述具有基因型msmsrfrf的欧洲油菜植物是i.对于可获得自在NCIMB保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子的能育等位基因(功能失常的雄性不育基因；ms等位基因)是纯合的，和ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因)是纯合的，和iii.优势雄性能育，和c)使步骤b)的雄株传粉给步骤a)的雌株，让种子发育(优选直至成熟)，并收获种子，其中收获的种子特征在于它们是具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系(即基础雌株)的种子。对于预基础雌性系，Ms等位基因和rf等位基因定义如上，具有相同的参数选择。能育等位基因(功能失常的雄性不育基因；ms等位基因)定义如下。在本发明的一个优选的实施方案中，在生产上述具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系种子的方法的步骤(a)中提供的条件性雄性不育欧洲油菜植物进一步特征如下a.当在开花之前和/或开花期间暴露于优选低于25°C的温度，更优选暴露于低于20°C的温度，但至少在容许正常生长的温度例如至少12°C，优选至少14°C，更优选至少16°C下之时(上述步骤a的子步骤iii.))，优势雄性不育，和b.当在开花之前和/或开花期间暴露于优选35°C_43°C的温度，更优选暴露于370C-40°C的温度，最优选暴露于约39°C的温度时，恢复优势雄性能育表型；最优选暴露如本文中所规定的优选的热处理时间以及随后在如本文所规定的环境温度下生长。在本发明的一个优选的实施方案中，在生产或繁殖上述具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系的种子的方法的步骤(b)中提供的条件性雄性不育欧洲油菜植物任选地具有不超过25μmol/克(优选1-22μmol/克，更优选5_20μmol/克，最优选8-17μmol/克)9%水分含量的风干种子的总芥子油苷含量。在生产适合作为(雄性不育)基础雌性系用于生产欧洲油菜杂种种子的具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系的种子的方法的一个优选的实施方案中，用作雌株并在步骤a)中提供的具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育(预基础)欧洲油菜植物生长自已使用上述生产或繁殖具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系的种子的方法生产的种子，即通过a)提供具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物，该基因型存在于在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子中，其中所述条件性雄性不育欧洲油菜植物是i.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的雄性不育基因(Ms等位基因)是纯合的，和ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480或4148下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因)是纯合的，和iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度时，恢复优势雄性能育表型，和b)将所述条件性雄性不育欧洲油菜植物暴露于高于35°C的温度至少4小时，和c)将步骤(b)中获得的热处理的条件性雄性不育欧洲油菜植物暴露于低于33°C的温度，直至雄性能育花发育，和d)使具有在步骤(C)中获得的所述雄性能育花的欧洲油菜植物自花传粉，让种子发育，并收获种子，其中所收获的种子特征在于它们是具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系的种子。优选地，在基础雌性种子生产中使用的雄性系和(雄性不育)雌性系都基于相同的遗传背景。更优选地，通过杂交系统相应基因的基因渗入欧洲油菜近交系中，然后通过针对所述品系进行至少1次(优选2、3或4次)回交，从而提供所述雄性系和所述(雄性不育)雌性系。例如，基因渗入包括选自如下的一种或多种方法分离和转化、常规育种、谱系选择、杂交、自花传粉、单倍性、双单倍体技术、胚拯救、单粒传法、标记辅助育种、诱发突变以及回交。在本发明的一个优选的实施方案中，可通过以交替带状培育相应的(雄性不育)雌株和雄株实现基础雌性种子的生产，其中传粉者(雄性能育系)在传粉后抛弃。对于足够的雌性系产量优选良好的传粉条件。母本和传粉者的比率应优选21、31或41，优选31。可通过使用具有2/3设置的播种机来设定该比率。如果在田地中进行生产，则每公顷3-5个蜂箱是有益的。如果旨在产生具有一致的Msmsrfrf基因型的预基础种子，优选地，如果在田地中进行，则在温度不增加超过33°C，优选30°C的条件和/或场所中进行基础雌性种子的生产。对于在早春种植的冬油菜，大多数场所通常不是关键的。对于春油菜(例如双低油菜)，具有高于环境温度条件的场所(瑞典，加拿大)是优选的。然而，在该阶段于更高的温度下生产并不是不利的。当温度超过35°C时，其仅仅会导致预基础雌性系能自花传粉并且所生产的基础种子包含一定水平的预基础种子。然而，预基础种子和基础种子都同样适合于生长成用于生产杂种种子的雌株。因此，对于预基础雌性系生产，温度控制仅仅是任选的，并且较阻止预基础雌性系受精与高种子产量(其在更高的温度下减产)更相关。为避免用来自除保持系之外的其他植物的花粉异花传粉，用于生产基础种子的田地要与其他欧洲油菜植物，优选其他芸苔属植物保持隔离。隔离距离为至少500m，优选Ikm,更优选2km,最优选5km。业已发现与在这些生产步骤中使用的雄性能育植物相比，(雄性不育)雌株延迟开花。为了能最佳传粉，因此优选通过选自如下的一种或多种方法同步化雄株和(雄性不育)雌株的开花i.修剪雄性能育植物(即开花部分)以延迟开花直至(雄性不育)雌株开花(优选所述植在开花后立刻使用电动或机械切割器修剪大约30cm)，ii.使用生长和/或成熟延迟化学药品(例如Folicur，一种具有生长调节特性的杀真菌剂)处理开花植物，和iii.延迟雄性能育亲本播种至多3周(即与(雄性不育)雌株相比，(雄性能育)雄株播种延迟至多3周)。优选在低于33°C，优选低于28°C，更优选低于25°C的温度下进行基础雌性种子和/或杂种种子的生产。从预基础到基础种子的繁殖效果通常为大约1500-11000。由该方法产生的基础(雄性不育)雌株代表了本发明的另一个发明目的。因此，本发明的另一个实施方案涉及具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物，其中所述(条件性雄性不育)欧洲油菜雌株是i.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是杂合的，和ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因)是纯合的，和iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度时，恢复优势雄性能育表型。在本发明的一个优选的实施方案中，如上所述的具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物进一步具有如下特征I.当在开花之前和/或开花期间(参见上述iii.)暴露于优选低于25°C的温度，更优选暴露于低于20°C的温度，但至少在容许正常生长的温度例如至少12°C，优选至少14°C，更优选至少16°C下之时，优势雄性不育，和II.当在开花之前和/或开花期间暴露于优选35°C_43°C的温度，更优选暴露于37°C-40°C的温度，最优选暴露于约39°C的温度时，恢复优势雄性能育表型；优选暴露如本文中所规定的优选的热处理时间以及随后在如本文所定义的环境温度下生长(参见上述iv.)0在本发明的一个优选的实施方案中，如上所述的具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物的进一步的特征在于具有不超过25umol/克9%水分含量的风干种子，优选1-22ymol/克9%水分含量的风干种子，更优选5-20ymol/克9%水分含量的风干种子，最优选8-17umol/克9%水分含量的风干种子的总芥子油苷含量。对于预基础雌性系，Ms等位基因和rf等位基因如上定义具有相同的优先选择。能育等位基因(功能失常的雄性不育基因；ms等位基因)定义如下。优选地，具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物(即基础雌株)是i.对于与雄性不育表型连锁的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是杂合的，其可通过与任何包含至少一个显性功能性Rf等位基因(恢复系)的植物杂交恢复能育性，并且可通过与来源于在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子(保持系)的植物杂交得以保持，其中所述Ms等位基因选自I)可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的Ms等位基因，和II)具有基本上相同的表型特性的其变体(即赋予核条件性雄性不育表型(通过如上定义的保持系可保持的，但通过任何包含Rf等位基因的植物可恢复能育性的))，以及其中所述Ms等位基因优选与选自如下的一种或多种特性连锁和/或与之相关I.在具有Ms等位基因赋予的雄性不育表型的植物中的芽败育表型，和II.在包含至少一个拷贝的Ms等位基因的雄性能育和雄性不育植物中，一种或多种选自MS基因标记组(如上定义的)的标记，和III.具有Ms等位基因赋予的雄性不育表型的植物中的白色条纹或白色斑点花瓣表型，或赋予了核条件性雄性不育表型的其变体(通过保持系(如上定义的)可保持的，但通过包含Rf等位基因的任何植物可恢复能育性；因此具有基本上相同的表型特性)，ii.对于保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因)是纯合的，其中所述保持系等位基因(rf等位基因)以纯合子与雄性不育保持表型连锁，其不能恢复包含至少一个Ms等位基因的植物的能育性，以及能保持包含至少一个Ms等位基因的植物的不育性，其中所述rf等位基因选自I)可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子的rf等位基因，和II)具有相同的表型特性的其变体(即保持Ms等位基因赋予的核条件性雄性不育表型)，以及其中所述rf等位基因优选是在在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子中与一种或多种选自rf等位基因标记组(如上定义的)的标记连锁和/或与之相关的rf等位基因，或所述rf等位基因的变体，其具有基本上相同的表型特性(即保持Ms基因赋予的核条件性雄性不育表型)，iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度(优选低于25°C的温度，更优选低于20°C，但至少在容许正常生长的温度例如至少12°C，优选至少14°C，更优选至少16°C下)之时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度(优选35°C-43°C，更优选37°C-40°C，最优选在约39°C；优选暴露如本文中所规定的优选的热处理时间以及随后在如本文所规定的环境温度下生长)时，恢复优势雄性能育表型，和v.任选地具有不超过25μmol/克9%水分含量的风干种子(优选1_22μmol/克，更优选5-20μmol/克，最优选8-17μmol/克)的总芥子油苷含量。另一方面，对于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是杂合的植物对于能育等位基因(功能失常的雄性不育等位基因；ms等位基因)是杂合的。详细定义提供于下。在本发明的一个优选的实施方案中，在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子被用于生产具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物，即根据本发明的基础雌性系的方法中。在本发明的一个进一步优选的实施方案中，NorddeutschePflanzenzuchtHans-GeorgLembkeKG(NPZ)在德国基于他们的MSL系统生产的种子也可被用于生产具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物的方法中。这样的种子的实例包括但不P艮于品系Joker、Pronto、Panther>Artus>Baldur>Elan>Marcant、Mende1、Talent、Taurus>Tenno>Titan、Trabant>Zeppelin、Visby>Horus禾口Siesta的禾中子。其他还可用于生产具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物的方法中的种子的实例包括但不限于如Alkido、Mika、Fangio>Elektra禾口Libretto的种子。此夕卜，Syngenta(或其附属公司之一)所生产的种子，例如来自品系NKPetrol.NKKaribik,NKSpeecUNKOctans,NKKick、NKTechnik,NKPicolo、NKCaravel的种子也可用于生产具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物的方法中。优选地，在用于杂种种子的生产系统中，具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物适合作为基础雌性种子。在一个优选的实施方案中，所述基础雌株可获得自通过本发明用于生产基础雌性种子的方法所生产的种子。另一个实施方案涉及生长成所述具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物的种子，所述植物的部分，以及所述植物在杂种种子生产过程中的应用。优选地，所述基础雌株的遗传背景不是杂种，更优选其是近交的。所述植物部分优选自包含种子、小孢子、原生质体、细胞、胚珠、花粉、营养体部分、子叶、合子的组。本发明的其他优选的实施方案涉及在本发明的杂种种子生产系统中使用的植物成分预基础雌性系、保持系、基础雌性系、所得到的杂种植物和生长成所述植物的种子。基础种子(即生长成基础雌株的种子)的生产优选在通过使用条件性雄性不育预基础雌性系和雄性能育保持系的田地中进行。优选将这两个品系以带状种植(如Sauermann&Lamp,1997所描述的)。仅收获雄性不育预基础雌性系获得的种子。保持系仅用于传粉者并在开花后移除并处置。2.1保持系本发明的另一个实施方案涉及一种具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物(在本发明的上下文中，也称为“保持系”)，该基因型可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子，其中所述雄性能育欧洲油菜植物是i.对于可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子的能育等位基因(功能失常的雄性不育等位基因；ms等位基因)是纯合的，和ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因)是纯合的，和iii.优势雄性能育，和iv.任选地具有不超过25umol/克(优选1-22umol/克，更优选5-20umol/克，最优选8-17umol/克)的由所述植物产生的9%水分含量的风干种子的总芥子油苷含量。rf等位基因定义如上，具有相应的参数选择。在本发明的进一步优选的实施方案中，在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子用作获得具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物(即如上所述的保持系)或用作提供能育等位基因(如上所述在2.2下的ms等位基因)和/或保持系等位基因(如上所述在1.2下的rf等位基因)，以供本发明任一方法使用。本发明的一个进一步优选的方面涉及在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子用于保持种子的条件性雄性不育的应用，所述种子是在根据本发明的生产具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物(即本发明的预基础雌性系)的种子的方法(即在第1节中描述的方法)中生严的。2.2ms等位基因、其相关的表型和标记术语“ms等位基因”、“能育等位基因”或“功能失常的雄性不育等位基因”指不存在功能性雄性不育等位基因(Ms等位基因或Ms基因)，以及更具体地说，可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子的ms等位基因及所述等位基因的变体赋予了基本上相同的表型(即雄性能育表型)。该ms等位基因优选与如下表型特性连锁和/或以如下表型特性为特征a)不能恢复由Ms等位基因所引起的雄性不育表型的能育性，和b)在不存在Ms等位基因的情况下不能赋予雄性不育表型。当这些特性只有是ms等位基因才有时，存在其他与ms等位基因连锁或与之相关的特性。在本发明的一个优选的实施方案中，ms等位基因与一种或多种选自由如下组成的组(“ms等位基因标记组”)的标记(“ms等位基因标记”)连锁I.选自由如下组成的NR1116标记区中多态性(突变)组的标记a)具有位于相应于SEQIDNO3中第85位的位置处的G的单核苷酸多态性标记，b)具有位于相应于SEQIDNO3中第87位的位置处的A的单核苷酸多态性标记，c)具有位于相应于SEQIDNO3中第139位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，d)具有位于相应于SEQIDNO3中第214位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，e)具有位于相应于SEQIDNO3中第218位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，f)具有位于相应于SEQIDNO3中第277位的位置处的A的单核苷酸多态性标记，50g)具有位于相应于SEQIDNO3中第286位的位置处的G的单核苷酸多态性标记，h)具有位于相应于SEQIDNO3中第312位的位置处的A的单核苷酸多态性标记，i)具有位于相应于SEQIDNO3中第319位的位置处的C的单核苷酸多态性标记，j)具有位于相应于SEQIDNO3中第359位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，k)在相应于SEQIDNO:3中第221位的位置处的5‘-TTGGTGAACAATC-3‘插入突变，1)在相应于SEQIDNO3中第328-330位的位置处的5'-GAA-3'缺失突变，II.选自由如下组成的NR2525标记区中多态性(突变)组的标记a)具有位于相应于SEQIDNO6中第60位的位置处的C的单核苷酸多态性标记，b)具有位于相应于SEQIDNO6中第92位的位置处的C的单核苷酸多态性标记，c)具有位于相应于SEQIDNO6中第105位的位置处的C的单核苷酸多态性标记，d)具有位于相应于SEQIDNO6中第158位的位置处的A的单核苷酸多态性标记，e)具有位于相应于SEQIDNO6中第431位的位置处的C的单核苷酸多态性标记，f)具有位于相应于SEQIDNO6中第82位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，g)在位于相应于SEQIDNO:6中的第17_25位的位置处的插入突变5'-TGAGCAAAA-3‘，III.选自由如下组成的SNP标记组的标记a)在使用包含SEQIDNO:11所示的核苷酸序列(能育等位基因特异性探针ΗΝΚ6700)的SNP-探针(SNP-探针2)的SNP检测中，产生阳性信号，和优选在使用包含SEQIDNO:12所示的核苷酸序列(不育等位基因特异性探针HiNK6701)的SNP-探针(SNP-探针1)的SNP检测(优选基于TaqMan的SNP检测)中，产生阴性信号，和b)在使用包含SEQIDNO18所示的核苷酸序列(能育等位基因特异性探针ΗΝΚ6776)的SNP探针(SNP-探针4)的SNP检测中，产生阳性信号，和优选在使用包含SEQIDNO:17所示的核苷酸序列(不育等位基因特异性探针HiNK6775)的SNP探针(SNP-探针3)的SNP检测(优选基于TaqMan的SNP检测)中，产生阴性信号，IV.选自由如下组成的SSR标记组的标记a)具有选自由94(+/-0·9)bp、110.4(+/-0·5)bp、112.3(+/-0·4)bp和116.3(+/"O.4)bp组成的表观分子量组的表观分子量的PCR片段，该片段产生自使用具有SEQIDNOs:1和2所示序列的引物的PCR反应，b)具有183.8(+/-0.4)bp的表观分子量的PCR片段或无能育等位基因相关的PCR片段，该片段产生自使用具有SEQIDNOs:4和5所示序列的引物的PCR反应，其中一种或多种标记(Ms等位基因标记)还包括选自如下序列的分离的核苷酸序列，所述序列I.与在上述I.-IV.中定义的标记序列具有至少80%的序列同一性，或II.在严格条件下与在上述I.-IV.中定义的标记序列杂交，或III.包含在上述I.-IV.中定义的标记序列的至少25个连续的核苷酸。优选地，存在至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个组1.的突变，更优选地存在至少位于相应于SEQIDNO3中第214位(T/C)和218位(T/G)的位置处的突变。优选地，存在至少1、2、3、4、5、6或7个组II.中的突变，更优选地，存在至少位于相应于SEQIDNO6中第158位的位置处的突变。应当指出与Ms等位基因不同，与ms等位基因相关的标记变化更多。结果，如上所示可能存在一条或多条具有不同表观分子量的条带。原因非常简单Ms等位基因由一种未经历频繁的后发遗传修饰的单一种质来源产生的，而ms等位基因则是一种存在于不同的遗传背景中的欧洲油菜“天然等位基因”，并且其的遗传环境受诸多繁殖活动的影响。因此，相关标记的明显更高的变异性是有可能的。业已如上所述，标记可用于本发明的多个其他方面中。然而，本发明的这些方面并不限于使用本申请中所披露的标记。需要强调的是这些发明还可使用没有在本文中明确披露的标记或仍待鉴定的标记。此外，应当理解尽管能育等位基因(功能失常的雄性不育等位基因；ms等位基因或ms)可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子，但可存在可获得所述ms等位基因的其他来源。事实上，ms等位基因的存在是有规则的而非出现例外，并且应当实际上存在于所有的欧洲油菜种质中(除来源于Takagi种质的种质以外)。在本发明的一个优选的实施方案中，在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子用于获得能育等位基因(如上定义的ms等位基因)。以纯合子存在的能育等位基因(功能失常的雄性不育等位基因；ms等位基因)与雄性能育表型连锁。在杂合型(即与Ms等位基因结合)中，其容许由Ms所引起的雄性不育表型在纯合的rf等位基因(rfrf；或换言之，在不存在Rf等位基因的情况下)存在下表现。所述ms等位基因存在于任何基于非-Takagi的种质中。除来源于Takagi种质的种质之外，尚不知道不包含至少一个功能性ms等位基因拷贝的品系。因此，以纯合子存在的能育等位基因(功能失常的雄性不育等位基因；ms等位基因)与雄性能育表型连锁，其中所述ms等位基因优选自a)存在于在保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子中的ms等位基因，和b)具有相同的表型特性的其变体。在本发明的一个优选的实施方案中，所述具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物在本发明的基础雌性种子生产方法中适合作为保持系。另一个实施方案涉及生长成所述具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物的种子，所述植物的部分，以及所述植物在杂种种子生产方法中的应用。优选地，所述植物的遗传背景不是杂种，更优选地，其是自交的。另一个实施方案涉及生长成所述具有基因型MsmsRfrf或msmsRfrf的雄性能育欧洲油菜杂种植物的种子，所述植物的部分，以及所述植物用于栽培用于油料生产的欧洲油菜籽粒的应用。3.杂种种子生产本发明的另一个实施方案涉及一种生产欧洲油菜的雄性能育杂种种子的方法，所述方法包括步骤a)提供作为雌株的具有基因型Msmsrfrf(基础雌性系)或MsMsrfrf(预基础雌性系)的条件性雄性不育欧洲油菜植物，其中所述条件性雄性不育欧洲油菜雌株是i.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是杂合的(基础雌性系)或纯合的(预基础雌性系)，和ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子的功能失常的恢复系等位基因(rf等位基因)是纯合的，和iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度时，恢复优势雄性能育表型，和b)提供作为雄株的具有基因型RfRf的雄性能育欧洲油菜植物(如下定义的“恢复系”)，其中所述雄性能育欧洲油菜植物是i.对于功能性恢复系等位基因(Rf等位基因)是纯合的，该等位基因可获得自任何被商业化作为种子用于栽培的欧洲油菜能育近交系，和ii.优势雄性能育，和c)使步骤b)的雄株传粉给步骤a)的条件性雄性不育雌株，让种子发育，并收获所述雄性能育杂种种子。在一个优选的实施方案中，在上述生产欧洲油菜的雄性能育杂种种子的方法的步骤a)中提供作为雌株的条件性雄性不育欧洲油菜植物具有基因型Msmsrfrf(即为上文中所描述的基础雌性系)。结果，步骤a)中提供的雌株优选对于雄性不育等位基因(Ms等位基因)是杂合的。在一个进一步优选的实施方案中，在上述生产欧洲油菜的雄性能育杂种种子的方法的步骤a)中作为雌株提供的条件性雄性不育欧洲油菜植物进一步具有如下特征I.当在开花之前和/或开花期间(参见上述iii.在步骤a)下)暴露于优选低于25°C的温度，更优选暴露于低于20°C的温度，但至少在容许正常生长的温度例如至少12°C，优选至少14°C，更优选至少16°C下之时，优势雄性不育，和II.当在开花之前和/或开花期间暴露于优选35°C_43°C的温度，更优选暴露于37°C-40°C的温度，最优选暴露于约39°C的温度时，恢复优势雄性能育表型；优选暴露如本文中所规定的优选的热处理时间以及随后在如本文所规定的环境温度下生长(参见上述iv.在步骤a)下)。在一个进一步的实施方案中，在上述生产欧洲油菜的雄性能育杂种种子的方法的步骤a)中作为雌株提供的条件性雄性不育欧洲油菜植物进一步具有如下特征具有不超过25iimol/克，优选1-22umol/克，更优选5-20umol/克，最优选8-17umol/克9%水分含量的风干种子的总芥子油苷含量。在生产欧洲油菜的雄性能育杂种种子的方法的一个优选的实施方案中，在步骤a)中作为雌株提供的具有基因型Msmsrfrf(基础雌性系)或MsMsrfrf(预基础雌性系)的条件性雄性不育欧洲油菜植物由已使用上述方法之一生产的种子生长成，所述方法例如对于预基础雌性系，生产或繁殖具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系种子的方法，所述方法包括步骤a)提供具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物，其基因型存在于在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子中，其中所述条件性雄性不育欧洲油菜植物是i.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的雄性不育基因(Ms等位基因)是纯合的，和ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480或4148下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因)是纯合的，和iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度时，恢复优势雄性能育表型，和b)将所述条件性雄性不育欧洲油菜植物暴露于高于35°C的温度至少4小时，和c)将步骤(b)中获得的热处理的条件性雄性不育欧洲油菜植物暴露于低于33°C的温度，直至雄性能育花发育，和d)使具有在步骤(C)中获得的所述雄性能育花的欧洲油菜植物自花传粉，让种子发育，并收获种子，其中所收获的种子特征在于它们是具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系的种子，或对于基础雌性系，使用该上述生产具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系的种子的方法的优选的实施方案，其中用作雌株并在该方法的步骤a)中提供的具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育(预基础)欧洲油菜植物由已用上述生产或繁殖具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系的种子的方法生产的种子生长成，即通过a)提供具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物，该基因型存在于在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子中，其中所述条件性雄性不育欧洲油菜植物是i.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的雄性不育基因(Ms等位基因)是纯合的，和ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480或4148下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因)是纯合的，和iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度时，恢复优势雄性能育表型，和b)将所述条件性雄性不育欧洲油菜植物暴露于高于35°C的温度至少4小时，和c)将步骤(b)中获得的热处理的条件性雄性不育欧洲油菜植物暴露于低于33°C的温度，直至雄性能育花发育，和d)使具有在步骤(C)中获得的所述雄性能育花的欧洲油菜植物自花传粉，让种子发育，并收获种子，其中所收获的种子特征在于它们是具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜品系的种子。术语“恢复系”指任何对于Rf基因是纯合的芸苔属植物(优选任何欧洲油菜植物)(即具有基因型RfRf)。关于Ms基因，这样的植物可具有任何ms和Ms等位基因的组合，尽管优选具有msms基因型，原因在于其是“天然”能育等位基因表型。结果，恢复系可具有选自msmsRfRf、MsmsRfRf和MsMsRfRf的基因型。优选地，恢复系对于能育等位基因(功能失常的雄性不育等位基因；ms等位基因)是纯合的，所述等位基因优选可获得自任何被商业化作为种子用于栽培的欧洲油菜能育近交系，或可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子。在另一个实施方案中，上述生产欧洲油菜的雄性能育杂种种子的方法的步骤b)中提供的具有基因型RfRf的雄性能育欧洲油菜植物进一步特征在于具有不超过25umol/克，优选1-22umol/克，更优选5-20umol/克，最优选8-17umol/克9%水分含量的风干种子的总芥子油苷含量。在最优选的实施方案中，在收获前让步骤c)中发育的种子发育直至成熟。在本发明的一个较少优选的实施方案中，恢复系是具有基因型Rfrf的雄性能育欧洲油菜雄株，其中雄性能育欧洲油菜植物是i.对于功能性恢复系等位基因(rf等位基因)是杂合的，所述等位基因优选可获得自任何被商业化作为种子用于栽培的欧洲油菜能育近交系，和ii.优势雄性能育，和iii.任选地具有不超过25umol/克(优选1-22umol/克，更优选5-20umol/克，最优选8-17umol/克)9%水分含量的风干种子的总芥子油苷含量。在本发明的一个优选的实施方案中，将在保藏编号NCIMB41480和/或NCIMB41481下分别保藏的种子用于生产如本文中所描述的欧洲油菜的能育杂种种子的方法中。优选地，在该杂种种子生产中使用的雄性能育系(保持系)和雌性雄性不育系(基础雌性系或预基础雌性系，优选基础雌性系)是基于遗传多样性背景的。可通过使用例如Knaak(1996)中所描述的分子标记测定遗传距离。本发明的另一个优选的实施方案涉及具有基因型MsmsRfrf或msmsRfrf的雄性能育欧洲油菜杂种植物，其中所述雄性能育欧洲油菜杂种植物是i.对于功能性恢复系等位基因(rf等位基因)或保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因)是杂合的，和ii.优势雄性能育，和iii.任选地产生具有不超过25iimol/克(优选1_22umol/克，更优选5-20umol/克，最优选8-17umol/克)的由所述植物产生的9%水分含量的风干种子的总芥子油苷含量的籽粒(F2种子；优选当通过不同的芸苔品种异花传粉时，是基本上不存在的)。在一个优选的实施方案中，上述具有基因型MsmsRfrf或msmsRfrf的雄性能育欧洲油菜杂种植物优选产生具有不超过25umol/克，优选1-22umol/克，更优选5_20umol/克，最优选8-17ymol/克的由所述植物产生的9%水分含量的风干种子的总芥子油苷含量的籽粒(F2种子；优选当通过不同的芸苔品种异花传粉时，是基本上不存在的)。本发明的另一个优选的实施方案涉及本发明的所述杂种芸苔属植物的部分，优选所述部分选自包含种子、小孢子、原生质体、细胞、胚珠、花粉、营养体部分、子叶、合子的组。在一个优选的实施方案中，根据本发明的杂种种子的生产可通过以交替带状栽培55相应的雌性(雄性不育)和雄性能育植物而得以实现，其中传粉者(雄性能育系)在传粉后抛弃。对于足够的雌性系产量优选良好的传粉条件。母本(雄性不育雌性系)和传粉者的比率应优选31，以及如果在田地中进行生产，则每公顷3-5个蜂箱是有益的。以交替带状进行的种子生产优选得到高的杂交性水平。尽管如此，还是有可能(尽管在某些国家中不被接受)通过将(母本)雌性系与传粉者(雄性系)混合来生产杂种种子。混合生产的优点在于降低生产成本。已发现在本发明的过程中，与在这些生产步骤中使用的雄性不育雌株相比，雄性能育植物更早开花。为了能最佳传粉，为此优选修剪雄性能育植物以延迟开花，直至雄性不育雌株开花。优选地，基础雌性种子和/或杂种种子的生产在低于33°C，优选低于28°C，更优选低于25°C的温度下进行。在本发明的一个进一步优选的实施方案中，无需利用热介导的雄性不育植物自交来实施欧洲油菜的雄性能育杂种种子的生产。在该实施方案中，如本领域所知的自交具有基因型MsmsRfrf的雄性能育植物。可通过将RHS雌株与正常的油菜进行杂交并随后通过使用标记(例如本发明的标记)鉴定所需基因的存在，进行自交，从而获得具有基因型MSmsRFrf的植物。还可通过在每一世代中回交和标记分析，以保持只有那些对于Ms和Rf基因都是杂合的植物，从而获得这些植物。甚至有可能从热介导的雄性不育植物自交中选择具有基因型MsMsrfrf的植物(如上所述用于常规的RHS开发)，并将它们与正常的msmsRfRf油菜籽品系品种杂交。这两种品系应当是近等基因以获得纯系用于进一步的开发。在分离后代中，预计有雄性不育植物(具有基因型Msmsrfrf和MsMsrfrf)和雄性能育植物(具有基因型MsMsRfRf、MsmsRfRf、msmsRfRf、MsMsRfrf,MsmsRfrf,msmsRfrf或msmsrfrf)。通过利用使用如在上文中所述的紧密连锁的分子标记的选择获得具有基因型MsMSRfrf和msmsrfrf的雄性能育植物。如本领域所知的，自交这些植物。将雄性不育MsMsRfrf植物的后代播种在田地中作为雌性系，与雄性能育msmsrfrf植物(在此称为保持系)的后代呈交替带状。在雌性条带中植物会在具有基因型MsMsRfRf或MsMsRfrf的雄性能育表型和具有基因型MsMsrfrf的雄性不育表型中分离，分离比率为3能育的1不育的。业已如上所述，雄性不育植物具有花序的第一个芽败育和白色条纹或斑点花瓣为特征的表型。此外，雄性不育植物开始开花明显迟于近等基因雄性能育植物。这些表型差异使得能在雄性不育植物开始开花前除去雄性能育(早期开花)植物。在雄性不育植物开始开花前完全除去雄性能育植物毫无疑问能避免均来源于雄性能育MsmsRfrf植物自交的杂种生产中雄性能育植物(如保持系)和雄性不育植物之间的异花传粉。修剪雄性能育植物是不足够的，因为仅仅延迟了雄性能育植物开花，且仍有可能存在之前提及的不合需要的异花传粉。一旦在开花前除去雄性能育植物，则保留在田地里的雄性不育植物通过雄性能育恢复系植物(优选地如上所述以交替带状存在)传粉用于&杂种种子生产。种子仅获得自在雌性条带中生长的雄性不育MSMSrfrf植物，并且会具有基因型Msmsrfrf；从这些种子生长成的植物会是雄性不育的。该完全雄性不育种群是大量生产杂种种子的先决条件。然而，这种类型的基础种子生产需要小规模田地，以便能尽可能地粗选雄性能育植物。取决于用于传粉的传粉者，在上述方法中具有基因型MsmsRfrf的植物通常有可能产生(1)基础雌性系的种子(使用具有基因型msmsrfrf的保持系作为传粉者)或^F1杂种种子(使用具有基因型msmsRfRf的恢复系作为传粉者)。然而，此后用于生产&杂种种子的方法却并不有效，原因在于需要大量的Fi杂种种子。临近没有雄性不育雌性纯系，具有基因型MsmsRfrf的植物就不得不通过抛弃75%的全部子代(雄性能育植物)来进行选择，从而导致种子生产植物的大量损失。因此，优选产生用于杂种种子生产的雄性不育雌性纯系。在生产杂种植物中，优选与恢复系杂交的基础雌性系以及自身具有足够低的芥子油苷水平的恢复系以确保？工杂种植物的籽粒(或生长成的种子)具有处于控制水平内的芥子油苷水平。收获自h杂种的种子的芥子油苷水平约略为母本和父本的芥子油苷水平的平均水平(或略低于平均水平(例如10-20%))。杂种籽粒(F2)的芥子油苷水平反映了&杂种的基因型。例如，如果目标是获得具有低于25ymol/克(优选低于20i!mOl/克)的芥子油苷水平的杂种籽粒(F2)，则雄性能育亲本(恢复系)具有15ymol/克的芥子油苷水平，母本优选具有低于25umol/克的芥子油苷水平。3.1恢复系和Rf等位基因术语“(功能性)恢复系等位基因”或“Rf等位基因”或“功能失常的保持系等位基因”指具有显性的等位基因，其能(即Rf等位基因与选自如下的一种或多种特性连锁和/或与之相关)a)在h植物中恢复能育性，所述&植物获得自与由在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子生长成的欧洲油菜植物杂交，和b)在&植物中恢复能育性，所述&植物获得自与由获得自作为雄性不育雌株的获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子的欧洲油菜植物与作为雄性能育植物的获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子的欧洲油菜植物的杂交的种子生长成的欧洲油菜植物的杂交。Rf等位基因可获得自任何基于非-Takagi的种质。除来源于Takagi种质的种质之外，尚不知道不包含至少一个功能性Rf等位基因拷贝的欧洲油菜能育近交系。结果，发现实际上所有在本发明之日可获得的欧洲油菜能育近交系都是恢复系(即包含Rf等位基因)。因此，恢复系等位基因(Rf等位基因)选自可获得自任何被商业化作为种子用于栽培的欧洲油菜能育近交系(“恢复系”)(不包括其的任何杂种系或亲本系)的Rf等位基因，优选可获得自在本发明优先权之日市售的品系，更优选自Bounty、Cyclone,Delta、Ebony>Garrison、Impact、Legacy>Legend、Profit、Quantum、Campala、Pollen、Grizzly、Expert、Aviso、NKJetix、Oase、Smart、NKFair、NKNemax、Ladoga、Cooper、Billy、Lorenz、Aurum、Lilian、Californium、Lisek、Orkan、Winner>Licorne、Castille、Fortis的品系和在它们的谱系中具有前述品种的欧洲油菜能育近交系。合适的恢复系还包括在2006年12月0ECD品种列表上的那些恢复系(确认合格的0ECD品种列表-2006/2007；2006年12月；http://www.oecd.org/dataoecd/1/44/33999447.pdf；http://www.oecd.org/document/14/0,2340,en_2649_33909_2485070_l_l_l_l,00.html)，优选被商业化作为种子用于栽培的非杂交系(用于油料生产)，更优选在所述0ECD列表上那些没有标记为“d”(只要它们代表杂交亲本系，就是近交系)或“b”(杂种)的品种。本发明的一个优选的实施方案涉及任何一种被商业化作为种子用于栽培的欧洲油菜能育近交植物用于获得供生产在此披露的欧洲油菜的能育杂种种子使用的功能性恢复系等位基因(rf等位基因)的应用。育性恢复表型和/或Rf等位基因与一种或多种SSR标记(“Rf等位基因标记”)连锁和/或与之相关，所述SSR标记不存在于具有240.8(+/-0.4)bp的表观分子量的PCR片段中，所述PCR片段来自使用SEQIDNOs:19和20所示引物的PCR反应。在上下文中，应当指出与rf等位基因不同，与Rf等位基因相关的标记有可能变化更多。结果，可能存在更多具有不同表观分子量的条带。原因非常简单rf等位基因由一种未经历频繁的后发遗传修饰的单一种质来源产生的，而Rf等位基因则是一种存在于不同的遗传背景中的欧洲油菜“天然等位基因”，并且其的遗传环境受诸多繁殖活动的影响。因此，相关标记的更高的变异性是有可能的。在本发明的一个优选的实施方案中，在一个整合的生产过程中实施繁殖预基础种子、生产基础雌性种子和生产杂种种子的方法。因此，优选地，本发明的另一个实施方案涉及一种生产生长成产种子(或籽粒(即非栽培目的的种子)；任选地，但优选地，具有不超过25iimol/克(优选l_22iimol/克，更优选5-20iimol/克，最优选8-17iimol/克)的9%水分含量的风干种子的总芥子油苷含量)欧洲油菜植物的欧洲油菜杂种种子的方法；其中所述方法包括繁殖预基础雌性种子(如上定义的)的方法、生产基础雌性种子(如上定义的)的方法，以及生产杂种种子(如上定义的)的方法。本发明的一个进一步优选的实施方案涉及任何一种被商业化作为种子用于栽培携带至少一种“(功能性)恢复系等位基因”、“Rf等位基因”或“功能失常的保持系等位基因”(“恢复系”)(即如上所述的“恢复系植物”或“恢复系”)的欧洲油菜能育近交系在由本发明的条件性雄性不育欧洲油菜植物(参见如上)杂交获得的&植物中恢复雄性能育性的作用。4.用于Ms、ms、rf、Rf等位基因的标记以及标记技术的应用分子标记可用于显现核酸序列的差异。例如由于在用限制性内切酶消化后的DNA-DNA杂交技术(RFLP)和/或由于使用聚合酶链反应的技术(如STS、微卫星、AFLP)，因此使得该显现得以可能。如下所述在此鉴定的标记可用于本发明的各个方面中。本发明的方面不限于使用在此鉴定的标记。强调指出这样的方面也可使用没有在此明确披露的标记或甚至待鉴定的标记。分子标记即SNP和SSR被用于杂种育种计划中，以及被用于开发在该育种计划中使用的近交系，以指引等位基因(例如MS、mS、Rf、rf等位基因)的遗传或评估所选择的育种品系的遗传距离。通过将所选择的品系标记辅助回交入本发明的杂交系统中(或反之亦然)，该回交步骤可从5代回交减少到3代回交。有几种分子标记可用于基于标记的选择，包括限制性片段长度多态性(RFLP)、多态DNA随机扩增(RAPD)、扩增片段长度多态性(AFLP)、单序列重复(SSR)和单核苷酸多态性SNPs。RFLP涉及使用限制性内切酶在特定的短限制酶切位点处切割染色体DNA，多态性产生自位点或在该限制酶切位点处突变之间的重复或缺失。RAPD利用了低严格性聚合酶链反应(PCR)扩增，使用单条随机序列引物来产生未知DNA片段的链特异性阵列。该方法仅需要很好的DNA样品，却能分析大量的多态性基因座。AFLP需要在使用PCR和引物中选择性的核苷酸来扩增特异性片段前，用限制性内切酶消化细胞DNA。一种特别优选的方法利58用了基于广泛分布于真核生物基因组中的DNA微卫星(短重复)序列的SSR标记分析，该DNA微卫星(短重复)序列被选择性扩增以检测简单序列重复中的变异。对于SSR分析仅需要很少的DNA样品。还优选的是SNP标记，其使用了能有效地挑选点突变的PCR延伸检测。该方法对每个样品只需要很少的DNA。一种或两种上述方法可用于典型的基于标记的选择育种计划中。对于标记辅助选择，用于实现植物基因组跨多态性区域的核苷酸片段扩增的最优选的方法利用了聚合酶链反应(“PCR”)(Mullis等，1986)，使用能与在其双链形式中限定了多态性的近侧序列杂交的包括反向引物和正向引物的引物对。备选的方法可被用于扩增这样的片段，例如“连接酶链反应”(“LCR”)(Barany，1991)，其使用两对寡核苷酸探针来指数式扩增特异性靶标。挑选每对寡核苷酸的序列以容许该寡核苷酸对与靶标的同一条链的邻接序列杂交。这种杂交产生了用于模板依赖的连接酶的底物。因此，如同PCR—样，所得到的产物在随后的循环中用作模板并获得了所需序列的指数式扩增。可用具有多态位点的同一条链的近侧和远侧序列的寡核苷酸来执行LCR。在一个实施方案中，任何一条寡核苷酸都被设计以包括多态性的实际多态位点。在这样一种实施方案中，如果靶分子包含或缺少与寡核苷酸上存在的多态位点互补的特异性核苷酸，则可选择反应条件使得该寡核苷酸只能连接在一起。可选地，可选择该寡核苷酸使得它们不包括该多态位点(参见WO90/01069)。另一种被利用的可替代的方法是“寡核苷酸连接检测”(“OLA”)(Landegren等，1988))。该OLA实验方案使用了两条被设计成能杂交靶单链的邻接序列的寡核苷酸。0LA，像LCR—样，特别适用于检测点突变。然而，不像LCR，OLA产生了“线性”而非指数式的靶序列扩增。Nickerson等描述了一种结合了PCR和OLA特性的核酸检测方法(Nickerson等，1990)。在该方法中，PCR用于实现靶DNA的指数式扩增，然后使用OLA进行检测。除需要多个和分离的处理步骤之外，与上述组合相关的一个问题是它们继承了与PCR和OLA相关的所有问题。基于在具有合成的“二寡核苷酸”的序列的核酸存在下连接两条(或更多条)寡核苷酸，从而扩增该二寡核苷酸的方案也是已知的(Wu等，1989)，并可容易地适应于本发明的用途。在一个实施方案中，分子标记是通过PCR扩增的DNA片段，如SSR标记。在一个实施方案中，扩增的DNA片段的存在与否是性状自身或该性状特定等位基因存在与否的指示。在一个实施方案中，扩增的DNA片段的长度差异是性状特定等位基因存在的指示，并因此能区分不同的性状等位基因。在本发明的一个具体实施方案中，简单序列重复(SSR)标记用于在亲本植物和/或其祖先中，以及在由所述亲本植物杂交产生的后代植物中，鉴定发明相关的等位基因。简单序列重复是短重复的DNA序列，存在于所有真核生物的基因组中，并由几个到超过几百个1-4个核苷酸基序的重复组成。由于在植物中存在于基因组中特定位置处的SSRs数目通常不同，因此可分析SSRs以确定特定等位基因的存在与否。在一个方面，本发明涉及选自SEQIDNOs:1、2、4、5、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19和20所示的序列组的寡核苷酸引物。这些引物优选用作由正向引物和反向引物组成的PCR寡核苷酸引物对或用作SNP突变检测探针。优选地，用于扩增SSR标记的引物对由SEQIDNOs1和2(引物对1)、SEQIDNOs4和5(引物对2)或SEQIDNOs19禾口20(引物对3)所示的引物组成。优选地，用于扩增SNP标记片段(即包含SNP突变的片段)的引物对由SEQIDNOs:8和10(引物对4)或由SEQIDNOs:15和16(引物对5)所示的引物组成。在此提供的其他引物对也可能适合作为标记序列(例如对于RFLP标记)，例如SEQIDNOs:13和14所示的引物(引物对6)，或SEQIDNOs:7和8所示的引物(引物对7)。适合于检测单核苷酸多态性(SNP)的探针可包含作为核酸部分的选自SEQIDNOs:11、12、17和19所示序列的序列。业已测序了包含SSRs和SNPs的区域。在那些与相应的等位基因(例如MS等位基因、ms等位基因、Rf等位基因、rf等位基因)和相关表型连锁的序列之间存在着相当大的突变差异。其结果是，那些区域存在着本发明的创造性特征，因为它们能鉴定更多的标记和/或开发用于邻近基因组测序的引物，所述邻近基因组可包含相应的MS等位基因、ms等位基因、Rf等位基因、rf等位基因。为了序列比较，对不育和能育的植物比对变化的区域以创建共有序列(分别为SEQIDN0:3和6)。该序列可优选用于检测迄今未被分析欧洲油菜种质的相应序列。作为结果，本发明的另一个实施方案涉及一种分离的核苷酸序列，选自a)序列，其i)与选自SEQIDNOs3和6所示序列的共有序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在严格条件下与选自SEQIDNOs3和6所示序列的共有序列杂交，或iii)包含选自SEQIDNOs:3和6所示序列的共有序列的至少25个连续的核苷酸，和b)序列，其i)与选自SEQIDNOs:21、22和23所示序列的序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在严格条件下与选自SEQIDNOs:21、22和23所示序列的序列杂交，或iii)包含选自SEQIDNOs-.21,22和23所示序列的序列的至少25个连续的核苷酸。在本发明中披露的序列在标记辅助育种和选择中是特别有用的。然而，这些序列可用于不限于使用如在本申请中所描述的标记的本发明的多个其他方面中。需要强调的是本发明还可利用没有在此明确披露的序列或仍待鉴定的序列。关于标记辅助选择，本发明的另一个实施方案涉及一种使用本发明的核酸序列(或与所述核苷酸序列享有90%-99%,优选95%-98%序列同一性的其片段)用于将选自Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因和/或rf等位基因等位基因基因渗入缺少所述等位基因集合的芸苔种质中的方法。本发明的一个进一步优选的实施方案涉及根据本发明的核酸序列在基于标记的选择中的应用，所述基于标记的选择用于将选自Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因和/或Rf等位基因的等位基因基因渗入至如上所述缺少所述等位基因集合的芸苔种质中。赋予雄性不育或保持雄性不育的本发明的植物可例如具有基因型MsMsrfrf、Msmsrfrf或msmsrfrf，而本发明的杂种植物具有MsmsRfrf或msmsRfrf的基因型，其中Ms、ms、rf、Rf具有上述含义。因此，本发明还提供了通过在所述植物中检测如在此定义的Ms和/或rf等位基因的存在，用于选择显示赋予或保持雄性不育表型的物种欧洲油菜植物的方法。在本发明的一种优选的用于选择这样的植物的方法中，所述方法包括i)从要被检测的植物或植物种群获得植物材料并从所述材料提取DNA；ii)通过使用一种或多种本发明的核酸序列，分析步骤i)中获得的DNA样品以确定Ms等位基因、ms等位基因、rf等位基因和/或Rf等位基因的存在/不存在。更优选地，上述方法的步骤ii)包括在所述基因组DNA的样品中检测至少一种与Ms等位基因、ms等位基因、rf等位基因或Rf等位基因连锁的分子标记，更优选地，检测至少来自所述组的两种分子标记，其中一种标记检测Ms等位基因或ms等位基因，另一种标记检测rf等位基因或Rf等位基因。该分析可以多种方法来进行，并可包括例如下列步骤a)使用PCR寡核苷酸引物对鉴定至少一个标记基因座，所述引物对由具有如SEQIDNOs:1、2、4、5、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20任一所示的核苷酸序列的正向引物和反向引物组成，和b)通过测定步骤a)中获得的PCR扩增产物的分子量鉴定标记等位基因，和c)使用标记分析数据鉴定具有所需组成的植物。DNA样品可获得自合适的植物材料，例如通过使用已知技术提取DNA的叶组织。在一个优选的实施方案中，检测分子标记的步骤(步骤b)可包括使用一组双向引物，该双向引物用于SSR法中来产生随后被证实是适合用于Ms、ms、Rf或rf等位基因的标记的扩增产物。这样的一组引物在此称为规定SSR标记的引物或标记特异性引物。“双向”意味着在核酸的扩增反应中引物的一个方向起正向引物作用以及另一个方向起反向引物作用。该检测分子标记的步骤(步骤b)还可包括针对所述基因组DNA执行核酸扩增反应来检测一种或多种Ms、ms、Rf或rf等位基因。这可通过使用一组标记特异性引物进行PCR反应而得以合适地进行。在一个优选的实施方案中，所述步骤b)包括使用至少一组规定用于所述等位基因的SSR标记的引物，或一种在严格条件下与用于所述等位基因的SSR标记的核酸序列特异性杂交的引物。然后，使用本领域技术人员公知的聚合酶链反应(PCR)法，将侧接包含与在此披露的本发明的等位基因连锁的SSRs或SNPs区域的引物用于扩增DNA样品。基本上，该PCR扩增法涉及使用包含两条侧接要被扩增的DNA区段的短寡核苷酸引物序列的引物对。重复的DNA加热和变性循环之后是在低温下引物退火至它们的互补序列上，以及使用DNA聚合酶的退火引物的延伸。弓丨物与DNA靶序列的相反链杂交。杂交指互补DNA链的退火，其中互补指核苷酸序列如此以致一条链中的核苷酸能键合相反链上的核苷酸以形成双链结构。引物如此定向使得通过聚合酶的DNA合成跨引物之间的核苷酸序列双向进行。该方法有效地在一次循环中倍增了DNA区段的数量。由于PCR产物与引物互补并能与之结合，因此每轮成功的循环倍增了在之前循环中合成的DNA的量。该方法的结果是特异性靶片段的指数式累积，其系数为大约2n，其中n为循环数。通过PCR扩增，制备了成百万拷贝的侧接引物的DNA片段。对于SSRs，不同等位基因中侧接引物之间的重复序列数量的差异反映在扩增的DNA片段的长度变化上。这些变化可通过在凝胶上电泳分离扩增的DNA片段而检测到。通过分析凝胶，能确定植物是否以纯合或杂合形式包含所需的等位基因，或者所需的等位基因是否不存在于植物基因组中。使用提取自非常年轻的植物的叶组织的DNA样品，标记分析可在植物发育初期进61行。该标记分析容许鉴定在繁殖周期早期具有所需遗传组成的植物，并可在传粉前抛弃不含有所需的、本发明相关的等位基因的植物，从而减少繁殖种群的大小。此外，通过使用分子标记，可在携带两拷贝的所需的、本发明相关的等位基因的纯合植物和仅携带一个拷贝的杂合植物之间进行区分。可通过标准的凝胶电泳技术或通过使用自动化DNA测序仪执行检测具有预计长度或预计核酸序列的扩增的DNA片段的步骤。该方法无需在此描述，因为它们是本领域技术人员所熟知的。本发明的标记还可用于将本发明的等位基因定位至欧洲油菜基因组中的某一位置处。一般而言，可通过邻接的显示与表型性状统计相关标记串(string)指示某一性状基因(例如Ms或rf等位基因)的位置。一旦发现标记位于该串之外(即具有低于某一阈值的L0D-计分，表明该标记距离之远以致标记和基因(或等位基因)之间的区域中的重组如此频繁地发生，使得标记的存在不以统计显著方式与表型的存在相关)，就设定了该基因(或等位基因)的边界。因此，还有可能通过其他位于该指定区域中的标记来指示基因(或等位基因)的位置。应当指出(如上所述)，当本发明所述的等位基因(例如Ms等位基因或rf等位基因)被基因渗入另一遗传背景种(即基因渗入另一植物物种或另一欧洲油菜品种的基因组中)时，某些标记可不再发现于子代中，尽管在其中存在性状，表明在最初的亲本系中这样的标记位于代表了特定性状的基因组区之外，以及该新的遗传背景具有不同的基因组结构。在其不存在时指示在子代中成功地导入了遗传元件的这样的标记称为“反式标记”，并可同样适用于本发明中的MAS法。本发明的Ms或rf等位基因的核苷酸序列可例如通过如下得以解析测定与所述等位基因(例如在下文中披露的核酸序列)相关的一种或多种标记的核苷酸序列并针对所述标记序列设计内部引物，然后引物用于进一步测定在所述标记序列之外的基因序列。在这样的用于检测受怀疑的涉及或保持雄性不育的植物(或杂种植物)中Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因或rf等位基因存在的方法的实施方案中，该方法还可包括步骤提供能在严格杂交条件下与标记的核酸序列杂交的寡核苷酸或多核苷酸，所述标记与所述Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因或rf等位基因连锁，将所述寡核苷酸或多核苷酸与所述受怀疑的植物的消化的基因组核酸接触，以及确定所述寡核苷酸或多核苷酸与所述消化的基因组核酸的特异性杂交的存在。优选地，尽管还可以使用原位杂交法，但是对获得自所述受怀疑的植物的核酸样品执行所述方法。可选地，以及在一个更优选的实施方案中，一旦Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因或rf等位基因的核苷酸序列被测序，技术人员就可设计能在严格杂交条件下与所述Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因或rf等位基因的核苷酸序列杂交的特异性杂交探针或寡核苷酸，并可将这样的杂交探针用于本发明的在怀疑的欧洲油菜植物中检测Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因或rf等位基因存在的方法中。在一个进一步的实施方案中，本发明涉及一种检测包含Ms等位基因(用于核雄性不育)的芸苔属植物的方法，包括步骤a)从芸苔属植物获得样品；和b)在所述样品中检测能通过使用至少一种如上定义的本发明的Ms等位基因标记得以鉴定的DNA片段。在一个进一步优选的实施方案中，本发明涉及一种检测包含恢复系等位基因(rf)的芸苔属植物的方法，包括步骤a)从芸苔属植物获得样品；和b)在所述样品中检测能通过使用至少一种如上定义的本发明的Rf等位基因标记得以鉴定的DNA片段。在一个进一步优选的实施方案中，本发明涉及一种检测包含ms等位基因(与核雄性能育性相关)的芸苔属植物的方法，包括步骤a)从芸苔属植物获得样品；和b)在所述样品中检测能通过使用至少一种如上定义的本发明的ms等位基因标记得以鉴定的DNA片段。在一个进一步优选的实施方案中，本发明涉及一种检测包含保持系等位基因(rf)的芸苔属植物的方法，包括步骤a)从芸苔属植物获得样品；和b)在所述样品中检测能通过使用至少一种如上定义的本发明的rf等位基因标记得以鉴定的DNA片段。在另一个优选的实施方案中，根据本发明检测芸苔属植物(具有Ms、Rf、ms或rf等位基因)的方法进一步包括选择包含所述DNA片段的所述芸苔属植物或其部分的步骤c)。还在另一个实施方案中，根据本发明检测芸苔属植物的方法进一步包括自交包含所述DNA片段的所述芸苔属植物的步骤d)。还在另一个实施方案中，根据本发明检测芸苔属植物的方法进一步包括将所述芸苔属植物与另一种芸苔属植物杂交的步骤e)。5.本发明植物的农业和工业用途本发明的植物-特别是杂种植物_和/或从其中获得的产物可用作农业和/或工业用途(例如在食品和饲料工业中)。因此，本发明的另一个实施方案涉及基于使用本发明的杂种种子的农业方法。一个实施方案涉及一种用于栽培和/或生产欧洲油菜籽粒或种子的方法，包括步骤a)播种本发明的杂种种子或通过本发明的方法提供的杂种种子，b)由所述种子培育杂种欧洲油菜植物，和c)由所述植物收获成熟种子或籽粒。本发明的又一个优选的实施方案涉及本发明的杂种种子在这样的过程中的应用。在一定的环境下，能经济可行地再植由杂种芸苔属植物收获的种(例如如果那些种子产生高价值特种油料的话)。因此，本发明的另一个实施方案涉及一种使用欧洲油菜植物的方法，包括步骤由本发明的(或由通过生产本发明的杂种种子的方法提供的种子生长成的)芸苔属杂种植物收获种子，和种植所述种子以产生后代。优选地，所述收获的种子具有不超过25μmol/克(优选1-22μmol/克，更优选5-20μmol/克，最优选8-17μmol/克)9%水分含量的风干种子的芥子油苷含量。更优选，所述再植种子对于功能失常的恢复系等位基因(rf等位基因)是至少杂合的或对于雄性不育等位基因(Ms等位基因)是至少杂合的，即具有选自如下的表型MsmsRfRf、MsMsRfrf、MsmsRfrf、msmsRfrf■禾口Msmsrfrf。该再植方法可重复进行，并因此可包括重复种植收获的后代植物的种子的步骤。本发明的又一个优选的实施方案涉及欧洲油菜植物在方法中的应用，包括步骤由通过如在此所提供的本发明的方法提供的种子生长成的芸苔属植物收获种子，和种植所述种子以产生后代。优选地，该应用进一步包括步骤重复种植所收获的后代植物的种子的步骤。本发明的另一个实施方案涉及使用本发明的杂种种子，特别是由该种子生长成和/或由其可获得油的植物生产油的方法。因此，一个实施方案涉及一种生产油菜籽(欧洲油菜)油和粕(优选粕基本上是无油的，即具有小于10%，优选小于5%，更优选小于2%的含油量)的方法，包括步骤a)播种本发明提供的或通过本发明的方法提供的杂种种子，b)由所述种子生长成杂种欧洲油菜植物，c)由所述植物收获成熟的种子或籽粒，和d)破碎所述种子或籽粒并由粕中分离或提取油(以及优选进一步包括将油和粕分离的步骤)。生产油和粕的方法产生了两种产物(油和粕)，它们可作为方法的分离产物获得并具有不同的效用。油用于食品和饲料工业中用于不同的用途。粕用于饲料用途或生产生物气体。粕的代表性用途包括用于牲畜的饲料。所述油类代表性的用途包括凉拌、油炸、烹饪、喷涂和粘性食品应用。由于本发明的内源性蔬菜粕和油满足了大量最终应用的要求，因此处理和库存考虑得到大大简化。在固有优良的健康和营养特性的内源性产物中，这些益处中的每一个都可以直接的方式得以实现。“种子”指适合于和/或被选定用于进一步种植的由欧洲油菜植物收获的种子材料。“籽粒(Grain)”指不适合于(在商业上或在实践上)和/或未被选定用于进一步种植的由欧洲油菜植物收获的种子材料。本发明的又一个实施方案涉及本发明的杂种种子在这样的方法中的应用。另一个实施方案涉及一种生产欧洲油菜(油菜籽)油和粕的方法，包括步骤a)提供对于功能失常的恢复系等位基因(rf等位基因)是至少杂合或对于雄性不育等位基因(Ms等位基因)是至少杂合的油菜籽籽粒，和b)破碎所述种子并分离或提取油。在一个优选的实施方案中，所述油具有选自如下所述的优选组成的组的脂肪酸组成。本发明的另一个实施方案涉及欧洲油菜粕，其基本上无油并且是使用任何一种本发明的植物的含油种子生产的。本发明的另一个实施方案涉及一种通过破碎任何一种本发明的植物的含油种子提供欧洲油菜粕的方法。优选地，所述含油种子对于功能失常的恢复系等位基因(rf等位基因)是至少杂合的或对于雄性不育等位基因(Ms等位基因)是至少杂合的，即具有选自MsmsRfRf、MsMsRfrf、MsmsRfrf、msmsRfrf和Msmsrfrf的表型。本发明的又一个实施方案涉及一种通过如下经营种子生意的方法a)提供选自具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物(即预基础雌性系)、具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物(即基础雌性系)或具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物(即保持系)的本发明的种子生产植物给感兴趣生产杂种油菜籽的育种人员，和b)让所述育种人员在许可下通过将所述步骤(a)的种子生产植物与所述育种人员可获得的雄性能育欧洲油菜近交系(即所述育种人员可获得的恢复系，其优选不是基于Takagi种质的)杂交创建欧洲油菜杂种种子。在本发明的更优选的实施方案中，在上述经营种子生意的方法的步骤a)中提供给育种人员的种子生产植物是本发明的基础雌性系(例如具有基因型Msmsrfrf的欧洲油菜自交植物)。在一个进一步优选的实施方案中，本发明涉及一种在生产杂种种子的方法中使用一种或多种选自具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物(即预基础雌性系)、具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物(即基础雌性系)或具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物(即保持系)的本发明的欧洲油菜植物的方法。该杂种种子的生产优选如上所述来进行(例如在第3节中所描述的)。本发明的又一个优选的实施方案涉及一种或多种选自具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物(即预基础雌性系)、具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物(即基础雌性系)或具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物(即保持系)的本发明的欧洲油菜植物在生产杂种种子的方法中的应用。该生产杂种种子的方法优选是上述本发明的方法之一。在一个更优选的实施方案中，本发明涉及具有基因型MsMsrfrf的本发明的条件性雄性不育欧洲油菜植物(即预基础雌性系)和具有基因型msmsrfrf的本发明的雄性能育欧洲油菜植物(即保持系)在生产杂种种子的方法中的应用。此外，该生产杂种种子的方法优选是上述本发明的方法之一。在一个还进一步优选的实施方案中，本发明涉及一种在生产具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物(即基础雌性系)或其种子的方法中使用一种或多种选自具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物(即预基础雌性系)和具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物(即保持系)的本发明的欧洲油菜植物的方法。该具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物的生产优选如上所述来进行(例如在第3节中所描述的)。在一个进一步优选的实施方案中，本发明涉及一种或多种选自具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物(即预基础雌性系)和具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物(即保持系)的本发明的欧洲油菜植物在生产具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物(即基础雌性系)或其种子的方法中的应用。该杂种种子的生产优选如上所述来进行(例如在第3节中所描述的)。在一个更优选的实施方案中，本发明涉及具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物(即保持系)在生产具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物(即基础雌性系)或其种子的方法中的应用。此外，该生产具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物的方法优选是上述本发明的方法之一。在一个优选的实施方案中，用于使用本发明的欧洲油菜植物生产杂种种子的方法中的欧洲油菜植物选自由在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子生长成或来源于所述种子的品种。在又一个优选的实施方案中，本发明涉及一种在提供如上所述的欧洲油菜的能65育杂种种子的方法中使用具有基因型RfRf的雄性能育欧洲油菜植物的方法。优选地，所述在提供如上所述的欧洲油菜的能育杂种种子的方法(即生产本发明的欧洲油菜的能育杂种种子方法)中使用具有基因型RfRf的雄性能育欧洲油菜植物的方法，其中具有基因型Msmsrfrf或MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物被提供作为雌株，而具有基因型RfRf的雄性能育欧洲油菜植物则被提供作为雄株，以及让所述雄株传粉给条件性雄性不育雌株，让种子发育并作为能育杂种种子收获。关于该方法以及在该方法中使用的本发明的植物的详情参见如上。本发明另一个优选的实施方案涉及具有的基因型RfRf能育欧洲油菜植物在提供如上所述的欧洲油菜的能育杂种种子的方法中的应用。优选地，具有基因型RfRf的能育欧洲油菜植物用于提供能育杂种种子的方法中，所述方法是上述生产本发明的能育杂种种子的方法之一。在一个进一步优选的实施方案中，本发明涉及通过上述应用或在上述使用方法中获得的欧洲油菜植物、其种子或杂种种子。6.具有遗传背景和其他性状的杂交系统的组合大体上，本发明的预基础雌性系、基础雌性系、保持系和/或杂种植物可与具有任意遗传背景的欧洲油菜组合。然而，这些植物(尤其是杂种植物)优选具有选自如下的一种或多种特性黄色种皮颜色、除草剂抗性、生物胁迫抗性(例如抗例如昆虫、真菌、细菌、线虫、病毒等的病原体抗性)和非生物胁迫抗性(例如干旱、盐、热、霜冻等)。在商业上期望的额外的性状是那些会降低芸苔属作物生产成本的性状(输入性状)或会增加芸苔属作物或来自其的油类或粕的品质的性状(输出性状)。输入性状可选自除草剂抗性、抗虫性、抗病性和胁迫抗性(例如旱、冷、热和盐抗性)。输出性状可优选自具体所需的油类或脂肪酸组成。病原体抗性性状包括但不限于a)单基因Rlm7Phoma抗性(油菜茎基溃疡病菌(L印tosphaeriamaculans))；这样的性状易得自欧洲油菜品种cv.Roxet，和cv.Caiman；b)根肿病抗性(甘蓝根肿菌(Plasmodiophorabrassicae))；这样的性状易得自欧洲油菜品种cv.Tosca，禾口cv.Mendel；禾口c)TUYV病毒抗性(芜菁黄化病毒)；这样的性状易得自欧洲油菜品种cv.Caletta。本领域技术人员可利用本发明的芸苔属植物来开发生产含油种子的，对于核雄性不育的能育性预基础或基础雌性系、保持系或恢复系的芸苔属植物，其优选具有低芥子油苷含量以及任何其他期望的性状。由本发明的植物和种子产生的粕和油取决于预期用途还可具有多种特性。这样的用途可以是工业用途或作为饲料或食品的用途。作为食品目的的用途可包括用作为油炸用油，广义来讲，作为烹饪用油或作为色拉油。所有这些预期用途均与优选的脂肪酸组成相关。优选地，本发明的芸苔属植物和/或所述植物的种子和/或由所述植物获得的种子均具有双低油菜品质。6.1.油组成性状在一个优选的实施方案中，本发明的预基础系、基础系、保持系和杂种植物产生具有大于40%，优选大于42%和最优选大于44%的含油量的籽粒。芸苔油种子的食用内源性植物油包含受遗传手段控制的脂肪酸和其他性状(W091/15578；US5，387，758)。优选地，基于总脂肪酸含量，为人或动物消费所设计的芸苔油种子包括不超过2衬％的低浓度的芥子酸，其受控于与其他所列指定组分相结合的遗传手段。用于表达这样的芥子酸性状的遗传手段可来源于多种具有良好农艺学特性的市售双低油菜品禾中，例如Bounty、Cyclone、Delta、Ebony、Garrison、Impact、Legacy、Legend、Profit、Quantum、Campala、Pollen、Grizzly、Expert、Aviso、NKJetix、Oase、Smart、NKFair、NKNemax、Ladoga、Cooper、Billy、Lorenz、Aurum、Lilian、Californium、Lisek、Orkan、Winner、Licorne、Castilie、Fortis。在一个优选的实施方案中，本发明的杂种欧洲油菜植物(或用于其育种的本发明的基础、预基础或保持系)产生特有的油组成。对于芸苔中优选的特有的油组成的评述参见Scarth&Tang(2006)及其中引用的参考文献；均在此以其整体并入作为参考。传统的芸苔油种子栽培品种产生的菜籽油通常具有5%棕榈酸(C16:0)、1%硬脂酸(C18:0)、15%油酸(C18:l)、14%亚油酸(C18:2)、9%亚麻酸(C18:3)和45%芥子酸(C22:l)的脂肪酸组成(Ackman，1990)。C221是一种在营养上不合需要的脂肪酸，并且在芸苔油中为了可食用业已降至非常低的水平。低C22:l芸苔油具有在营养上合乎需要的脂肪酸组成，具有低饱和脂肪酸和高水平的C18:3-—种《-3脂肪酸(Eskin等，1996)。C22:1在工业应用上具有重要价值，并且对于这些应用，期望在传统的菜籽油中尽可能高地增加45%水平，以提高高芥子酸菜籽(HEAR)油及其衍生物的经济竞争力。除在芸苔油中常见的脂肪酸之外，植物界成员产生超过200种不常见的脂肪酸，特别是在非农学植物中(vandeLoo等，1993；Thelen&0hlrogge,2002Jaworski&Cahoon，2003)。许多这些脂肪酸具有营养益处或工业用途。然而，大多数这些植物具有有限的驯化潜力。由于含油种子生产相对低的成本和可再生的特性，因此包括芸苔含油种子在内的含油种子作物可被改性来产生新的脂肪酸，作为石油衍生的工业原料的替代来源(CahOOn，2003；Thelen&0hlrogge,2002)。常规育种有助于开发瞄准不同市场的四种主要类型的具有改变的脂肪酸组成的芸苔油(Burton等，2004；Przybylski，2005)。这些开发是在芸苔属物种中使用天然和人工诱发突变的植物育种的结果。低芥子酸在使用高C22:1的菜籽油的动物饮食研究中鉴定了潜在的人体健康影响之后，于1950年代开始了低C22:1的芸苔油的选择和开发。动物研究显示高C22:1菜籽油饮食与心肌损伤相关，表现出心脏和肾脏周围脂肪沉积以及心脏中肌肉损伤。1959年，从德国春季型欧洲油菜饲料栽培品种Liho中首次鉴定到了具有在种子油中低水平的C22:l的突变体(Stefansson等，1961)。将低C221植物与适合的栽培品种回交。在北美洲和欧洲，已有从传统油菜籽和低芥子酸品种完整转换为双低油菜品质品种的商业性生产存在。高芥子酸和超高芥子酸尽管在营养上不合需要，但是高C22:l油类和C22:l衍生物具有超过200种潜在的工业应用，例如作为润滑剂和溶剂中的添加剂，作为织物软化剂以及酰胺衍生物用于制造聚合物、高温流动性润滑剂、表面活性剂、增塑剂、表面涂层和药物(Scarth&McVetty，2006)，以及公布了超过1000项关于C221应用的专利(Mietkiewska等，2004)。为与基于石油的产品竞争，期望尽可能高地增加C22:1水平以减少纯化费用。最初的具有低芥子油苷含量的高芥子酸油菜籽(HEAR)栽培品种，例如cv.Hero(Scarth等，1991，1992)、cv.Mercury(54%C22:1；Scarth等，1995a)、cv.Castor和MilleniUM01(C22:155%;McVetty等1998,1999)是可以利用的。此外，具有高芥子酸含量的合适的品种是cv.Hearty,Maruca.Maplus.已通过经杂交挑选的两种祖二倍体品系——芜菁(B.rapa)和甘蓝(B.oleracea)再合成欧洲油菜(Taylor等，1995)，从而逼近了增加C22:l水平的目标。再合成的植物可积累C22:l水平至高达60%(Liihs&Friedt，1995)。已知涉及C22:l合成的基因和等位基因(Scarth&McVetty，2006)，因此利用定向(标记辅助育种)和/或转基因方法来增加C22:1含量都是有可能。具有大于80%C22-.1水平的超高芥子酸菜籽(SHEAR)油期望能降低生产作为一种可再生的、环境友好的工业原料的该脂肪酸及其衍生物的成本。通过表达旱金莲(TropaeolummajusL.)FAE基因C221水平增加90%(Mietkiewska等，2004)，证实了使用FAE基因由高-C22:l累积物种来增加芸苔种子油中C22:l积累的潜在应用。低亚麻酸C18:3和C18:2，与它们的更长链和更不饱和的衍生物一起构成了人体发育和健康所必需的两个系列的必需多不饱和脂肪酸(PUFA)，分别属于n-3和n-6脂肪酸。然而，在PUFA的化学结构中增加数目的双键使得它们对氧化敏感。与C18:l相比，C18:2和C18:3的氧化速率分别高大约10和25倍。因此，高C18:2和C18:3的油类在暴露在空气中时就会变质得越快，特别是处于高温时，导致缩短的油类货架期，使得该油类对于人消费是较不健康的。通常地，较不稳定的油类会被氢化以增加稳定性，但氢化步骤会导致反式脂肪酸形成，由于它们的生理功能，其又引起关注。此外，氢化增加了加工商品油类的成本。最初的低C183双低油菜品种，例如cv.stellar(3%C183)，品系‘Ml1，(Robbelen&Nitsch,1975)和cv.Apollo(Scarth等，1995b)是可利用的。已知涉及C221合成的基因和等位基因(Scarth&McVetty，2006)，因此利用定向(标记辅助育种)和/或转基因方法来增加C22:l含量都是有可能的。高和非常高油酸具有高C18:1和低C18:3水平的油类具有更高的氧化稳定性，无需部分氢化，并且在油炸期间产生较少的不合需要的产物。高油酸油具有与饱和脂肪相当的热稳定性，并且适合在需要长期稳定性的商业饮食服务应用中取代它们。描述了具有80-90%C18:l的高油酸含量的品系(Vilkki&Tanhuanpaa,1995；Riicker&R6bbelen，1995；Schierholt&Becker,1999；Wong等，1991)。市售的是具有70-75%C18:l和降低的C18:3水平的cv.ClearValley75和M0N0LA(Scarth&McVetty，1999)。高C18:l突变与欧洲油菜中fad2基因相关(Laga等，2004)。在芥菜型油菜(B.juncea)中，在C18:l水平中，两个QTLs共同可占32.2%变化(Sharma等，2002)。在通过A12-去饱和酶和FatB硫酯酶工程化开发非常高C18:l含油种子中已取得了相当大的进展。使用有义或反义A12-去饱和酶构建体的转基因欧洲油菜在种子油中能积累高达89%C18:l，并且PUFA级分减少(评述于Scarth&McVetty，2006中)。特别优选地是高油酸和低亚油酸组合的油组成，其产生了具有非常好的油炸品质的油类。这样的性状存在于例如品种cv.Splendor中。低和非常低饱和脂肪酸C16:0是包括芸苔油的植物油的总饱和脂肪酸水平的主要组成部分。C16:0以及更短链的脂肪酸C8:0-C14:0被广泛报道增加动物和人中血浆总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。双低油菜油是唯一符合美国和加拿大的标签条例中所规定的低饱和油类(<7%)标准的商用植物油。期望进一步降低饱和脂肪酸水平以达到零饱和脂肪水平。描述了具有小于6%的进一步减少的水平的品系(Raney68等，1999)。一种替代“传统”育种用于减少饱和水平的方法在于调节包括KAS、去饱和酶和硫酯酶的多种基因的表达(DeheSh，2004；Scarth&McVetty，2006)。描述了与在非转化的欧洲油菜植物中约6.0%的水平相比，具有低于3.4%的总饱和脂肪酸水平的转基因芸苔(Dehesh，2004)。高水平的短链和中链脂肪酸(高月桂酸、高辛酸和癸酸)富含短链和中链脂肪酸(SMCFA)的植物油在多个食品和非食品工业中是有用的。目前，SMCFA的商业来源是椰子油和棕榈仁油。芸苔种子油具有几乎无法被检测到的水平的C8:0、C10:0和C12:0的痕量SMCFA。通过使用各种基因的转基因方法，可获得显著水平的SMCFA。这样地转基因植物产生具有高达56mol%C12:0的种子油(Voelker等，1996)。Bay-FatB转化的欧洲油菜植物的种子油在SMCFA水平中类似于椰子油和棕榈仁油的组成(Voelker等，1996)，所述椰子油和棕榈仁油用于食品例如巧克力、糖果包衣、糖膏、非乳制奶油、低脂人造黄油、肥皂、洗涤剂和化妆品中。在用CupheaFatB2硫酯酶基因转化后的芸苔中获得了高达40%C8:0和C10:0(Dehesh等，1996)。高棕榈酸在表达FatB硫酯酶和来自MCFA-累积植物物种的KAS的转基因植物中观察到种子油C16:0水平的明显增加。表达CupheaChFatBl基因的转基因植物具有高达34mol%的C16:0水平(Jones等，1995)。在表达来自榆树(美国榆(UlmusamericanaL.))和肉豆蔻(MyristicafragransHoutt.)的FatB基因的转基因欧洲油菜植物的种子油中发现了类似的C16:0水平(Voelker等，1997)。高硬脂酸具有高饱和脂肪酸水平的植物油用于制造固体脂肪食品，例如人造黄油和起酥油，节约了氢化成本并避免了产生不需要的反式脂肪酸。C18:0优于其他类型饱和脂肪酸，原因在于其降低了血清脂蛋白胆固醇或对之没有影响。双低油菜栽培品种在种子油中仅具有1.1_2.5%C18:0。业已报道了非天然或诱导的高C18:0芸苔种质。但是，描述了控制C18:0水平的基因(评述于Scarth&McVetty，2006中)。描述了欧洲油菜ffestar品种(B.napuscv.ffestar)产生的种子油具有高达10.1%C180(Hitz等，1995)。欧洲油菜Quantum品种(B.napuscv.Quantum)中来自倒捻子(mangosteen)的FatA基因的表达增加了超过22%的C180水平(Hawkins&Kridl，1998)。与野生型FatA版本相比，来自位点特异性诱变的突变的倒捻子FatA的表达导致C180水平55-68%的增加(Facciotti等，1999)。第二种策略是过表达八9-去饱和酶，该酶指导碳流至(18:14〔？生产。降低的A9-去饱和酶活性会导致更高的C18:0累积(Knutzon等，1992)。尽管使用大豆A9-去饱和酶的有义抑制在欧洲油菜中无效(Hitz等，1995)，但是使用芜菁A9-去饱和酶基因的反义抑制在转基因芜菁中增加C18:0水平至大于32%以及在欧洲油菜中增加至大于40%(Knutzon等，1992)。第三种策略是同时操纵两种酶的活性。过表达FatA硫酯酶并下调节A9-去饱和酶，增加C18:0水平至45%，较单独表达FatA硫酯酶转基因(11%C18:0)和A9-去饱和酶转基因(13%C18:0)更高(T6pfer等，1995)。启动了具有包含靶基因反向重复序列的双沉默构建体的欧洲油菜和芥菜型油菜中FatA和FatB的下调节(Pandian等，2004)。一种用于开发高C18:0芸苔油的额外方法可下调节A9和△12去饱和酶的活性，如在对于两种去饱和酶用发夹RNA沉默构建体工程化的棉籽中所示的，将棉籽C180水平从2-3%增加到40%(Liu等，2002)。多不饱和脂肪酸(PUFA)y-亚麻酸(GLA)是一种必需脂肪酸n_6家族中的PUFA。69GLA是一种人和动物饮食中在营养上重要的多不饱和脂肪酸。描述了用于表达这些脂肪酸的基因(论述于Scarth&McVetty，2006)。极长链多不饱和脂肪酸(VLCPUFA)具有20或22个碳原子，带有4-6个中断的双键，包括在人中具有重要治疗和营养益处的脂肪酸，例如花生四烯酸(ARA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)。芸苔物种像其他高等植物一样不产生极长链PUFAs例如ARA、EPA和DHA。GLA和ALA并不常见于高等植物中。为开发富含ARA和EPA的含油种子，必须导入至少三个基因(Abbadi等，2004)。在烟草中证实了工程化ARA途径的可行性(Huang等，2004)。共轭脂肪酸是具有不为甲叉单元所分离的双键的多不饱和脂肪酸。在涂层应用中，富含共轭脂肪酸(例如十八碳三烯酸)的油类具有作为干性油的优异特性。来自编码将共轭双键导入多不饱和脂肪酸的酶的金盏花(CalendulaofficinalisL.)基因的表达导致在大豆油中累积了20-25%总脂肪酸的十八碳三烯酸(Cahoon等，2001)。环氧脂肪酸例如斑鸠菊酸是通过单加氧酶和二铁去饱和酶的趋异型所产生的(Hatanaka等，2004)，并且是用于生产树脂、胶、塑料、聚合物等的有价值的原材料。其他新的脂肪酸“新的”或“不常见的”脂肪酸宽广地定义为具有不同于在主要含油种子作物中常见的那些脂肪酸的化学结构的脂肪酸(JaWOrSki-&Cah00n，2003)。通过特定的去饱和酶产生了不常见的单不饱和脂肪酸，该去饱和酶将双键插入酰基链中不常见的位置处，而非如在常见的脂肪酸C18:l中所看到的碳8-9之间。在生产生物可降解的润滑剂、表面活性剂和塑料前体中，富含岩芹酸或棕榈油酸的植物油可用作石油的代用品。此外，在本发明的一个优选的实施方案中，由杂种种子生长成的本发明的芸苔属植物产生了种子，在收获和破碎后，其产生了具有选自如下组成的油a)小于2%的芥子酸(erucicacid)含量，b)大于45%的芥子酸水平，c)大于70%的油酸含量，d)小于8%的a-亚油酸含量，e)小于8%的亚麻酸含量，f)小于10%的饱和脂肪酸含量，g)大于20%(优选20-35%)的硬脂酸含量，h)大于10%，优选大于20%的短链和中链脂肪酸(优选自月桂酸、辛酸和癸酸)含量，i)大于20%，优选大于30%的棕榈酸含量，和j)大于10%，优选大于20%的多不饱和脂肪酸(优选地，长链多不饱和脂肪酸选自花生四烯酸(ARA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)，或共轭多不饱和脂肪酸例如共轭亚油酸(CLA))含量。6.2除草剂抗性性状在本发明的另一个优选的实施方案中，本发明的欧洲油菜植物进一步包含除草剂抗性性状。除草剂抗性可包括例如针对孟山都以ROUNDUP商标名出售的除草剂草甘膦的抗性。草甘膦是一种广泛使用的除草剂，因为迄今在植物的生长部分种类及并且具有很少的土壤残留物或没有土壤残留物。视情况，如在公知的US5，387，758(在此并入作为参考)中所描述的，用于容忍当按能破坏本发明缺少所述遗传手段的油菜植物的比例应用的除草剂的遗传手段任选地还70可掺入本发明的油菜植物中。在双低油菜中有两种基因涉及草甘膦抗性。一种编码解毒的酶除草剂；其称为G0X，草甘膦氧化还原酶。另一种是编码EPSP合酶突变体的突变的靶基因。基本上，将上述基因导入植物细胞中，例如携带有Ms系统的遗传成分的本发明的植物细胞中，然后将该植物细胞生长成芸苔属植物。另一种优选的除草剂抗性，其既可作为转基因又可作为天然突变的基因型获得，是针对咪唑啉和/或碘酰脲类除草剂(例如PURSUIT)家族的抗性。针对咪唑啉的抗性是基因AHAS或ALS所赋予的。本领域技术人员会将存在于任意的CLEARFIELD油菜籽中的AHAS的突变型导入还携带有本发明的Ms系统的遗传成分的芸苔属植物中。可选地，通过本领域公知的几种方法的任何一种，可以将带有合适的启动子的AHAS基因的修饰型导入油菜籽植物细胞中。基本上，将上述基因导入植物细胞中，例如携带有任何一种本发明的Ms系统的遗传成分的本发明的植物细胞中，然后将该植物细胞生长成芸苔属植物。7.一般技术7.1性状和基因渗入本发明的Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因、rf等位基因(或它们的任何组合)可渗入欧洲油菜和其他芸苔属品种的任何遗传背景中。转基因技术根据本发明的另一个方面，对于Ms和/或rf等位基因，包含基因组序列的核酸(优选DNA)序列可用于生产转基因杂交系统。所述核酸序列可来源于在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的种子。本发明还涉及一种生产具有基因型MsMsrfrf的雄性不育欧洲油菜植物或具有基因型msmsrfrf的欧洲油菜保持系植物的方法，包括步骤执行一种检测与雄性不育相关的Ms等位基因和/或rf等位基因存在的方法，和/或执行一种如上所述在根据本发明的欧洲油菜植物中保持雄性不育的方法，和将包含至少一种如此检测到的Ms等位基因或rf等位基因的核酸序列，或赋予或保持雄性不育的其部分，从所述供体植物转移到受体植物(优选芸苔属植物，更优选欧洲油菜植物)。可通过任何本领域已知的方法包括农杆菌介导的基因转移或微粒介导的基因转移，进行所述核酸序列的转移。非转基因技术这样的方法的一个优选的实施方案包括通过杂交所述植物，由基础雌性或保持系欧洲油菜植物(例如来源于在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的种子的植物)基因渗入所述核酸序列的转移。因此，该转移可适合与传统的育种技术一起使用。在每一世代中，确定Ms等位基因和/或rf等位基因的存在与否。由于雄性不育表型，恢复系等位基因的存在与否可容易在每一世代中检测，例如通过能育性计分(fertilityscoring)。在最后一次回交发生后，优选进行自交步骤。在下一世代中，如在本发明中所描述的，分子标记用于选择对于Ms等位基因和/或rf等位基因是纯合的植物。这些植物代表了可用于生产杂种种子的预基础雌性系(MsMsrfrf)或保持系(msmsrfrf)。优选通过使用上述的标记辅助选择(MAS)或标记辅助育种(MAB)，将Ms等位基因和/或rf等位基因基因渗入商用欧洲油菜品种中。MAS和MAB涉及使用一种或多种分子标记用于鉴定和选择那些包含一种或多种编码所需性状的基因的子代植物。在本发明的实例中，这样的鉴定和选择是基于Ms等位基因和/或rf等位基因或与之相关的标记的选择。根据该实施方案开发的欧洲油菜植物可有利地从受体植物中获得它们的大部分性状，以及71从供体植物(即基础雌性系或保持系)中获得赋予或保持特性的雄性不育。在一种称为谱系选择的方法中，将显示赋予或保持特性的雄性不育的供体欧洲油菜植物(如本发明的预基础雌株或保持系植物)与缺少所述特性但优选显示商业上所需特性的受体欧洲油菜植物杂交，所述商业上所需特性例如但不限于抗病性、抗虫性、有价值油类和/或粕特性等。然后，将所得到的植物种群(表示为&杂种)进行自花传粉，并使之产生种子(F2种子)。接着，对由F2种子生长成的F2植物筛选赋予或保持特性的雄性不育。可以多种不同方式筛选该种群。首先，可通过分别评估品系的不育性或能育性或它们的特性筛选种群以保持不育性。其次，可使用上述一种或多种分子标记进行标记辅助选择以鉴定那些包含Ms等位基因和/或rf等位基因的后代。涉及上文中通过相关的表型用于检测Ms等位基因和/或rf等位基因存在的方法的其他方法也可使用。同样，标记辅助选择可用于证实由定量生物测定所获得的结果，因此，几种方法还可组合使用。本发明进一步包括一种基因渗入Ms等位基因和/或rf等位基因的方法，包括步骤获得包含Ms等位基因和/或rf等位基因的芸苔属植物，例如在保藏编号NCIMB41480或41481下分别保藏的芸苔近交系，将该植物与另一种芸苔属植物杂交并选择包含Ms等位基因和/或rf等位基因的种子。将得到的h植物与轮回亲本杂交以取代更多的芸苔近交系的基因组，特别是80-99.5%的基因组，更特别是90%-99%的基因组，但尤其是95%-98%的基因组。将包含Ms等位基因和/或rf等位基因的植物对具有目标遗传背景的品种至少回交两次。在第2次回交中，进行能育雌性系(包含来自具有目标背景的能育品种的Rf等位基因)的平行自交以获得BC0S1植物。在随后的育种步骤中只利用包含Ms和rf等位基因(自交后产生不育植物)的植物。在每一个BC世代中进行个自交和平行杂交过程。可选地，可使用标记技术追踪Ms等位基因和/或rf等位基因的存在与否。可使用轮回选择和回交、自交和/或双单倍体技术或任何其他用于制备亲本系统的技术开发雄性不育基础雌性近交系或保持系。在轮回选择和回交方法中，通过将轮回亲本与第一供体植物杂交，可将涉及或保持雄性不育的基因型基因渗入靶受体植物(“轮回亲本”)中，所述第一供体植物不同于轮回亲本并在此被称为“非轮回亲本”。轮回亲本是一种缺少赋予或保持雄性不育特性并且优选具有商业上所需特性的植物，所述商业上所需特性例如但不限于(额外的)抗病性、抗虫性、有价值油类或粕特性等。非轮回亲本显示雄性不育赋予或保持特性并包含编码Ms等位基因和/或rf等位基因的核酸序列。非轮回亲本可以是任何与轮回亲本杂交可育的植物品种或近交系。将轮回亲本和非轮回亲本之间杂交所得到的后代与轮回亲本回交。然后针对所需特性筛选所得到的植物种群，该筛选可以多种不同方式来进行。例如，可使用本领域已知的表型病理学筛查法或定量生物测定法进行种群筛选。可选地，代替使用生物测定法，可使用一种或多种上文中描述的分子标记、杂交探针或多核苷酸来鉴定那些包含编码Ms等位基因和/或rf等位基因的核酸序列的后代，以进行标记辅助选择(MAS)。同样，MAS可用于证实定量生物测定获得的结果。因此，在此定义的标记最终适合于通过基因型筛选来选择合适的子代植物。筛选后，选择显示雄性不育赋予或保持表型的或更优选显示雄性不育赋予或保持基因型并因此包含编码Ms等位基因和/或rf等位基因的必需核酸序列的欧洲油菜植物，并与轮回亲本回交持续多个世代，以致使得欧洲油菜植物变得格外近交。该方法可进行2-5个或更多个世代。原则上，由轮回亲本与涉及或保持雄性不育的非轮回亲本杂交过程产生的后代对于Ms等位基因或rf等位基因是杂合的。纯合植物可通过该植物自交并通过标记分析评估后代的基因型或进一步自交并检测表型分离模式而获得。一般而言，一种将所需的赋予或保持雄性不育性状导入欧洲油菜品种中的方法包括步骤(a)将欧洲油菜近交亲本与另一包含Ms等位基因和/或rf等位基因的欧洲油菜植物杂交以产生&后代植物；(b)选择具有所需Ms等位基因和/或rf等位基因的所述后代植物以产生经选择的&后代植物，优选使用在此定义的分子标记；(c)将经选择的后代植物与所述的欧洲油菜近交亲本植物回交以产生回交后代植物；(d)对回交后代植物选择具有所需Ms等位基因和/或rf等位基因以及所述欧洲油菜近交植物的形态学和生理学特性的植物，其中所述选择包括分离基因组DNA并针对Ms等位基因和/或rf等位基因测试所述DNA中至少一种分子标记的存在，优选如在此所描述的；(e)重复步骤(c)和(d)两次或更多次继而产生经选择的第三代或更高代回交后代植物；和(f)任选地自交选择的回交后代以便鉴定纯合植物。如所指示的，可自交最后一个回交世代以便提供用于赋予或保持雄性不育的纯合的纯育(近交)后代植物。因此，轮回选择、回交和自交的结果是产生了在遗传学上对于Ms等位基因和/或rf等位基因以及对于与商业上感兴趣的性状相关的其他基因是纯合的品系。在一个用于生产本发明的雄性不育系或保持系芸苔属植物的可选的实施方案中，原生质体融合可用于将本发明的Ms等位基因或rf等位基因转移到受体植物。通过该方法，本发明的杂交系统可在用于其他物种，优选用于其他芸苔物种例如甘蓝。原生质体融合是一种诱发或自发的联合，例如在两个或更多个原生质体(其细胞通过酶处理除掉细胞壁)之间进行体细胞杂交产生单一双核或多核细胞。融合细胞可甚至获得自在自然界中没有进行品种间杂交的植物物种，经组织培养成具有所需性状组合的杂种植物。更具体地说，第一原生质体可获得自本发明的欧洲油菜植物(例如来源于在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的种子的植物)。第二原生质体可获得自另一种欧洲油菜例如其他芸苔物种或其他植物品种，优选包含商业上有价值的特性例如但不限于抗病性、抗虫性、有价值的果实特性等的芸苔品系。然后，使用本领域已知的传统的原生质体融合方法融合原生质体。可选地，胚拯救可用于将在此描述的包含Ms和/或rf等位基因的核酸从供体植物转移到受体植物。胚拯救可用作一种从其中植物无法产生有活力的种子的杂交中分离胚的方法。在该方法中，对植物已受精的子房或不成熟的种子进行组织培养以产生新植物(Pierik,1999)。其他技术可额外地或替代地用于基因和性状的基因渗入。这样的技术可包括使用双单倍体技术(Fletcher等，1998)，对于预基础系和保持系，其能显著增加近交世代的速度。对于预基础系，需要利用热处理操作，因为要不然小孢子会败育。7.2创建差异基因库利用杂种优势最大效应以及长期成功的杂种优势育种需要具有高遗传差异性的亲本。油菜的窄遗传基础是在长期育种中增加杂种性能的限制因素。通过导入再合成的基因型(Girke，2002)并使用相互反复选择方法，该遗传基础肯定会逐步延伸。尤其在冬双低油菜中，可观察到现有商用品种的窄遗传相关(r=0,87)(Girke,2002)。具有较固定最小值更低的遗传距离的亲本系并不值得在田间进行检测。可通过同工酶分析(Miindges等，1990)或更便利地通过标记(RFLP:Beckmann&Soller,1983；Botstein等，1980；RAPD(随机扩增多态DNA):Williams等，1990；Forster&Knaak,1995)检测距离。这减少了产量试验的工作量。7.3在育种中的应用本发明的植物可用于多种繁殖活动，包括但不限于a)杂种的自交递降(SelfingDown)培养包含本发明的新的Ms等位基因和/或rf等位基因的低芥子油苷杂种。能育植物进行自花传粉，一些使用袋子，其他通过人工刷花粉。由这些&植物收获&种子并种植作为种群。选择来自该种群的能育植物并生长作为F3畦(row)，从而提供用于育种方法例如谱系选择、轮回选择等的起始材料。b)在传统育种中作为亲本将包含本发明的Ms等位基因和/或rf等位基因的品系与作为育种计划一部分的其他种质品系杂交。生长来自这些杂交的&。能育植物自花传粉并收获所得到的F2种子。挑选、收获来自F2种群的能育植物并生长作为F3畦，从而提供用于育种方法例如谱系选择、轮回选择等的起始材料。c)在双单倍体中作为亲本将本发明的Ms等位基因和/或rf等位基因的来源与改良的种质杂交。所得到的杂种经历小孢子培养产生双单倍体恢复系。所利用的小孢子培养类似于Chen等(1994)和Mollers等(1994)所描述的那些小孢子培养。因此，本发明的另一个实施方案涉及一种生产本发明的欧洲油菜植物(例如基础、预基础或保持系)的方法，包括步骤i.选择具有包含选自Ms等位基因、ms等位基因、rf等位基因和Rf等位基因的等位基因的小孢子的雄性能育亲本；ii.由所选择的步骤(i)的雄性能育植物培养经选择的小孢子，形成单倍体并包括双单倍体；iii.对双单倍体后代检测与所述等位基因相关的表型或通过标记检测等位基因的存在；和iv.选择对于所述等位基因的存在是阳性的后代。d)在回交计划中作为起源将包含Ms等位基因和/或rf等位基因的材料与挑选的近交系杂交。雄性能育植物去雄并再与近交系(轮回亲本)杂交。将所得到的雄性能育植物再与近交系回交。在任一世代，材料的自交递减可开始产生新的恢复系。这些计划例证了一种将Ms等位基因和/或rf等位基因带入优良种质中的回交计划。可使用标记分析(如上所述的)。根据阅读下列实施例和附加的权利要求，本发明的这些和其他目的和优点对于本领域技术人员是显而易见的。保藏物欧洲油菜近交系07055001(雄性不育预基础种子系；基因型MsMsrfrf)的种子样品于2007年5月16日保藏在NCIMB，Ltd.(NCIMBLtd；FergusonBuilding,CraibstoneEstate,Bucksburn,Aberdeen,AB219YA,UK；Tel:+44(0)1224711lOOFax+44(0)1224711299)，保藏编号NCIMB41480。欧洲油菜近交系04058001(“保持系”;基因型msmsrfrf)的种子样品于2007年5月16Hf^^NCIMB,Ltd.(NCIMBLtd；FergusonBuilding,CraibstoneEstate,Bucksburn,Aberdeen,AB219YA,UK；Tel+44(0)1224711lOOFax:+44(0)1224711299)，保藏编号NCIMB41481。关于生物材料来源的声明Ms和rf等位基因获得自1998年欧盟(德国和其他国家)市售的欧洲油菜材料。具体实施例方式下列实施例旨在提供本发明应用的例证，并不意在完全规定或限制本发明的范围。实施例1:GSL分析在育种计划全过程中监测芸苔种子的芥子油苷(GSL)含量。芥子油苷含量以iUmol/克9%水分含量的种子给出。可使用现有技术例如HPLC或近红外反射光谱法(NIRS)进行芥子油苷分析。利用NIRS法，可对未受破坏的芸苔种子样品分析它们的品质构成油类、蛋白和芥子油苷。在此讨论的芥子油苷水平根据两种标准方法进行测定，S卩(1)如用于总全芥子油苷定量的ISO9167-11992(E)中所描述的高效液相色谱法(HPLC)(“油菜籽-芥子油苷含量的测定一第1部使用高效液相色谱的方法，国际标准化组织”，日内瓦)，和(2)如通过Sosulski和DabrOWSki(1984)所描述的，用于提取并纯化的脱硫芥子油苷的三甲基甲硅烷(TMS)衍生物定量的气相色谱法。在此讨论的用于测定芥子油苷水平的HPLC和TMS法均涉及破碎和提炼油后种子固体成分(即脱脂或无油粕)的分析。更优选地，使用近红外反射光谱法进行芥子油苷分析。该分析在F0SSNIRSystemsModel5000-c上进行。芥子油苷分析描述于Williams&Sobering(1992)中。实施例2测定脂肪酸组成的方法根据标准方法测定在此讨论的脂肪酸浓度，其中通过破碎从芸苔含油种子中除去油，随后与甲醇和甲醇钠(sodiummethoxide)反应作为脂肪酸甲酯提取。接着，通过使用毛细管柱的气液色谱法对所得到的酯分析脂肪酸含量，该气液色谱法容许在不饱和度和链长的基础上进行分离。该分析方法描述于Daim等(1983)的工作中，其在此并入作为参考。实施例3纯合的预基础雄性不育系的开发使用欧洲油菜品种Zenith的花粉对雄性不育Takagi种质欧洲油菜植物传粉。该杂交的&后代是雄性能育的。在温室中将那些植物与人工除雄后的品种Smart的雄性能育植物杂交。？工植物由温室中每一植物的杂交种生长起来。所有植物都显示雄性能育表型。通过用塑料袋(CryovacCrispacBeutelSuperMicroLochung360x830mm，供应商BaumannSaatzuchtbedarfD-74638ffaldenburg)分离单株植物，自交在该种群之外的单株植物。在温室中对雄性不育/能育性测试F2自交后代。10个种群中的8个是能育的，其他2个种群显示不育性/能育性分离。如在以下实施例10中所描述的，在高温度条件下自交75来自这些种群的不育植物。那些雄性不育植物的&种群再在温室中生长并自交。仅3个种群显示雄性不育植物，而10个种群分离成雄性不育和雄性能育植物。在热处理下自交来自非分离种群的雄性不育植物。根据图1给出的遗传方案并通过标记分析证实，这些植物显示基因型MSMSrfrf。在温室中生长出264株F4植物。它们都显示雄性不育表型。在热处理后，可从所有植物中收获总计232g的种子。实施例4:保持系的开发当它们显示rfrfmsms时，自交在来自实施例3的分离F3种群之外的雄性能育植物(图1)。进行与完全雄性不育F3种群植物的测交。使用16株植物各自评估5种不同的杂交。所有植物均显示雄性不育表型，前提是杂交是如所推测的rfrfMSMSxrfrfmsms。在保持系中不存在Rf等位基因是关键的。为确保这一点，对该等位基因必须具有标记。来自恢复系的异花传粉无法被检测到，因为在保持系和恢复系之间不存在表型差异。实施例5鉴定与RHS不育等位基因(Ms等位基因)连锁的分子标记对对于RHS不育性基因座分离的162株个体的F2种群运行分离种群分组分析法(BSA)(Michelmore等，1991)实验。该种群来源于RHS-不育系(ID=03550015-34；如通过在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子样品所代表的)和相应的RHS-能育保持系(ID03560006-08；如通过在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子样品所代表的)之间的杂交。将在&种群中观察到的对于雄性不育的分离拟合对于单显性基因预期的31比率。一组762条微卫星标记(SSR)用于检测在亲本系之间以及在雄性不育和雄性能育&植物集团之间的多态性。两个不同的雄性能育和雄性不育集团得到分析。所述集团由来自10株能育或10株不育F2植物的叶样品混合物组成。BSA披露了在两个亲本系之间以及在雄性不育和雄性能育集团之间的5个显示多态性的SSR标记(图4-A)。随后在整个F2种群中对这些5个SSR标记进行基因分型并使用Mapmaker/Exp(3.Ob版)作图。作图结果证实标记NR1116(通过寡核苷酸引物SEQIDNO:1和2扩增的SSR;SSR区如SEQIDNO:21所示；对于引物和SSR基序的定位还参见图6)和NR2525(通过寡核苷酸引物SEQIDN0:4和5扩增的SSR;SSR区如SEQIDNO:22所示；对于引物和SSR基序的定位还参见图7)与染色体N7上的雄性不育等位基因(Ms)紧密连锁(表2)。NR1116正向引物序列5，-TCTTCAAGGGATTCATTCGG-3，(SEQIDNO1)NR1116反向引物序列5，-GAAACTTCGTCGAATCCTCG-3，(SEQIDNO2)NR2525正向引物序列5，-ATTACCATTTCCAACGAATCT-3，(SEQIDNO4)NR2525反向引物序列5，-GTCTCTTTCTCAACTCTTGTATC-3，(SEQIDNO5)SSR标记NR1116由大约20个单元的GA/CA重复组成。在RHS_Ms作图群(使用ABI3700测序仪)中观察到的等位基因大小对于RHS-不育系(0355015-34)为96.7(+/_1)bp(雄性不育等位基因)，以及对于RHS-保持系(03560006-08)为112.3(+/-0.4)bp(雄性能育等位基因)。SSR标记NR2525由大约20个单元的AG重复组成。在RHS_Ms作图群(使用ABI763700测序仪)中观察到的等位基因大小对于RHS-不育系(0355015-34)为192.8(+/_0.3)bp(雄性不育等位基因)以及对于RHS-保持系(03560006-08)(雄性能育等位基因)没有条带。原因在，对于MsNR2525被计为显性标记。观察到另一条194.6(+/-0.5)bp的片段，但没有考虑到该条带，因为其不变地出现在所有植物个体中，而与它们的表型无关。根据表型预测Ms等位基因的基因型雄性不育植物可以是‘Msms’或‘MsMs’，但雄性能育植物则总是‘msms，。因此，Ms等位基因被定位为显性标记。因此，NR1116和NR2525定位在Ms性状的任意一侧，分别具有2.8cM和6.OcM的遗传距离(参见表2)。对于Ms和ms等位基因，计算的距离基本上相同。表2使用Mapmaker(3.Ob版)计算的位于染色体N7上的Ms和侧翼标记之间的图距。标记间的遗传距离以厘摩(cM)来估计，并与种群中发现的重组体数目成正比。用于BSA或用于SSR标记的定位的试验条件由分子标记领域技术人员公知的常规的实验方案组成。用于BSA筛选的PCR扩增在来自AppliedBiosystemsInc.的GeneAMPPCRSystem9700设备上的384孔板的10yl的总反应体积中运行，使用SigmaJumpstartTaq聚合酶。PCR混合物由来自Sigma的IX反应缓冲液，1.65mMMgCl2，0.25mMdNTPs和400nM每种引物组成。PCR条件通常由如下组成94°C，2min，然后40个循环(94°C，15秒，59°C，45秒)，以及最终在72°C温育2min。随后，根据供应商的使用说明书，将扩增产物加载并迁移到3%Resophor琼脂糖1000(来自InvitrogenCorp.)凝胶上。为了定位目的，用于PCR扩增的引物包含至少一条标记有HEX(5’-六氯-荧光素)、NED(苯并氟三氯羧基-荧光素)或FAM(羧基荧光素)的引物，以便能在ABI3700测序仪上进行荧光检测以解析并计分长度多态性。除使用荧光标记的引物之外，用于SSRs定位的PCR条件与用于BSA筛选的相同。实施例6:SSR标记转换为SNP标记.为了将SSR标记转换为被证实对于标记辅助育种更通用的SNP标记，在包含纯合的雄性不育系(MsMs)和纯合的雄性能育系或保持系(msms)的品系组中对SSR标记的扩增产物进行测序，每次8条。每个雄性不育系和保持系的组合代表了不同的遗传背景。BLAST分析使用NR1116的核苷酸序列(SEQIDNO:21)作为针对NCBI上的基因组测绘序列数据库(genomicsurveysequencedatabase)(GSS)的询问，显示在NR1116和具有登录号BH708933的来自甘蓝的GSS片段之间的高序列同源性。该同源性在紧接下微卫星基序的游延续了大约0.4Kb的长度，并能用于设计推定的基因组(芜菁)_特异性引物HiNK6440和6442(分别为SEQIDNOs:7和8)。77寡核苷酸引物HiNK64405，-GTTCACTTCTCATCTTCTTCCAG-3，(SEQIDNO7)寡核苷酸引物HiNK64425，-TCCTGGCAATCAGACAATACTT-3，(SEQIDNO8)对在MsMs和msms品系中获得的扩增产物的序列分析揭示了两个显示与雄性不育性状相关的单倍体型。表3概述了区分两种单倍体型的多态位置的位置；共有序列如SEQIDNO3所示。表3观察到的雄性不育和雄性能育单倍体型的特性。根据参考序列SEQIDNO3观察到的多态性的类型和位置。(indel=缺失)使用AppliedBiosystemsInc.发布的引物Express2.0软件并遵循相应的使用说明，选择位于第214(T/C)和218(T/G)位的SNPs来来发TaqMan.检测。称为SR0002A的相应于该检测的引物和探针序列列于表4中。表4用于Taqman检测SR0002A的引物和探针的核苷酸序列。荧光染料FAM(羧基荧光素)；VIC(AppliedBiosystems专有缩语)。MGB小沟结合物。NFQ非荧光猝灭剂。微卫星标记NR2525的序列在登录号BZ061557(SEQIDNO22)下公开。为了测量该序列片段与雄性不育性状相关的等位变异性，针对该序列设计侧接微卫星基序的PCR引物。寡核苷酸引物HiNK67025，-AGTAACATCAGCGGGGAAC-3，(SEQIDNO13)寡核苷酸引物HiNK67075，-TTTAAGAGCATTGGAACTCTCC-3，(SEQIDNO14)引物HiNK6702和6707的组合(分别为SEQIDNO13和14)显示了两种大概相应于A和C基因组的扩增产物；在多种不同的遗传背景中，0.6Kb的较大的片段结果弄清楚是单态的，但较小的片段则显示与雄性不育性状相关的长度多态性，对于雄性能育等位基因为0.5Kb，与之相比对于雄性不育等位基因为0.4Kb(图4B)。跨MsMs和msms系的该多态片段的序列分析揭示了三种单倍体型(表5)，如所期望的雄性不育Ms等位基因的一种单一的单倍体型(单倍体型B)，和雄性能育ms等位基因的两种单倍体型(单倍体型A和C)。表5观察到的雄性不育和雄性能育单倍体型的特征。根据参考序列SEQIDNO6观察到的多态性的类型和位置(“.”指单核苷酸缺失)位置17-2560^S92105158224-302单倍体型BINDELA□TTCTAAAAACAGAAGGGAAAACCCACC79三种单倍体型的共有序列如SEQIDNO:6所示。如通过单倍体型的比对所显示的，在多个位置上包括在为如上所述的TaqMan裣测设计所靶向的第158位的SNP上，雄性不育等位基因可与雄性能育等位基因相区分。被称为SR0003B的在该检测中使用的引物和探针的序列列于表6中。表6用于Taqman检测SR0003B的引物和探针的核苷酸序列。荧光染料FAM(羧基荧光素)；VIC(AppliedBiosystems专有缩语)。MGB小沟结合物。NFQ非荧光猝灭剂。使用来自InvitrogenCorp的PlatinumTaq聚合酶和相应的酶混合物，衍生于NR1116和NR2525的TaqMan检测通常在来自AppliedBiosystemsInc.的GeneAMPPCRSystem9700设备上的384孔板的10yl的反应体积中运行。PCR条件通常由如下组成最初的变性步骤94°C，2分钟，然后是的40个扩增循环(94°C，15秒和62°C，60秒)。随后使用SDS2.1软件包，在来自AppliedBiosystemsInc的7900HT测序系统上定量荧光FAM和VIC信号。图5显示了一张使用在三块不同的云簇中分离的纯合雄性不育(MsMs)、杂合雄性不育(Msms)和纯合雄性能育(msms)植物，针对标记SR0002A获得的典型的图。使用上述实验方案，两个标记都被定位在如实施例1中所描述的对于雄性不育性状分离的&种群中。如所期望的，基于原始SSR标记的作图位置，SNP测定了SR0003B和SR0002A定位在Ms性状的任意一侧，相对于Ms性状分别具有的2.8cM和3.3cM的距离(表7)。表7使用Mapmaker(3.Ob版)计算的位于染色体N7上的Ms和侧翼标记之间的图距。标记间的遗传距离以厘摩(cM)来估计，并与种群中发现的重组体数目成正比。Ms和ms等位基因显示基本上相同的距离。如上所述，对于本领域技术人员显而易见的是组合使用两种标记能在油菜中进行可靠的Ms性状基因分型。实施例7鉴定与RHS恢复系等位基因(rf等位基因)连锁的分子标记为了开发用于Rf基因座的标记，对对于RHS能育性分离的190株个体的F2种群进行BSA(Michelmore等，1991)。该种群来源于RHS-不育系(MsMsrfrf)(ID:05056504，如在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子样品所代表的)和恢复系(msmsRfRf)(ID:NKFAIR)之间的杂交。由于对于雄性不育Ms基因座在该杂交中同样分离，因此如实施例5中所描述的在基于对SSRs标记NR1116和NR2525获得的基因型的BSA筛选之前从种群中除去能育的msms植物个体。在仅包含MsMs和Msms植物的190株个体的亚种群中，将对于能育性的分离拟合对于单显性基因预期的31比率。一组1225条微卫星标记(SSR)用于检测在亲本系之间以及在雄性不育和雄性能育F2植物集团之间的多态性。三个不同的雄性能育和雄性不育集团得到分析。所述集团由来自10株能育或10株不育F2植物的叶样品混合物组成。BSA披露了在亲本系之间以及在雄性不育和雄性能育F2植物集团之间的37个SSRs多态性。随后在整个F2种群中对这些37个SSRs进行基因分型并使用Mapmaker/Exp(3.Ob版)作图。根据所观察到的表型预测Rf等位基因的基因型雄性能育植物可以是‘Rfrf’或‘RfRf’，但雄性不育植物则总是‘rfrf’。因此。Rf等位基因被定位为显性标记。该作图结果揭示了两种与染色体N19上雄性能育性基因(Rf)紧密连锁的SSRs，NR2219(SEQIDNO23)和NR3454(SEQIDNO26)(表8)。事实上，NR2219和NR3454分别定位在Rf任何一侧的10.2cM和26.5cM的遗传距离上。对于rf和Rf等位基因，所计算的距离基本上相同。业已如实施例5中所描述的，用于BSA或用于SSR标记的定位的试验条件由分子标记领域技术人员公知的常规的实验方案组成。用于SSRNR2219扩增的引物如下NR2219正向引物序列5，-ATTATCCTCTCGCCATTTC-3，(SEQIDNO19)NR2219反向引物序列5，-AAACTCCTGAACACCTCCTAC-3，(SEQIDNO20)用于SSRNR3454扩增的引物如下NR3454正向引物序列5，-GATGGTGATGGTGATAGGTC-3，(SEQIDNO24)NR3454反向引物序列5，-GAAGAGAAGGAGTCAGAGATG-3，(SEQIDNO25)SSRNR2219由大约27个单元的TA重复组成。对于雌性亲本系(ID=05056504,如在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子样品所代表的)的rf等位基因，在ABI3700测序仪上观察到的等位基因大小为240.8(+/-0.4)bp，而对于恢复系(NKFAIR:Rf等位基因；恢复系等位基因)，则没有获得条带。因此，NR2219在分离种群中起显性标记作用等位基因240.8(+/-0.4)的存在相应于rf等位基因的纯合和杂合状况，而不存在等位基因240.8(+/-0.4)则相应于Rf等位基因的纯合状态。SSRNR3454由大约4个单元的TCA重复组成。对于雌性亲本系(ID=05056504,如在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子样品所代表的)的rf等位基因，在ABI3700测序仪上观察到的等位基因大小为282(+/-0.38)bp,以及对于恢复系(NKFAIR:Rf等位基因；恢复系等位基因)则为290(+/-0.38)bp。表8使用Mapmaker(3.0b版)计算的位于染色体N19上的Rf和侧翼标记之间的图距。标记间的遗传距离以厘摩(cM)来估计，并与种群中发现的量组体数目成正比基因座基因座之间的遗传距离NR345426.5cM82实施例8在基因芯片上通过单特征多态性(SFP)检测进行RHS恢复系基因(rf基因)的精细作图通过在Syngenta专有的芸苔Affymetrix基因芯片上对Rf基因进行近等基因系(NILs)杂交，获得RHS恢复系基因(rf基因)的精细作图。该芸苔基因芯片的设计是一种通过Affymetrix实现的用户定制设计。该基因芯片包含来源于代表了欧洲油菜、芜菁或甘蓝的152，362条芸苔11111§61168的2.56百万条探针。该unigenes由来源于位于PlantGDB(www.plantgbd.org,161A版，用于欧洲油菜和芜菁，157a版，用于甘蓝)的芸苔EST集群的结合的共有序列组成。通过使用具有98%序列同一性阈值的cd-hit程序(http://bioinformatics.ljcrf.edu/cd-hi/)组合3个集群获得了结合的共有序列。共有序列各自被分成150个碱基长的探针选择区(PSR)。平均起来，每个PSR4条探针，并沿着整个转录物避开内含子/外显子边界对每条转录物设计16条探针(仅仅完全匹配的探针)。将该约束条件应用于探针设计，从而确保了探针序列的唯一性、可比较的杂交效率并除去了Affymetrix推荐的杂交探针。为了能够评估本底信号，17.000条抗基因组探针包括在芯片上。8对近等基因系用于该实验中。这8对由8种不同的油菜品系(恢复系；Rf等位基因；恢复系等位基因)和它们相应的通过1次回交基因渗入保持系等位基因(rf等位基因)然后通过5次连续自交固定的近等基因系(表9)组成。通过55种沿19条欧洲油菜染色体适当分布的多态SSR标记的基因分型评估品系的基因纯化水平。表9用于Rf精细作图(参见实施例8)的16种NILs的列表和特性除NIL对NO1的品系进行两倍6次杂交以便获得足够的统计显著性之外，在基因芯片上对每一个体品系杂交两次。总数合计达36块芯片用于该实验。如在公开的国际专利申请W02007/005305中所描述的进行DNA制备和标记、杂交以及和芯片扫描，以及数据归一化，该文献特此以其整体在此并入作为参考。为了数据分析，通过将所有恢复系(RfRf系)的杂交结果与所有保持系(rfrf系)的杂交结果进行比较执行单向方差分析(ANOVA)，使得36次个体杂交被分析为18次RfRf基因型重复和18次rfrf基因型重复。该策略导致统计能力增加。选择用Bonferormi检验计算的α-值阈值来声明SFP为显著的，意思是在RfRf和rfrf系之间的杂交信号是统计学差异的。Bonferroni校正是一种当几次相关或独立的统计检验同时进行时所使用的多重比较校正(虽然对于每次个体比较给出的α值可能是合适的，但对于所有比较的集合却并不合适)。为了避免伪阳性，需要将α值降低来解决正在进行的比较的数目。因此，将0.05的理论α-值除以基因芯片上0.05/152362=3.310_7。该阈值产生代表30种芸苔imigenes的55条显著的SFP，称为芸苔候选基因。通过在芸苔属和拟南芥属基因组之间使用同线性进一步确认30条芸苔候选基因。对TAIR拟南芥蛋白数据库进行的芸苔imigenes核苷酸序列的TBLASTX分析得以对23条芸苔候选基因鉴定了拟南芥同系物。随后，基于拟南芥同系物的物理位置，将该23条芸苔候选基因投射到拟南芥基因组上(图11)，从而鉴定了染色体5上14条拟南芥基因的簇。由于芸苔imigenes被预测定位在Rf基因座周围，因此可假定Rf基因位于拟南芥中该1.77百万碱基对的同线区中。14条拟南芥基因和14条芸苔候选基因之间的对应关系在表10中给出。表10在14种定位在染色体5上簇中的拟南芥基因和它们的芸苔候选基因同系随后，列于表10中的14条芸苔候选基因被调查作为靶用于标记开发。由于在芯片检测到的多态性的确切特性未知，因此单链构型多态性(SSCP)技术被用于基因分型以及随后的作图。用于该目的的对Rf分离的种群与实施例7中所描述的相同。对于每种芸苔候选基因。设计包围用于SFP鉴定的探针区的引物。使用添加到5’末端的M13F尾(5，CACGACGTTGTAMACGAC3'；SEQIDNO:27)合成正向引物，反向引物携带位于5’末端的M13R尾(5，CAGGAAACAGCTATGACC3，；SEQIDNO28)。在包含5μ15ng/μ1浓度的基因组DNA、1.5μIlOX反应缓冲液、1.2μIlOmMdNTPs、0.5μ150mMMgCl2、0.3μ110μM浓度的每种引物、0.12μIInvitrogenTaqplatinium(5U/μ1)的15μ1终体积中进行最初的PCR反应。所有PCR反应均在ABIGeneAmpPCR系统9700上进行。最初的PCR的热循环条件由如下组成在94°C下初始温育2分钟以活化Taq聚合酶，然后35个扩增循环(94°C，变性30秒，550C，退火30秒，和72°C，延伸30秒)。最终在72°C下延伸5分钟完成PCR反应。将PCR产物稀释100倍，然后使用各自处于10μM浓度下的5μ1稀释的产物作为模板和0.4μ1M13F标记的尾作为正向引物PET-5，-CACGACGTTGTAAAACGAC-3，(SEQIDNO27)以及0·4μ1M13R标记的尾FAM-5，-CAGGAAACAGCTATGACC-3，(SEQIDNO28)作为反向引物进行第二次PCR。除引物浓度和退火温度被设定在50°C以外，第二次PCR反应的试验条件与第一次反应相同。在ABI3130x1基因分析仪上进行SSCP分析。在加载和运行样品前，将来自AppliedBiosystems的0.2μ1Genescan500LIZ大小标准物和9μIHi-Di甲酰胺添加到2ul40-倍稀释的最终PCR产物中。在95°C下对该混合物变性5分钟，并在冰上冷却3分钟以避免重退火。根据供应商推荐制备7.2%浓度的由来自ABI的POP构象分析聚合物(CAP)组成的电泳聚合物。加载样品并迁移到36cm毛细管阵列上，与此同时应用下列参数箱温25°C,Poly_Fill_Vol6500阶，电流稳定度:5μΑ，预运行电压15kV，预运行时间180秒，注入电压1.2kV，注入时间24秒，电压步数40nk，电压阶跃间隔15秒，数据延迟时间1秒，运行电压15kV和运行时间3000秒。使用来自ABI的GeneMapper软件v4.0分析电泳期间收集的数据。在所测试的14种芸苔候选基因中，unigeneID:PUT-161a_Brassica_napus-59218(SEQIDNO:31)被定位为最接近于Rf基因，处于Rf下方4.IcM的距离。图12显示了在分离种群中对于该基因座观察到多态性的类型。因此，对于Rf相应的SSCP标记容许缩小定位间隔并代表了现有可获得的最接近的标记(表11)。PUT-161a-Brassica_napus_59218正向引物序歹Ij5，-ACAGAGACAGAGGAGGTAGC-3，(SEQIDNO29)PUT-161a-Brassicanapus-59218反向引物序列5，-ATCATAATCCCTCGTTCTTT-3，(SEQIDNO30)表11使用Mapmaker(3.Ob版)计算的位于染色体N19上的Rf和侧翼标记之间的图距。标记间的遗传距离以厘摩(cM)来估计，并与种群中发现的重组体数目成正比。对于rf和Rf等位基因，该距离基本上相同。基因座基因座之间的遗传距离实施例9在RHS系统分离种群中对雄性不育和雄性能育植物进行标记选择如果植物例如由RHS-不育系和恢复系杂交产生的F2植物是雄性不育或雄性能育的，则一种可能的用于上述雄性不育或雄性能育的测定是使用与Ms(如实施例1和2中所描述的)和Rf等位基因(如实施例3中所描述的)连锁的标记检测该植物。实施例9.1预测Ms基因型NR1116、NR2525、SR0002A和SR0003B标记的基因型提供对Ms-基因型的预测(表12；图5)。表12对NR1116和NR2525下划线的等位基因的特性，以及Ms和ms等位基因的指定。‘Ms’是不育基因的雄性不育等位基因以及‘ms’是不育基因的雄性能育等位基因。给出的等位基因大小已在ABI3700测序仪上计分过。针对分子量标准物ROX500(AppliedBiosystem)进行表观片段分子量的校正。基因座Ms/ms等位基因等位基因大小(bp)如果仅存在雄性不育等位基因，则可预测该植物对于雄性不育(MsMs)是纯合的。如果既存在雄性不育等位基因又存在雄性能育等位基因，则可预测该植物对于雄性不育(Msms)是杂合的。以及如果仅存在能育等位基因，则可预测该植物对于雄性能育(msms)是纯合的。实施例9.2预测Rf基因型NR3454、NR2219和PUT-161a_Brassicanapus-59218标记容许预测Rf-基因型(表12)。对于SSCP标记PUT-161a-Brassicanapus-59218,由于所使用的技术，其不可能给出等位基因大小来计分。总是必须参看对参照恢复系‘RfRf’和保持系‘rfrf’品系所观察到的多态性(图13)。表13对NR2219下划线的等位基因的特性以及Rf和rf等位基因的指定。‘Rf，是恢复系等位基因的能育等位基因以及‘rf’是恢复系等位基因的不育等位基因。给出的等位基因大小已在ABI3700测序仪上计分过。针对分子量标准物ROX500(AppliedBiosystem)进行表观片段分子量的校正。如果仅存在保持系‘rf’等位基因，则可预测该植物对于雄性不育(rfrf)是纯合的。如果既存在保持系等位基因又存在恢复系等位基因，则可预测该植物对于雄性不育(Rfrf)是杂合的。以及如果仅存在恢复系‘Rf’等位基因，则可预测该植物对于雄性能育(RfRf)是纯合的。实施例9.3；预测雄性不育和雄性能育表型根据预测的Ms-基因型和Rf-基因型，我们能预测植物的雄性不育性或雄性能育性(表14)。由于在雄性不育基因(Ms)上恢复系等位基因(rf)是显性的，因此在Rf处每次都具有雄性能育等位基因的植物是雄性能育的。如果在Rf处的能育等位基因不存在并且在Ms处的雄性不育等位基因存在，则仅可获得雄性不育。表14根据雄性不育基因(Ms)和恢复系等位基因(rf)的基因型确定雄性不育和雄性能育表型。实施例10=RHS雄性不育植物自交为了产生花粉，在开第一朵花之后，优选用大约38°C的白天温度(16小时)和大约20°C的夜间温度(8小时)处理RHS雄性不育植物7天。该处理在空调房(空调设备制造商www.redeker-kaeltetechnik.de)中进行，该空调房装备有8盏400W飞利浦SON-TP400WAgro温室用灯。在热处理后一周，将植物送回温室并在至少18°C白天温度和14°C夜间温度的自然条件下培育。在所述热处理后7-14天，植物显示具有扩大的花药的花。那些花药能释放花粉。花粉用于传粉给同一植物的雄性不育和雄性能育花。使用塑料袋(CryovacCrispacBeutelSuperMicroLochung360x830mm，i"共商BaumanriSaatzuchtbedarfD-74638ffaldenburg)分离相邻的植物以防止不受控制的传粉。已被传粉的植物显示正常的荚发育，并且在干燥作为正常的能育油菜籽植物的植物后可收获种子。实施例11生产杂合的基础种子雌性系将来自实施例10的F4雄性能育植物和F4雄性不育植物的种子播种在隔离的大棚中。大棚长20m，宽Sm。覆盖材料是具有16x10网眼大小的防虫网。该设计是一行雄株，接着6行雌株，4行雄株，6行雌株以及再一行的雄株。每行播种大约1.5g单一植物自交种子。在开花开始前覆盖大棚。在开花前对雄性能育植物选择雌株。不管在自交过程中多么细心，通过来自温室中的恢复系花粉的异花传粉还是无法完全排除。雄性能育植物可根据它们不显示雄性不育个体的芽败育表型来进行选择。由于芽败育，因此雄性不育植物开始开花较能育植物为迟。为了使开花同步，通过在开始开花时人工修剪主芽延迟雄性能育植物开花。在开花后，除去在大棚边界的两行传粉者。人工分离两块6行雄性不育雌株和4行雄株以避免种子混杂。在成熟后，单独收获雄性不育雌性系和雄性能育保持系植物。在2005年，一个大棚中的基础雌性种子的种子产量为11.9kg未清洁的种子。在同一个大棚中的保持系植物的种子产量为8.9kg。也可以田地生产方式进行预基础种子生产。因此，两块油菜籽地的最小距离必须是5km。还要确保在周围5km内不存在能与油菜籽异花传粉的能育油菜籽或十字花科植物。重要的是要检查油菜籽植物经常生长的路边。实施例12杂种开发以露地生产方式生产杂种。雌性系是实施例4中所描述的基础种子雌性系。恢复系是任何一种常规的油菜籽品系。技术是带状生长，在恢复系植物田地周围具有至少3m的边界。在田地中雄雌比率为13-14，取决于农场主的条播机，1个条带在2.5-4m之间。在开花前，50%的恢复系植物必须截去约50cm高度。这可通过任何一种常规的割草机来进行。如实施例4中所描述的，在开花前雄性不育植物需要进行针对雄性能育植物的选择。毫无疑问是要确保在不育条带中能育植物的数量不超过总数的0.2%以确保超过90%的杂种性。隔离距离必须为200m。必不可少的是要控制开花期间的环境温度。如果温度超过20°C，则必须在开花3周内对雄性不育雌株检查雄性能育花。在开花后，传粉者必须除去以保证所收获的F1杂种种子的纯度。实施例13杂种性能在不同国家的产量试验中测试杂种。试验进行至少3个复本，具有至少15m2土地面积。收获土地并以dt/ha再计算土地产率。使用NIRS技术在FOSSNIRSystemsModel5000-c上分析种子。那些分析的原则描述于Williams&Sobering(1992)中。那些在德国和波兰试验的结果在表15中给出(RNX本发明的各种杂种种子；msl基于NPZmsl的杂种种子；Ogura=InraOgura杂种种子)。与现有可获得的杂交系统相比，相对种子产量的性能如果不是更好的话，至少也是一样好。表15在2006年(德国和波兰)和2007年(德国、波兰和法国)，RHS杂种的性能12.Brandle,J.E.andMcVetty,P.B.E.(1989):CropScience,29:1191-1195.13.Burton,J.ff.，J.F.Miller,B.A.Vick,R.Scarth,andC.C.Holbrook.2004.Alteringfattyacidcompositioninoilseedcrops.Adv.Agron.4:273-306.14.Cahoon,E.B.2003.AgBioForum,611-13.15.Cahoon,E.B.,K.G.Ripp,S.E.Hall,andA.J.Kinney.2001.J.Biol.Chem.276:2637_2643.16.Chen,F.X.，B.C.Hu,C.Li,Q.S.Li,ff.S.Chen,andM.L.Zhang,1998:GeneticstudiesonGMSinBrassicanapusL.I.InheritanceofrecessiveGMSline9012A.ActaAgron.Sin.24，431-438.17.Chen,Z.Z.,S.Snyder,Z.G.Fanandff.H.Loh.1994PlantBreedingl1318.DaskalovS.1972.Proc.EucarpiaMeet.Capsicum7202~210.19.DaunJKetal,J.Amer.OilChem.Soc.,601751-1754(1983)20.Dehesh,K.2004.UnitedStatesPatentApplication20040132189.21.Dehesh,K.,A.Jones,D.S.Knutzon,andT.A.Voelker.1996.PlantJ.9217-221167-172,Applied22.DelourmeR,A.Bouchereau,N.Hubert,M.Renard,B.S.Landry.TheoreticalGenetics,vol.88，pp.741-748，1994.23.DelourmeR.andF.Eber.TheoreticalandAppliedGeneticsvol.85,pp222-228,1992.24.DelourmeR.,F.Eber,M.Renard."BreedingDoubleLowRestorerLinesinRadishCytoplasmicMaleSterilityofRapeseed(BrassicaNapusL.)."Proc.9thInt.RapeseedConf.Cambridge.England(1995).25.DelourmeR.,F.Eber,M.Renard."RadishCytoplasmicMaleSterilityinRapeseed:BreedingRestorerLineswithaGoodFemaleFertility."Proc8thInt.RapeseedConf.,Saskatoon,Canada.1506-1510(1991).26.DenisM.,DelourmeR.,GourretJ.P.,MarianiC.,andRenardM.PlantPhysiol.101，1295-1304(1993).27.DicksonMH.1970.J.Amer.Soc.Hort.Sci.95:13—14.28.Eskin,N.A.M.，B.E.McDonald,R.Przybylski,L.J.Malcolmson,R.Scarth,T.Mag，K.Ward，andD.Adolph.1996.Canolaoil.p.1-96.InY.H.Hui(ed.)Edibleoilandfatproducts:0ilandoilseeds.JohnWiley&SonsInc.,NewYork.29.Facciotti,M.T.，P.B.Bertain,andL.Yuan.1999.17:593-597.30.Fletcher,R.；Coventry,J.andScott,L.S.(1998):DoubledHaploidTechnologyforSpringandWinterBrassicanapus.RevisedEdition.UniversityofGuelphToronto,DepartmentofPlantAgriculture,TechnicalBulletin,OACPublication.31.Forster，J.undKnaak,C.1995Estimationofthegeneticdistanceof21winterrapeseedvarietiesbyRAPDanalyssincomparisontoRFLPresults.Proc.9thInt.RapeseedCongress,4-7July1995,Cambridge,UK.32.Frauen,M.(1999a)Ernahrungsdienst46:13.33.FrauenM,J.Noack,A.Girke,ff.Paulmann(2007):TenyearsexperienceofdevelopmentandcultivationofwinteroilseedrapehybridsinEuropebasedontheMSLsystemPoc.12.th.Int.RapeseedCongress,Wuhan,China(2007)34.Frauen,M.，andA.Baer(1996)GCIRCBulletin12:47_5L35.FuTD(1981)EucarpiaCruciferaeNewsl6:6D736.GirkeA.,Ph.DThesis(Dissertation)Gottingen,May2002"NeueGenpoolsausresynthetisiertemRaps(BrassicanapusL.)fiirdieHybridziichtung"37.Grant,I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中所述(雄性不育)雌性系对于Ms等位基因是杂合的。8.根据权利要求2-7任一项的方法，其中(雄性不育)雌性植株和(雄性能育)雄性植株以交替带状生长和/或其中通过修剪或用生长延迟化学药品处理或通过与(雄性不育)雌性植株相比播种(雄性能育)雄性植株延迟至多3周来延迟雄性植株开花。9.根据权利要求2-8任一项的方法，其中所述方法在低于28°C的温度下实施。10.一种生产欧洲油菜杂种种子的方法，所述欧洲油菜杂种种子生长成产生籽粒的欧洲油菜植物，所述籽粒任选地具有不超过25umol/克9%水分含量的风干种子的总芥子油苷含量，其中所述方法包括如在以下所请求保护的一种或多种方法a)权利要求1，和b)权利要求2-5任一项，和c)权利要求6-9任一项。11.权利要求1-10任一项的方法，其中Ms等位基因具有赋予条件性核雄性不育表型的特征，其a)通过暴露于高于35°C的温度，暂时恢复能育性，b)在至少一部分的F1植物中恢复能育性，所述F1植物获得自具有基因型MsMsrfrf或Msmsrfrf的雄性不育植物与任何包含至少一个显性Rf等位基因的欧洲油菜植物的杂交，和c)在F1植物中得以保持，所述F1植物获得自具有所述Ms等位基因涉及的条件性雄性不育表型的植物与来源于在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子的雄性能育植物的杂交。12.权利要求1-11任一项的方法，其中Ms等位基因是存在于在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子中Ms等位基因或其遗传变体，其赋予条件性雄性不育表型。13.权利要求1-12任一项的方法，其中条件性雄性不育表型和/或Ms等位基因与选自如下的一种或多种特性连锁和/或与之相关I.在具有Ms等位基因赋予的雄性不育表型的植物中的芽败育表型，II.在具有Ms等位基因赋予的雄性不育表型的植物中的白色条纹或白色斑点花瓣表型，和III.在包含至少一个拷贝的Ms等位基因的雄性能育和雄性不育植物中存在Ms等位基因特异性标记。14.权利要求1-13任一项的方法，其中条件性雄性不育表型和/或Ms等位基因与选自如下的一种或多种标记连锁和/或与之相关I.选自由如下组成的NR1116标记区中多态性组的标记a)具有位于相应于SEQIDN03中第85位的位置处的A的单核苷酩〖多态性标记，b)具有位于相应于SEQIDNO3中第87位的位置处的G的单核苷酩〖多态性标记，c)具有位于相应于SEQIDNO3中第139位的位置处的A的单核苷!睃多态性标记，d)具有位于相应于SEQIDNO3中第214位的位置处的C的单核苷!睃多态性标记，e)具有位于相应于SEQIDNO3中第218位的位置处的G的单核苷!睃多态性标记，f)具有位于相应于SEQIDNO3中第277位的位置处的G的单核苷!睃多态性标记，g)具有位于相应于SEQIDNO3中第286位的位置处的A的单核苷!睃多态性标记，h)具有位于相应于SEQIDNO3中第312位的位置处的T的单核苷!睃多态性标记，i)具有位于相应于SEQIDNO3中第319位的位置处的T的单核苷!睃多态性标记，j)具有位于相应于SEQIDNO3中第359位的位置处的C的单核苷!睃多态性标记，k)在相应于SEQIDNO:3中第221位的位置处的5'-TTGGTGAACAATC-3'缺失突变和1)在相应于SEQIDNO3中第328-330位的位置处的5'-GAA-3'插入突变II.选自由如下组成的NR2525标记区中多态性组的标记a)具有位于相应于SEQIDNO6中第60位的位置处的A的单核苷酸多态性标记，b)具有位于相应于SEQIDNO6中第92位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，c)具有位于相应于SEQIDNO6中第105位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，d)具有位于相应于SEQIDNO6中第158位的位置处的C的单核苷酸多态性标记，e)具有位于相应于SEQIDNO6中第431位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，f)在相应于SEQIDNO6中第82位的位置处的单核苷酸缺失突变，和g)在相应于SEQIDNO6中第17-25位的位置处的5'-TGAGCAAAA-3‘缺失突变，III.选自由下列组成的SNP标记组的标记a)在使用包含SEQIDN0:12所示的核苷酸序列的SNP-探针的SNP检测中，产生阳性信号，和使用包含SEQIDNO:11所示的核苷酸序列的SNP-探针，产生阴性信号，和b)在使用包含SEQIDNO17所示的核苷酸序列的SNP-探针的SNP检测中，产生阳性信号，和使用包含SEQIDNO:18所示的核苷酸序列的SNP-探针，产生阴性信号，IV.选自由下列组成的SSR标记组的标记a)具有96.7(+/-1.0)bp的表观分子量的PCR片段，该片段产生自使用具有SEQIDNOs:1和2所示序列的引物的PCR反应，和b)具有192.8(+/-0.3)bp的表观分子量的PCR片段，该片段产生自使用具有SEQIDNOs:4和5所示序列的引物的PCR反应，和V.选自与SEQIDNOs:3、6、11和18所示的至少一条序列连锁的标记组的标记，其中一种或多种标记(Ms等位基因标记)还包括选自如下序列的分离的核苷酸序列，所述序列IV.与在上述I.-V.节中定义的标记序列具有至少80%的序列同一性，或V.在严格条件下与在上述I.-V.节中定义的标记序列杂交，或VI.包含在上述I.-V.节中定义的标记序列的至少25个连续的核苷酸。15.权利要求1-10任一项的方法，其中ms等位基因特征在于具有如下的表型特性a)不能恢复Ms等位基因赋予的雄性不育表型的能育性，和b)在不存在Ms等位基因的情况下，不能赋予雄性不育表型。16.权利要求1-10和15任一项的方法，其中ms等位基因与选自如下的一种或多种标记连锁和/或与之相关I.选自由如下组成的NR1116标记区中多态性组的标记a)具有位于相应于SEQIDNO3中第85位的位置处的G的单核苷酸多态性标记，b)具有位于相应于SEQIDNO3中第87位的位置处的A的单核苷酸多态性标记，c)具有位于相应于SEQIDNO3中第139位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，d)具有位于相应于SEQIDNO3中第214位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，e)具有位于相应于SEQIDNO3中第218位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，f)具有位于相应于SEQIDNO3中第277位的位置处的A的单核苷酸多态性标记，g)具有位于相应于SEQIDNO3中第286位的位置处的G的单核苷酸多态性标记，h)具有位于相应于SEQIDNO3中第312位的位置处的A的单核苷酸多态性标记，i)具有位于相应于SEQIDNO3中第319位的位置处的C的单核苷酸多态性标记，j)具有位于相应于SEQIDNO3中第359位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，k)在相应于SEQIDNO3中第221位的位置处的5'-TTGGTGAACAATC-3‘插入突变，和1)在相应于SEQIDNO3中第328-330位的位置处的5'-GAA-3'缺失突变II.选自由如下组成的NR2525标记区中多态性组的标记a)具有位于相应于SEQIDNO6中第60位的位置处的C的单核苷酸多态性标记，b)具有位于相应于SEQIDNO6中第92位的位置处的C的单核苷酸多态性标记，c)具有位于相应于SEQIDNO6中第105位的位置处的C的单核苷酸多态性标记，d)具有位于相应于SEQIDNO6中第158位的位置处的A的单核苷酸多态性标记，e)具有位于相应于SEQIDNO6中第431位的位置处的C的单核苷酸多态性标记，f)具有位于相应于SEQIDNO6中第82位的位置处的T的单核苷酸多态性标记，和g)在相应于SEQIDNO:6中第17-25位的位置处的5'-TGAGCAAAA-3‘插入突变，III.选自由下列组成的SNP标记组的标记a)在使用包含SEQIDNO:11所示的核苷酸序列的SNP-探针的SNP检测中，产生阳性信号，和使用包含SEQIDN0:12所示的核苷酸序列的SNP-探针，产生阴性信号，和b)在使用包含SEQIDNO18所示的核苷酸序列的SNP-探针的SNP检测中，产生阳性信号，和使用包含SEQIDNO:17所示的核苷酸序列的SNP-探针，产生阴性信号，IV.选自由下列组成的SSR标记组的标记a)具有选自由94(+/-0.9)bp、110.4(+/-0.5)bp、112.3(+/-0.4)bp和116.3(+/_0.4)bp组成的表观分子量组的表观分子量的PCR片段，该片段产生自使用具有SEQIDN0s:l和2所示序列的引物的PCR反应，和b)具有183.8(+/-0.4)bp的表观分子量的PCR片段或无能育等位基因相关的PCR片段，该片段产生自使用具有SEQIDN0s:4和5所示序列的引物的PCR反应，其中一种或多种标记还包括选自如下序列的分离的核苷酸序列，所述序列a)与在上述I.-IV.节中定义的标记序列具有至少80%的序列同一性，或b)在严格条件下与在上述I.-IV.节中定义的标记序列杂交，或c)包含在上述I.-IV.节中定义的标记序列的至少25个连续的核苷酸。17.权利要求1-10任一项的方法，其中rf等位基因具有如下表型特性的特征a)不能恢复Ms等位基因赋予的雄性不育表型的能育性，和b)能保持Ms等位基因赋予的雄性不育表型。18.权利要求1-10和17任一项的方法，其中rf等位基因选自a)可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子的rf等位基因，和b)以能保持Ms等位基因赋予的雄性不育表型的纯合形式存在的其变体。19.权利要求1-10、17和18任一项的方法，其中rf等位基因与SSR标记连锁和/或与之相关，该SSR标记由具有240.8(+/-0.4)bp的表观分子量的PCR片段组成，该PCR片段来自使用具有如SEQIDNOs19和20所示序列的引物的PCR反应。20.权利要求1-10任一项的方法，其中能育性恢复表型和/或Rf等位基因与选自如下的一种或多种特性连锁和/或与之相关a)在获得自与在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子生长成的欧洲油菜植物杂交的F1植物中，恢复能育性，和b)在获得自与种子生长成的欧洲油菜植物杂交的F1植物中，恢复能育性，所述种子获得自作为雄性不育雌性植株(femalemalesterileplant)的获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的种子的欧洲油菜植物与作为雄性能育植物的获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的种子的欧洲油菜植物的杂交。21.权利要求1-10和20任一项的方法，其中Rf等位基因可获得自任何被商业化作为种子用于栽培的欧洲油菜能育近交系。22.权利要求1-21任一项的方法，其中Rf等位基因和/或ms等位基因可获得自市售欧洲油菜能育近交系，所述市售欧洲油菜能育近交系选自包括在2006年12月确认合格的0ECD品种列表中的被商业化作为种子用于栽培目的的非杂种欧洲油菜品种。23.权利要求1-10和20-22任一项的方法，其中能育性恢复表型和/或Rf等位基因与SSR标记连锁和/或与之相关，所述SSR标记由缺少具有240.8(+/-0.4)bp的表观分子量的PCR片段的SSR标记组成，所述PCR片段来自使用具有SEQIDNOs:19和20所示序列的引物的PCR反应。24.—种具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物，该基因型可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子，其中所述条件性雄性不育欧洲油菜雌性植株是i.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是纯合的，和ii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(rf等位基因)是纯合的，和iii.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度时，优势雄性不育，和iv.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度时，恢复优势雄性能育表型。25.权利要求24的植物，其中所述条件性雄性不育植物可获得自通过权利要求1的方法生产的种子。26.一种具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物，其中所述条件性雄性不育欧洲油菜雌性植株是iii.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480下保藏的欧洲油菜种子的雄性不育等位基因(Ms等位基因)是杂合的，iv.对于可获得自在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(rf等位基因)是纯合的，v.当在开花之前和/或开花期间暴露于低于28°C的温度时，优势雄性不育，和vi.当在开花之前和/或开花期间暴露于高于35°C的温度时，恢复优势雄性能育表型。27.权利要求26的植物，其中所述条件性雄性不育植物可获得自通过权利要求2的方法生产的种子。28.一种具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物，该基因型可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子，其中所述雄性能育欧洲油菜植物为v.对于可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子的能育等位基因(ms等位基因)是纯合的，和vi.对于可获得自在保藏编号NCIMB41481下保藏的欧洲油菜种子的保持系等位基因(rf等位基因)是纯合的，和vii.优势雄性能育。29.—种具有基因型MsmsRfrf或msmsRfrf的雄性能育欧洲油菜杂种植物，其中所述雄性能育欧洲油菜杂种植物为i.对功能性恢复系等位基因(Rf等位基因)或保持系等位基因(功能失常的恢复系等位基因；rf等位基因)是杂合的，ii.优势雄性能育，和iii.任选地产生具有不超过25iimol/克的由所述植物产生的9%水分含量的风干种子的总芥子油苷含量的籽粒。30.权利要求24-29任一项的植物，其中a)Ms等位基因如权利要求11-14中任一项所定义的，和b)ms等位基因如权利要求15-16任一项中所定义的，和c)rf等位基因如权利要求17-19任一项中所定义的，和d)Rf等位基因如权利要求20-23任一项中所定义的。31.权利要求24-30任一项的植物，其中所述植物包含选自黄色种皮颜色、除草剂抗性、生物胁迫抗性和非生物胁迫抗性的性状。32.权利要求24-31任一项的植物，其中所述植物产生籽粒，该籽粒产生具有选自如下组成的油类a)小于2%的芥子酸含量，b)大于45%的芥子酸水平，c)大于70%的油酸含量，d)小于8%的a-亚油酸含量，e)小于8%的亚麻酸含量，f)小于10%的饱和脂肪酸含量，g)大于20%的硬脂酸含量，h)大于10%的短链和中链脂肪酸含量，i)大于20%的棕榈酸含量，和j)大于10%的多不饱和脂肪酸含量。33.权利要求24-32任一项的芸苔属植物的部分，选自种子、小孢子、原生质体、细胞、胚珠、花粉、营养体部分、子叶和合子。34.一种产生如权利要求24-32任一项所请求保护的植物的欧洲油菜种子。35.一种生产欧洲油菜种子或籽粒的方法，包括步骤a)播种通过权利要求6-10任一项的方法提供的杂种种子，b)由所述种子生长成杂种欧洲油菜植物，和c)收获所述植物的成熟种子或籽粒。36.一种生产欧洲油菜油和粕的方法，包括步骤a)播种通过权利要求6-10任一项的方法提供的杂种种子，b)由所述种子生长成杂种欧洲油菜植物，c)收获所述植物的成熟种子或籽粒，d)破碎所述种子或籽粒并由粕中分离或提取油。37.权利要求36的方法，其中所述油具有选自由如下组成的组成a)小于2%的芥子酸含量，b)大于45%的芥子酸水平，c)大于70%的油酸含量，d)小于8%的a-亚油酸含量，e)小于8%的亚麻酸含量，f)小于10%的饱和脂肪酸含量，g)大于20%的硬脂酸含量，h)大于10%的短链和中链脂肪酸含量，i)大于20%的棕榈酸含量，和j)大于10%的多不饱和脂肪酸含量。38.使用欧洲油菜植物的方法，包括步骤收获来自由通过权利要求6-10任一项的方法提供的种子培育的芸苔属植物的种子，以及种植所述种子以产生后代。39.权利要求38的方法，进一步包括步骤重复种植收获的后代植物的种子的步骤。40.一种经营种子生意的方法，包括步骤a)提供如权利要求24-28任一项所请求保护的种子生产植物给感兴趣生产杂种油菜籽的育种人员，b)让所述育种人员在许可下通过将步骤(a)中提供的所述植物与所述育种人员可获得的雄性能育欧洲油菜品系杂交创建欧洲油菜杂种种子。41.根据权利要求40的方法，其中步骤(a)中提供的种子生产植物是权利要求26或27的条件性雄性不育欧洲油菜植物。42.一种寡核苷酸引物，选自SEQIDNOs:1、2、4、5、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19和20所示序列。43.一种适合于检测单核苷酸多态性的探针，包含作为核酸部分的选自SEQIDNOs11、12、17和19所示序列的序列。44.一种分离的核苷酸序列，选自a)序列，其i)与选自SEQIDNOs:3和6所示序列的共有序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在严格条件下与选自SEQIDNOs3和6所示序列的共有序列杂交，或iii)包含选自SEQIDNOs3和6所示序列的共有序列的至少25个连续的核苷酸的序列，和b)序列，其i)与选自SEQIDNOs:21、22和23所示序列的序列具有至少80%的序列同一性，或ii)在严格条件下与选自SEQIDNOs:21、22和23所示序列的序列杂交，或iii)包含选自SEQIDNOs:21、22和23所示序列的序列的至少25个连续的核苷酸。45.一种在基于标记的选择中使用根据权利要求42或44的核酸序列用于将选自Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因和/或rf等位基因的等位基因基因渗入缺少所述等位基因集合的芸苔种质中的方法。46.一种鉴定或表征根据权利要求24-32任一项的欧洲油菜植物的方法，该方法包括如下步骤iii)从要被测试的根据权利要求24-32任一项的植物或植物种群获得植物材料并从所述材料中提取DNA；iv)通过使用根据权利要求42-44任一项的核酸序列，分析步骤i)中获得的DNA样品以确定Ms等位基因、ms等位基因、rf等位基因和/或Rf等位基因的存在/不存在。47.一种使用根据权利要求24-32任一项的欧洲油菜植物生产杂种种子的方法。48.权利要求47的方法，其中欧洲油菜植物选自由在保藏编号NCIMB41480或41481下保藏的欧洲油菜种子培育的或来源于该种子的品种。49.一种在生产欧洲油菜能育杂种种子的方法中使用具有基因型RfRf的雄性能育欧洲油菜植物的方法。50.权利要求49的方法，其中所述生产能育杂种种子的方法是根据权利要求6-8任一项的方法。51.具有基因型RfRf的雄性能育欧洲油菜植物在生产欧洲油菜能育的杂种种子的方法中的用途。52.根据权利要求51的用途，其中所述生产能育的杂种种子的方法是根据权利要求6-9任一项生产能育的杂种种子的方法。53.欧洲油菜植物在方法中的用途，所述方法包括步骤由通过权利要求6-10任一项的方法提供的种子生长成的芸苔属植物收获种子，和种植所述种子以生产后代。54.根据权利要求53的用途，进一步包括重复种植收获的后代植物种子步骤的步骤。55.根据权利要求42或44任一项的核酸序列在用于将选自Ms等位基因、ms等位基因、Rf等位基因和/或rf等位基因的等位基因基因渗入缺少所述等位基因集合的芸苔种质中的基于标记的选择中用途。56.在生产杂种种子的方法中使用一种或多种选自具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物、具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物或具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物的欧洲油菜植物的方法。57.一种或多种选自具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物、具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物或具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物的欧洲油菜植物在生产杂种种子的方法中的用途。58.根据权利要求57的用途，其中具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物和具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物用于生产杂种种子的方法中。59.根据权利要求56-58任一项的用途，其中所述方法是如权利要求6-23任一项中所请求保护的方法。60.在生产具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物或其种子的方法中使用一种或多种选自具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物和具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物的欧洲油菜植物的方法。61.一种或多种选自具有基因型MsMsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物和具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物的欧洲油菜植物在生产具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物或其种子的方法中的用途。62.根据权利要求61的用途，其中具有基因型msmsrfrf的雄性能育欧洲油菜植物用于生产具有基因型Msmsrfrf的条件性雄性不育欧洲油菜植物或其种子的方法中。63.根据权利要求60-62任一项的用途，其中所述方法是如权利要求2-5、8、9和11-23任一项中所请求保护的方法。全文摘要本发明涉及一种欧洲油菜(Brassicanapus)核条件性雄性不育系统。本发明的实施方案提供了预基础(雄性不育)雌性系(MsMsrfrf)、(雄性能育)保持系(msmsrfrf)、(雄性不育)基础雌性系(Msmsrfrf)和杂交系。进一步提供了用于生产那些品系的方法。本发明的进一步的实施方案涉及与不育性、能育性和保持系等位基因相关的标记，以及那些标记在提供杂交系统中的应用。文档编号C12N15/82GK101861390SQ200880020023公开日2010年10月13日申请日期2008年6月13日优先权日2007年6月13日发明者冈瑟·施蒂韦,斯蒂芬·普莱尼斯,约翰尼斯·J·L·吉伦,马里·科克申请人:先正达参股股份有限公司